油茶籽功能性成分的提取、鑒定及其活性評(píng)價(jià)

摘要：油茶籽廣泛種植于我國南方地區(qū)，是食用植物油的重要原料。為了探明其有效成分，文章首先通過氣相色譜-質(zhì)譜法對(duì)其揮發(fā)性成分進(jìn)行分析。其中，順-十八碳烯酸、n-十六酸、7-丁基苯并[a]蒽等成分的含量較高，并發(fā)現(xiàn)生育酚、角鯊烯等活性成分。隨后采用超聲強(qiáng)化溶劑提取法對(duì)油茶籽中的功能性因子進(jìn)行提取，并探究了超聲溫度、pH、乙醇濃度、料液比對(duì)活性成分提取率的影響。4個(gè)因素對(duì)酚類物質(zhì)提取率的影響次序?yàn)閜H＞超聲溫度＞乙醇濃度＞料液比，且超聲溫度和乙醇濃度的交互作用最強(qiáng)。通過響應(yīng)面優(yōu)化后，得到總酚的最佳提取工藝條件為超聲溫度45 ℃、乙醇濃度40%、料液比1∶10、pH 4?？寡趸钚詫?shí)驗(yàn)結(jié)果表明，其半抑制濃度IC50為39.72 mg/mL，其在抗炎、抗腫瘤領(lǐng)域的功效值得進(jìn)一步研究。

關(guān)鍵詞：油茶籽；索氏提??；超聲強(qiáng)化；揮發(fā)性成分；氣相色譜-質(zhì)譜法（GC-MS）

中圖分類號(hào)：TS222.1""""" 文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A"""" 文章編號(hào)：1000-9973（2024）11-0021-09

Extraction， Identification and Activity Evaluation of Functional Components

of Camellia oleifera Seeds

WEN Zhuo1， HUANG Yong-chun1，2，3*， TANG Xiang-yi1，2，4*

（1.College of Biological and Chemical Engineering， Guangxi University of Science and Technology，

Liuzhou 545006， China; 2.Guangxi Key Laboratory of Green Processing of Sugar Resources，

Liuzhou 545006， China; 3.Guangxi Liuzhou Luosifen Engineering Technology Research

Center， Liuzhou 545006， China; 4.School of Food Science and Engineering，

South China University of Technology， Guangzhou 510640， China）

Abstract： Camellia oleifera seeds are widely planted in southern China and they are important raw materials for edible vegetable oils. In order to find out the active components， the volatile components are analyzed by gas chromatography-mass spectrometry. Among them， the content of cis-vaccenic acid， n-hexadecanoic acid and 7-butylbenz[a]anthracene is higher， and active components such as tocopherol and squalene are found. The functional factors in Camellia oleifera seeds are extracted by ultrasonic enhanced solvent extraction method， and the effects of ultrasonic temperature， pH， ethanol concentration and solid-liquid ratio on the extraction rate of active components are investigated. The four factors affect the extraction rate of phenolic substances in the order of pHgt;ultrasonic temperaturegt;ethanol concentrationgt;solid-liquid ratio， and the interaction effect between ultrasonic temperature and ethanol concentration is the strongest. The optimal extraction conditions of total phenols are as follows： the ultrasonic temperature is 45 ℃， the ethanol concentration is 40%， the solid-liquid ratio is1∶10 and the pH is 4. The experimental results of antioxidant activity show that the semiinhibitory concentration IC50is 39.72 mg/mL， and their efficacy in antiinflammatory and antitumor fields is worthy of further study.

