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    大孔樹脂法分離原花色素的初步研究

    2010-08-28 06:38:20鄭永麗
    天津化工 2010年1期
    關(guān)鍵詞:花色素大孔吸附劑

    鄭永麗

    (天津渤海職業(yè)技術(shù)學(xué)院生物工程系,天津 300402)

    大孔樹脂法分離原花色素的初步研究

    鄭永麗

    (天津渤海職業(yè)技術(shù)學(xué)院生物工程系,天津 300402)

    在靜態(tài)吸附條件下,考查了原花色素在4種大孔吸附樹脂的吸附量,篩選出X-5樹脂,進(jìn)一步測定其動泄露曲線為Q=-41.78C2+64.14C-12.10,解吸率為80%,并考查了X-5樹脂的再生能力。

    大孔樹脂;原花色素;分離

    采用大孔樹脂進(jìn)行天然產(chǎn)物的分離純化,同傳統(tǒng)方法如溶劑萃取法相比,溶劑用量大為減少,在操作全過程中一般只使用水與乙醇溶劑,具有無殘留,無污染,無副作用等特點(diǎn)。正是由于大孔樹脂具有上述優(yōu)點(diǎn)使得它已成為目前天然植物有效成份分離富集的首選方法。國內(nèi)外對原花色素的藥理作用已進(jìn)行了較深入的研究,但對其分離與純化的研究報道還比較少,本實驗將大孔樹脂應(yīng)用于原花色素的分離純化,在原花色素經(jīng)浸提劑粗提的基礎(chǔ)上,采用國產(chǎn)大孔吸附樹脂進(jìn)行分離富集,對分離純化過程中的操作條件進(jìn)行了初步研究。

    1 實驗材料及儀器

    實驗材料:葡萄籽(河北張家口);原花色素標(biāo)準(zhǔn)品(天津市尖峰有限公司);大孔吸附樹脂均來自南開大學(xué)化工廠;其它試劑均為試劑純。

    儀器:超聲波清洗器(昆山市超聲儀器有限公司);恒溫槽(北京市醫(yī)療設(shè)備總廠);樹脂柱(天津金鴿玻璃儀器廠)。

    2 實驗部分

    2.1 吸附樹脂的篩選

    分別稱取預(yù)處理過的大孔吸附樹脂X-5、AB-8、NKA-9、D3520各2.00 g置于四個錐形瓶中,分別加入10 mL原花色素標(biāo)準(zhǔn)品溶液,封口,室溫下,置于超聲波清洗器中振蕩。每隔10 min從上清液中取樣離心后,測其吸光度值以檢測原花色素含量,吸附平衡后過濾,并用去離子水沖洗樹脂,瀝干后加入洗脫劑,按上述操作步驟,再測解吸過程的吸光度變化。

    2.2 原花色素在大孔吸附樹脂上吸附時間的測定

    分別配制一定濃度的原花色素溶液各500 mL,加入2.00 g吸附樹脂,靜態(tài)吸附并間歇振蕩,每隔一段時間測定溶液的吸光度,計算原花色素吸附率,對時間作圖,得到原花色素的吸附時間曲線。

    2.3 樹脂吸附量與原花色素濃度的關(guān)系的測定

    將經(jīng)過預(yù)處理好的X-5型大孔吸附樹脂,用蒸餾水洗凈,瀝干水分后,分別稱取樹脂2.00 g 5份放入250 mL三角燒瓶中,再加入不同濃度100 mL的原花色素溶液(濃度用A0表示),間歇振蕩,待吸附達(dá)到飽和后,離心分離,測定原花色素溶液的平衡濃度,計算吸附量,以吸附量對原花色素濃度作圖,經(jīng)計算機(jī)擬合,得到樹脂吸附量與原花色素濃度的關(guān)系。

