白鮮皮水提物對ApoE－/－小鼠動脈粥樣硬化早期病變形成的抑制作用

秦蒙，國漢邦，許揚(yáng)

(1.中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院藥用植物研究所，北京 100193;

2.衛(wèi)生部北京醫(yī)院老年醫(yī)學(xué)研究所生化室，北京 100730)

研究報(bào)告

白鮮皮水提物對ApoE－/－小鼠動脈粥樣硬化早期病變形成的抑制作用

秦蒙1，國漢邦2，許揚(yáng)1

(1.中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院藥用植物研究所，北京 100193;

2.衛(wèi)生部北京醫(yī)院老年醫(yī)學(xué)研究所生化室，北京 100730)

目的研究白鮮皮水提物對載脂蛋白E基因缺損小鼠主動脈弓粥樣硬化早期病變形成的影響。方法將40只ApoE－/－小鼠隨機(jī)分成空白對照組和白鮮皮高、中、低三劑量組(白鮮皮水提物3.2、1.6、0.8 g/kg)給藥，計(jì)算各組主動脈弓粥樣硬化病變的面積。體內(nèi)檢測血清中的脂質(zhì)含量以及抗氧化指標(biāo)丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)、過氧化氫酶(CAT)、谷胱甘肽－S轉(zhuǎn)移酶(GST)的活性變化。測定白鮮皮水提物對Cu2+介導(dǎo)的人血清低密度脂蛋白(LDL－C)氧化易感性的影響。結(jié)果與對照組相比，白鮮皮各給藥組小鼠動脈粥樣硬化早期病變面積均小于對照組，血清中MDA的含量降低，SOD、CAT活性增高，GST變化不明顯，血清脂質(zhì)含量組間沒有顯著差異。白鮮皮水提物明顯延長Cu2+介導(dǎo)的人血清LDL氧化滯留時(shí)間和達(dá)峰時(shí)間。結(jié)論白鮮皮水提物對ApoE－/－小鼠動脈粥樣硬化早期病變形成具有顯著的抑制作用，其作用機(jī)制可能是通過對抗脂蛋白的過氧化作用而實(shí)現(xiàn)。

白鮮皮;ApoE基因缺損小鼠;動脈粥樣硬化;抗氧化;低密度脂蛋白

白鮮皮為蕓香科植物白鮮Dictamnus dascarpus Turcz.的干燥根皮。因其具有清熱燥濕、祛風(fēng)解毒的功效，在傳統(tǒng)中藥學(xué)上歸為清熱燥濕類。臨床主要用于濕熱瘡毒、皮膚搔癢、濕疹、風(fēng)疹、疥癬、瘡癩、風(fēng)濕熱痹、黃疸尿赤等［1］，但其在心血管疾病中是否具有治療作用的研究無文獻(xiàn)報(bào)道。在筆者以前對清熱燥濕中藥的系統(tǒng)研究中，發(fā)現(xiàn)該類中藥對動脈粥樣硬化無論針對致病的危險(xiǎn)因素，還是從發(fā)病機(jī)制的干預(yù)方面，8種中藥及其配方在抗炎、抗氧化、降脂、抑制血小板聚集、抵制異常的免疫反應(yīng)方面存在一項(xiàng)或多項(xiàng)相一致的作用中藥［2］，隨著進(jìn)一步研究的深入，很多新的藥理作用將不斷發(fā)現(xiàn)。

從已有的研究結(jié)果出發(fā)，我們對全國高等院校教材《中藥學(xué)》中的清熱燥濕藥進(jìn)行了系統(tǒng)的篩選，發(fā)現(xiàn)白鮮皮水提物對載脂蛋白E基因缺損(ApoE－/－)小鼠主動脈弓的動脈粥樣硬化斑塊形成具有明顯的抑制作用，并從抗脂質(zhì)過氧化的角度探究了白鮮皮抑制早期動脈粥樣硬化病變形成的機(jī)制。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)材料

1.1.1 動物:ApoE－/－小鼠40只，雌性，6周齡。購于北京大學(xué)醫(yī)學(xué)部實(shí)驗(yàn)動物中心［SCXK(京)2006－0008］。飼養(yǎng)于中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院藥用植物研究所SPF級動物房內(nèi)［SCXK(京)2008－0019］。20℃，12 h晝夜交替。

