青檀內(nèi)生和附生真菌群落多樣性的季節(jié)性變化

摘要： 【目的】了解青檀（Pteroceltis tatarinowii） 內(nèi)生和附生真菌的群落結(jié)構(gòu)及其季節(jié)性特征，并探討群落間的關(guān)系及多樣性形成的可能原因?！痉椒ā吭诓煌竟?jié)分別采集野生青檀當(dāng)季生長的健康枝條，采用組織分離和振蕩清洗涂布平板法分離內(nèi)生和附生真菌，并對其進(jìn)行培養(yǎng)、鑒定以及群落多樣性分析?！窘Y(jié)果】青檀的內(nèi)生和附生真菌群落主要由子囊菌門（Ascomycota） 構(gòu)成，分別占94.78% 和87.62%。內(nèi)生真菌主要包括擬莖點(diǎn)霉屬（Phomopsis）、交鏈孢屬（Alternaria） 和曲霉屬（Aspergillus），三者合計(jì)占比為76.10%；擬莖點(diǎn)霉屬和刺盤孢屬（Colletotrichum） 在每個(gè)季節(jié)均出現(xiàn)；擬莖點(diǎn)霉屬為第1 優(yōu)勢菌屬，春、夏、秋、冬季占比分別為89.65%、43.51%、35.51% 和75.35%。附生真菌則主要由青霉屬（Penicillium）、莖點(diǎn)霉屬（Phoma） 和擬莖點(diǎn)霉屬構(gòu)成，三者合計(jì)占比為55.05%；每個(gè)季節(jié)均出現(xiàn)交鏈孢屬、擬莖點(diǎn)霉屬和刺盤孢屬。春季時(shí)，內(nèi)生真菌的多樣性、豐富度和均勻度均低于附生真菌，而在夏、秋季則相反；冬季時(shí)，內(nèi)生真菌的多樣性和均勻度較低，但豐富度較高。2 個(gè)群落組成的相似度較高（Cs=0.76），無顯著性差異（Pgt;0.05）?！窘Y(jié)論】青檀的內(nèi)生與附生真菌群落豐富且相似度高，存在明顯的季節(jié)差異。季節(jié)更替導(dǎo)致青檀內(nèi)外生態(tài)因子變化，從而驅(qū)動(dòng)內(nèi)生和附生真菌群落多樣性的變化。

關(guān)鍵詞： 青檀；內(nèi)生真菌；附生真菌；群落多樣性；季節(jié)變化

中圖分類號： S718.81 文獻(xiàn)標(biāo)志碼： A 文章編號： 1004–390X （2024） 05?0125?09

植物內(nèi)生和附生真菌群落在生態(tài)系統(tǒng)功能中扮演著重要角色，能夠促進(jìn)植物凋落物的分解，推動(dòng)生物地球化學(xué)循環(huán)[1-5]。內(nèi)生真菌可增強(qiáng)宿主植物的生長、產(chǎn)量和抗逆性（如干旱、鹽堿、病蟲害等）[6-8]。因此，植物內(nèi)生和附生真菌一直被視為植物健康和生產(chǎn)力的關(guān)鍵因素，研究其群落結(jié)構(gòu)及動(dòng)態(tài)關(guān)系對于理解真菌多樣性、群落穩(wěn)定性和生態(tài)系統(tǒng)功能具有重要意義[9]。盡管內(nèi)生和附生真菌群落之間的距離小于1 mm，但其棲息地的生態(tài)環(huán)境卻截然不同。附生真菌暴露在溫度、濕度、紫外線等外部壓力下，而內(nèi)生真菌在宿主植物內(nèi)部承受植物防御、營養(yǎng)和生物競爭等壓力的篩選。季節(jié)更替是導(dǎo)致植物內(nèi)外生態(tài)環(huán)境變化的主要原因，因此，研究植物附生和內(nèi)生真菌群落結(jié)構(gòu)及其季節(jié)性變化特征，對深入了解2 個(gè)群落間的關(guān)系具有重要意義。

