冠心病心絞痛血瘀證四亞型與血管性假血友病因子相關(guān)性探討

楊軍輝，周小青

（湖南中醫(yī)藥大學(xué)，湖南 長(zhǎng)沙 410007）

冠心病心絞痛血瘀證四亞型與血管性假血友病因子相關(guān)性探討

楊軍輝，周小青

（湖南中醫(yī)藥大學(xué)，湖南 長(zhǎng)沙 410007）

目的 探討血管性假血友病因子（VWF）與冠心病心絞痛血瘀證四亞型的相關(guān)性。方法 對(duì)符合診斷標(biāo)準(zhǔn)的受試者112例、健康對(duì)照組30例、冠心病非血瘀證組30例分別檢測(cè)其VWF指標(biāo)。結(jié)果 與冠心病心絞痛非血瘀證比較，冠心病心絞痛血瘀證患者VWF水平均有不同程度升高（P＜0.01），各亞型之間比較，為痰濁血瘀＞氣滯血瘀＞氣虛血瘀＞陰虛血瘀。結(jié)論 冠心病心絞痛血瘀證內(nèi)皮細(xì)胞損傷實(shí)證比虛證較為嚴(yán)重，尤其是痰濁血瘀亞型更為嚴(yán)重。

血管性假血友病因子；冠心病心絞痛；血瘀證

中醫(yī)學(xué)對(duì)冠心病心絞痛血瘀證的辨證分型頗多，但尚無(wú)統(tǒng)一規(guī)范，比較常見(jiàn)的辨證分型有氣滯血瘀、氣虛血瘀、痰濁血瘀、陰虛血瘀、血脈瘀阻、陰虛陽(yáng)亢血瘀，其中以氣滯血瘀、氣虛血瘀、痰濁血瘀、陰虛血瘀四亞型較為常見(jiàn)[1-2]，本實(shí)驗(yàn)探討血管性假血友病因子（VWF）與冠心病心絞痛血瘀證常見(jiàn)的四亞型的相關(guān)性，現(xiàn)將實(shí)驗(yàn)方法及結(jié)果報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

受試對(duì)象來(lái)自于2005年3月至2008年3月湖南中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院、第二附屬醫(yī)院及湖南省中醫(yī)藥研究院附屬醫(yī)院心內(nèi)科冠心病心絞痛病人，隨機(jī)抽取符合診斷標(biāo)準(zhǔn)的冠心病心絞痛病人作為觀察對(duì)象，將符合血瘀證辨證標(biāo)準(zhǔn)的病例112例作為研究對(duì)象，分為冠心病血瘀證氣滯亞型（C組）25例、氣虛亞型（D組）28例、痰濁亞型（E組）30例、陰虛亞型（F組）29例。另設(shè)健康對(duì)照組（A組）30例，冠心病非血瘀證組（B組）30例。各組之間性別、年齡及伴隨病史比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），見(jiàn)表1。

1.2 診斷標(biāo)準(zhǔn)

1.2.1 冠心病心絞痛西醫(yī)診斷標(biāo)準(zhǔn) 冠心病心絞痛西醫(yī)診斷標(biāo)準(zhǔn)參照國(guó)際心臟病學(xué)會(huì)及WHO制定的“缺血性心臟病的命名及診斷標(biāo)準(zhǔn)”[3]。

1.2.2 冠心病心絞痛血瘀證診斷標(biāo)準(zhǔn) 按照1995年 《中醫(yī)病證診斷療效標(biāo)準(zhǔn)》[4]18的辨證分型標(biāo)準(zhǔn)擬定。主癥：胸悶心痛，痛如針刺，心悸氣短；兼癥：面色晦暗/口唇青紫/爪甲發(fā)青；舌象：舌質(zhì)紫暗/舌有瘀斑；脈象：澀/結(jié)代。主癥1項(xiàng)+兼癥2項(xiàng)+舌脈1項(xiàng)，為冠心病心絞痛血瘀證。

1.3 冠心病心絞痛血瘀證各亞型辨證標(biāo)準(zhǔn)

按照1995年 《中醫(yī)病證診斷療效標(biāo)準(zhǔn)》[4]19的辨證分型標(biāo)準(zhǔn)，參照中醫(yī)診斷學(xué)第六版教材[5]，由導(dǎo)師組織咨詢相關(guān)專家擬定，見(jiàn)表2。

表1 各組一般資料比較（例）

表2 冠心病心絞痛血瘀證各亞型分級(jí)量化表

臨床上，冠心病心絞痛血瘀證出現(xiàn)單一亞型很少，一般夾雜多種亞型，本課題采取以哪種亞型所占分?jǐn)?shù)較多則屬于該亞型為原則。

1.4 納入標(biāo)準(zhǔn)