1.1.2 藥材:白鮮皮(購于河北省安國藥材市場，由本研究所常琪教授鑒定)生藥100 g。2 L蒸餾水4℃冷浸24 h，超聲波提取25 min過濾，再重復(fù)2次加入2 L蒸餾水超聲波提取25 m in過濾，合并提取液，于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上80℃濃縮至100 m L，即得含生藥量1 g/m L的白鮮皮水提物。

1.1.3 儀器:上海亞榮RE52AA旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀，日立7060全自動生化分析儀，美國Beckman XL－90超速離心機(jī)，美國Beckman Coulter離心管切割機(jī)，美國Hamilton MicroLab 500稀釋器，德國Leica 1900冰凍切片機(jī)，德國Leica DM4000M正置顯微鏡，美國Bio－Tek酶標(biāo)儀，上海儀器有限UV－2102C/PC/PCS型分光光度計(jì)。

1.1.4 試劑:血清總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL－C)、高密度脂蛋白(HDL－C)試劑盒(中生北控生物科技股份有公司，北京)，血清丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、過氧化氫酶(CAT)、谷胱甘肽－S－轉(zhuǎn)移酶(GST)試劑盒(南京建成生物技術(shù)研究所，南京)，油紅O染料(sigma，USA)，PBS(中杉金橋生物技術(shù)有限公司，北京)，OTC包埋劑(日本櫻花精機(jī)株式會社，東京)，人血清樣品(收集自北京醫(yī)院和同仁醫(yī)院檢驗(yàn)科的新鮮血清標(biāo)本)。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 動物分組:40只6周齡的apoE－/－雌性小鼠隨機(jī)分成4組，每組10只。分別為白鮮皮高、中、低三劑量各1組，空白對照組1組。所有小鼠均以高脂飼料(含0.3%膽固醇，20%脂肪，其余成分與普通飼料相同，購于中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院動物研究所)喂養(yǎng)，自由攝食和飲水。

1.2.2 給藥方法:將白鮮皮水提物1 g/m L分別稀釋成高、中、低三個(gè)濃度，每組按每只每天3.2、1.6、0.8 g/kg劑量灌胃，空白對照組按相同劑量給予稀釋藥物用的滅菌純凈水。每兩周稱重一次，調(diào)整給藥量，連續(xù)給藥6周。

1.2.3 血脂測定:每組給藥前后測定血脂各項(xiàng)指標(biāo)，包括TC、TG、LDL－C、HDL－C。各組小鼠于給藥前后禁食12 h，眼眶取血，5000 r/min離心10 min，分離上層血清，－80℃保存。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，用日立全自動生化儀一次全部測定完畢。

1.2.4 主動脈粥樣硬化病變面積定量分析:各組給藥結(jié)束后，小鼠經(jīng)乙醚麻醉后開胸，以滅菌PBS液(0.01 mol/L，pH=7.2)經(jīng)心室灌流5 m in后，分離主動脈根部和升主動脈，OCT包埋，制作6 μm厚冰凍切片。從第一張血管腔及主動脈瓣可見處開始留取切片，每只鼠連續(xù)切80張。每5張抽取一張切片(共16張)作油紅O染色，蘇木素復(fù)染細(xì)胞核。組織切片在40倍顯微鏡下攝取圖像，參照文獻(xiàn)的方法［3］作病變面積定量分析。用Image Pro plus(版本6.0，Media Cybernetics，美國)軟件分析斑塊面積，計(jì)算斑塊面積占總血管面積之比。

1.2.5 血清抗氧化指標(biāo)測定:每組給藥前后使用酶標(biāo)儀測定血清中MDA含量，以及SOD、CAT、GST的活性。

1.2.6 人血清低密度脂蛋白(LDL)的分離和氧化:人LDL經(jīng)超高速序列離心法分離獲得，使用稀釋器的稀釋功能將血清分別與1.006 g/m L和1.063 g/ mL的NaBr密度液加入厚壁聚碳酸酯離心管(1 m 1.8 mm×51 mm Beckman)，采用Type25轉(zhuǎn)頭在20℃、23 000 r/min下離心18.5 h經(jīng)離心管切割器切割得到LDL，4℃經(jīng)PBS(0.01mol/L，pH=7.2)透析48 h去除NaBr，每隔8h換液，Low ry’s法測定蛋白含量。超濾除菌，4℃保存。