目前，關(guān)于木本植物上真菌群落形成的驅(qū)動(dòng)因素尚未明確。盡管已有一些關(guān)于植物內(nèi)生和附生真菌的研究[10-13]，但由于研究區(qū)域、植物種類和氣候特點(diǎn)的差異，尚未形成共識性的預(yù)測模式或結(jié)論。青檀（Pteroceltis tatarinowii） 是中國特有的古老榆科（Ulmaceae） 植物，是石灰?guī)r及鈣質(zhì)土壤植物群落中的先鋒樹種，主要生長于干旱、貧瘠、微堿性的山地。青檀具有飼用、藥用、材用、生態(tài)防護(hù)等多種用途[14]。研究表明：青檀的枝條、葉片和果實(shí)中分布著豐富的內(nèi)生真菌，且其菌群組成具有一定的組織特異性[15-16]。然而，關(guān)于青檀枝條內(nèi)生和附生真菌群落結(jié)構(gòu)的特征及其隨季節(jié)變化的規(guī)律，以及2 個(gè)群落之間的動(dòng)態(tài)關(guān)系，尚無相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道。因此，本研究以野生青檀為試驗(yàn)對象，分別在不同季節(jié)采集當(dāng)季生長的健康枝條，對其內(nèi)生和附生真菌進(jìn)行分離、培養(yǎng)和鑒定，并分析2 個(gè)群落結(jié)構(gòu)隨季節(jié)變化的特征，旨在了解內(nèi)生和附生真菌群落的結(jié)構(gòu)及其季節(jié)性變化特征，分析內(nèi)生真菌與附生真菌之間的動(dòng)態(tài)關(guān)系，探討內(nèi)生和附生真菌群落多樣性形成的可能原因。研究結(jié)果可為植物內(nèi)生和附生真菌的生理生態(tài)學(xué)功能、菌植協(xié)同進(jìn)化、多樣性維持機(jī)制等研究提供參考。

1 材料與方法

1.1 材料

分離培養(yǎng)基：青檀枝條100 g （煮汁）、馬鈴薯200 g （煮汁）、葡萄糖20 g、瓊脂20 g、水1 000 mL，pH 為自然。誘導(dǎo)產(chǎn)孢培養(yǎng)基：青檀枝條100 g （煮汁）、麥芽浸粉10 g、酵母膏2 g、瓊脂粉20 g、水1 000 mL，pH 5.8～6.2。

1.2 方法。

1.2.1 植物采集

2021 年春季（4 月）、夏季（7 月）、秋季（10 月）、冬季（12 月） 分別在安徽瑯琊山野生青檀居群中，隨機(jī)選取樹齡和生長勢基本一致的10 棵青檀植株并編號，用無菌剪刀從每株上剪取當(dāng)季生長的健康枝條5 根，置于滅菌袋內(nèi)，編號并低溫保存。每個(gè)季節(jié)采集的植物樣本均來源于上述編號植株。

1.2.2 附生真菌分離

在超凈工作臺(tái)上用無菌鑷子小心取出枝條樣本，用無菌剪刀剪取長約2 cm 的枝段，每個(gè)枝條各取1 段。將枝段放入裝有50 mL 無菌磷酸鉀緩沖液的錐形瓶中，在200 r/min 的搖床上振蕩120 min，得到附生菌懸液。用無菌移液管吸取菌懸液0.5 mL 至分離培養(yǎng)基平板上，并用無菌玻璃涂棒均勻涂布；然后將平板置于28 ℃ 恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。在上述操作過程中，打開一空白平板作為對照，以檢測工作環(huán)境的無菌狀況。

1.2.3 內(nèi)生真菌分離

取出上述用于分離附生真菌的枝段，用無菌水沖洗2～3 次；將其置于70% 酒精中浸泡2 min，再用無菌水沖洗2～3 次；將其置于2% 次氯酸鈉溶液中浸泡1 min，隨后用無菌水沖洗2～3 次。將枝段剪成0.1～0.2 cm 的組織塊，并將其接入分離培養(yǎng)基平板上，將平板置于28 ℃ 恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。在上述操作過程中，取最后1 次沖洗的無菌水作為對照涂布平板。

1.2.4 誘導(dǎo)產(chǎn)孢

制備誘導(dǎo)產(chǎn)孢培養(yǎng)基薄層平板，挑選上述試驗(yàn)中未產(chǎn)孢的真菌菌株，在無菌條件下接種于薄層平板上。將平板置于近紫外光下照射12 h，隨后在黑暗中培養(yǎng)12 h，交替進(jìn)行14 d。挑取培養(yǎng)物進(jìn)行染色、制片，鏡檢是否有分生孢子產(chǎn)生。