（1）同時(shí)符合冠心病心絞痛診斷標(biāo)準(zhǔn)和冠心病心絞痛血瘀證診斷標(biāo)準(zhǔn)；（2）診斷為穩(wěn)定型心絞痛；（3）年齡55～75歲；（4）在檢查前15 d內(nèi)沒(méi)有參加其他臨床研究者；（5）伴隨病史以糖尿病和高血壓為主。

1.5 排除標(biāo)準(zhǔn)

（1）意識(shí)不清，不能表達(dá)主觀不適應(yīng)癥狀；（2）合并肝、腎、消化、造血系統(tǒng)等嚴(yán)重原發(fā)性疾病者及精神病患者；（3）診斷為不穩(wěn)定型心絞痛。

1.6 觀察指標(biāo)及方法

觀察指標(biāo)為VWF。方法：靜脈采血，置于含有1/10體積0.109 mol/L枸緣酸鈉抗凝液的試管中，3 000 r/min離心10 min，收集上層液（血漿，黃色），-70℃保存；采用發(fā)色底物法（Assay）檢測(cè)。

1.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

2 結(jié)果

VWF水平從高到低依次為E組＞C組＞D組＞F組＞B組＞A組，與A、C、E組相比，其余各組差異均有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）；與B組相比除 F組無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），其余各組差異均有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）；與 D組相比除F組外，其余各組差異均有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。見(jiàn)表3。

表3 各組 VWF水平比較（±s）

表3 各組 VWF水平比較（±s）

注：與A組比較*P＜0.01；與B組比較▲P＜0.01；與C 組比較△P＜0.01；與 D 組比較★P＜0.01；與 E 組比較☆P＜0.01。

組別A組B組C組D組E組F組n 30 30 25 28 30 29活性（%）79.913±5.737 103.118±6.048*128.009±16.332*▲110.977±12.286*▲△153.941±11.752*▲△★108.122±8.860*☆△

3 討論

VWF是目前已知分子量最大的血液溶性蛋白，屬于免疫球蛋白超家族。免疫組化和細(xì)胞培養(yǎng)證實(shí)，內(nèi)皮細(xì)胞及血小板是合成和儲(chǔ)備VWF的場(chǎng)所。循環(huán)血液中VWF有90%以上是內(nèi)皮細(xì)胞合成釋放[6]，VWF主要功能[7]是介導(dǎo)血小板與細(xì)胞外基質(zhì)之間黏附與血小板的聚集。已有大量報(bào)道，血漿中VWF含量與血管內(nèi)皮受損程度呈正比，內(nèi)皮細(xì)胞輕度受損時(shí)，VWF合成釋放增加，介導(dǎo)血小板活化黏附，血管平滑肌收縮，局部血流瘀滯，促進(jìn)血栓形成。當(dāng)內(nèi)皮細(xì)胞重度受損、壞死脫落，血管內(nèi)皮功能紊亂、喪失，內(nèi)皮下層各種成分的暴露導(dǎo)致血管通透性增強(qiáng)，血小板的激活，促進(jìn)凝血過(guò)程，內(nèi)皮細(xì)胞脫落導(dǎo)致抗凝活性、纖溶活性的減弱，最終導(dǎo)致血栓形成，因此，VWF改變是血管內(nèi)皮細(xì)胞受損“金指標(biāo)”。

近年研究表明，VWF增高的程度與心血管疾病相關(guān)，尤其是急性冠狀動(dòng)脈綜合征，VWF可以明顯提前預(yù)測(cè)負(fù)面心血管事件，包括死亡。ABAMT13是一種能解聚VWF的非金屬蛋白酶，VWF/ABAMT13比值可作為急性心肌梗死后長(zhǎng)期血栓事件的預(yù)后指標(biāo)[8]。血漿VWF增高的不同水平反映了心房顫動(dòng)患者臨床危險(xiǎn)因素的負(fù)面作用，并可以預(yù)測(cè)腦卒中和其他血管事件[9]，高VWF水平增加了急性缺血性腦卒中的風(fēng)險(xiǎn)[10]。

有實(shí)驗(yàn)提示，冠狀動(dòng)脈粥樣硬化的早期即有冠狀動(dòng)脈血管內(nèi)皮受損及功能紊亂，而且這一現(xiàn)象在冠狀動(dòng)脈造影探測(cè)到粥樣硬化斑塊前就可以發(fā)生[11]。內(nèi)皮細(xì)胞的損傷或功能紊亂會(huì)導(dǎo)致血管平滑肌發(fā)生內(nèi)皮依賴性舒縮功能異常，而且會(huì)導(dǎo)致血液中凝血及抗凝物質(zhì)失衡，促進(jìn)血栓形成等。血液VWF濃度與CHD，尤其是心絞痛嚴(yán)重程度和急性心肌梗死 (AMI)高度相關(guān)，AMI時(shí)VWF濃度升高，溶栓治療后24 h顯著下降；多中心前瞻性研究揭示VWF是冠脈事件的獨(dú)立預(yù)測(cè)指標(biāo)之一[12]。

