KLF7對(duì)創(chuàng)傷性腦損傷海馬神經(jīng)元細(xì)胞模型凋亡和增殖的影響

馬 多，李文媛，王曉宇，喻 靜，呂忠孝，王 瑩

(1.牡丹江醫(yī)學(xué)院神經(jīng)組織工程研究所，黑龍江 牡丹江 157011；2.廈門醫(yī)學(xué)院附屬第二醫(yī)院，福建 廈門 361000)

創(chuàng)傷性腦損傷(traumatic brain injury,TBI)是目前導(dǎo)致死亡和致殘的主要原因之一[1]。研究表明約50%以上創(chuàng)傷相關(guān)死亡與TBI密切相關(guān)，美國(guó)約40%TBI損傷幸存者發(fā)展為長(zhǎng)期殘疾，可導(dǎo)致顯著的海馬萎縮，并伴有語(yǔ)言記憶和認(rèn)知功能受損。其復(fù)雜的病理生理過(guò)程涉及創(chuàng)傷性機(jī)械力，導(dǎo)致內(nèi)皮或腦實(shí)質(zhì)的原發(fā)性或繼發(fā)性腦損傷[2]。繼發(fā)性損傷發(fā)生在原發(fā)性損傷介導(dǎo)的神經(jīng)炎癥、免疫反應(yīng)、氧化應(yīng)激、線粒體功能障礙和細(xì)胞凋亡之后，可能持續(xù)數(shù)小時(shí)到數(shù)天。此外繼發(fā)性損傷阻礙現(xiàn)存神經(jīng)保護(hù)和修復(fù)機(jī)制，能夠?qū)е麻L(zhǎng)期認(rèn)知和功能性神經(jīng)損傷[3]。

Krüpple樣因子(Krüppel-like Factor,KLF)是一個(gè)由17個(gè)成員組成的鋅指轉(zhuǎn)錄因子家族，調(diào)控多種重要的生理和病理過(guò)程，包括增殖、分化和細(xì)胞死亡[4]。在所有17個(gè)KLF家族成員中，KLF6和KLF7都是視神經(jīng)軸突再生所必需的調(diào)控轉(zhuǎn)錄因子，而且，KLF7促進(jìn)神經(jīng)突起生長(zhǎng)的能力是KLF6的兩倍以上[5]。KLF7在成人組織中廣泛表達(dá)，在腦和脊髓中占優(yōu)勢(shì)。在TBI模型中，一些KLF家族成員如KLF4、KLF11和KLF6在神經(jīng)元損傷、缺氧/復(fù)氧損傷、軸突生長(zhǎng)和運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元存活中起重要作用[6]。前期研究發(fā)現(xiàn)KLF7在周圍神經(jīng)損傷或脊髓損傷模型中可提高移植種子細(xì)胞的存活率，促進(jìn)軸突再生[7]。但KLF7對(duì)TBI的機(jī)制研究尚未見(jiàn)報(bào)道。

本研究對(duì)HT22海馬神經(jīng)元細(xì)胞進(jìn)行拉伸(stretch)結(jié)合氧葡萄糖剝奪(oxygen-glucose deprivation,OGD)處理，復(fù)制體外TBI細(xì)胞損傷模型[8]，探討KLF7對(duì)TBI誘導(dǎo)HT22細(xì)胞增殖、凋亡損傷作用及其機(jī)制，為臨床TBI損傷提供新的治療靶點(diǎn)。

1 材料與方法

1.1 海馬神經(jīng)元細(xì)胞培養(yǎng)及體外損傷模型的建立HT22海馬神經(jīng)元細(xì)胞系購(gòu)自中國(guó)科學(xué)院細(xì)胞庫(kù)。在10%胎牛血清(FBS)和1%青霉素/鏈霉素的Dulbecco培養(yǎng)基(DMEM)，在5% CO2、37 ℃細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。每2 d更換培養(yǎng)基。將細(xì)胞接種在6孔板(2×107細(xì)胞/孔)上進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)。