Key words：Camellia oleifera -seeds; Soxhlet extraction; ultrasonic enhancement; volatile components; gas chromatography-mass spectrometry （GCMS）

收稿日期：2024-04-24

基金項(xiàng)目：中國博士后科學(xué)基金項(xiàng)目（2023MD734187）；廣西科技基地和人才專項(xiàng)科學(xué)基金項(xiàng)目（2021AC19460）

作者簡介：文卓（1998—），男，碩士，研究方向：功能性油脂。

*通信作者：黃永春（1974—），男，教授，博士，研究方向：生物資源加工技術(shù)與過程強(qiáng)化；

唐湘毅（1990—），男，講師，博士，研究方向：功能性碳水化合物。

油茶是山茶科山茶屬，是一種高脂肪含量的植物，并且具有一定的經(jīng)濟(jì)價(jià)值。茶油由油茶籽去皮后榨取而得，油茶籽是我國特有的具有較長歷史的木本油料植物[1]。中國是世界上最大的茶油生產(chǎn)地，其種植主要分布在華南、中南、西南等地區(qū)，是我國一種特有的植物油[2-3]。油茶品種繁多，如普通油茶、小果油茶、浙江紅花油茶等[4]。

油茶籽制取出的茶油具有脂肪酸、黃酮類、維生素E、維生素D、亞油酸、茶多酚、角鯊烯等多種有益成分，能夠幫助腸胃蠕動(dòng)，促進(jìn)消化，美膚養(yǎng)顏，減脂，抗衰老，增強(qiáng)人體免疫力，預(yù)防和減輕動(dòng)脈粥樣硬化、膽固醇、高血壓、高血脂等心腦血管疾病[5-8]。茶油是一種能和橄欖油媲美的植物油，擁有“東方橄欖油”、“油中之王”的美譽(yù)[9]。山茶油作為中國南方部分省份常見的食用油，因富含多酚類、植物固醇類等不皂化物，被認(rèn)為是高營養(yǎng)價(jià)值的珍貴產(chǎn)品[10]。茶油不僅能用于食品行業(yè)，而且能用于化妝品行業(yè)、藥業(yè)、化學(xué)工業(yè)，有著良好的發(fā)展前景[11-13]。

為了探明油茶籽中的揮發(fā)性成分及其醇提物的生物活性，本文首先以油茶籽為研究對(duì)象，采用索氏提取技術(shù)，分別以無水乙醇和石油醚為溶劑，并利用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)（GC-MS）對(duì)油茶籽中的揮發(fā)性成分進(jìn)行提取、分離和鑒定，比較了不同溶劑對(duì)提取物成分的影響。隨后采用超聲波強(qiáng)化溶劑提取技術(shù)研究超聲溫度、pH、乙醇濃度、料液比對(duì)醇提物和酚類物質(zhì)提取率的影響，通過響應(yīng)面法對(duì)提取工藝進(jìn)行優(yōu)化，并采用DPPH自由基清除率實(shí)驗(yàn)對(duì)油茶籽的生物活性進(jìn)行初步評(píng)價(jià)。

1 材料和方法

1.1 材料與試劑

無水乙醇（藥用級(jí)，99.5%）：上海麥克林生化科技有限公司；石油醚（分析純）：四川西隴科學(xué)有限公司；沒食子酸（HPLC≥98%）：中原植提標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)銷中心；DPPH（≥97.0%）：福州飛凈生物科技有限公司；福林酚試劑（分析純）：合肥巴斯夫生物科技有限公司；正己烷（分析純）：美國安捷倫科技公司。

1.2 儀器與設(shè)備

7890B-7000C氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀 美國安捷倫科技公司；RE-52AA旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器 上海亞榮生化儀器廠；Alpha 1-2 LD-Plus冷凍干燥機(jī) 迪圖（上海）生物科技有限公司；H1850高速臺(tái)式離心機(jī) 湖南湘儀離心機(jī)儀器有限公司；UV-2006紫外可見分光光度計(jì) 島津企業(yè)管理（中國）有限公司；101-3AB電熱鼓風(fēng)干燥箱 天津市泰斯特儀器有限公司。

1.3 方法

1.3.1 油茶籽粉的制備

將500 g干油茶籽進(jìn)行篩選，使用粉碎機(jī)對(duì)油茶籽進(jìn)行間歇式粉碎（粉碎時(shí)間為10～15 s，間隔時(shí)間為3～5 s），粉碎后使用60目篩進(jìn)行過篩并密封保存，備用。

