采用液質(zhì)聯(lián)用技術定性分析松葉雞蛋參根的化學成分

摘 要：" 為闡明藏藥雞蛋參 ［植物松葉雞蛋參（Codonopsis convolvulacea var. pinifolia）的根］的化學成分，該文采用超高效液相色譜-四級桿飛行時間質(zhì)譜聯(lián)用（UHPLC-Q-TOF-MS/MS）技術對其化學成分進行定性分析。采用Waters ACQUITY UPLC BEH C18（1.7 μm，2.1 mm × 150 mm）色譜柱，以0.1 mmol·L-1乙酸銨水溶液（A）-乙腈（B）為流動相，流速0.3 mL·min-1，進樣體積3 μL，柱溫40 ℃。質(zhì)譜使用ESI離子源，采用負離子檢測模式，掃描范圍為m/z 100～1 800 （MS）、m/z 50～1 800 （MS/MS）。根據(jù)化合物一級質(zhì)譜中的準分子離子推測其分子式，根據(jù)化合物二級質(zhì)譜中的特征碎片離子推測其可能的結構片段及分子結構，再結合對照品對比和文獻檢索，進行結構鑒定。結果表明：（1）首次從松葉雞蛋參中鑒定出56種化合物，其中含氮類成分6種、苯丙素類成分6種、木脂素類成分22種、黃酮類成分2種、有機酸類成分8種、糖苷或其他類成分12種；采用對照品比對指認了其中11種成分。（2）首次發(fā)現(xiàn)木脂素類和苯丙素類化合物為松葉雞蛋參根的主要成分，并推導出其裂解途徑。該研究結果表明，應用UHPLC-Q-TOF-MS/MS技術能夠快速高效地初步闡明松葉雞蛋參根的化學成分，為藏藥雞蛋參的質(zhì)量標準、體內(nèi)過程及藥效物質(zhì)等研究提供了化學基礎。

關鍵詞： 松葉雞蛋參， UHPLC-Q-TOF-MS/MS， 化學成分， 結構解析， 裂解途徑

中圖分類號：" Q946

文獻標識碼：" A

文章編號：" 1000-3142（2025）03-0585-21

Qualitative analysis of chemical constituents of Codonopsis convolvulacea var. pinifolia roots by using LC-MS

ZHAO Wenhui1， 2， DOU Zhiyang2， Qiangba3*， Wujian3， Baimazhuoma3，LIU Guangxue2， CAI Shaoqing2， XU Feng1，2*

（ 1. Medical College， Tibet University， Lhasa 850000， China;

2. School of Pharmaceutical Sciences， Peking University，Beijing 100191， China;

3. Tibet Qizheng Tibetan Medicine Co. Ltd.， Nyingchi 860000， Xizang， China ）

Abstract： To clarify the chemical constituents of the Tibetan medicine Codonopsis Convolvulaceae Radix （the roots of Codonopsis convolvulacea var. pinifolia） by ultra high performance liquid chromatography-quadrupole-time of flight-mass spectrometry （UHPLC-Q-TOF-MS/MS）， Waters ACQUITY UPLC BEH C18 （1.7 μm， 2.1" mm × 150 mm） chromatographic column was used. The mobile phase was 0.1 mmol·L-1 ammonium acetate aqueous solution and acetonitrile. The flow rate was 0.3 mL·min-1， the injection volume was 3 μL， and the column temperature was 40 ℃. Electrospray ionization （ESI） source was used for mass spectrometry， and the detection was conducted in negative ion mode. The mass spectrometry scanning range was m/z 100-1 800 （MS） and m/z 50-1 800 （MS/MS）. The molecular formula of a compound was deduced based on quasi-molecular ions in its first-order mass spectra， and its structural fragments and possible molecular structure were elucidated by analyzing the characteristic fragment ions in its second-order mass spectra. Finally， its structure was indentified by comparison with reference material and literature retrieval. The results were as follows： （1） Totally 56 compounds were tentatively identified from the roots of C. convolvulacea var. pinifolia for the first time， including 6 nitrogen-containing compounds， 6 phenylpropanoids， 22 lignans， 2 flavonoids， 8 organic acids， and 12 glucosides or other compounds. Among them， 11 compounds were unequivocally identified by comparison with reference compounds. （2） Lignans and phenylpropanoids were firstly found to be the main constituents of" C. convolvulacea var. pinifolia roots， and their fragmentation pathways were deduced. In this study， the application of UHPLC-Q-TOF-MS/MS can quickly and efficiently elucidate chemical constituents of" C. convolvulacea var. pinifolia roots. It provides a chemical basis for further studies of quality standard， in vivo process and pharmacodynamic substances of Codonopsis Convolvulaceae Radix.