應(yīng)用stretch結(jié)合OGD制備體外TBI細(xì)胞模型[9]。首先將細(xì)胞進(jìn)行雙軸拉伸損傷模型。HT22細(xì)胞加入涂有I型膠原6孔板上培養(yǎng)，然后用細(xì)胞損傷控制器(CIC)II(FlexCell International公司)處理。延遲設(shè)置為50 ms，調(diào)節(jié)器壓力設(shè)置為35 psi，峰值壓力設(shè)置為5.6 psi[10]。設(shè)置參數(shù)相當(dāng)于中度拉伸損傷。細(xì)胞受到中等程度拉伸損傷4 h。隨后細(xì)胞進(jìn)行OGD處理，原培養(yǎng)基被缺乏D-葡萄糖的DMEM培養(yǎng)基替換培養(yǎng)，在缺氧培養(yǎng)箱中培養(yǎng)4 h，然后在進(jìn)行實(shí)驗(yàn)前再?gòu)?fù)氧20 h。對(duì)照組HT22細(xì)胞在相同條件下處理，但不接受stretch和OGD處理。

1.2 AG490預(yù)處理及AAV-KLF7對(duì)HT22細(xì)胞的轉(zhuǎn)導(dǎo)將HT22細(xì)胞接種于6孔板(2×107細(xì)胞/孔)上，細(xì)胞分為：control組(未處理細(xì)胞)；stretch+OGD+AAV-NC(SOAN)組：由AAV-NC轉(zhuǎn)染細(xì)胞24 h后，細(xì)胞拉伸后24 h進(jìn)行OGD處理；stretch+OGD+AAV-KLF7(SOAK)組：AAV-KLF7轉(zhuǎn)染細(xì)胞24 h后，細(xì)胞拉伸后24 h進(jìn)行OGD處理。stretch+OGD+AAV-KLF7+AG490(SOAK-AG490)組：首先JAK2/STAT3抑制劑AG490預(yù)處理細(xì)胞30 min，再經(jīng)AAV-KLF7轉(zhuǎn)染24 h后進(jìn)行細(xì)胞拉伸和OGD。sretch+OGD+AAV-NC(SOAN-AG490)組：細(xì)胞經(jīng)AG490預(yù)處理30 min后，再經(jīng)AAV-NC轉(zhuǎn)染24 h后進(jìn)行牽張和OGD。

在AAV轉(zhuǎn)染、細(xì)胞拉伸和OGD之前進(jìn)行AG490預(yù)處理[11]。SOAK+AG490和SOAN+AG490組中AG490(5 mM的1 μL 50%乙醇，sigma公司)。在細(xì)胞拉伸和OGD之前進(jìn)行AAV轉(zhuǎn)染。AAV-NC(6.5×109病毒粒/mL，Vector Biolabs公司)或AAV-KLF7(6.5×109病毒粒/mL，Vector Biolabs公司)，濃度為150 μL/孔[12]。

1.3 Western blot法每組細(xì)胞通過(guò)SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)和聚偏二氟乙烯(PVDF)膜轉(zhuǎn)移對(duì)蛋白質(zhì)樣品(20 μg)進(jìn)行取樣和分離。加入一抗KLF7(兔多克隆IgG；1∶500)、Bcl-2(兔多克隆IgG；1∶500)、Bax(兔多克隆IgG；1∶500)、Cleaved Caspase-3(兔多克隆IgG；1∶500)、p-JAK2(兔多克隆IgG；1∶500)、total-JAK2(兔多克隆IgG；1∶500)、p-STAT3(兔多克隆IgG；1∶500)、total-STAT3(兔重組多克??；1∶500)、GAPDH(兔多克隆IgG；1∶500)4 ℃孵育過(guò)夜。加入辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記二抗(1∶5000)室溫下孵育1 h。所有抗體均購(gòu)自Thermoscitific公司。使用增強(qiáng)化學(xué)發(fā)光(ECL)試劑盒(GE Healthcare公司)對(duì)標(biāo)記的蛋白質(zhì)進(jìn)行顯色，使用Image J 1.42q軟件進(jìn)行分析。

1.4 實(shí)時(shí)熒光定量PCR(Real-time quantitative PCR,qRT-PCR)應(yīng)用Trizol試劑(美國(guó)Life Technologies公司)使HT22細(xì)胞均質(zhì)化，將純化RNA稀釋500 ng/μL根據(jù)cDNA生成說(shuō)明，將3 μL純化稀釋RNA與PrimeScript?RT試劑混合物孵育。各引物序列為：KLF7上游5′-TTTCCTGGCAGTCATCTGCAC-3′，下游5′-GGGTCTGTTTGTTTGTCAGTCTGTC-3′；β-actin 上游5′- CCCATCTATGAGGGTTACGC -3′，下游5′- TTTAATGTCACGCACGATTTC -3′。利用2- △△ CT方法分析。