1.2.5 真菌鑒定

無性型真菌種類的鑒定參考文獻(xiàn)[17]，有性型子囊菌種類的鑒定參考《真菌鑒定手冊》[18]。參考國際權(quán)威分類網(wǎng)站（http：//www.indexfungorum.org） 最新資料及《安·貝氏菌物詞典（第10版）》[19]，追蹤真菌屬的變動(dòng)，最終確定真菌的分類地位。

1.2.6 真菌群落多樣性分析

（1） 分離頻率：指某個(gè)屬的菌株數(shù)占所分離菌株總數(shù)的百分比，用于評價(jià)優(yōu)勢菌群的組成情況。

（2） Shannon-Wiener 多樣性指數(shù)（H′ ）：用于分析枝條內(nèi)生及其附生真菌群落組成的多樣性。計(jì)算公式為：H′= -ΣSi=1Pi lnPi；Pi＝Ni/N。式中：Pi 為第i 個(gè)物種的相對豐度；S 為物種數(shù)； Ni 為第i 個(gè)物種的個(gè)體數(shù)，i=1，2，3，4…S；N 為個(gè)體總數(shù)。

（3） Margalef 豐富度指數(shù)（R）：用于分析內(nèi)生和附生真菌群落組成的豐富度。計(jì)算公式為：R＝（S－1）/log2N。

（4） 均勻度指數(shù)（E）：用于分析內(nèi)生和附生真菌群落分布的均勻程度。計(jì)算公式為：E＝H′/lnS。

（5） Sorenson 相似性指數(shù)（Cs）：用于分析內(nèi)生和附生真菌群落組成的相似性程度。計(jì)算公式為：Cs＝2j/（a＋b）。式中：j 為不同季節(jié)內(nèi)生或附生真菌的共有屬數(shù)；a 為某一季節(jié)內(nèi)生或附生真菌的屬數(shù)；b 為另一季節(jié)內(nèi)生或附生真菌的屬數(shù)。

（6） 優(yōu)勢度曲線：根據(jù)分離頻率的大小進(jìn)行排序，通過累積百分?jǐn)?shù)繪制優(yōu)勢度曲線，用于直觀展示內(nèi)生和附生真菌群落分布的豐富度和均勻度。

采用SPSS 16.0 進(jìn)行費(fèi)舍爾檢驗(yàn)，以判斷和分析內(nèi)生和附生真菌群落組成的差異程度。

2 結(jié)果與分析

2.1 真菌群落結(jié)構(gòu)的特征

由表1 可知：4 個(gè)季節(jié)共分離內(nèi)生真菌671株、附生真菌1 454 株，其中，內(nèi)生真菌隸屬于2門7 綱16 目18 科20 屬，附生真菌隸屬于2 門6綱10 目13 科14 屬。

在門水平上，青檀內(nèi)生真菌和附生真菌均主要由子囊菌門（Ascomycota） 組成，分別占94.78%和87.62%；其次為毛霉菌門（Mucoromycota），分別占3.43% 和2.96%。此外，經(jīng)誘導(dǎo)產(chǎn)孢后，仍分別存在1.79% 和9.42% 的未產(chǎn)孢菌群。

在綱水平上，數(shù)量排名前3 的內(nèi)生真菌為糞殼菌綱（Sordariomycetes）、座囊菌綱（Dothideomycetes）和散囊菌綱（Eurotiomycetes），分別占76.00%、11.23% 和5.61%，合計(jì)占比為92.84%；附生真菌則以座囊菌綱、散囊菌綱和糞殼菌綱為主，分別占32.43%、28.36% 和26.76%，合計(jì)占比為87.55%。

在目水平上，數(shù)量排名前3 的內(nèi)生真菌為間座殼菌目（Diaporthales）、格孢腔菌目（Pleosporales）和散囊菌目（Eurotiales），分別占64.23%、8.80%和5.61%，合計(jì)占比為78.64%；附生真菌則主要由散囊菌目、格孢腔菌目和間座殼菌目構(gòu)成，分別占28.36%、19.88% 和12.59%，合計(jì)占比為60.83%。

