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    消斑膏的制備與臨床療效觀察

    2010-11-06 06:04:34黃壽妙陳福軍許少微
    中國藥業(yè) 2010年3期
    關(guān)鍵詞:液相色譜儀黃褐斑丹參酮

    黃壽妙,陳福軍,許少微

    (浙江省平陽縣中醫(yī)院,浙江 溫州 325400)

    黃褐斑是臨床常見的皮膚病,好發(fā)于中青年女性,嚴(yán)重影響美容。我院針對黃褐斑研制的消斑膏,經(jīng)臨床應(yīng)用,療效滿意,現(xiàn)將其制備和質(zhì)量控制方法及臨床療效觀察情況報道如下。

    1 儀器與試藥

    LC-4A型高效液相色譜儀(日本島津);SPD-2AS型紫外檢測器(日本島津);C-R3A型數(shù)據(jù)處理機。丹參酮!A對照品由溫州醫(yī)學(xué)院天然藥物化學(xué)實驗室提供;甲醇為色譜純,水為雙重蒸餾水,其余試劑均為分析純。

    2 方法與結(jié)果

    2.1 制備

    處方:丹參 200 g,桑葚子 150 g,山萸肉 200 g,熟地 120 g,僵蠶100 g,生炒白術(shù) 150 g,龜板膠 200 g,白糖 250 g,女貞子 200 g,桃仁100 g。

    制備[1-3]:取處方量除龜板膠、白糖外的上述藥材,加水浸泡2 h,提取3次,每次均加5倍量水煎煮1 h,合并煎液,靜置過夜,濾過,再加熱,使濾液濃縮約為原容積的2/5時,再加入龜板膠、白糖烊化,濾過,濾液繼續(xù)濃縮至規(guī)定的相對密度,放冷,即得。

    2.2 質(zhì)量控制

    2.2.1 色譜條件

    色譜柱:Zorbax BP-ODS柱(250 mm×4.6 mm,5"m);流動相:甲醇 -水(79 ∶21);檢測波長:270 nm;流速:1 mL/min;柱溫:25 ℃;進樣量:10"L。

    2.2.2 溶液制備

    精密稱取丹參酮!A對照品適量,加甲醇制成質(zhì)量濃度為10.8"g/mL的溶液,作為對照品溶液。取本品約1.0 g,精密稱定,加甲醇少量使其完全溶解,并定量轉(zhuǎn)移至50 mL棕色量瓶中,加甲醇稀釋至刻度,稱定質(zhì)量(精密至0.01 g),超聲處理15 min,稱定質(zhì)量,補加損失的質(zhì)量,置冰浴中冷卻2 h以上,取出后濾膜(0.45"m)濾過,棄去初濾液,取續(xù)濾液,放至室溫,作為供試品溶液。按處方比例稱取除丹參的其他藥物適量,依照消斑膏的制備工藝和供試品溶液的制備方法制備陰性對照品溶液。

    2.2.3 方法學(xué)考察

    系統(tǒng)適用性試驗:量取供試品溶液、對照品溶液和陰性對照品溶液各10"L,分別注入高效液相色譜儀。結(jié)果供試品溶液色譜中,在與對照品溶液色譜相應(yīng)位置上有一相同保留時間的色譜峰,而陰性對照品溶液在此保留時間無干擾(圖1)。

    線性關(guān)系考察:分別精密吸取 2.5,5,10,15,20,25"L 的對照品溶液,注入高效液相色譜儀,每一質(zhì)量濃度進樣2次,計算丹參酮!A的峰面積平均值,以峰面積平均值為縱坐標(biāo)、丹參酮!A進樣量為橫坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,得回歸方程 Y=56.98X+1.578 9×104,r=0.999 8。結(jié)果表明,丹參酮!A質(zhì)量濃度在0.027~0.27"g/mL范圍內(nèi)與峰面積線性關(guān)系良好。