Key words： Codonopsis convolvulacea var. pinifolia， UHPLC-Q-TOF-MS/MS， chemical constituents， structural elucidation， fragmentation pathway

據(jù)《中國藏藥》（青海省藥品檢驗所和青海省藏醫(yī)藥研究所，1996）、《藏藥志》（中國科學院西北高原生物研究所，1991）、《中華本草（藏藥卷）》（國家中醫(yī)藥管理局《中華本草》編委會，2002）和《四川省藏藥材標準（2020年版）》（四川省藥品監(jiān)督管理局，2021）等著作記載，藏藥雞蛋參為桔?？齐u蛋參（Codonopsis convolvulacea） ［現(xiàn)行正名為輻冠參（Pseudocodon convolvulaceus）］、薄葉雞蛋參（Codonopsis convolvulacea subsp. vinciflora） ［現(xiàn)行正名為薄葉輻冠參（Pseudocodon vinciflorus）］、松葉雞蛋參（Codonopsis convolvulacea var. pinifolia） ［現(xiàn)行正名為松葉輻冠參（Pseudocodon graminifolius）］、大金線吊葫蘆（Codonopsis convolvulacea var. forrestii） ［現(xiàn)行正名為珠子參（Pseudocodon convolvulaceus subsp. forrestii）］、大葉黨參（Codonopsis affinis）和大萼黨參（C. macrocalyx） ［現(xiàn)行正名為大萼黨參（C. benthamii）］ 6種植物的根，其藏文音譯名為“尼哇、聶哇”。本研究所用的藏藥雞蛋參來源于松葉雞蛋參（C. convolvulacea var. pinifolia）的干燥根。

藏藥雞蛋參具有清熱、補氣養(yǎng)血、潤肺生津、補脾益胃、增強嗅覺等功效，可用于治療感冒、胸痛、貧血、食欲缺乏、肺陰虛咳嗽、扁桃體炎等（中國科學院西北高原生物研究所，1991；青海省藥品檢驗所和青海省藏醫(yī)藥研究所，1996；國家中醫(yī)藥管理局《中華本草》編委會，2002；四川省藥品監(jiān)督管理局，2021）。藏藥雞蛋參的化學成分研究尚處于起始階段，除17種氨基酸、多種維生素和無機元素等營養(yǎng)成分（鐘惠民等，2002）外，目前從藏藥雞蛋參中共分離鑒定出27種化合物，主要包括蒽醌類、三萜類、甾體類、脂肪族、有機酸類、木脂素類、炔類等化合物（韓廣軒等，2001；吳雷，2009；孫秀麗等，2019）。

迄今未見采用超高效液相色譜-四級桿飛行時間質(zhì)譜聯(lián)用（UHPLC-Q-TOF-MS/MS）技術對松葉雞蛋參的化學成分進行定性分析的研究報道。由于UHPLC-Q-TOF-MS/MS 技術具有高靈敏度、高分辨率、高質(zhì)量準確度、可獲得二級質(zhì)譜、分析速度快等優(yōu)勢，在天然藥物的成分解析中發(fā)揮著重要作用（張楊等，2017）。因此，本研究采用該技術對松葉雞蛋參根的化學成分進行快速檢測和鑒定，擬解決以下問題：（1）揭示松葉雞蛋參根的主要化學成分及其結構類型；（2）揭示松葉雞蛋參根的主要化學成分在液質(zhì)分析中的主要裂解規(guī)律。

1 材料與方法

1.1 儀器和材料

UHPLC-Q-TOF-MS/MS系統(tǒng)由SCIEX Triple TOF 6660+高分辨飛行時間質(zhì)譜儀（ESI離子源，AB SCIEX公司，馬薩諸塞州，美國）和SCIEX Exion LC AD UHPLC System超高效液相色譜儀（AB SCIEX公司，馬薩諸塞州，美國）組成，其中UHPLC包括LC-20AD 輸液泵2個、LC-20AB 輸液泵1個、DGU-20A3 脫氣單元、SIL-20AC 可制冷自動進樣器、CBM-20A 系統(tǒng)控制器、CTO-20A柱溫箱和SPD-M20A 二極管陣列檢測器。KQ-500DE 數(shù)控超聲波清洗器（昆山市超聲儀器有限公司，中國）；萬分之一電子天平（OHAUS，新澤西州，美國）；Milli-Q 超純水制備儀（Millipore，美國）；SHZ-D（Ⅲ）循環(huán)水式多用真空泵（上海力辰邦儀器科技有限公司，中國）；Buchi R-20 旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（Buchi，瑞士）；乙酸銨（上海阿拉丁生化科技股份有限公司，中國，批號為G2222070，質(zhì)譜級）；甲醇、甲酸和乙腈（Fisher，美國）均為質(zhì)譜級。

