水蔓菁滴丸的制備工藝和質(zhì)量評(píng)價(jià)研究

刁海鵬， 杜 艷， 孫體健， 牛栓成

(山西醫(yī)科大學(xué)，山西太原030001)

水蔓菁為玄參科細(xì)葉婆婆納屬水蔓菁(Veronica linariifolia)全草入藥(應(yīng)具體說(shuō)明其藥用部位)，具有清熱解毒、利尿、止咳化痰等作用［1］。主要化學(xué)成分為芹黃素、木犀草素苷等黃酮類(lèi)化合物［2］，現(xiàn)水蔓菁已有制成片劑，臨床用于治療慢性氣管炎、肺化膿癥、咳吐膿血、急性腎炎、尿路感染等疾?。?］。為滿(mǎn)足臨床用藥的需要，本課題組對(duì)水蔓菁藥材中的黃酮類(lèi)有效成分進(jìn)行提取并富集，制備成止咳滴丸，同時(shí)對(duì)制備過(guò)程中影響滴丸成型的多種因素進(jìn)行考察，優(yōu)化工藝條件，并對(duì)制成的滴丸質(zhì)量進(jìn)行評(píng)價(jià)。

1 儀器與試藥

儀器:旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀:RE－52－98型(上海亞榮儀器公司);真空干燥箱:DEG－402型(天津天宇技術(shù)實(shí)業(yè)有限公司);超聲波清洗儀:KQ－100型(昆山市超聲儀器有限公司);760CRT雙光束紫外－可見(jiàn)分光光度計(jì)(上海精密分析儀器廠)。

材料與試劑:PEG 4000、PEG 6000(AR，天津基準(zhǔn)化學(xué)試劑有限公司);甲基硅油、液狀石蠟等均為藥用規(guī)格;大孔吸附樹(shù)脂HPD600購(gòu)自南開(kāi)大學(xué);蘆丁對(duì)照品(中國(guó)藥品生物制品檢定所 批號(hào):1521－200401);水蔓菁藥材，經(jīng)山西省藥檢所鑒定為細(xì)葉婆婆納屬水蔓菁，產(chǎn)自山西省萬(wàn)榮縣。

2 方法與結(jié)果

2.1 水蔓菁浸膏的制備

2.1.1 水蔓菁藥材的提取

水蔓菁藥材中最主要的有效成分是黃酮類(lèi)化合物，通過(guò)單因素考察，水蔓菁提取工藝中主要的影響因素有:加水量、提取時(shí)間和提取次數(shù)，故以水蔓菁藥材提取液中總黃酮含量為指標(biāo)，以三因素三水平的L9(34)正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)，來(lái)考察最佳提取工藝。

將水蔓菁藥材粉碎，過(guò)20目篩，稱(chēng)取粗粉20 g，加水煎煮，按照表1、表2設(shè)計(jì)內(nèi)容進(jìn)行操作。將提取液過(guò)濾，減壓濃縮，測(cè)其總黃酮含量［4］，結(jié)果見(jiàn)表 2、表 3。

表1 水蔓菁總黃酮水提取方法正交試驗(yàn)考察因素水平

試驗(yàn)結(jié)果表明，只有提取次數(shù)對(duì)水蔓菁中總黃酮含量有顯著性影響，確定提取次數(shù)為3次;根據(jù)總黃酮含量直觀分析表明，影響因素差別為:D＞B＞A，最后工藝為A2B2D3，即10倍量水，回流提取3次，每次1 h。

表2 提取工藝正交實(shí)驗(yàn)安排及結(jié)果

表3 藥材總黃酮含量方差分析

2.1.2 水蔓菁提取物的純化 將水蔓菁藥材粉碎，過(guò)20目篩，稱(chēng)取300 g，加10倍量水煎煮3次，每次1 h，過(guò)濾，合并濾液減壓濃縮藥液比至1∶8(g/mL)，作為上樣溶液。取處理好的大孔吸附樹(shù)脂HPD600濕法裝柱，使其徑高比為1∶10，以1.5倍柱體積/小時(shí)的速度上樣，同時(shí)用FeCl3溶液驗(yàn)漏，至變成墨綠色;然后用2倍柱體積的水洗，流速為2倍柱體積/小時(shí)，洗脫液棄取;然后用4倍柱體積的50%乙醇洗脫，流速為2倍柱體積/小時(shí)，收集洗脫液，濃縮，真空干燥得浸膏，研細(xì)，過(guò)80目篩，即得水蔓菁浸膏粉末，平均出粉率為31.4%，總黃酮含量按蘆丁折算為20.66%。