對(duì)于VWF與CHD血瘀證的關(guān)系，研究者也多有報(bào)道。王佑華通過(guò)比較冠心病血瘀證、冠心病非血瘀證和健康人之間的VWF水平差異，結(jié)果顯示冠心病血瘀證患者VWF水平顯著高于非血瘀證患者和健康者，從分子水平提示冠心病血瘀證患者存在著內(nèi)皮細(xì)胞受損，且內(nèi)皮細(xì)胞受損既可能是血瘀證發(fā)生的原發(fā)性損傷因素之一，同時(shí)也可能是血瘀證發(fā)展的放大性損傷因素[13]。沈慶樂(lè)[14]研究提示VWF在血瘀證冠心病變化是氣滯血瘀證＞氣虛血瘀證＞對(duì)照組。林桂永研究結(jié)果顯示[15]，冠心病穩(wěn)定型心絞痛(SA)組血液中VWF表達(dá)增高，超出正常范圍，與張宇輝報(bào)道一致[16]。不同中醫(yī)證型之間比較，血瘀證組指標(biāo)均與非血瘀證組比較增高，與非血瘀證病人比較，冠心病穩(wěn)定型心絞痛血瘀證病人存在更嚴(yán)重的內(nèi)皮細(xì)胞(EC)損傷激活狀態(tài)，分泌黏附分子功能增強(qiáng)，以氣滯血瘀組最為明顯，與文獻(xiàn)[14，16]報(bào)道一致。說(shuō)明AS血瘀證病人處于EC受損激活，且EC與白細(xì)胞、血小板相互黏附作用增強(qiáng)狀態(tài)。EC分泌黏附分子表達(dá)增加，介導(dǎo)EC與白細(xì)胞、血小板黏附作用，通過(guò)一系列機(jī)制相互激活，使血液循環(huán)中VWF、進(jìn)一步增加，形成惡性循環(huán)，促進(jìn)長(zhǎng)期炎癥反應(yīng)和促凝及血栓形成；出現(xiàn)典型的心絞痛發(fā)作癥狀，與臨床表現(xiàn)嚴(yán)重程度一致。所以，林桂永認(rèn)為[15]，EC損傷激活是冠心病血瘀證病變的基礎(chǔ)。

本研究提示，與健康組比較，冠心病心絞痛組VWF水平差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01），與文獻(xiàn)報(bào)道一致，從而可以驗(yàn)證VWF可以作為內(nèi)皮損傷及冠心病心絞痛發(fā)生有效標(biāo)志物。同時(shí)與冠心病心絞痛非血瘀證比較，冠心病血瘀證患者VWF水平均有不同程度升高，所以，VWF也是判別是否冠心病心絞痛血瘀證有效指標(biāo)。對(duì)于冠心病心絞痛血瘀證各亞型之間比較，為痰濁血瘀＞氣滯血瘀＞氣虛血瘀＞陰虛血瘀，提示冠心病心絞痛血瘀證內(nèi)皮細(xì)胞損傷實(shí)證比虛證較為嚴(yán)重，痰濁血瘀內(nèi)皮細(xì)胞損傷較重。

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Mutuality study on VWF and four subfamilies of blood stasis syndrome in angina of coronary heart disease

YANG Jun-hui,ZHOU Xiao-qing
(TCM University of Hunan,Changsha,Hunan 410007,China)

ObjectiveTo study the dependability of von willebrand factor(VWF)and 4 subfamilies of the blood stasis syndrome in angina of coronary heart disease（CHD）.MethodsVWF was examined respectively in 112 patients with the disease,30 healthy persons and 30 patients with non blood stasis in angina of CHD.ResultsCompared with the non blood stasis in angina of CHD，VWF in all groups increased respectively(P＜0.01),the order in the four was the sputum retention ＞the qi-stagnancy ＞the qi deficiency ＞the yin deficiency of blood stasis syndromes.ConclusionSufficient syndrome of endothelial injury of blood stasis syndrome in angina of CHD is more serious than insufficient syndrom,especially in the sputum retention and blood stasis subfamily.

von willebrand factor;angina of coronary heart disease;blood stasis syndrome

R541.4

B

10.3969/j.issn.1674－070X.2010.11.015.045.03

2010－08－01

湖南省教育廳科研基金資助項(xiàng)目（08C634）。

楊軍輝（1969-），男，湖南婁底人，醫(yī)學(xué)博士，副教授，主要從事缺血性心腦血管疾病的中醫(yī)藥防治研究。

（本文編輯 馬 薇）