ＨＰＬＣ法測(cè)定祛風(fēng)通痹膠囊中士的寧的含量

王志巍　紀(jì)　玲　宋　岳

【摘要】 目的 采用高效液相色譜法測(cè)定祛風(fēng)通痹膠囊中士的寧的含量。方法 選用C₁₈色譜柱；流動(dòng)相：正己烷-二氯甲烷-甲醇-三乙胺(47.5∶47.5∶5∶0.4)；檢測(cè)波長：280 nm。結(jié)果 本方法的回收率為97.76%，RSD=1.75%(n=6)。結(jié)論 HPLC法準(zhǔn)確，重現(xiàn)性好，可用于祛風(fēng)通痹膠囊的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。

【關(guān)鍵詞】HPLC法；士的寧；祛風(fēng)通痹膠囊

Determination of strychnine in qufentongbi capsules by HPLC

WANG Zhi-wei,JI Ling,SONG Yue.Heilongjiang Jiamusi Institute for Drug Contrl，Heilongjiang 154007，China

【Abstract】 Objective A HPLC method was developed for the contents determination of strychnine in qufentongbi capsules.Methods The C₁₈column was used with a mobile phase wasn-hexane-dichloromethane-methanol-Triethylamine(47.5∶47.5∶5∶0.4).The detection wavelength was 280 nm.Results The average recovery was 97.76%，RSD=1.75%(n=6).Conclusion The method was accurate and reliable.It can be used for the quality control of qufengtongbi capsules.

【Key words】HPLC; Strychnine ;Qufengtongbi Capsules

祛風(fēng)通痹膠囊是由三七、延胡索(制)、馬錢子(制)等十二味中藥組成的傳統(tǒng)醫(yī)院制劑，具有除濕通絡(luò)，活血化瘀的功效。用于痹癥，肩周炎，肌肉關(guān)節(jié)疼痛，屈伸不利，以及風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎見以上證候者。其中馬錢子(制)中的士的寧既是治療風(fēng)濕痹癥的活性成分，又是毒性成分，筆者根據(jù)中國藥典［1］中馬錢子的用量，對(duì)方中馬錢子的用量進(jìn)行折算，采用HPLC法對(duì)方中的士的寧進(jìn)行了含量測(cè)定。方法簡便、準(zhǔn)確、重復(fù)性好，適用于該制劑的質(zhì)量控制。

1 儀器與試藥

Agilent1100自動(dòng)進(jìn)樣高效液相色譜儀(安捷倫科技有限公司)士的寧(中國藥品生物制品檢定所 批號(hào)0705-200004 含量測(cè)定用)。樣品(醫(yī)院提供 批號(hào)：080711、080712、080713)。所用試劑甲醇、乙腈為色譜純，其他試劑均為分析純。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件［2］ 色譜柱：AgilentC₁₈柱(4.6 mm×250 mm,5 μm),流動(dòng)相：正己烷-二氯甲烷-甲醇-三乙胺(47.5∶47.5∶5∶0.4)；檢測(cè)波長：280 nm； 流速：1.0 ml/min,柱溫：30℃，進(jìn)樣量：5 μl。上述色譜條件下，理論板數(shù)按士的寧峰計(jì)不低于2000。見圖1。

2.2 對(duì)照品溶液的制備 精密稱取士的寧對(duì)照品10.25 mg，置100 ml量瓶中，加醋酸乙酯溶解并稀釋至刻度，制成每1 ml含0.102 5 mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。

2.3 供試品溶液的制備［2］ 取本品20粒內(nèi)容物，精密稱定，混勻，研細(xì)，取6 g，精密稱定，置250 ml圓底燒瓶中，加濃氨試液4 ml及氯仿25 ml，加熱回流50 min，放冷，濾過，殘?jiān)勇确孪礈?次，每次5 ml，并入濾液，置分液漏斗中，用硫酸溶液(3→100)振搖提取5次，每次15 ml，合并酸液，用濃氨試液調(diào)節(jié)pH值至9~10，用氯仿振搖提取5次，每次20 ml，合并氯仿液，蒸干，殘?jiān)哟姿嵋阴ミm量使溶解，轉(zhuǎn)移至5 ml量瓶中，加醋酸乙酯至刻度，搖勻，作為供試品溶液。

2.4 線性關(guān)系考察 分別精密量取上述對(duì)照品溶液0.5、1、2、4、8 μl照“2.1”色譜條件分別進(jìn)樣，記錄色譜圖，以進(jìn)樣量為橫坐標(biāo)(μg)，色譜峰面積A為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。計(jì)算士的寧的回歸方程為A=1 525.930 2X+25.312 8，r=0.998 3結(jié)果表明，士的寧在51.25~820.0 μg范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。

2.5 精密度試驗(yàn) 精密吸取對(duì)照品溶液各5 μl，重復(fù)進(jìn)樣5次，測(cè)定峰面積，結(jié)果士的寧峰面積的RSD為0.5%。

2.6 重復(fù)性試驗(yàn) 取樣品(批號(hào)080711)，平行稱取5份，按“2.3”方法制備，進(jìn)樣，測(cè)定，計(jì)算。結(jié)果平均含量為0.045 mg/粒，RSD為2.1%。

2.7 穩(wěn)定性試驗(yàn) 精密吸取供試品溶液(批號(hào)080711)各5 μl，在0、2、4、6、8 h進(jìn)樣，測(cè)定峰面積，結(jié)果士的寧峰面積的RSD為1.5%，表明士的寧在8 h內(nèi)穩(wěn)定。

2.8 加樣回收率試驗(yàn) 取已測(cè)定含量的樣品(批號(hào)080711，含量為0.045 mg/粒，平均裝量為0.432 g/粒)樣品6份，各精密稱定3 g，置250 ml圓底燒瓶中，分別加入上述對(duì)照品溶液2.4、3.0、3.6 ml，按2.3方法制備，進(jìn)樣，測(cè)定，結(jié)果見表1。

2.9 樣品測(cè)定 分別精密吸取對(duì)照品溶液及供試品溶液各5 μl，注入色譜儀，按“2.1”色譜條件測(cè)定峰面積，以外標(biāo)法計(jì)算士的寧含量，分別為0.045 mg/粒(批號(hào)080711)、0.055 mg/粒(批號(hào)080712)、0.050 mg/粒(批號(hào)080713)。

3 討論

3.1 檢測(cè)波長的選擇 筆者通過紫外光譜掃描，表明樣品和士的寧對(duì)照品的圖譜基本一致，且在280 nm處有最大吸收。

3.2 流動(dòng)相的選擇 筆者參考文獻(xiàn)使用乙腈-1%的冰醋酸(10∶90)為流動(dòng)相，但此流動(dòng)相不能較好地將對(duì)照品峰與雜質(zhì)峰分離。而本試驗(yàn)確定的流動(dòng)相卻能達(dá)到滿意的結(jié)果。

參考文獻(xiàn)

［1］ 國家藥典委員會(huì).中國藥典(一部)．化學(xué)工業(yè)出版社，2005：34.

［2］ 國家藥品監(jiān)督管理局編，國家中成藥標(biāo)準(zhǔn)匯編.中成藥地方標(biāo)準(zhǔn)上升國家標(biāo)準(zhǔn)部分經(jīng)絡(luò)肢體腦系分冊(cè)，2002：338-339.