    圖1 高效液相色譜圖

    穩(wěn)定性試驗:依上述色譜條件,每隔1 h向色譜儀注入同一供試品溶液10"L,連續(xù)5次,測定丹參酮!A的峰面積 ,結(jié)果的RSD=1.1%(n=5),表明供試品溶液在5 h內(nèi)基本穩(wěn)定。

    精密度試驗:精密量取對照品溶液10"L各5份,分別注入色譜儀,結(jié)果的 RSD=0.5%(n=5),表明儀器精密度良好。

    加樣回收試驗:精密稱取已知含量的樣品6份,每份0.5 g,分別置錐形瓶中,再添加一定量的丹參酮!A對照品,每份用甲醇定容至50 mL,按上述色譜條件測定。結(jié)果見表1。

    表1 加樣回收試驗結(jié)果(n=6)

    2.2.4 樣品含量測定

    分別精密稱取不同批次的消斑膏制劑1.0 g,按供試品溶液制備方法制備,分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液各20"L,注入高效液相色譜儀中,按上述色譜條件測定,結(jié)果3批樣品中丹參酮!A的含量分別為 0.664 7,0.653 8,0.668 8 mg/g。

    2.3 臨床應(yīng)用

    2.3.1 一般資料

    選擇我院皮膚科門診黃褐斑患者150例,年齡22~45歲,平均32歲,病程6個月至12年,平均4.2年。隨機分為治療組85例和對照組65例,兩組患者在年齡、一般情況和癥狀體征方面無統(tǒng)計學(xué)差異(P>0.05),具有可比性。

    2.3.2 治療方法

    治療組口服消斑膏,每日2次,每次20~30 g,早晚空腹溫服。對照組口服維生素C 0.2 g,六味地黃丸8粒,均為每日3次。兩組以1個月為一療程,連服2個月。

    2.3.3 療效標(biāo)準(zhǔn)

    根據(jù)國家中醫(yī)藥管理局《中醫(yī)病證診斷療效標(biāo)準(zhǔn)》[2],治愈為顏面皮膚恢復(fù)正常顏色,顯效為皮損消退80%,好轉(zhuǎn)為皮損消退30%,無效為皮損無明顯變化或消退不足30%。以前三者之和計算總有效率。

    2.3.4 治療結(jié)果

    治療組85例中治愈30例,顯效35例,好轉(zhuǎn)8例,無效12例,總有效率為85.88%;對照組65例中治愈19例,顯效12例,好轉(zhuǎn)10例,無效24例,總有效率為63.08%。兩組療效比較具有統(tǒng)計學(xué)差異(P<0.05)。

    3 討論

    中醫(yī)稱黃褐斑為蝴蝶斑,中醫(yī)學(xué)認(rèn)為該病發(fā)生的原因很多,發(fā)病機理復(fù)雜,但臨床觀察提示該病與肝、脾、腎等臟腑功能失調(diào)有關(guān),瘀血內(nèi)阻也是主要病因之一。消斑膏方中桃仁、當(dāng)歸、丹參活血祛瘀,熟地、山萸肉、桑葚子、龜板膠、女貞子等補益肝腎、滋陰養(yǎng)血,白術(shù)健脾土利運化,僵蠶善行頭面而直達病所。方中諸藥制成煎膏劑以滋補為主,藥性滋潤,共奏調(diào)理沖任、補益肝腎、滋陰養(yǎng)血、消斑養(yǎng)顏之功效,臨床應(yīng)用療效確切,值得推廣應(yīng)用。采用高效液相色譜法對丹參的主要成分丹參酮!A進行含量測定,方法準(zhǔn)確方便,重現(xiàn)性好,且簡單易行。

    [1]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典(一部)[M].北京:化學(xué)工業(yè)出版社,2005:附錄 33.

    [2]中國中西醫(yī)結(jié)合皮膚科學(xué)會色素病學(xué)組.黃褐斑的臨床診斷和療效判定標(biāo)準(zhǔn)[J].中國皮膚性病學(xué)雜志,1999,13:209.

    [3]呂圭源,王一濤.中藥新產(chǎn)品開發(fā)學(xué)[M].北京:人民衛(wèi)生出版社,1997:561-565.

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