藏藥雞蛋參由西藏奇正藏藥股份有限公司強巴藏藥中級工程師采集于云南大理鶴慶縣龍開口鎮(zhèn)，經(jīng)北京大學藥學院徐風副教授鑒定為桔?？浦参锼扇~雞蛋參（Codonopsis convolvulacea var. pinifolia）的根（中國科學院中國植物志編輯委員會，1983）。對照品棉子糖（L100210，5 g）、1，2，3，4-Tetrahydro-β-carboline-3-carboxylic acid（B066440，250 mg）購于北京鴻柏科技有限公司；L-苯丙氨酸（L115406，25 g）、香草醛（BL017414，25 g）、棕櫚酸（B064315，100 g）、L-色氨酸（B074003，25 g）購于北京凱國科技有限公司；開環(huán)異落葉松樹脂酚（MUST-24042513，5 mg）購于成都曼斯特生物科技有限公司；黨參苷Ⅰ（PSD240905-376，5 mg）、黨參炔苷（PS012897，10 mg）、丁香脂素（PS011627，10 mg）、漢黃芩素（PS011541，5 mg）均購于成都普思生物科技股份有限公司；以上對照品的純度均大于98%。

1.2 方法

1.2.1供試品溶液的制備 精密稱定松葉雞蛋參根粗粉2 g，加入60 mL 純甲醇，25 ℃ 超聲提取1 h，過濾得濾液，剩余藥材濾渣繼續(xù)加入60 mL 純甲醇，25 ℃ 超聲提取1 h，合并兩次濾液并濃縮至干，用2 mL 純甲醇復溶，經(jīng)0.22 μm微孔濾膜過濾，得供試品溶液，待液質(zhì)分析。

1.2.2 對照品溶液的制備 精密稱取對照品1 mg，溶解于1 mL 甲醇中，配置成1 mg·mL-1的溶液，精確吸取每種對照品100 μL，混勻后配制成含有11種對照品的混合對照品溶液，經(jīng)0.22 μm微孔濾膜過濾，待液質(zhì)分析。

1.2.3 液質(zhì)分析條件 Waters ACQUITY UPLC BEH C18色譜柱（1.7 μm，2.1 mm × 150 mm），柱溫為40 ℃，進樣體積為3 μL。流動相為0.1 mmol·L-1乙酸銨水溶液（A）和乙腈（B），流速為0.3 mL·min-1，流動相梯度如下：0～5 min，3% B；5～45 min，3%～32% B；45～52 min，32%～62% B；52～57 min，62%～81% B；57～62 min，81%～100% B；62～67 min，100% B。質(zhì)譜條件如下：電噴霧離子化（ESI）源；負離子模式；Gas1輔助氣60 psi；Gas2霧化氣60 psi；Gas3氣簾氣35 psi；TEM離子源溫度600 ℃；IS離子噴霧電壓-4 500 V；去簇壓力60/-60 V；碰撞能（35±15） eV；質(zhì)量檢測掃描范圍m/z 100～1 800（MS）、m/z 50～1 800（MS/MS）。

1.2.4 數(shù)據(jù)處理和化合物結構解析 使用PeakView v.1.2軟件分析所得質(zhì)譜數(shù)據(jù)。有對照品的化合物，將供試品溶液中相應成分的保留時間、準分子離子、二級碎片離子信息與對照品進行比對確認。無對照品的化合物，根據(jù)其保留時間、準分子離子、二級碎片離子等信息，參考相關文獻報道的質(zhì)譜碎片信息以及通過檢索SciFinder數(shù)據(jù)庫來推測其化學結構。

2 結果與分析

本研究中，質(zhì)譜中常見的中性丟失有18.01 Da （H2O）、27.99 Da （CO）、15.02 Da （CH3）、30.01 Da （CH2O）、42.01 Da （C2H2O）、43.99 Da （CO2）、60.02 Da （C2H4O2） 等，分別表明化合物分子中含有羥基（以H2O形式失去）、羰基、甲基、甲醛基、乙?；Ⅳ然騼?nèi)酯、乙酸基等。

2.1 化學成分對照品的質(zhì)譜特征

11種化學成分對照品在負離子模式下的基峰色譜圖（BPC）如圖1所示，質(zhì)譜信息詳見表1。以（-）-開環(huán)異落葉松樹脂酚的可能裂解途徑為例畫出，詳見圖2。