1.3.2 油茶籽中揮發(fā)性成分的提取

稱取15 g粉碎后的油茶籽粉，使用濾紙折疊成桶狀包住并封口，使用脫脂棉繩進(jìn)行捆綁，防止樣品泄露。捆綁好后將其放入提取筒內(nèi)，將其余索氏提取器裝置連接，冷水從下端入口進(jìn)入，從上端出口排出。分別以無水乙醇和石油醚為有機(jī)溶劑，倒至燒瓶的2/3體積，開啟冷凝水，將索氏提取器的燒瓶放置并浸沒在80 ℃的水浴鍋中進(jìn)行水浴加熱，在冷凝管口塞入一小團(tuán)棉花，索氏提取9 h[14]。提取完畢后，關(guān)掉冷凝水，從上至下拆卸索氏提取器，取出燒瓶，略微傾斜索氏提取器，將里面所有液體都倒入燒瓶中。通過旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀將其中的有機(jī)溶劑去除[15-16]，即得揮發(fā)油，放入冰箱中冷藏待用。

1.3.3 氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀測(cè)定不同提取方式茶油的成分

氣相色譜-質(zhì)譜條件：色譜柱：DB-5彈性石英毛細(xì)管柱（60 m×0.25 mm×0.25 μm）；升溫程序：起始柱溫為50 ℃，保持8 min；以8 ℃/min的升溫速度升至150 ℃，保持2 min；再以4 ℃/min的升溫速度升至170 ℃，保持2 min；然后以2 ℃/min的升溫速度升至200 ℃，保持5 min；最后以5 ℃/min的升溫速度升至280 ℃，保持5 min；進(jìn)樣口溫度：280 ℃；載氣：高純氦氣；流量：1 mL/min；進(jìn)樣量：1 μL（揮發(fā)油樣品用正己烷稀釋）；分流比：10∶1。質(zhì)譜條件：接口溫度：300 ℃；離子源溫度：230 ℃；電子能量：70 eV；質(zhì)量掃描范圍（m/z）：33～400 amu；發(fā)射電流：34.6 VA；電子倍增器電壓：1 392 V。

油茶籽揮發(fā)油中各化合物的相對(duì)保留時(shí)間可以通過正構(gòu)烷烴的保留時(shí)間計(jì)算得到，綜合以下兩個(gè)方法鑒定茶油揮發(fā)性物質(zhì)：與NIST和NBS標(biāo)準(zhǔn)譜庫檢索結(jié)果對(duì)比匹配相似度大于90%；將揮發(fā)性化合物的相對(duì)保留時(shí)間與文獻(xiàn)報(bào)道的數(shù)據(jù)進(jìn)行對(duì)比。茶油中各揮發(fā)性化合物的相對(duì)含量采用面積歸一化法計(jì)算得到[17]。

1.3.4 超聲空化提取酚類物質(zhì)

選擇4個(gè)單因素對(duì)油茶籽粉進(jìn)行超聲空化提取，分別是超聲溫度、乙醇濃度、料液比、pH，并研究其對(duì)酚類物質(zhì)提取率的影響。

1.3.5 總酚的測(cè)定

沒食子酸標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制參考張?zhí)裉竦姆椒╗17]。粗提物中酚類物質(zhì)的測(cè)定采用福林酚法，其計(jì)算公式如下：

總酚提取率（%）=C×n×V1M×100%。

式中：C為總酚的質(zhì)量濃度（mg/mL）；n為稀釋倍數(shù)；V1為提取液體積；M為油茶質(zhì)量（mg）。

1.3.6 DPPH自由基清除劑評(píng)價(jià)活性物質(zhì)

配制0.2 g/mL的DPPH溶液作為儲(chǔ)備液，稀釋5倍作為工作液。配制不同濃度的樣品溶液。取DPPH工作液各2 mL與等體積樣品混合均勻，于室溫下避光反應(yīng)30 min。隨后在517 nm處測(cè)定吸光值，以未添加DPPH的試樣為空白組，添加DPPH的試樣為對(duì)照組。清除率（Q）計(jì)算公式如下[18]：