LDL的氧化修飾的反應(yīng)體系為2 m L，LDL(0.01 mg/mL)PBS稀釋液中加入CuSO4溶液至其終濃度為5 μmol/L，再分別加入0.1 g/m L白鮮皮水提物0、16、24、28、32 μL(白鮮皮生藥含量相當(dāng)于0、1.6、2.4、2.8、3.2 mg)，37℃孵育，每隔10 min，234 nm波長下經(jīng)紫外分光光度計(jì)檢測吸光度。繪制各組△A234隨時(shí)間變化曲線圖，得到LDL氧化滯留時(shí)間(Lag time)和達(dá)峰時(shí)間(Tmax)。

1.2.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析:所有數(shù)據(jù)輸入計(jì)算機(jī)，應(yīng)用SPSS (版本16.0)軟件，根據(jù)資料要求進(jìn)行方差分析。

2 結(jié)果

2.1 給藥前后對動物體重的影響

各組給藥前和給藥結(jié)束后均稱量體重，對照組、低劑量組、中劑量組、高劑量組的體重分別為(16.04±0.62)、(19.78±0.95)，(16.01±0.53)、(19.01±0.34)，(16.17±0.70)、(19.71±0.69)，(16.07±0.60)、(19.67±1.29)g，經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理各組間差異無顯著性(P＞0.05)，說明白鮮皮給藥后對小鼠體重不造成明顯影響。同時(shí)，對各組小鼠的攝食情況觀察表明，對照組和三個(gè)給藥組小鼠攝食和飲水均正常，活潑程度亦未見明顯差異。

2.2 給藥前后血脂各項(xiàng)指標(biāo)的變化

對各組小鼠血清脂質(zhì)水平測定表明，對照組與三個(gè)給藥組實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)血清中TC、TG、HDL－C、LDL－C含量雖有一定下降(表1)，但經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理差異無顯著性(P＞0.05)，說明白鮮皮水提物沒有明顯的降低血脂的作用。

表1 各組小鼠血脂含量的比較(±s，n=10)Tab.1 Comparison of the serum lipid contents in m ice of the 4 groups(±s，n=10)

表1 各組小鼠血脂含量的比較(±s，n=10)Tab.1 Comparison of the serum lipid contents in m ice of the 4 groups(±s，n=10)

注:(1)BA:Before drug administration;AA:After drug adm inistration;HD:High dose，MD:Medium dose，LD:low dose.(2)*與對照組比較P＞0.05*Compared with the control group，P＞0.05

組別Group TC(mmol/L)TG(mmol/L)HDL－C(mmol/L)LDL－C(mmol/L)給藥前BA給藥后AA給藥前BA給藥后AA給藥前BA給藥后AA給藥前BA給藥后AA對照組Control 4.96±1.08 21.43±2.82 1.43±0.29 3.62±0.75 1.14±0.17 2.00±0.20 2.09±0.48 6.32±1.06高劑量HD 4.91±1.02 21.29±1.48*1.44±0.36 3.37±0.42*1.03±0.14 2.03±0.46*2.17±0.79 6.41±0.76*中劑量MD 5.71±1.30 19.43±3.90*1.43±0.26 3.03±0.36*1.04±0.16 1.92±0.40*2.40±0.56 4.89±1.36*低劑量LD 5.67±1.22 19.59±3.16*1.47±0.12 3.38±0.38*1.07±0.18 1.96±0.36*2.27±0.43 5.23±1.09*

2.3 給藥后對動脈粥樣硬化病變面積的影響

apoE－/－小鼠于6周齡開始給予高脂負(fù)荷飼料至12周齡，誘導(dǎo)早期動脈粥樣硬化病變的形成。白鮮皮水提物各劑量組與空白對照組相比均能顯著抑制動脈粥樣硬化早期病變面積(圖1，彩插2)。定量分析表明，對照組與白鮮皮水提物高、中、低劑量組的病變面積分別為(9.79±1.78)%、(3.68± 1.56)%、(3.86±1.34)%、(5.41±0.96)%，經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，各給藥組病變面積與對照組比較差異有顯著性(P＜0.01)。對動脈粥樣硬化早期病變的抑制效果上看，各給藥組具有量效正相關(guān)關(guān)系。

2.4 給藥前后血清脂質(zhì)過氧化物及抗氧化酶指標(biāo)變化

各組小鼠在給藥的同時(shí)給予高脂負(fù)荷飼料，實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)測定各組小鼠血清中脂質(zhì)過氧化物及抗氧化酶的活性。結(jié)果表明，對照組小鼠血清的MDA含量升高，SOD、CAT、GST的活性下降，白鮮皮高中劑量給藥后明顯減少血清中MDA含量，并且使SOD、CAT活性升高，但對GST的下降沒有明顯的提升趨勢(表2)。