2.2 水蔓菁止咳滴丸成型工藝考察［5，6］

2.2.1 水蔓菁滴丸基質(zhì)種類(lèi)的確定 本試驗(yàn)考察了水蔓菁浸膏粉末與不同基質(zhì)混合后的成型情況。取適量2.1.2項(xiàng)下制得的浸膏粉末，稱(chēng)取PEG4000、PEG 6000各3 g，分別置50 mL小燒杯中，80℃水浴加熱，熔化后加入浸膏，攪拌均勻后，80℃保溫，滴頭口徑為3.0/4.0 mm，滴距6 cm，以20 d/min速度滴入0～5℃的液體石蠟中，冷凝液長(zhǎng)為15 cm。

試驗(yàn)結(jié)果表明:PEG6000本身黏度較大，熔融溫度偏高，熔融液顏色深，滴制時(shí)不宜成形，制成的滴丸大小不均勻，丸重差異大，圓整度不好，而且制成的滴丸溶散時(shí)間為8.4 min。而浸膏與PEG4000融合性好，藥液稠度適宜，易于滴制，制成的滴丸溶散時(shí)間短，故水蔓菁滴丸的基質(zhì)選擇用PEG4000。

2.2.2 冷凝劑的確定 根據(jù)水蔓菁浸膏為水溶性物質(zhì)，制備滴丸時(shí)應(yīng)選擇油溶性冷凝劑，因植物油穩(wěn)定性較差，故選擇液體石蠟和甲基硅油，通過(guò)實(shí)驗(yàn)確定冷凝劑的種類(lèi)。取適量2.1.2項(xiàng)下制得的浸膏粉末，按1∶3加入在80℃熔化的PEG4000中，攪拌均勻后，分別滴入液體石蠟、甲基硅油中，其它滴制條件不變。

試驗(yàn)結(jié)果表明:使用液體石蠟為冷凝劑時(shí)水蔓菁滴丸下降太快，形成子母丸，滴丸產(chǎn)生拖尾，丸的大小不均勻，圓整度低;而使用甲基硅油為冷凝劑，滴丸下降速度慢，丸形圓整度高，故確定甲基硅油為冷凝劑。

2.3 水蔓菁滴丸制備條件的優(yōu)化

水蔓菁滴丸的制備:本課題組選擇常用的水溶性基質(zhì)PEG4000，冷凝劑為甲基硅油，并通過(guò)單因素試驗(yàn)，確定滴頭內(nèi)外徑為3.0/4.0 mm，冷凝劑溫度為0～5℃，滴距為6 cm，以丸重差異、溶散時(shí)限和外觀質(zhì)量為指標(biāo)，對(duì)熔融溫度(A)、滴速(B)、冷凝液高度(C)、保溫溫度(D)按正交設(shè)計(jì)L9(34)表做四因素三水平試驗(yàn)，試驗(yàn)設(shè)計(jì)見(jiàn)表4，試驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表 5，表 6。

表4 水蔓菁滴丸正交試驗(yàn)因素水平

表6的丸重差異方差分析數(shù)據(jù)表明，各因素對(duì)丸重差異系數(shù)的影響沒(méi)有顯著性差異。各因素對(duì)丸重差異的影響大小順序?yàn)?B＞D＞C＞A，最優(yōu)組合為A1B3C3D3，即藥液熔融溫度為80℃，保溫溫度為85℃，滴速為40 d/min，冷凝液高度為35 cm。