在科水平上，數(shù)量排名前3 的內(nèi)生真菌為間座殼科（Diaporthacea）、多孢菌科（Pleosporaceae） 和小叢殼科（Glomerellaceae），分別占64.23%、6.86%和3.87%，合計(jì)占比為74.96%；附生真菌則主要由曲霉科（Aspergillaceae）、亞隔孢殼科（Didymellaceae）和間座殼科組成，分別占28.36%、18.71%和12.59%，合計(jì)占比為59.66%。

在屬水平上，數(shù)量排名前3 的內(nèi)生真菌為擬莖點(diǎn)霉屬（Phomopsis）、交鏈孢屬（Alternaria） 和曲霉屬（Aspergillus），分別占64.23%、6.86% 和5.01%，合計(jì)占比為76.10%；附生真菌則以青霉屬（Penicillium）、莖點(diǎn)霉屬（Phoma） 和擬莖點(diǎn)霉屬為主，分別占23.75%、18.71% 和12.59%，合計(jì)占比為55.05%。

2.2 真菌群落組成隨季節(jié)更替的變化特征

由表2 可知：春、夏、秋、冬季分別分離內(nèi)生真菌232、154、143 和142 株，分別分離附生真菌503、128、294 和529 株。每個(gè)季節(jié)均出現(xiàn)的內(nèi)生真菌包括擬莖點(diǎn)霉屬和刺盤孢屬（Colletotrichum），且均以擬莖點(diǎn)霉屬為第1 優(yōu)勢菌群，其在4 個(gè)季節(jié)的分離頻率分別為89.65%、43.51%、35.51% 和75.35% （表1）。內(nèi)生真菌的組成存在季節(jié)特異性，例如，僅在春季出現(xiàn)大莖點(diǎn)霉屬（Macrophoma），夏季出現(xiàn)殼二孢屬（Ascochyta） 和痂圓孢屬（Sphaceloma），秋季則出現(xiàn)枝孢霉屬（Glomerella）、腐質(zhì)霉屬（Humicola） 和阜孢屬（Papularia），而冬季則出現(xiàn)殼針孢屬（Septoria） 和雙珠霉屬（Dimargaris）。每個(gè)季節(jié)中均出現(xiàn)的附生真菌包括交鏈孢屬、擬莖點(diǎn)霉屬和刺盤孢屬。附生真菌的組成也存在季節(jié)特異性，如雙珠霉屬僅在春季出現(xiàn)，葉點(diǎn)霉屬（Phyllosticta）、盤多毛孢屬（Pestalotia）和粉孢屬（Oidium） 等僅在秋季出現(xiàn)。

2.3 真菌群落的多樣性

由表2 還可知：青檀內(nèi)生真菌群落的多樣性、豐富度和均勻度均以秋季最高，而以春季最低；附生真菌群落的多樣性、豐富度和均勻度也以秋季最高，但其在夏季的多樣性和豐富度最低，冬季的均勻度最低。由表3 可知：青檀枝條內(nèi)生真菌群落的豐富度指數(shù)高于附生真菌，而多樣性指數(shù)和均勻度指數(shù)均低于附生真菌。

由圖1 可知：青檀內(nèi)生真菌的菌群數(shù)量多于附生真菌的菌群數(shù)量，且內(nèi)生真菌群落中的第1 優(yōu)勢菌群占比高于附生真菌群落的第1 優(yōu)勢菌群占比。青檀內(nèi)生真菌的優(yōu)勢度曲線變化相對平緩，而附生真菌的優(yōu)勢度曲線在早期上升較快，隨后逐漸趨于平緩，這表明內(nèi)生真菌主要受到植物特性調(diào)節(jié)，相對變化較為穩(wěn)定；而附生真菌則主要受到外界環(huán)境影響，變化相對不穩(wěn)定。

2.4 真菌群落多樣性隨季節(jié)更替的變化特征

由圖2 可知：在秋季，青檀內(nèi)生真菌的第1 優(yōu)勢菌群相對較低（35.51%），曲線變化平緩；而春季內(nèi)生真菌群落的第1 優(yōu)勢菌群占比較高（89.65%）；夏季的優(yōu)勢度曲線在早期上升較為迅速，隨后逐步趨于平緩。雖然附生真菌群落的多樣性、豐富度和均勻度均在秋季達(dá)到最高，但其第1 優(yōu)勢菌群占比相對較低（26.53%），曲線變化較為平緩；雖然夏季附生真菌群落的多樣性和豐富度最低，但其第1 優(yōu)勢菌群占比較高（46.09%），曲線上升迅速。結(jié)合表2 可知：內(nèi)生和附生真菌之間隨著季節(jié)更替存在一定的演化關(guān)系。春季，附生真菌群落的多樣性、豐富度和均勻度均大于內(nèi)生真菌群落；夏季和秋季則與春季相反；冬季，附生真菌群落的多樣性和均勻度大于內(nèi)生真菌群落，但其豐富度小于內(nèi)生真菌群落。