表2 各組小鼠血清MDA含量及抗氧化酶活性變化(±s，n=10)Tab.2 Comparison of serum MDA contents and antioxidant enzyme activities in the mice of the 4 groups

表2 各組小鼠血清MDA含量及抗氧化酶活性變化(±s，n=10)Tab.2 Comparison of serum MDA contents and antioxidant enzyme activities in the mice of the 4 groups

注:(1)BA:Before drug administration，AA:After drug adm inistration，HD:High dose，MD:Medium dose，LD:Low dose.(2)與對照組比較*P＜0.05**P＜0.01。Compared with the control group，*P＜0.05**P＜0.01

組別Group MDA(nmol/m L)SOD(U/m L)CAT(U/m L)GST(U/m L)給藥前BA給藥后AA給藥前BA給藥后AA給藥前BA給藥后AA給藥前BA給藥后AA對照組Control 4.76±0.43 27.41±1.32 365.58±47.32 277.28±31.77 2.96±0.19 2.21±0.13 28.17±2.37 23.40±1.98高劑量HD 5.15±0.48 8.15±0.78**382.98±51.24 387.68±42.80*2.71±0.20 3.25±0.23*27.14±3.08 27.94±2.87中劑量MD 5.38±0.49 12.59±0.69**330.76±41.39 333.81±30.17*3.16±0.41 3.21±0.19*28.32±2.11 27.30±1.66低劑量LD 4.97±0.33 15.19±1.19**313.35±39.21 319.21±29.20 2.84±0.13 3.12±0.21*27.45±2.34 28.57±1.94

2.5 白鮮皮體外對人LDL氧化易感性的作用

與空白對照組比較，白鮮皮水提物在體外對人LDL的氧化修飾具有明顯的抑制作用，白鮮皮水提物給藥后LDL氧化易感性降低，反映于氧化滯留的延長和達(dá)峰時(shí)間的推遲(表3)，并且這種氧化抑制與白鮮皮的濃度呈正性相關(guān)。

3 討論

隨著生活水平的提高，飲食結(jié)構(gòu)和生活習(xí)慣的改變，近年來，冠狀動脈粥樣硬化性心臟病(以下簡稱冠心病)已成為嚴(yán)重威脅人們生命安全的重大疾病。動脈粥樣硬化病變形成機(jī)制復(fù)雜，高脂血癥尤其是LDL膽固醇升高是引起病變發(fā)生和發(fā)展的最主要因素之一［4］，然而，而在近年來的的研究中發(fā)現(xiàn)，天然LDL本身并無致動脈粥樣硬化的作用，必須經(jīng)過氧化修飾才會促進(jìn)斑塊的形成［5］，氧化型低密度脂蛋白(oxidized low－density lipoprotein，ox－LDL)在動脈硬化斑塊形成過程中的作用得到重視。早期病變形成過程中，脂質(zhì)的過氧化引起動脈血管內(nèi)膜下的巨噬細(xì)胞表面的清道夫受體大量表達(dá)，巨噬細(xì)胞吞噬大量的氧化脂質(zhì)，形成泡沫細(xì)胞，逐漸形成動脈粥樣硬化的斑塊病變。這種病變在動脈粥樣硬化模型小鼠－apoE－/－小鼠上具有明確的特征［6，7］。因此，在目前臨床上嚴(yán)重缺乏有效防治動脈粥樣硬化的藥物情況下，從抗脂質(zhì)過氧化的角度尋找高效低毒的抗氧化劑對減少冠心病的發(fā)生和病死率有很大的研究空間。

表3 白鮮皮對Cu2+誘導(dǎo)的LDL氧化易感的影響(±s)Tab.3 Effect of Cortex Dictamni(CD)on the susceptibility of LDL to oxidation induced by Cu2+(±s)

表3 白鮮皮對Cu2+誘導(dǎo)的LDL氧化易感的影響(±s)Tab.3 Effect of Cortex Dictamni(CD)on the susceptibility of LDL to oxidation induced by Cu2+(±s)

注:*與對照組比較P＜0.01。Note:Compared with the control group，P＜0.01

組別Group氧化滯留時(shí)間(min) Lag time(min)達(dá)峰時(shí)間(min) Tmax(min) LDL+Cu 68.4±2.4 152.8±5.8 LDL+Cu+CD 1.6 mg 86.8±3.5*173.4±6.6*LDL+Cu+CD 2.4 mg 91.9±2.9*177.3±9.8*LDL+Cu+CD 2.8 mg 128.5±3.7*203.9±11.2*LDL+Cu+CD 3.2 mg 201.2±4.6*267.3±14.3*