2.4 水蔓菁止咳滴丸質(zhì)量評(píng)價(jià)［7］

2.4.1 3批樣品重復(fù)性試驗(yàn) 按確定的處方制備3批水蔓菁止咳滴丸，進(jìn)行外觀評(píng)價(jià)和溶出度測(cè)定，結(jié)果見(jiàn)表7。

結(jié)果表明，批次之間滴丸外觀和體外藥物的溶出無(wú)明顯差異，設(shè)計(jì)與優(yōu)化結(jié)果是可靠的。

2.4.2 穩(wěn)定性試驗(yàn) 藥物制劑的基本要求是安全、有效、穩(wěn)定，藥物制劑穩(wěn)定性對(duì)保證制劑安全有效是非常重要的。滴丸作為一種固體分散體劑型，其主要缺點(diǎn)是藥物分散狀態(tài)的穩(wěn)定性不高，久貯易產(chǎn)生老化現(xiàn)象。

針對(duì)中藥滴丸的特點(diǎn)，設(shè)計(jì)以下實(shí)驗(yàn)進(jìn)行加速試驗(yàn):在溫度(30±2)℃、相對(duì)濕度60%±5%的條件下放置3個(gè)月，在試驗(yàn)期間第0，1，2，3個(gè)月取樣，進(jìn)行外觀、含量考察，結(jié)果見(jiàn)表8;采用不帶外包裝，在照度3600Lx的光照條件下放置10天，于第0，5，10天取樣，進(jìn)行外觀、總黃酮含量考察。結(jié)果見(jiàn)表9。

表5 水蔓菁滴丸正交試驗(yàn)結(jié)果(n=6)

表6 水蔓菁滴丸丸重差異方差分析

表7 3批樣品重復(fù)性試驗(yàn)結(jié)果

表8 水蔓菁滴丸高溫和高濕下的外觀和含量

表9 水蔓菁滴丸強(qiáng)光下的外觀和含量

結(jié)果表明，水蔓菁止咳滴丸在溫度和濕度加速試驗(yàn)條件下，色澤、硬度等外觀保持良好，含量穩(wěn)定;在光照加速試驗(yàn)條件下，外觀、含量均無(wú)明顯變化。說(shuō)明制備的水蔓菁滴丸在此試驗(yàn)條件下比較穩(wěn)定。

3 討論

本實(shí)驗(yàn)從影響滴丸的丸重差異系數(shù)、溶散時(shí)限和外觀質(zhì)量為評(píng)價(jià)指標(biāo)考察了各因素的影響，確立制備水蔓菁滴丸的最佳條件為:基質(zhì)為PEG4000，冷凝劑為甲基硅油，滴頭內(nèi)外徑為3.0/4.0 mm，冷凝劑溫度為0～5℃，滴距為6 cm，藥液熔融溫度為80℃，保溫溫度為85℃，滴速為40 d/min，冷凝液高度為35 cm。

本課題組對(duì)水蔓菁滴丸質(zhì)量從重現(xiàn)性、穩(wěn)定性?xún)煞矫孢M(jìn)行評(píng)價(jià)，該滴丸重現(xiàn)性良好，在高溫、高濕環(huán)境下三個(gè)月內(nèi)、強(qiáng)光下10 d內(nèi)滴丸外觀不變，其總黃酮含量基本保持不變，但其有效期的確定還有待通過(guò)加速試驗(yàn)和長(zhǎng)期試驗(yàn)繼續(xù)加以探討。

通過(guò)上述工藝條件確定的滴丸成型度好，所制滴丸符合《中國(guó)藥典》(2005版)滴丸質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。

［1］江蘇新醫(yī)學(xué)院.中藥大辭典［M］.上海:上海科技出版社，1986:1032.

［2］馬翠英.水蔓菁中黃酮類(lèi)化合物的研究［J］.藥學(xué)學(xué)報(bào)，1991.26(3).203－208.

［3］楊丁銘，朱開(kāi)賢.水蔓菁的化學(xué)成分研究(Ⅱ)［J］.中草藥，1991.(22).2－3.

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［7］中國(guó)藥典［S］.二部.2005:附錄IK.