1.5 免疫熒光染色應(yīng)用一抗KLF7(兔多克隆IgG，1∶200)，DAPI(1∶200)和β-Ⅲ-tubulin(兔多克隆lgG；1∶200)4 ℃孵育過(guò)夜，孵育二抗FITC結(jié)合抗兔(1∶200；山羊多克隆IgG)或Alexa555結(jié)合驢抗兔二級(jí)抗體(1∶200；驢多克隆IgG)，所有抗體均購(gòu)自Sigma-Aldrich公司，使用Olympus BX41熒光顯微鏡拍攝圖像，MetaMorph軟件分析熒光強(qiáng)度。

1.6 乳酸脫氫酶(LDH)測(cè)定LDH細(xì)胞毒性分析試劑盒(Sigma-Aldrich公司)檢測(cè)LDH酶活性。與實(shí)驗(yàn)處理的HT22細(xì)胞在37 ℃培養(yǎng)30 min。應(yīng)用終止液(1 M HCl，50 μL)停止反應(yīng)。490 nm處檢測(cè)光密度值(optical density，OD)。細(xì)胞毒性(%)=(實(shí)驗(yàn)組OD 值/control組OD值)×100%。

1.7 Caspase-3活性測(cè)定Caspase-3細(xì)胞活性檢測(cè)試劑盒(美國(guó)Sigma-Aldrich公司)檢測(cè)促凋亡蛋白Caspase-3活性。細(xì)胞裂解后將5 μL 4 mM DEVD-p-NA底物、50 μL反應(yīng)緩沖液與細(xì)胞上清液(50 μL/孔)37 ℃孵育2 h。使用微孔板讀取器(Bio-Rad)在405 nm測(cè)定光密度值(ODs)。Caspase-3活性(%)=(實(shí)驗(yàn)組OD值/control組OD值)×100%。

1.8 免疫沉淀(Chromatin Immunoprecipitation，ChIP)在OGD和細(xì)胞拉伸后，收集細(xì)胞在裂解緩沖液(2 mM EDTA、300 mM NaCl、20 mM Tris-HCl、1%nonidet P-40)提取蛋白[13]。500 μg蛋白加入一抗KLF7(2 μg，小鼠單克隆IgG，Santa Cruz Biotechnology公司)及p-STAT3(2 μg，兔多克隆IgG，ThermoScientific公司)孵育過(guò)夜，用50 μL protein A/G-加瓊脂糖(Santa Cruz Biotechnology公司)孵育4 h。免疫沉淀反應(yīng)后，加入SDS緩沖液。然后進(jìn)行上述western blot步驟分析結(jié)合蛋白。

1.9 碘化丙啶(Propidium Iodide，PI)染色應(yīng)用DAPI(5 μg/mL，Sigma-Aldrich公司)在37 ℃下加入細(xì)胞15 min標(biāo)記細(xì)胞核。然后添加5 μg/mL 碘化丙啶(PI)(Sigma-Aldrich公司)10 min，應(yīng)用磷酸鹽緩沖鹽溶液(phosphate buffered saline，PBS)洗滌。將樣品在4%多聚甲醛(Paraformaldehyde solution，PFA)固定10 min，Olympus熒光顯微鏡拍攝圖像。應(yīng)用ImageJ軟件定量細(xì)胞活力(%)=(PI陽(yáng)性/Hoechst陽(yáng)性細(xì)胞)×100%。

1.10 細(xì)胞計(jì)數(shù)試劑盒-8(Cell Counting Kit-8，CCK-8)分析應(yīng)用CCK-8細(xì)胞計(jì)數(shù)試劑盒檢測(cè)細(xì)胞增殖和細(xì)胞毒性。每組細(xì)胞放入96孔板在37 ℃下加入CCK-8溶液(10 μL/孔)培養(yǎng)2 h。用微孔板讀取器(Bio-Rad公司)在450 nm處測(cè)量光密度值(ODs)。細(xì)胞活性(%)=(實(shí)驗(yàn)組OD 值/control組OD值)×100%。