2.2 UHPLC-Q-TOF-MS/MS分析松葉雞蛋參根的化學成分

按1.2項中的條件分析松葉雞蛋參根的供試品溶液，得到負離子模式下的基峰色譜圖（BPC）如圖3所示，共鑒定出56種化學成分。具體信息見表2。

2.3 松葉雞蛋參根主要化學成分的裂解規(guī)律和結構解析

2.3.1含氮類成分的鑒定 本研究將所有含氮元素的化合物歸為一類，從松葉雞蛋參中共初步鑒定出6種含氮類化合物，分別為化合物A1-A6。其中，A1、A3、A5根據(jù)其質(zhì)譜信息及查閱SciFinder數(shù)據(jù)庫，并與所購買的對照品進行比對，最終鑒定化合物A1為L-苯丙氨酸，A3為L-色氨酸，A5為1，2，3，4-Tetrahydro-β-carboline-3-carboxylic acid。

在負離子一級質(zhì)譜中，化合物A4的準分子離子峰 ［M-H］-為m/z 406.172 1，預測其分子式為C17H29NO10，在其二級質(zhì)譜中觀察到由準分子離子連續(xù)失去162.05 Da（C6H10O5）、2個18.01 Da（H2O）后產(chǎn)生碎片離子m/z 244.119 0、m/z 226.108 5和m/z 208.097 9。還觀察到由碎片離子m/z 244.119 0失去159.08 Da（C7H13NO3）后又丟失26.01 Da（C2H2）產(chǎn)生的碎片離子m/z 85.029 5和m/z 59.013 9。碎片離子m/z 226.108 5失去155.09 Da（C8H13NO2）和27.99 Da（CO）后產(chǎn)生碎片離子m/z 71.013 9和m/z 198.113 6。通過結合質(zhì)譜信息和查閱SciFinder數(shù)據(jù)庫，初步鑒定化合物A4為β-D-ribo-Hexopyranoside， 2-propen-1-yl 2-（acetylamino）-2，3-dideoxy-4-O-β-D-galactopyranosyl 或其同分異構體。

化合物A6的準分子離子峰 ［M-H］-為m/z 485.178 5，預測其分子式為C21H30N2O11，在其二級質(zhì)譜中觀察到由準分子離子連續(xù)失去18.01 Da（H2O）、162.05 Da（C6H10O5）、116.10 Da（C5H8O3）和27.99 Da（CO）后產(chǎn)生碎片離子m/z 467.167 1、m/z 305.114 3、m/z 189.067 6和m/z 161.072 0。還觀察到由準分子離子連續(xù)失去162.05 Da（C6H10O5）、120.04（C4H8O4）和27.99（CO）等，產(chǎn)生的m/z 323.124 9、m/z 203.082 6和m/z 175.087 7等碎片離子。通過結合質(zhì)譜信息和查閱SciFinder數(shù)據(jù)庫，其可能的詳細裂解途徑見圖4。由此鑒定化合物A6為Tatarine C-4′-O-β-D-glucopyranoside或其同分異構體。

2.3.2苯丙素類成分的鑒定 苯丙素是天然存在的一類苯環(huán)與3個直鏈碳連接（C6-C3基團）構成的化合物，一般具有苯酚結構。這類化合物在負離子檢測模式下響應度較高，其質(zhì)譜中經(jīng)常出現(xiàn)丟失CO2、CH3、H2O、C6H10O5的碎片離子峰。本研究從松葉雞蛋參中共初步鑒定出6種苯丙素類化合物，分別為化合物A10-A15。

化合物A10的準分子離子峰 ［M-H］-為m/z677.229 8，預測其分子式為C29H42O18。在二級質(zhì)譜中觀察到由準分子離子連續(xù)失去180.06 Da（C6H12O6）、43.99 Da（CO2）和162.05 Da（C6H10O5）產(chǎn)生m/z 497.166 4、m/z 453.176 6和m/z 291.123 8等碎片離子，還觀察到由m/z 677.229 8失去354.13 Da（C17H22O8）產(chǎn)生m/z 323.098 4碎片離子。結合質(zhì)譜信息并與對照品進行比對，最終鑒定化合物A10為黨參苷Ⅰ。

化合物A12的準分子離子峰 ［M-H］-為m/z 371.133 9，預測其分子式為C17H24O9，此外在二級質(zhì)譜中觀察到m/z 209.082 9（［M-H-C6H10O5］-）、m/z 194.058 5（［M-H-CH3］-）、m/z 179.034 9（［M-H-CH3-CH3］-）和m/z 161.024 6（［M-H-CH3-CH3-CO］-）等碎片離子。通過查閱SciFinder數(shù)據(jù)庫，并和文獻（Liu et al.， 2013）對比，鑒定化合物A12為黨參苷Ⅱ或其同分異構體。