白鮮皮是清熱燥濕中藥中的一種，迄今的研究表明，白鮮皮具有明顯的抗炎［8］、抑制免疫反應(yīng)［9］的作用。因而推測其在抑制動脈粥樣硬化病變方面具有相應(yīng)的藥理作用。通過對apoE－/－小鼠給藥后的實(shí)驗(yàn)研究表明，白鮮皮的水提物對早期動脈粥樣硬化的形成具有顯著的抑制作用，且這種作用以高劑量組最為明顯。但是，白鮮皮水提物在給藥前后對apoE－/－小鼠的血清脂質(zhì)各項(xiàng)指標(biāo)雖有不同程度的降低作用，但經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理與對照組差異無顯著性，說明白鮮皮抑制動脈粥樣硬化作用的機(jī)制并不體現(xiàn)在降低血清脂質(zhì)水平上。

為了研究白鮮皮抑制動脈粥樣硬化的作用機(jī)制，我們從抗脂質(zhì)過氧化的途徑進(jìn)行了相關(guān)的研究。在體外通過Cu2+介導(dǎo)的人LDL氧化易感性實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，白鮮皮水提物能顯著降低LDL的氧化易感性，體現(xiàn)在氧化過程中共軛雙稀含量升高的滯留時(shí)間(Lag time)和達(dá)峰時(shí)間(Tmax)隨劑量增加而延長。同時(shí)，apoE－/－小鼠在高脂負(fù)荷飼料喂養(yǎng)6周后，空白組血清中的MDA含量急劇升高而抗氧化酶SOD、CAT、GST的活力下降，而給予白鮮皮水提物的小鼠血清中脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物MDA含量明顯降低，并且逆轉(zhuǎn)甚至升高了SOD、CAT的活性。表明白鮮皮在體內(nèi)增強(qiáng)了血清的總抗氧化能力，提高了重要的抗氧化酶的活性，對血清中脂質(zhì)的過氧化具有明確而持久的抑制作用。白鮮皮水提物能夠在不降低血清脂質(zhì)水平的條件下使脂質(zhì)的過氧化得到抑制而顯著減少動脈粥樣硬化病變面積的作用，在其他中藥中也有報(bào)道，如黃連解毒湯，給予因高脂負(fù)荷形成的動脈粥樣硬化家兔模型時(shí)，對家兔主動脈弓的粥樣硬化斑塊具有顯著的抑制作用，但對血脂各成分亦沒有明顯影響。其機(jī)制是激活了抗氧化系統(tǒng)的功能［10］。而在西紅花酸對高脂血癥家兔LDL氧化易感性的研究中西紅花酸抗兔動脈粥樣硬化并不依賴于其調(diào)血脂作用，而主要與其提高血清TAC及LDL抗氧化能力、降低血清ox－LDL水平有關(guān)［11］。說明天然藥物中的抗氧化劑可以不通過降脂作用達(dá)到抗動脈粥樣硬化的作用，因此推斷白鮮皮水提物抑制動脈粥樣硬化早期病變的形成的關(guān)鍵機(jī)制是通過抑制血清中脂質(zhì)的過氧化而實(shí)現(xiàn)的。

(本文圖1見彩插2。)

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Cortex Dictam ni Inhibits Form ation of Ear ly Atherosclerotic Lesions in ApoE-Deficient M ice

QIN Meng1，GUO Han－bang2，XU Yang1
(1.Institute of Medicinal Plant Development，Chinese Academy of Medical Sciences and Peking Union Medical College，Beijing 100193，China;
2.Biochemistry Laboratory，Institute of Geriatrics，Beijing Hospital，Beijing 100730)