Q（%）=[1-（A1-A2）/A3]×100%。

式中：A1為樣品組（加入樣品和DPPH溶液）的吸光值；A2空白組（只加入樣品溶液）的吸光值；A3為對(duì)照組（只加入DPPH溶液）的吸光值。

2 結(jié)果與分析

2.1 氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用鑒定精油成分

運(yùn)用索氏提取技術(shù)通過不同的溶劑提取得到的茶油均呈黃色且伴有特殊香味，以乙醇為溶劑的提取率為6.72%，以石油醚為溶劑的提取率為11.46%，索氏石油醚提取法的提取率大于索氏乙醇提取法。

經(jīng)過氣質(zhì)分析后得到典型總離子流圖，見圖1。

索氏乙醇提取法提取的揮發(fā)油成分及含量見表1。

由表1可知，通過索氏乙醇提取法提取的揮發(fā)油中共鑒定出33種揮發(fā)性成分，其中包括6種有機(jī)酸類（18.18%），6種酯類（18.18%），5種酰類（15.15%），3種酮類（9.09%），2種烯烴類（6.06%），1種醚類（3.03%），以及其他類（30.31%）。經(jīng)比對(duì)鑒定，通過索氏乙醇提取法提取的茶油揮發(fā)油成分中順-十八碳烯酸的含量最高，面積歸一化百分比為56.26%，其次為7-丁基苯并[a]蒽，面積歸一化百分比為9.69%，以及n-十六酸（7.47%）、γ-谷甾醇（3.89%）、油酰氯（3.25%）、4-菜籽甾烯-3-酮（2.92%）、順-13-二十碳烯酸（2.12%）、菜油甾醇（1.37%）、豆甾-3，5-二烯（1.3%）等。

索氏石油醚提取法提取的揮發(fā)油成分及含量見表2。

由表2可知，通過索氏石油醚提取法提取的揮發(fā)油中共鑒定出39種揮發(fā)性成分，其中包括6種烯烴類（15.38%），6種酯類（15.38%），4種有機(jī)酸類（10.26%），2種酰類（5.13%），2種苯類（5.13%），2種烷烴類（5.13%），2種呋喃類（5.13%），1種醚類（2.56%），1種酮類（2.56%），以及其他類（12.82%）。經(jīng)比對(duì)鑒定，通過索氏石油醚提取法提取到的茶油揮發(fā)油成分中順-十八碳烯酸的含量最高，面積歸一化百分比為66.72%，其次是n-十六酸，面積歸一化百分比為9.66%，以及硬脂酸乙烯酯（3.05%）、花生酸（2.18%）、DL-α-生育酚（1.78%）、順-11-二十碳烯酸（1.56%）、順-11-二十碳烯酸（1.35%）、2-十六酮（1.16%）、γ-生育酚（1.01%）等[19]。

值得一提的是，兩種溶劑提取得到的揮發(fā)油成分中角鯊烯（squalene）的面積歸一化百分比分別為0.34%和0.14%，說明以乙醇為溶劑得到的揮發(fā)油中角鯊烯含量較高。而維生素E在兩種提取方法得到的揮發(fā)油中的面積歸一化百分比分別為1.94%和2.79%，說明以石油醚為溶劑能夠提取并鑒別出更多的維生素E成分[20]。

2.2 超聲空化提取工藝條件對(duì)醇溶性功能因子提取率的影響

古籍記載，茶油性偏涼，有涼血、止血之功效，研究表明，油茶籽中除了含有大量的不飽和脂肪酸外，還含有角鯊烯、維生素E、甾醇、酚類等小分子活性成分[21]。

2.2.1 溫度對(duì)樣品粗提物的影響

由圖2可知，隨著溫度的升高，醇溶性功能因子的提取率呈先升高后降低的趨勢(shì)，在溫度為40 ℃時(shí)達(dá)到最大值，為11.46%。高溫可促進(jìn)分子的運(yùn)動(dòng)，提高細(xì)胞的通透性，有利于活性成分的溶出，然而過高的溫度可能會(huì)造成這些物質(zhì)的降解，進(jìn)一步提高溫度不利于醇溶性功能因子的提取。因此，油茶籽中醇溶性功能因子的最佳提取溫度為40 ℃。