2.5 內(nèi)生和附生真菌群落的相似性

由表1 和表4 可知：除未產(chǎn)孢菌群外，青檀內(nèi)生和附生真菌2 個(gè)群落的共有屬為13 個(gè)，相似性指數(shù)（Cs） 為0.76。春季，青檀內(nèi)生和附生真菌群落的共有屬為6 個(gè)，Cs 為0.86；夏季，2 個(gè)群落的共有屬為4 個(gè)，Cs 為0.73；秋季，2 個(gè)群落的共有屬為10 個(gè)，Cs 為0.77；冬季，2 個(gè)群落的共有屬為4 個(gè)，Cs 為0.44。

費(fèi)舍爾精確檢驗(yàn)結(jié)果（表5） 表明：青檀內(nèi)生真菌的群落組成在春季與秋季之間存在極顯著差異（Plt;0.01），夏季與秋季之間存在顯著差異（Plt;0.05），在其余季節(jié)之間無顯著差異（Pgt;0.05）。青檀附生真菌的群落組成在夏季與秋季之間存在極顯著差異（Plt;0.01），夏季與冬季之間存在顯著差異（Plt;0.05），而在其余季節(jié)之間無顯著差異（Pgt;0.05）。春季內(nèi)生真菌的群落組成與秋季附生真菌的群落組成存在顯著差異（Plt;0.05）；秋季內(nèi)生真菌的群落組成與春季附生真菌的群落組成存在顯著差異（Plt;0.05），與夏季附生真菌的群落組成存在極顯著差異（Plt;0.01）；冬季內(nèi)生真菌的群落組成與夏季附生真菌的群落組成存在顯著差異（Plt;0.05）；其余內(nèi)生真菌與附生真菌的群落組成之間無明顯的季節(jié)差異（Pgt;0.05）。

3 討論

3.1 季節(jié)性變化對內(nèi)生真菌群落的影響

植物體內(nèi)外廣泛存在種類豐富、結(jié)構(gòu)多樣、功能復(fù)雜的真菌群落，且與宿主植物密切相關(guān)[20-25]。OSONO[11]在研究山茶葉片內(nèi)生真菌群落組成隨季節(jié)性變化時(shí)發(fā)現(xiàn)：隨著春、夏、秋、冬的更替，內(nèi)生真菌的侵染率和數(shù)量逐漸增加，且隨著時(shí)間的推移，內(nèi)生真菌種類的豐富度也逐漸增加。在本研究中，隨著春、夏、秋、冬的演化更替，野生青檀枝條內(nèi)生真菌的數(shù)量逐漸減少，秋季的屬數(shù)最多，而春季的屬數(shù)最少。GUO 等[22]在研究北京油松枝條的內(nèi)生真菌時(shí)發(fā)現(xiàn)：春季內(nèi)生真菌的分離頻率最高，且4 個(gè)季節(jié)分布的常見種類包括交鏈孢屬、半殼孢屬、擬盤多毛孢屬、莖點(diǎn)霉屬和擬莖點(diǎn)霉屬5 個(gè)菌群，而不同季節(jié)的內(nèi)生真菌群落組成沒有顯著差異。此外，MARTINS 等[26]對橄欖樹內(nèi)生真菌群落的研究發(fā)現(xiàn)：春季內(nèi)生真菌的多樣性高于秋季，且不同季節(jié)群落組成的相似性較低，常見種類包括擬莖點(diǎn)霉屬、鐮刀菌屬和木霉屬3 個(gè)菌群。本研究發(fā)現(xiàn)：在青檀枝條的內(nèi)生真菌中，擬莖點(diǎn)霉屬和刺盤孢屬2個(gè)菌群在4 個(gè)季節(jié)中均有分布，春季與秋季的內(nèi)生真菌群落組成存在極顯著差異（Plt;0.01），夏季與秋季的內(nèi)生真菌群落組成存在顯著差異（Plt;0.05）。以上研究結(jié)果存在差異的原因，除了植物內(nèi)生真菌群落組成和分布受宿主植物種類、地理分布、組織部位等因素的影響外，可能還與研究樣本自身的差異有關(guān)。本研究選取野生青檀當(dāng)季生嫩枝為樣本，有助于探究季節(jié)性環(huán)境因素變化與相應(yīng)季節(jié)枝條內(nèi)生真菌群落之間的相關(guān)性。