1.11 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析所得數(shù)據(jù)應(yīng)用SPSS 13.0軟件行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，計(jì)量數(shù)據(jù)以“均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示。采用單因素方差分析(one-way ANOVA)和SNK法比較，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 AAV-KLF7轉(zhuǎn)染HT22細(xì)胞后KLF7表達(dá)與control組比較，stretch+OGD+AAV-NC(SOAN)組和stretch+OGD+AAV-KLF7(SOAK)組KLF7蛋白和mRNA表達(dá)均顯著增高，而SOAK組KLF7蛋白和mRNA表達(dá)均顯著高于SOAN組(蛋白，F(xiàn)2,6=88.10，P<0.001；mRNA，F(xiàn)2,6=59.75，P<0.001)(見(jiàn)圖1)。

圖1 AAV-KLF7轉(zhuǎn)染HT22細(xì)胞后KLF7表達(dá)

2.2 細(xì)胞免疫熒光染色檢測(cè)stretch+OGD+AAV-NC(SOAN)組和stretch+OGD+AAV-KLF7(SOAK)組KLF7與βⅢ-tubulin表達(dá)均顯著高于control組，而SOAK組KLF7與βⅢ-tubulin表達(dá)均顯著高于SOAN組(KLF7：F2,15=264.0，P<0.001；βⅢ-tubulin：F2,15=126.3，P<0.001)(圖2)。

2.3 KLF7對(duì)海馬神經(jīng)元凋亡的影響stretch+OGD+AAV-KLF7(SOAK)組和stretch+OGD+AAV-NC(SOAN)組PI陽(yáng)性細(xì)胞比率、LDH活性及Caspase3活性顯著高于control組。而與SOAN組比較，SOAK組顯著降低PI陽(yáng)性細(xì)胞比率、LDH活性及Caspase3活性(PI陽(yáng)性細(xì)胞比率：F2,15=75.71，P<0.001；LDH:F2,15=62.45，P<0.001；Caspase3:F2,15=51.14，P<0.001)(圖3A-F)。與stretch + OGD損傷組比較，control組細(xì)胞活力顯著增高，而SOAK組細(xì)胞活力顯著高于SOAN組(F2,15=43.06，P<0.001)(圖3G)。

圖3 KLF7對(duì)海馬神經(jīng)元凋亡和細(xì)胞活性的影響

2.4 KLF7調(diào)控細(xì)胞損傷的機(jī)制stretch+OGD+AAV-NC(SOAN)組和stretch+OGD+AAV-KLF7(SOAK)組p-JAK2/t-JAK2和p-STAT3/t-STAT3比值顯著高于control組，而SOAK組p-JAK2/t-JAK2和p-STAT3/t-STAT3比值均顯著高于SOAN組，然而與SOAN和SOAK組比較，SOAK-AG490組顯著降低p-STAT3/t-STAT3和p-JAK2/t-JAK2比值(p-JAK2/t-JAK2:F3,8=139.8，P<0.001；p-STAT3/t-STAT3:F3,8=73.96，P<0.001(圖4A-C)。ChIP結(jié)果表明KLF7可直接結(jié)合p-STAT3(圖4D)。

圖4 KLF7靶向調(diào)控JAK2/STAT3信號(hào)通路

2.5 AG490對(duì)凋亡因子的影響western blot分析結(jié)果表明與control組比較，stretch+OGD+AAV-NC(SOAN)組和stretch+OGD+AAV-KLF7(SOAK)組抗凋亡因子Bcl-2蛋白表達(dá)顯著降低，Bax和C-caspase3蛋白表達(dá)顯著增高，然而與SOAN組比較，SOAK組Bcl-2蛋白表達(dá)顯著增高，Bax和C-caspase3蛋白表達(dá)顯著降低。此外，與SOAK組比較，AG490處理組顯著降低Bcl-2蛋白表達(dá)，增加Bax和C-caspase3蛋白表達(dá)。其中SOAK-AG490組與SOAN-AG490組Bcl-2、Bax及C-caspase3蛋白表達(dá)無(wú)顯著性差異(Bcl-2:F4,10=43.34，P<0.001；Bax:F4,10=173.6，P<0.001；C-caspase3:F4,10=93.55，P<0.001)(圖5A-D)。