2.2.2 乙醇濃度對(duì)樣品粗提物的影響

由圖3可知，隨著乙醇濃度逐漸升高，粗提物的提取率先緩慢升高后降低，并且在乙醇濃度為40%時(shí)最大，為8.93%，原因可能是隨著乙醇濃度的增加，提取溶劑的極性逐漸降低，而油茶籽醇溶性功能因子大多為中等極性物質(zhì)，根據(jù)相似相溶原理，油茶籽中醇溶性功能因子的提取率隨著乙醇濃度的增大呈現(xiàn)先升高后降低的趨勢(shì)。因此，最佳的乙醇濃度為40%。

2.2.3 料液比對(duì)樣品粗提物的影響

由圖4可知，隨著料液比的增大，粗提物的提取率逐漸升高，當(dāng)料液比為1∶12時(shí)提取率最大。料液比越小越有利于物質(zhì)在溶劑中的擴(kuò)散，所以提取率逐漸升高，但料液比過高不利于活性物質(zhì)的回收，蒸發(fā)需要更多的能耗，提取速率下降。因此，最佳料液比為1∶12。

2.2.4 pH對(duì)樣品粗提物的影響

由圖5可知，隨著pH升高，粗提物的提取率先升高后降低，且在pH為4時(shí)提取率最大，為11.73%，低pH可能使茶油的滲透性發(fā)生變化，不利于小分子物質(zhì)的溶出。因此，最佳pH為4。

2.3 總酚

2.3.1 沒食子酸標(biāo)準(zhǔn)曲線

從測(cè)量結(jié)果可以看出，在測(cè)量范圍內(nèi)，沒食子酸濃度與吸光度呈線性關(guān)系，相關(guān)系數(shù)R2為0.998 6，回歸方程為Y=0.005 7x+0.016 7，見圖6。

2.3.2 超聲溫度對(duì)粗提物總酚提取率的影響

由圖7可知，油茶籽的總酚提取率隨著超聲溫度的升高呈升高趨勢(shì)，在超聲溫度為60 ℃時(shí)達(dá)最大值，為11.84%。隨著超聲溫度的升高，組織細(xì)胞的通透性更強(qiáng)，有利于有效成分的釋放。因此，最佳超聲溫度為60 ℃。

2.3.3 乙醇濃度對(duì)粗提物總酚提取率的影響

由圖8可知，油茶籽的總酚提取率隨著乙醇濃度的升高呈先增大后減小的趨勢(shì)，當(dāng)乙醇濃度為40%時(shí)達(dá)到最大值，為10.42%，原因可能是油茶籽中醇溶性功能因子大多為中等極性物質(zhì)，由于相似相溶原理，酚類物質(zhì)易溶于乙醇，隨著乙醇濃度的增加，酚類物質(zhì)的提取達(dá)到飽和，同時(shí)其他物質(zhì)如醇溶性雜質(zhì)、色素等成分的溶出量增加，從而導(dǎo)致總酚提取率下降[22]。因此，最佳乙醇濃度為40%。

2.3.4 料液比對(duì)粗提物總酚提取率的影響

由圖9可知，隨著超聲空化料液比的增大，總酚提取率隨之增加，當(dāng)料液比為1∶12時(shí)達(dá)最大值，為9.17%。溶劑增大時(shí)，濃度差變大，有利于酚類物質(zhì)的擴(kuò)散，溶液能夠更好地傳輸物質(zhì)。因此，最佳料液比為1∶12。

2.3.5 pH對(duì)粗提物總酚提取率的影響

由圖10可知，隨著pH的增加，總酚的提取率呈先增大后減小的趨勢(shì)，在pH為4時(shí)最大，為10.91%。pH過高或過低均會(huì)抑制樣品中酚類物質(zhì)的提取。因此，最佳pH為4。