不同季節(jié)青檀內(nèi)生真菌的菌群結(jié)構(gòu)具有一定的共性和季節(jié)特異性。例如春、夏、秋、冬4 個(gè)季節(jié)均出現(xiàn)了擬莖點(diǎn)霉屬和刺盤孢屬，其中擬莖點(diǎn)霉屬分別占89.65%、43.51%、35.51% 和75.35%，刺盤孢屬分別占0.86%、0.49%、9.42% 和0.70%；但僅在春季出現(xiàn)大莖點(diǎn)霉屬，夏季出現(xiàn)殼二孢屬和痂圓孢屬，秋季出現(xiàn)枝孢霉屬、腐質(zhì)霉屬和阜孢屬，而冬季則出現(xiàn)殼針孢屬和雙珠霉屬。研究表明：植物內(nèi)生真菌中的一些種類能產(chǎn)生具有抗其他真菌的次級代謝活性物質(zhì)，從而抑制其他真菌生長，使自身成為優(yōu)勢菌群，進(jìn)而改變植物內(nèi)生真菌的群落結(jié)構(gòu)和功能[27-28]。此外，隨著季節(jié)的更替，植物體內(nèi)各種營養(yǎng)成分（如礦物質(zhì)、糖類、蛋白質(zhì)、粗脂肪等） 也在發(fā)生不同程度的變化。因此，推測植物營養(yǎng)物質(zhì)成分的季節(jié)性變化會(huì)對其內(nèi)生真菌產(chǎn)生影響，這可以在一定程度上解釋青檀枝條中內(nèi)生真菌群落多樣性的季節(jié)性變化規(guī)律。

3.2 季節(jié)性變化對附生真菌群落的影響

在春季，日本京都大原野森林公園內(nèi)山茶附生真菌的數(shù)量最多，而夏季最少[11]；在本研究中，青檀附生真菌的數(shù)量在冬季最多，春季次之，夏季最少。植物附生真菌分布于植物表面，其主要受自然溫度、濕度、降水、紫外線等氣候環(huán)境因素的影響，也受植物表面結(jié)構(gòu)、質(zhì)地、營養(yǎng)等多種因素的影響。隨著季節(jié)的變化，影響植物附生真菌種類和數(shù)量的諸多因素會(huì)發(fā)生規(guī)律性的變化，因此，植物附生真菌群落也會(huì)表現(xiàn)出相應(yīng)的變化規(guī)律。例如，在秋季，青檀附生真菌群落的多樣性、豐富度和均勻度最高，而在夏季的多樣性和豐富度最低，冬季的均勻度最低；夏季與秋季的附生真菌群落組成存在極顯著差異（Plt;0.01），而夏季與冬季的附生真菌群落組成存在顯著差異（Plt;0.05），在其余季節(jié)之間則無顯著差異（Pgt;0.05）。本次采集的青檀樣本來自安徽省瑯琊山森林公園，該地區(qū)的氣候環(huán)境特征為夏季降水次數(shù)和降水量均高于其他季節(jié)，降水易沖刷植株枝條表面，從而降低附著在植物表面的灰塵和微生物數(shù)量。此外，夏季環(huán)境溫度較高、濕度較低且干燥，紫外線輻射強(qiáng)度明顯高于冬季。因此，青檀附生真菌群落的種類和數(shù)量均在夏季最少。

