五加生脈飲對小鼠的抗疲勞作用及其機制

［摘 要］ 目的：探討五加生脈飲的抗疲勞作用，并闡明其作用機制。方法：36只雄性ICR小鼠隨機分為對照組（等體積蒸餾水）、生脈飲組（500 mg·kg－1 生脈飲） 和五加生脈飲組（600 mg·kg－1 五加生脈飲）。每隔7 d 測定各組小鼠體質量，觀察其精神狀態(tài)。采用疲勞轉棒實驗和力竭負重游泳實驗檢測各組小鼠轉棒停留時間和力竭游泳時間；試劑盒檢測各組小鼠血清中血尿素氮（BUN） 和乳酸（LA） 水平及乳酸脫氫酶（LDH） 活性、肝臟組織中肝糖原（LG） 水平、肌肉組織中肌糖原（MG）和丙二醛（MDA） 水平及谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px） 和超氧化物歧化酶（SOD） 活性；Western blotting法檢測各組小鼠肝臟組織中糖代謝相關蛋白表達水平。結果：與實驗前比較，實驗后各組小鼠體質量均呈現(xiàn)增長趨勢，但差異均無統(tǒng)計學意義（Pgt;0. 05）。疲勞轉棒實驗，與對照組比較，五加生脈飲組小鼠轉棒停留時間明顯增加（Plt;0. 01）；力竭負重游泳實驗，與對照組比較，生脈飲組和五加生脈飲組小鼠力竭游泳時間均明顯增加（Plt;0. 01）。與對照組比較，生脈飲組和五加生脈飲組小鼠血清中BUN 水平均明顯降低（Plt;0. 01）， LDH 活性均明顯升高（Plt;0. 01）； 五加生脈飲組LA 水平明顯降低（Plt;0. 01）。與生脈飲組比較，五加生脈飲組小鼠血清中BUN 和LA 水平均明顯降低（Plt;0. 01），LDH 活性明顯升高（Plt;0. 01）。與對照組比較，生脈飲組和五加生脈飲組小鼠肝臟組織中LG 水平和肌肉組織中MG 水平均明顯升高（Plt;0. 01）；與生脈飲組比較，五加生脈飲組小鼠肝臟組織中LG 水平和肌肉組織中MG 水平均明顯升高（Plt;0. 01）。與對照組比較，生脈飲組和五加生脈飲組小鼠肌肉組織中GSH-Px 和SOD 活性均明顯升高（Plt;0. 01），MDA 水平明顯降低（Plt;0. 01）；與生脈飲組比較，五加生脈飲組小鼠肌肉組織中GSH-Px 和SOD 活性均明顯升高（Plt;0. 01），MDA 水平明顯降低（Plt;0. 01）。Western blotting 法，與對照組比較，生脈飲組和五加生脈飲組小鼠肝臟組織中磷酸化磷脂酰肌醇3-激酶（p-PI3K）、磷酸化蛋白激酶B （p-AKT）、磷酸化糖原合成酶激酶3β（p-GSK3β） 及糖原合成酶（GS） 蛋白表達水平均明顯升高（Plt;0. 05 或Plt;0. 01）； 與生脈飲組比較，五加生脈飲組小鼠肝臟組織中p-PI3K、p-AKT、p-GSK3β 和GS 蛋白表達水平均明顯升高（Plt;0. 01）。結論：五加生脈飲可通過激活磷脂酰肌醇3激酶 （PI3K）/蛋白激酶B（AKT）/糖原合成酶激酶3β （GSK3β） 信號通路，提高機體抗氧化能力并增加糖原合成，發(fā)揮抗疲勞作用。

［關鍵詞］ 五加生脈飲； 氧化應激； 抗疲勞； 糖代謝； 尿素氮； 乳酸

［中圖分類號］ R289.1 ［文獻標志碼］ A

疲勞是人類一種主觀不適的感覺，表現(xiàn)為疲勞乏力和心力交瘁等非特異性癥狀，是臨床上常見癥狀，屬于亞健康類疾病，對身體多種臟器均產(chǎn)生影響。長期的疲勞會使機體發(fā)生一系列的生理和心理變化，并伴有精神緊張和煩躁易怒，嚴重時會出現(xiàn)神經(jīng)衰弱、心悸氣短和免疫力下降等情況，甚至誘發(fā)嚴重疾?。?］。疲勞的發(fā)生常與機體的能量缺乏有關， 可通過服用外源性補充劑， 提高運動時的耐力，緩解疲勞癥狀。生脈散為中醫(yī)古方，具有養(yǎng)陰生津、益氣復脈和緩解疲勞等功效［2］。生脈飲為生脈散衍生而來，由人參、麥冬和五味子3 種藥材配伍組成，三味藥分別作為君、臣和佐藥合用，為中醫(yī)常用的補益基礎方劑，可通過藥味加減用于治療或改善各種疾?。?］。本研究在生脈飲中引入一味刺五加藥材，制成五加生脈飲，相關配方及研究目前尚未見報道。刺五加中含有豐富的人參皂苷成分，具有調節(jié)中樞神經(jīng)系統(tǒng)和抗疲勞等作用［4-5］。此外，刺五加歸脾、肺、腎和心經(jīng)，是中醫(yī)常用的使藥。五加生脈飲充分利用了刺五加的特性，將基礎方劑的藥效作用向全身組織臟器引導，改善機體疲勞狀態(tài)，促進糖原的代謝，具有抗疲勞的功效。本研究探討五加生脈飲對小鼠的抗疲勞作用，并闡明相關作用機制，為五加生脈飲改善機體運動水平和調節(jié)高強度運動引起的氧化應激反應提供參考。