2.6 AG490對(duì)細(xì)胞凋亡及活性的影響與control組比較，SOAN組和SOAK組PI陽(yáng)性細(xì)胞比率、LDH活性及Caspase3活性顯著增高，細(xì)胞活性顯著降低。然而與SOAN組比較，SOAK組顯著降低PI陽(yáng)性細(xì)胞比率、LDH活性及Caspase3活性，顯著增高細(xì)胞活性。此外與SOAK組比較，SOAK-AG490組PI陽(yáng)性細(xì)胞百分率、LDH和caspase3活性顯著增加，細(xì)胞活力顯著降低。其中SOAN組、SOAK-AG490組和SOAN-AG490組PI陽(yáng)性細(xì)胞百分率、LDH活性、caspase3活性和細(xì)胞活性無(wú)顯著性差異(PI陽(yáng)性細(xì)胞：F4,15=25.07，P<0.001；LDH:F4,15=42.45，P<0.001；caspase-3:F4,15=49.83，P<0.001；細(xì)胞活力：F4,15=32.64，P<0.001(圖5A～5E)。

圖6 AG490對(duì)細(xì)胞凋亡及細(xì)胞活性的影響

3 討論

創(chuàng)傷性腦損傷(TBI)主要由跌倒、機(jī)動(dòng)車事故和娛樂(lè)活動(dòng)引起，每年發(fā)病率約為190萬(wàn)人。目前全世界約有5300萬(wàn)人因一次或多次TBI相關(guān)傷害而需要醫(yī)療援助[1]。TBI發(fā)生在大腦暴露于外力時(shí)，這些外力會(huì)導(dǎo)致局部或彌漫性損傷，包括軸突斷裂、水腫、血管損傷和神經(jīng)元死亡。TBI造成的傷害從輕微到嚴(yán)重不等。TBI后主要損傷通常會(huì)導(dǎo)致繼發(fā)性損傷，由炎癥、氧自由基形成、鈣釋放和線粒體功能障礙引起的神經(jīng)元死亡[2-3]。迄今為止TBI研究尚未轉(zhuǎn)化為臨床治療方法。治療TBI一種方法可能涉及轉(zhuǎn)錄因子的調(diào)節(jié)，對(duì)其進(jìn)行適度調(diào)控可能對(duì)細(xì)胞存活產(chǎn)生顯著影響。

前期研究表明JAK-STAT3通路介導(dǎo)細(xì)胞損傷調(diào)節(jié)效應(yīng)[11]。JAK/STAT通路參與各種中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病的進(jìn)展，包括腦缺血、TBI和脊髓損傷[14]。有研究表明KLF6和STAT3共同占據(jù)促再生基因的調(diào)控DNA[15]。特別是KLF6和-KLF7通過(guò)相似的轉(zhuǎn)錄靶點(diǎn)起作用，并且共享相同的DNA結(jié)合域，這表明其具有相似基因組靶點(diǎn)[5]。上述結(jié)果增加了KLF7也與JAK2/STAT3信號(hào)相關(guān)的可能性，由于大量證據(jù)支持KLF7對(duì)神經(jīng)系統(tǒng)損傷后軸突再生和神經(jīng)元存活的積極影響[7]。在Kruppel樣家族中，KLF7相對(duì)KLF6已被證明能促進(jìn)受損皮質(zhì)脊髓束軸突再生能力。本研究應(yīng)用KLF7腺相關(guān)病毒轉(zhuǎn)染細(xì)胞，通過(guò)western blot和qRT-PCR證實(shí)KLF7表達(dá)顯著增加，證實(shí)腺相關(guān)病毒能夠有效轉(zhuǎn)染KLF7至HT22細(xì)胞。牽張損傷是TBI最常用的體外模型，OGD目前用于體外缺血模型。這兩種方法的結(jié)合已經(jīng)被證明是成功的復(fù)制TBI繼發(fā)性損傷的體外細(xì)胞模型[12]。LDH活性是細(xì)胞膜完整性的指標(biāo)，因此可作為細(xì)胞毒性的指標(biāo)，研究表明嚴(yán)重TBI后，腦脊液中LDH活性和caspase-3表達(dá)顯著增高，海馬神經(jīng)元細(xì)胞PI陽(yáng)性細(xì)胞百分比顯著增高。研究表明TBI損傷處理的PC12細(xì)胞顯示βⅢ-tubulin降低，這與氧化損傷和炎癥及神經(jīng)退行性疾病進(jìn)展相關(guān)[13]。在本研究中應(yīng)用拉伸和OGD模擬TBI在體外造成的損傷，結(jié)果表明拉伸和OGD損傷后PI陽(yáng)性細(xì)胞百分比、LDH活性和caspase-3活性顯著增高，細(xì)胞活性及βⅢ-tubulin表達(dá)均顯著降低，與體內(nèi)TBI在原發(fā)性和繼發(fā)性損傷期間發(fā)生的損傷反應(yīng)相一致，再次證實(shí)拉伸和OGD聯(lián)合能夠成功構(gòu)建TBI體外細(xì)胞模型。