    3 實驗結(jié)果與討論

    3.1 樹脂的篩選

    由于葡萄籽提取物具有多酚結(jié)構(gòu)和糖甙鏈,具有一定的極性和親水性,生成氫鍵的能力較強(qiáng),有利于弱極性和極性樹脂的吸附,但是,吸附作用力太強(qiáng)并不利于解吸。NKA-9樹脂雖然吸附量大,但是解吸率低,因而不適用于分離;NKA-Ⅱ和D3520樹脂可能是由于本身的結(jié)構(gòu)特點(diǎn),對原花色素的吸附作用較差,因而也不能應(yīng)用于原花色素的分離。所以實驗中采用了X-5樹脂作為吸附劑。各種樹脂的吸附性能如表1所示:

    3.2 吸附時間的確定

    由圖1可知,吸附平衡時間大約在2 h左右,吸附率達(dá)到99.32%。

    3.3 解吸曲線

    前面通過測定四種樹脂的吸附曲線,已將NKA-9和NKA-2型樹脂淘汰,由圖2可知,X-5型樹脂的最終解吸率約為0.8,解吸時間較短,解吸速率較快,解吸效果較好。

    表1 不同樹脂的物理參數(shù)

    圖1 X-5樹脂吸附曲線

    圖2 X-5樹脂的解吸曲線

    3.4 濃度對樹脂吸附量的影響

    對于一定量的吸附質(zhì)來說,吸附劑用量增大,意味著吸附總表面增大,吸附質(zhì)在吸附劑上的分布較松散,從而吸附劑對吸附質(zhì)的物理作用和化學(xué)作用加強(qiáng),吸附量增加。

    從圖3可以看出,隨著溶液濃度的增加樹脂對原花色素的吸附量也隨之上升,當(dāng)溶液濃度為2.35 mg/mL后樹脂吸附量達(dá)到最高,即樹脂吸附量達(dá)到42.60 mg原花色素/g樹脂;原花色素濃度繼續(xù)上升,而樹脂吸附量反而下降,影響因素還有待于進(jìn)一步研究。根據(jù)擬合得出吸附液濃度C(mg/mL)與樹脂吸附量Q(mg/mL)具有一定的比例關(guān)系:Q=-41.78C2+64.14C-12.10。今后擴(kuò)大實驗時應(yīng)參考這條曲線來確定合適的樹脂用量及原花色素提取液濃度。

    3.5 樹脂再生性能

    吸附樹脂除了吸附目標(biāo)產(chǎn)物之外,還會吸附雜質(zhì),而這些雜質(zhì)會毒化樹脂,因此必須在下一次使用時再生樹脂。本試驗以X-5型樹脂為例考察了樹脂的再生性能,X-5樹脂在連續(xù)使用5次后吸附率(%)分別為:91.34、90.89、90.76、86.38、80.26,下降較明顯,因而應(yīng)該每使用5次進(jìn)行一次再生。X-5型樹脂的再生方法是依次用無水乙醇、5%NaOH浸泡,最后用蒸餾水沖洗至中性。經(jīng)再生后的樹脂吸附率可達(dá)到91.32%,與新品的吸附能力基本相同,而且樹脂可以重復(fù)利用50次以上。

    圖3 原花色素濃度同樹脂吸附量關(guān)系

    4 結(jié)論

    在靜態(tài)吸附條件下,X-5樹脂對原花色素的吸附率為99.32%,進(jìn)一步測定其動泄露曲線為Q=-41.78C2+64.14C-12.10,解吸率為80%。

    [1]李杰濱,譚秀濱,梁云霞.大孔吸附樹脂在藥物分離提取方面的應(yīng)用[J].制劑技術(shù),2002,11(12)14.

    [2]王勇強(qiáng),宋義軍,堵年生.大孔樹脂附——高碘酸鉀法測定御蓯蓉口服液中甘露醇的含量.天然產(chǎn)物研究與開發(fā).2001.13(4):36-37.

    book=2010,ebook=52

    10.3969/j.issn.1008-1267.2010.01.016

    R282.71

    A

    1008-1267(2010)01-0039-02

    2009-10-12

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