2.4 DPPH自由基清除率

由圖11可知，隨著粗提物濃度的增加，對(duì)DPPH自由基的清除率也隨之增大，當(dāng)粗提物濃度為25 mg/mL時(shí)，DPPH自由基清除率最高，為35.5%。

2.5 響應(yīng)面分析

2.5.1 響應(yīng)面實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ驮O(shè)計(jì)結(jié)果與顯著性分析

基于超聲空化單因素實(shí)驗(yàn)，通過Design-Expert 8.0.6 Trial軟件，設(shè)置自變量為超聲溫度（A）、乙醇濃度（B）、料液比（C）、pH（D），設(shè)置響應(yīng)值為油茶籽總酚提取率（Y），使用響應(yīng)面法對(duì)油茶籽總酚的提取工藝進(jìn)行優(yōu)化，進(jìn)行四因素三水平響應(yīng)面實(shí)驗(yàn)，見表3。

通過Design-Expert 8.0.6 Trial軟件共設(shè)計(jì)4個(gè)因素29個(gè)處理組，其中包含5個(gè)零點(diǎn)實(shí)驗(yàn)和24個(gè)析因?qū)嶒?yàn)。每個(gè)實(shí)驗(yàn)重復(fù)處理3次，以所得油茶籽樣品總酚提取率均值作為響應(yīng)值（Y）。響應(yīng)面試驗(yàn)?zāi)Ｐ驮O(shè)計(jì)及結(jié)果見表4。

通過Design-Expert 8.0.6 Trial軟件對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行回歸擬合分析，計(jì)算得Y與A、B、C、D之間的回歸方程[23]：總酚提取率（Y）=13.10-0.35A-0.15B-0.072C-0.38D+0.41AB-0.010AC+0.087AD-0.33BC-0.18BD+0.31CD-0.79A2-0.88B2-0.64C2-1.19D2。

由表5可知，回歸模型的P＜0.000 1，F(xiàn)值為22.64，回歸模型的結(jié)果極顯著，建立此模型具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，且失擬項(xiàng)的P值為0.138 5，失擬項(xiàng)不顯著，與實(shí)際情況有著較好的擬合度，能夠有效反映各因素之間的相關(guān)性，可以用此回歸方程方差和模型來分析油茶籽的總酚提取率[24]。

根據(jù)表5中F值和顯著水平可以看出，因素A（超聲溫度）、B（乙醇濃度）、C（料液比）、D（pH）對(duì)總酚提取率的影響次序?yàn)镈＞A＞B＞C。A2、B2、C2、D2的P值均＜0.000 1，因此超聲溫度、乙醇濃度、料液比、pH這4個(gè)因素都對(duì)油茶籽的總酚提取率有顯著影響。由表5中交互項(xiàng)可知，P值A(chǔ)Blt;BClt;CDlt;BDlt;ADlt;AC，所以其影響大小為AB＞BC＞CD＞BD＞AD＞AC，因此各因素對(duì)油茶籽總酚提取率的影響都不是簡單的線性關(guān)系[25]。根據(jù)F值可以得出，各因素兩兩之間的交互作用的P＞0.05，說明超聲溫度、乙醇濃度、料液比、pH這4個(gè)因素的交互作用對(duì)油茶籽總酚提取率的影響不顯著[26]。

2.5.2" 響應(yīng)面交互作用分析

各因素兩兩交互作用的響應(yīng)曲面圖見圖12。

由圖12可知，在交互項(xiàng)中，對(duì)油茶籽總酚提取率的影響次序?yàn)锳B＞BC＞CD＞BD＞AD＞AC。超聲溫度和乙醇濃度的交互作用最顯著，坡度最陡，等高線呈橢圓形，其他因素間的坡度相對(duì)平滑，交互作用相對(duì)較小。