Objective Cortex Dictamni(CD)is a commonly used Chinese herb medicine in the treatment of skin diseases.In a previous study we had shown that CD has an anti－inflammatory effect and regulates immune function.The aim of this study was to determine whether CD has any effect on the early formation of aortic atherosclerotic lesions in ApoE－/－mice and explore the possible mechanisms involved.M ethods 40 female apoE－/－mice(weighing 15－16 g，6 weeks of age)were kept in a temperature－controlled facility with a 12－h(huán) light/12－h(huán) dark photoperiod，and free access to food and water.The mice were random ly divided into four groups:the control group(n=10)，high dose CD group(n= 10)，medium dose CD group(n=10)and low dose CD group(n=10).All animals were fed a high fat diet and the three CD groups were orally administered with CD at different doses(3.2 mg/g，1.6 mg/g，0.8 mg/g)for 6 weeks while the control group got the same volume of distilled water.The fresh blood of all overnight fasted animals were obtained from the eye vein at 0 week and 6 weeks and serum was obtained by low－speed centrifugation.The serum levels of lipids including total cholesterol(TC)，triglyceride(TG)，high－density lipoprotein cholesterol(HDL－C)，low－density lipoproteincholesterol(LDL－C)were determ ined.Serum malondialdehyde(MDA)content and the activities of superoxide dismutase (SOD)，catalase(CAT)and glutathione S－transferase(GST)were also tested.At the end of the experiment，the heart and proximal aorta were removed from the mice.The hearts were then cut directly under and parallel to the aortic cusps and the upper portions were embedded in OCT compound.The samples were cut into a total of 80 sections(6 μm)and then stained with oil red－O every fifth section(16 samples from each mouse).The size of the atherosclerotic lesion in each aortic section was evaluated on the basis of oil red－O－staining using Image－Pro Plus 6.0 software.In vitro，the human lowdensity lipoproteins(density＜1.063 g/m L)was isolated from the human serum by density gradient ultracentrifugation. The influence of CD at different concentrations(0 mg，1.6 mg，2.4 mg，2.8 mg and 3.2 mg)on the susceptibility of human LDL oxidation induced by Cu2+were examined.Lag time and Tmax were used as indices of LDL oxidation susceptibility.Resu lt In vivo experiment:(1)There was no significant difference in the intake of food and water between the three CD groups and the control group.(2)At 0 week and 6 weeks of the experiment，the average weights of the four groups were not significantly different(P＞0.05).(3)A lthough the serum levels of TC，TG，HDL－C，LDL－C in the three CD groups were decreased in comparison with that in the control group，there was statistically no significant difference(P＞0.05).(4)The high fat diet for 6 weeks caused early formation of aortic atherosclerotic lesions in ApoE－/－mice and the control mice showed advanced atherosclerotic lesions in the aortic root.Comparing with the control group，the atherosclerotic lesions of all the CD groups were significantly reduced.Quantitative analysis showed that atherosclerotic lesions of the control group，the high，medium and low dose CD groups showed significant differences(P＜0.01)between the three CD groups and the control group.The inhibitory effect had a positive correlation with the dose of CD.In vitro experiment:(1)At the beginning and end of the experiment，the serum lipid peroxidation contents and antioxidant enzyme activities in all m ice were determ ined.The data indicated that the MDA content in the control group was highly increased. SOD，CAT and GST activities were all reduced because of the high fat diet.In the high，medium and low dose CD groups，the MDA contents were significantly decreased comparing with that in the control group(P＜0.05)and the SOD，CAT activities in the high and medium dose groups were significantly increased compared with that in the control group(P＜0.05).But the GST activity had no significant differences among the four groups(P＞0.05).(2)The lag time and Tmax of Cu2+induced LDL oxidation in the CD－treated mice were prolonged.The LDL oxidation susceptibility was reduced after the CD administeration and this inhibition of oxidation was positively correlated with the concentration of CD.ConlusionCD can significantly inhibit the formation of early aortic atherosclerotic lesions in ApoE－/－mice.It has no influence on the weight and the serum lipid levels in the apoE－/－mice.The possible mechanism of action may be via the inhibition of lipid peroxidation by increasing the activities of antioxidant enzyme activities.

Cortex Dictamni;Apoe－/－mice;Atherosclerosis;Anti－oxidant enzyme，acivity;Low－density lipoprotein

R363

A

1005－4847(2010)03－0191－05

2009－10－22

“重大新藥創(chuàng)制”科技重大專項(xiàng)“十一五”計(jì)劃“創(chuàng)新藥物研究開發(fā)技術(shù)平臺建設(shè)”(2009ZX09301－003)。人事部留學(xué)人員科技活動項(xiàng)目資助(國中醫(yī)藥研2006LHR05號)。

秦蒙(1985－)，女，藥理學(xué)碩士研究生，研究方向?yàn)樾难芩幚韺W(xué)及心血管疾病分子生物學(xué)。

許揚(yáng)(1965－)，男，碩士生導(dǎo)師，副教授，醫(yī)學(xué)博士，研究方向?yàn)樾难芩幚韺W(xué)及心血管疾病分子生物學(xué)。Tel:010－62817236，Email:xuyang65@hotmail.com