本研究結(jié)果顯示拉伸和OGD誘導(dǎo)的細(xì)胞骨架蛋白βⅢ-tubulin被KLF7的過(guò)度表達(dá)逆轉(zhuǎn)。這一現(xiàn)象證實(shí)KLF7可以修復(fù)拉伸和OGD引起的神經(jīng)突起縮短和損傷。本研究對(duì)拉伸聯(lián)合OGD后凋亡相關(guān)蛋白的研究結(jié)果與前期文獻(xiàn)一致[8]。在TBI損傷細(xì)胞模型中，Bax和C-caspase3蛋白表達(dá)均顯著增高，抗凋亡因子Bcl-2表達(dá)顯著降低，而KLF7高表達(dá)顯著降低C-caspase3和Bax表達(dá)，顯著上調(diào)Bcl-2的表達(dá)，這一結(jié)果證實(shí)KLF7能夠顯著抑制海馬神經(jīng)元TBI損傷細(xì)胞模型凋亡。

本研究在KLF7中證實(shí)了與轉(zhuǎn)錄因子STAT3的相互作用。KLF7相關(guān)的KLF6在啟動(dòng)子中被預(yù)測(cè)含有一個(gè)功能性STAT3相互作用域[11]。此外STAT3在KLF6基因啟動(dòng)子中富集，并且在再生相關(guān)基因路徑的調(diào)控DNA中檢測(cè)到共占據(jù)[15]。本研究使用JAK2/STAT3抑制劑AG490和共免疫沉淀分析，結(jié)果顯示KLF7直接與STAT3相互作用，并且表明KLF7上調(diào)與JAK2/STAT3磷酸化一致。JAK2/STAT3磷酸化與抗凋亡蛋白Bcl-2及細(xì)胞凋亡相關(guān)，這些與本研究中KLF7過(guò)度表達(dá)細(xì)胞中觀察到的特征相一致。此外與前期TBI研究相似，用選擇性抑制劑AG490抑制JAK2/STAT3通路能夠顯著減弱JAK2/STAT3激活的神經(jīng)保護(hù)作用。同時(shí)在拉伸和OGD的海馬神經(jīng)元中觀察到了TBI誘導(dǎo)的神經(jīng)元損傷，包括細(xì)胞凋亡增加和細(xì)胞活力降低，證實(shí)KLF7通過(guò)調(diào)控JAK2/STAT3通路改善TBI誘導(dǎo)的海馬神經(jīng)元損傷。但該信號(hào)通路目前僅在細(xì)胞水平得以驗(yàn)證，KLF7調(diào)控JAK2/STAT3保護(hù)神經(jīng)元損傷機(jī)制仍有待在動(dòng)物疾病模型中進(jìn)一步探討。由于TBI病理生理的復(fù)雜性，針對(duì)單一的病理生理機(jī)制干預(yù)治療TBI臨床療效并不理想，針對(duì)TBI多靶點(diǎn)、全方位神經(jīng)保護(hù)調(diào)控可能是TBI的未來(lái)研究方向。

綜上所述，KLF7能夠抑制海馬神經(jīng)元TBI損傷細(xì)胞模型凋亡，機(jī)制可能與調(diào)控JAK2/STAT3信號(hào)通路表達(dá)有關(guān)。