3.3 內(nèi)生與附生真菌群落之間的季節(jié)性聯(lián)系

本研究表明：附生真菌的數(shù)量多于內(nèi)生真菌，但內(nèi)生真菌的種類多于附生真菌。這一結(jié)果與對小果咖啡（Coffea arabica）、山茶（Camellia japonica）、山茱萸（Cornus stolonifera） 等植物的真菌研究結(jié)果[10-12]相似，但與對青檀葉片、油橄欖（Olea europaea）、圓葉菝葜（Smilax rotundifolia）等植物的真菌研究結(jié)果[15， 20-21]存在一定差異。這種差異可能主要來自選用的植物組織材料不同。本研究以當(dāng)季生健康枝條為樣本，而其他研究則使用了植物的葉、根或多年生枝條等。青檀內(nèi)生和附生真菌群落的組成隨著季節(jié)更替而發(fā)生規(guī)律性變化，且兩者之間的關(guān)系密切。2 個(gè)群落的組成相似性程度較高， 且無顯著性差異（Pgt;0.05）。在春季，青檀枝條內(nèi)生和附生真菌群落的共有屬為6 個(gè)，Cs 為0.86；在夏季，兩者的共有屬為4個(gè)，Cs 為0.73；在秋季，兩者的共有屬為10 個(gè)，Cs 為0.77；在冬季，兩者的共有屬為4 個(gè)，Cs 為0.44。因此，推測青檀枝條內(nèi)生真菌群落中有較大一部分真菌來自青檀枝條表面的附生真菌。

青檀枝條內(nèi)生和附生真菌群落受植物內(nèi)外生態(tài)環(huán)境變化的影響，而季節(jié)更替是推動(dòng)這種變化的根本原因。附生真菌主要受制于外界環(huán)境，而內(nèi)生真菌則主要受控于宿主植物。外部是否具有能夠入侵植物并成為內(nèi)生真菌的附生真菌種類，取決于2 個(gè)方面。（1） 附生真菌能否承受外部環(huán)境中各種變化因素的考驗(yàn)，如紫外線、溫度、降水等。在對木本植物油橄欖、木麻黃（Casuarinaequisetifolia）、可可樹（Theobroma cacao） 的研究中，證實(shí)了一些內(nèi)生真菌是來自空氣或降雨傳播的真菌定殖[20， 23-24]。（2） 附生真菌能否承受來自宿主植物內(nèi)部的多種壓力，如植物防御、營養(yǎng)和生物競爭等。研究表明：青檀枝條的內(nèi)生和附生真菌中包括一些被認(rèn)為是潛在植物病原菌的種類，如擬莖點(diǎn)霉屬、刺盤孢屬、交鏈孢屬等，這些類群一般具有較強(qiáng)的侵染能力，一旦接觸枝條表面，就能附著并侵入植物組織[25-26]。

宿主植物為內(nèi)生真菌的生長代謝提供所需的營養(yǎng)物質(zhì)，而分泌到植物組織表面的營養(yǎng)物是附生真菌的主要營養(yǎng)來源。有研究表明：植物的各種營養(yǎng)成分隨著季節(jié)更替而發(fā)生變化[29-30]，而真菌生長與營養(yǎng)成分之間存在密切聯(lián)系[31]。因此，推測季節(jié)更替引發(fā)宿主植物營養(yǎng)成分種類和含量的變化，進(jìn)而導(dǎo)致植物內(nèi)生和附生真菌種類和數(shù)量的變化，最終形成植物內(nèi)生和附生真菌群落結(jié)構(gòu)的季節(jié)性變化。此外，紫外線強(qiáng)度在夏季最高，春季次之，秋季和冬季最低[32]，紫外線對空氣中或枝條表面真菌具有一定的殺傷作用，導(dǎo)致能夠入侵植物組織的真菌種類和數(shù)量隨季節(jié)更替而變化，從而影響真菌在植物中的定殖和生態(tài)分布?？梢?，營養(yǎng)物質(zhì)和紫外線強(qiáng)度的季節(jié)性變化是驅(qū)動(dòng)真菌群落多樣性的重要因素。

4 結(jié)論

青檀枝條的內(nèi)生與附生真菌群落關(guān)系密切，群落組成的相似性程度較高。季節(jié)更替引發(fā)植物內(nèi)外生態(tài)環(huán)境因素的變化，從而驅(qū)動(dòng)青檀內(nèi)生和附生真菌群落多樣性的規(guī)律性變化。研究結(jié)果為利用植物微生物群落生態(tài)調(diào)控手段調(diào)節(jié)植物健康生長提供了科學(xué)依據(jù)。

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責(zé)任編輯：何承剛

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