2.5.3 優(yōu)化條件的模型認(rèn)證

利用Design-Expert 8.0.6 Trial軟件得到最佳工藝參數(shù)，并得到油茶籽的總酚提取率為（12.67±0.843）%，與之前計(jì)算的預(yù)測(cè)值偏差為1.707%，達(dá)到回歸模型預(yù)測(cè)提取率98.293%，說明該實(shí)驗(yàn)結(jié)果與模型預(yù)測(cè)值基本符合[27]。

3 結(jié)論

本實(shí)驗(yàn)以油茶籽為研究對(duì)象，探究了不同的溶劑對(duì)其成分的影響，研究了不同因素的超聲空化處理對(duì)其醇溶性物質(zhì)和總酚的影響[28]，對(duì)其提取工藝進(jìn)行了優(yōu)化，并采用DPPH自由基清除率實(shí)驗(yàn)對(duì)油茶籽醇提物的生物活性進(jìn)行了評(píng)價(jià)。通過本實(shí)驗(yàn)可以得到以下結(jié)論：

探究了不同溶劑的索氏提取法對(duì)其揮發(fā)性成分的影響。通過索氏無水乙醇提取法和索氏石油醚提取法兩種提取方式提取油茶籽揮發(fā)性成分，索氏無水乙醇提取法的提取率（6.72%）低于索氏石油醚提取法的提取率（11.46%）。兩種提取方法分別得到33種和39種揮發(fā)性物質(zhì)，兩種提取方法中順-十八碳烯酸的含量最高，此外，以乙醇為溶劑提取得到的揮發(fā)油成分中含量較多的為

7-丁基苯并[a]蒽、n-十六酸、γ-谷甾醇，而以石油醚為溶劑提取得到的揮發(fā)性成分中含量較多的為n-十六酸、硬脂酸乙烯酯、花生酸。并且以乙醇為溶劑得到的揮發(fā)油成分中角鯊烯的含量較以石油醚為溶劑提取的高，以石油醚為溶劑得到的揮發(fā)油成分中維生素E的含量較以乙醇為溶劑提取的高。

研究了不同因素的超聲空化處理對(duì)其粗提物和總酚的影響，并對(duì)其提取工藝進(jìn)行了優(yōu)化。超聲空化處理過程中，在測(cè)量范圍內(nèi)，當(dāng)溫度升高時(shí)，粗提物提取率也隨之增大，在40 ℃時(shí)提取率最大，之后呈下降趨勢(shì)。隨著乙醇濃度逐漸增加，粗提物的提取率呈現(xiàn)先增大后減小的趨勢(shì)，且在濃度為40%時(shí)達(dá)到最大。料液比與粗提物提取率呈正相關(guān)，當(dāng)料液比為1∶12時(shí)提取率達(dá)到最大。隨著pH的增大，粗提物提取率呈先升高后降低的趨勢(shì)，在pH為4時(shí)提取率最大。超聲空化提取酚類物質(zhì)過程中[29]，隨著溫度的升高，總酚提取率也隨之增大；隨著乙醇濃度的增大，總酚提取率先升高后降低；隨著料液比的增大，總酚提取率呈持續(xù)升高的趨勢(shì)；隨著pH的增大，總酚提取率先升高后降低。因此，超聲空化提取酚類物質(zhì)的最佳條件為超聲溫度60 ℃、乙醇濃度40%、料液比1∶12、pH 4，并且超聲溫度和乙醇濃度的交互作用最顯著。通過響應(yīng)面優(yōu)化后得到的提取酚類物質(zhì)的最佳工藝為超聲溫度45 ℃、乙醇濃度40%、料液比1∶10、pH 4。

對(duì)油茶籽醇溶性功能因子的生物活性進(jìn)行了評(píng)價(jià)，隨著茶油濃度的不斷升高，DPPH自由基清除率也隨之增大，濃度與DPPH自由基清除率呈正相關(guān)，油茶籽乙醇粗提物具有良好的DPPH自由基清除能力，其半抑制濃度IC50為39.72 mg/mL。濃度越高，DPPH自由基清除率越高，茶油的抗氧化能力越強(qiáng)。

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