化合物A13的準分子離子峰 ［M-H］-為m/z 469.135 9，預測其分子式為C21H26O12，在二級質(zhì)譜中觀察到m/z 325.093 8（［M-H-C6H8O4］-）、m/z 163.040 6（［M-H-C6H8O4-C6H10O5］-）、m/z 119.051 0（［M-H-C6H8O4-C6H10O5-CO2］-）和m/z 91.055 3（［M-H-C6H8O4-C6H10O5-CO2-CO］-）等碎片離子?；衔顰15在負離子模式下檢測到準分子離子峰 ［M-H］-為m/z 823.268 1，預測其分子式為C38H48O20，在二級質(zhì)譜中觀察到m/z 469.135 1（［M-H-C17H22O8］-）、m/z 265.074 3（［M-H-C23H30O12-C2H4O2］-）、m/z 235.059 2（［M-H-C23H30O12-C2H4O2-CH2O］-）和m/z 163.042 1（［M-H-C23H32O13-C6H8O4］-）等碎片離子。通過查閱SciFinder數(shù)據(jù)庫并對比文獻（Tang et al.， 2023），鑒定化合物A13為黨參苷Ⅴ或其同分異構體，A15為黨參苷Ⅵ或其同分異構體。以黨參苷Ⅴ為例，其可能的詳細裂解途徑見圖5。

2.3.3木脂素類成分的鑒定 木脂素是一類由兩分子苯丙素衍生物（即C6-C3單體）聚合而成的天然化合物，少數(shù)會與糖結合成苷而存在于植物的木質(zhì)部和樹脂中。木脂素類化合物在質(zhì)譜中可丟失CH2O、H2O、CH3和CO等。本研究從松葉雞蛋參中共初步鑒定22種木脂素類化合物，分別為化合物A7、A24-A29、A31、A34-A42、A50-A52、A55、A56。

化合物A38的準分子離子峰 ［M-H］-為m/z 417.155 5，預測其分子式為C22H26O8，在二級質(zhì)譜中觀察到由準分子離子連續(xù)丟失兩次15.02 Da（CH3）產(chǎn)生的碎片離子m/z 402.132 0和m/z 387.108 5。此外，還觀察到由碎片離子m/z 387.108 5失去196.07 Da（C10H12O4）、164.04 Da（C9H8O3）和27.99 Da（CO）分別產(chǎn)生的碎片離子m/z 191.035 0、m/z 223.061 2和m/z 359.113 6。結合質(zhì)譜信息并和對照品對比，最終鑒定化合物A38為丁香脂素。

化合物A26-A29互為同分異構體，它們的準分子離子峰 ［M-H］-為m/z 377.16，預測其分子式為C20H26O7，在二級質(zhì)譜中觀察到由準分子離子連續(xù)丟失18.01 Da（H2O）、30.01 Da（CH2O）、46.04 Da（C2H6O）和162.06 Da（C10H10O2）后產(chǎn)生的碎片離子m/z 359.15、 m/z 329.13、m/z 283.09和m/z 121.02等。除此之外還觀察到m/z 195.06（［M-H-H2O-C10H12O2］-）和m/z 180.04（［M-H-H2O-C10H12O2-CH3］-）等碎片離子。通過查閱SciFinder數(shù)據(jù)庫和對比文獻（Liu et al.， 2016），鑒定化合物A26-A29為erythro-Guaiacylglycerol-β-O-4′-dihydroconiferyl alcohol 或其同分異構體。

化合物A34的準分子離子峰 ［M-H］-為m/z 359.149 7，預測其分子式為C20H24O6，在二級質(zhì)譜中觀察到m/z 326.116 3（［M-H-H2O-CH3］-）、m/z 311.092 8（［M-H-H2O-CH3-CH3］-）、m/z 299.092 8（［M-H-CH2O-CH3-CH3］-）、m/z 269.082 5（［M-H-CH2O-CH3-CH3-CH2O］-）等碎片離子。通過查閱SciFinder數(shù)據(jù)庫和對比文獻（Yin et al.， 2023），鑒定化合物A34為（+）-異落葉松脂素或其同分異構體。其可能的詳細裂解途徑見圖6。

化合物A39-A42互為同分異構體，其準分子離子峰 ［M-H］-為m/z 525.19，預測其分子式為C25H34O12，在二級質(zhì)譜中觀察到m/z 489.17（［M-H-H2O-H2O］-）、m/z 311.12（［M-H-H2O-H2O-CH3-C5H7O6］-）、 m/z 221.08（［M-H-H2O-H2O-CH3-C5H7O6-C7H6］-）、m/z 179.07（［M-H-H2O-H2O-C5H10O5-CO-C9H8O2］-）等碎片離子。通過查閱SciFinder數(shù)據(jù)庫和對比文獻（Du et al.， 2018），鑒定化合物A39-A42為7R，8R-蘇式-4，7，9，9′-四羥基-3-甲氧基-8-O-4′-新木脂素-3′-O-β-D-葡萄糖苷或其同分異構體。

化合物A50的準分子離子峰 ［M-H］-為m/z 523.219 4，預測其分子式為C26H36O11，在二級質(zhì)譜中觀察到m/z 361.166 3（［M-H-C4H8O4-C2H2O］-）、m/z 301.109 4（［M-H-C4H8O4-C2H2O-CH2O-CH3-CH3］-）、m/z 223.095 8（［M-H-C4H8O4-C2H2O- C8H10O2］-）和m/z 179.071 3（［M-H-C4H8O4-C2H2O-C8H10O2-C2H4O］-）等碎片離子。結合質(zhì)譜信息和查閱SciFinder數(shù)據(jù)庫，鑒定化合物A50-A52為淫羊藿次苷 E3或其同分異構體。其可能的詳細裂解途徑見圖7。

化合物A55和A56互為同分異構體，它們的準分子離子峰 ［M-H］-為m/z 419.17，預測其分子式為C22H28O8。在二級質(zhì)譜中觀察到由準分子離子連續(xù)丟失30.01 Da（CH2O）、208.11 Da（C12H16O3）、18.01 Da（H2O）和15.02 Da（CH3）后產(chǎn)生碎片離子m/z 389.16、m/z 181.05、m/z 371.15和m/z 356.13等。還觀察到由碎片離子m/z 356.13連續(xù)丟失3個15.02 Da（CH3）后產(chǎn)生m/z 341.13、m/z 326.08和m/z 311.06等碎片離子。但是，在SciFinder數(shù)據(jù)庫中未找到符合這些質(zhì)譜數(shù)據(jù)的化合物結構，因此推測它們?yōu)橐阎衔?-Furanmethanol， tetrahydro-2-（4-hydroxy-3，5-dimethoxyphenyl-4-［（4-hydroxy-3，5-dimethoxyphe-nyl）methyl］-， （2S，3R，4R）（CAS編號：116498-58-9）的同分異構體，二者均為潛在的新化合物。其可能的詳細裂解途徑見圖8。

2.3.4 有機酸類成分的鑒定 有機酸類化合物的裂解規(guī)律為一般丟失H2O、CO2、C2H4等中性小分子。本研究從松葉雞蛋參中初步鑒定了8種有機酸類化合物，分別為化合物A18-A23、A44、A45。

化合物A18的準分子離子峰 ［M-H］-為m/z 277.266 8，預測其分子式為C18H30O2，在二級質(zhì)譜中觀察到準分子離子失去18.01 Da（H2O）、43.98 Da（CO2）、218.20 Da（C16H26）、206.20 Da（C15H26）、136.12 Da（C10H16）和150 Da（C11H18）等，分別產(chǎn)生碎片離子m/z 259.206 7、m/z 233.227 5、m/z 59.013 9、m/z 71.013 9、m/z 141.092 1和m/z 127.076 5。通過查閱SciFinder數(shù)據(jù)庫和對比文獻（Olmo-García et al.， 2018），鑒定化合物A18為亞麻酸或其同分異構體。其可能的詳細裂解途徑見圖9。

化合物A19和A20互為同分異構體，其準分子離子峰 ［M-H］-為m/z 327.21，預測其分子式為C18H32O5，在二級質(zhì)譜中觀察到m/z 229.14（［M-H-C6H10O］-）、m/z 221.13（［M-H-C6H10O-H2O］-）、m/z 193.12（［M-H-C6H10O-H2O-H2O］-）和m/z 185.11（［M-H-C6H10O-CH2O2］-）等碎片離子。通過查閱SciFinder數(shù)據(jù)庫和對比文獻（Ju et al.， 2021），鑒定化合物A19和A20為9，12，13-Trihydroxy-10，15-octadecadienoic acid或其同分異構體。

化合物A21的準分子離子峰 ［M-H］-為m/z 329.234 1，預測其分子式為C18H34O5，在二級質(zhì)譜中觀察到m/z 229.146 1（［M-H-C6H12O］-）、m/z 211.135 3（［M-H-C6H12O-H2O］-）、m/z 193.123 6（［M-H-C6H12O-H2O-H2O］-）和m/z 171.103 8（［M-H-C6H12O-C3H6O］-）等離子?；衔顰22的準分子離子峰 ［M-H］-為m/z 313.239 2，預測其分子式為C18H34O4，在二級質(zhì)譜中觀察到m/z 295.226 8（［M-H-H2O］-）、m/z 277.219 1（［M-H-H2O-H2O］-）、m/z 201.113 9（［M-H-C8H10］-）和m/z 183.139 7（［M-H-C7H12O2］-）等離子?；衔顰44和A45互為同分異構體，其準分子離子峰 ［M-H］-為m/z 337.09，預測其分子式為C16H18O8，在二級質(zhì)譜中觀察到m/z 191.055 9（［M-H-C9H6O2］-）、m/z 163.040 5（［M-H-C7H10O5］-）、m/z 127.045 2（［M-H-C9H6O2-H2O-HCOOH］-）和m/z 119.049 9（［M-H-C7H10O5-CO2］-）等離子。通過查閱SciFinder數(shù)據(jù)庫和對比文獻（Zhang et al.， 2014），鑒定化合物A21為9，12，13-Trihydroxyoctadecenoic acid或其同分異構體，化合物A22為9，10-Epoxy-18-hydroxyoctadecanoic acid或其同分異構體，化合物A44和化合物A45為3-p-香豆?？鼘幩峄蚱渫之悩嬻w。

2.3.5其他類成分的鑒定 此外，在松葉雞蛋參中還鑒定出黃酮類、炔類、糖苷類等其他成分。如化合物A16的準分子離子峰 ［M-H］-為m/z 283.062 2，預測其分子式為C16H12O5，在二級質(zhì)譜中觀察到準分子離子失去72.02 Da（C3H4O2）和15.02 Da（CH3）得到m/z 211.040 1和m/z 268.037 7離子。隨后m/z 268.037 7又連續(xù)丟失29.00 Da（CHO）、76.03 Da（C6H4）和27.99 Da（CO）后得到碎片離子m/z 239.035 0、m/z 163.003 7和m/z 135.008 8。結合質(zhì)譜信息和查閱SciFinder數(shù)據(jù)庫，并與所購買的對照品進行比對，鑒定化合物A16為漢黃芩素。

化合物A8的準分子離子峰 ［M-H］-為m/z 395.170 8，預測其分子式為C20H28O8，在二級質(zhì)譜中觀察到準分子離子失去162.05 Da（C6H10O5）、18.01 Da（H2O）和30.01 Da（CH2O）等得到m/z 233.118 3、m/z 215.107 8和m/z 185.097 2等碎片離子。結合質(zhì)譜信息和查閱SciFinder數(shù)據(jù)庫，并與所購買的對照品進行比對，鑒定化合物A8為黨參炔苷，其可能的詳細裂解途徑見圖10。A9則為其同分異構體。

化合物A32的準分子離子峰 ［M-H］-為m/z 151.040 8，預測其分子式為C8H8O3，在二級質(zhì)譜中觀察到m/z 136.016 9、m/z 108.021 9、m/z 95.013 9和m/z 92.027 4等碎片離子，結合質(zhì)譜信息和查閱SciFinder數(shù)據(jù)庫，并與所購買的對照品進行比對，鑒定化合物A32為香草醛。

化合物A33的準分子離子峰 ［M-H］-為m/z 503.162 5，預測其分子式為C18H32O16，在二級質(zhì)譜中觀察到m/z 341.108 8、m/z 323.098 5、m/z 179.055 5和m/z 113.025 3等碎片離子，結合質(zhì)譜信息和查閱SciFinder數(shù)據(jù)庫，并與所購買的對照品進行比對，鑒定化合物A33為棉子糖。

化合物A43的準分子離子峰 ［M-H］-為m/z 325.093 0，預測其分子式為C15H18O8，在二級質(zhì)譜中觀察到m/z 161.045 2（［M-H-C9H8O3］-）、m/z 119.050 0（［M-H-C6H10O5-CO2］-）、m/z 101.038 0（［M-H-C9H8O3-C2H4O2］-）和m/z 71.016 1（［M-H-C9H8O3-C3H6O3］-）等碎片離子，通過查閱SciFinder數(shù)據(jù)庫和對比文獻（Sun et al.， 2015），鑒定化合物A43為p-Coumaroylglucose或其同分異構體。

化合物A46的準分子離子峰 ［M-H］-為m/z 293.125 0，預測其分子式為C12H22O8，在二級質(zhì)譜中觀察到m/z 173.077 4（［M-H-C4H8O4］-）、m/z 143.032 2（［M-H-C4H8O4-C2H6］-）、m/z 131.071 9（［M-H-C6H10O5］-）和m/z 101.022 9（［M-H-C4H8O4-C2H6-C2H2O］-）等碎片離子。根據(jù)質(zhì)譜信息鑒定化合物A46為Ethyl （3S）-3-（β-D-glucopyranosyloxy）butanoate或其同分異構體，其可能的詳細裂解途徑見圖11。

化合物A53和A54互為同分異構體，在負離子模式下檢測到其準分子離子峰 ［M-H］-為m/z 507.24，預測其分子式為C23H40O12，在二級質(zhì)譜中觀察到m/z 447.23（［M-H-C2H4O2］-）、m/z 315.18（［M-H-C7H12O6］-）、m/z 161.04（［M-H-C17H30O7］-）和m/z 143.03（［M-H-C17H30O7-H2O］-）等碎片離子。根據(jù)其質(zhì)譜信息鑒定化合物A53和A54為6-O-10-十一烯?；Ｔ逄牵–AS登記號：151368-80-8）或其同分異構體，其可能的詳細裂解途徑見圖12。

3 討論與結論

前期預實驗發(fā)現(xiàn)，松葉雞蛋參根的化學成分在負離子檢測模式下的離子強度高于正離子檢測模式，色譜峰數(shù)也多于正離子檢測模式。因此，本文采用負離子檢測模式下得到的質(zhì)譜數(shù)據(jù)對松葉雞蛋參根的化學成分進行解析。

迄今為止，對藏藥雞蛋參化學成分的研究報道很少，主要如下：陳巧鴻等（2000）從植物雞蛋參的干燥塊根中分離鑒定了9個化合物；韓廣軒等（2001）采用硅膠色譜從植物雞蛋參的干燥根中分離鑒定了5個化合物；陳巧鴻等（2001）采用柱色譜法從藏藥尼哇（雞蛋參的根）中分離得到4種植物甾醇苷，分別為Δ7-豆甾烯醇-β-D-6′（二十碳烯酰）-吡喃葡萄糖苷、豆甾烷醇-β-D-6′（軟脂酰）-吡喃葡萄糖苷、Δ7-豆甾烯醇-β-D-6′（軟脂酰）-吡喃葡萄糖苷和α-菠甾醇-β-D-6′（軟脂酰）-吡喃葡萄糖苷；孫慶文等（2009）采用HPLC測定了植物雞蛋參的塊根、莖葉和珠子參的塊根、莖、葉中黨參炔苷的含量；吳雷（2009）從大萼黨參根部分離得到了黨參內(nèi)酯、蒲公英萜醇、蒲公英萜醇乙酸乙酯、6-甲氧基-4-甲?；?喹啉和葡萄糖5種化合物。綜上所述，從6種基源的藏藥雞蛋參中共分離鑒定出27種化合物。此外，鐘惠民等（2002）分析了植物雞蛋參的營養(yǎng)成分，發(fā)現(xiàn)其含有17種氨基酸、5種維生素和10種無機元素。

本研究為首次對藏藥雞蛋參的基源之一松葉雞蛋參的根進行較為系統(tǒng)的定性分析，采用UHPLC-Q-TOF-MS/MS技術首次鑒定了56種成分，經(jīng)對照品指認了11種。該56種化學成分均為首次從植物松葉雞蛋參中新發(fā)現(xiàn)的成分。除L-苯丙氨酸、丁香脂素和黨參炔苷以外，其余53種為首次從藏藥雞蛋參的6種基源植物中發(fā)現(xiàn)的化學成分。此外，本研究還發(fā)現(xiàn)了A55和A56兩種潛在的新化合物。以上研究結果極大地豐富了松葉雞蛋參的化學成分信息。此外，本研究首次詳細地畫出多種化學成分的液質(zhì)裂解途徑，為雞蛋參屬植物化學成分的快速分析提供了重要參考。本研究結果表明，采用液質(zhì)聯(lián)用技術，結合對液質(zhì)聯(lián)用數(shù)據(jù)的深入細致分析，可高效地發(fā)現(xiàn)和鑒定化學研究基礎非常薄弱的藏藥中的化學成分。本研究為藏藥雞蛋參的藥效物質(zhì)、質(zhì)量評價和體內(nèi)過程等研究奠定了堅實的基礎。

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（責任編輯 周翠鳴）

基金項目：" 西藏自治區(qū)2024年度科技計劃科技重大專項； 林芝市2022年度“區(qū)域科技協(xié)同創(chuàng)新”專項。

第一作者： 趙文慧 （2000—），碩士研究生，主要從事中藥分析和體內(nèi)代謝研究，（E-mail）zhaowenhui0222@163.com。

*通信作者：" 強巴，中級工程師，研究方向為藏藥材資源可持續(xù)利用與藥材栽培，（E-mail）2961859357@qq.com； 徐風，博士，副教授，研究方向為天然藥物的體內(nèi)過程、藥效物質(zhì)及質(zhì)量評價，（E-mail）xufeng76@hsc.pku.edu.cn。