1 材料與方法

1. 1 實驗動物、藥物、主要試劑和儀器

SPF 級ICR 小鼠， 雄性， 4～5 周齡， 體質量（20±2） g，由長春億斯實驗動物技術有限責任公司提供，動物生產(chǎn)許可證號： SCXK （吉） -2020-0002。人參、麥冬、五味子和刺五加由吉林市國安藥業(yè)有限公司提供。 血尿素氮（blood urea nitrogen，BUN）、乳酸脫氫酶（lactate dehydrogenase， LDH）、乳酸（lactate， LA）、 肝糖原（liver glycogen， LG）、肌糖原（muscle glycogen，MG）、谷胱甘肽過氧化物酶（glutathione peroxidase， GSH-Px）、超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD） 和丙二醛（malondialdehyde，MDA） 試劑盒購自南京建成生物工程研究所， RIPA 裂解液和BCA 試劑盒購自北京鼎國昌盛生物技術有限責任公司，所有抗體均購自武漢ABclone 公司。紫外可見分光光度計購自日本島津公司， 低溫冰箱購自日本SANYO 公司，純水儀購自美國密理博公司，恒溫生化培養(yǎng)箱購自上海博訊實業(yè)有限公司，酶標儀購自瑞士TECAN 公司， 高速低溫離心機購自美國EPPENDORF 公司，小鼠疲勞轉棒儀購自四川成都泰盟科技有限公司。

1. 2 五加生脈飲制備

取人參100 g、麥冬200 g、五味子100 g 和刺五加100 g［6］，剪碎后，以水為溶劑， 料液比為1∶10， 在100 ℃ 條件下， 混合提取1 h，提取2 次，提取條件通過正交實驗確定。分次濾過，合并濾液，得五加生脈飲，凍干備用。在使用前以水為溶劑復溶。

1. 3 實驗動物分組及給藥

將36只小鼠隨機分為對照組、生脈飲組和五加生脈飲組， 每組12 只。生脈飲組給予500 mg·kg－1 生脈飲，五加生脈飲組給予600 mg·kg－1 五加生脈飲，對照組給予等體積的蒸餾水，每日灌胃給藥1 次，持續(xù)7 周。每隔7 d測定各組小鼠的體質量并記錄相應數(shù)據(jù)，觀察其精神狀態(tài)。

1. 4 疲勞轉棒實驗檢測各組小鼠轉棒停留時間

將小鼠放入圓柱中央的一根轉動棒上，小鼠要保持身體平衡，并跟隨搖桿轉動，以免滑倒；在小鼠跌落時，儀器會自動記錄小鼠的轉棒停留時間，以檢測小鼠的疲勞耐受情況［7］。疲勞轉棒實驗于造模后第43～45 天進行， 給藥30 min 后， 將小鼠置于疲勞轉棒儀上，設定轉速為30 r·min－1，連續(xù)訓練3 d。造模后第46 天給藥30 min 后，進行實驗測試，以180 s 不墜落為標準，記錄小鼠在轉棒上的停留時間。

1. 5 力竭負重游泳實驗檢測各組小鼠力竭游泳時間

造模后第49 天給藥30 min 后， 開始力竭負重游泳實驗。稱量質量為每只小鼠體質量5% 的鉛絲，并系于小鼠尾部，然后將各組小鼠放入深度為40～50 cm 的恒溫水浴箱中， 溫度為（25±2） ℃，使其自由游泳，觀察小鼠逐漸力竭下沉至全身浸入水中7 s， 小鼠無法用鼻子呼吸視為體力已耗盡，撈起并記錄小鼠力竭游泳時間［8］。

1. 6 各組小鼠血清、肝臟組織和肌肉組織采集及處理

力竭負重游泳實驗小鼠游泳體力耗盡后，休息30 min，進行眼球取血，將獲得的血漿靜置10 min后，置于低溫離心機中，于4 ℃，3 000 r·min－1 離心15 min，取上清液100 μL 置于1. 5 mL 離心試管中， 放入－20 ℃的冰箱中凍存。取血后， 采用頸椎脫臼法將小鼠處死，取小鼠腦、肝臟和肌肉等組織，保存于－20 ℃冰箱中備用。

1. 7 試劑盒檢測各組小鼠血清、肝臟組織和肌肉組織中生化指標

取冷凍保存的樣品，采用紫外分光光度法，按試劑盒說明書操作，檢測各組小鼠血清中BUN 和LA 水平及LDH 活性，肝臟組織中LG 水平， 肌肉組織中MG 和MDA 水平及GSH-Px 和SOD 活性。

1. 8 Western blotting法檢測各組小鼠肝臟組織中糖代謝相關蛋白表達水平

取各組小鼠肝臟組織，剪碎后加入RIPA 組織裂解液，手動勻漿后，置于4 ℃低溫離心機中， 5 000 r·min－1 離心10 min， 取上清液，采用BCA 試劑盒測定蛋白濃度。樣品加熱變性后， 采用12% SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳（SDS-polyacrylamide gel electrophoresis， SDSPAGE），10 μL 上樣。電泳結束后，進行轉膜，加入封閉液室溫下封閉2 h，加入一抗后，于4 ℃下孵育過夜，加入HRP 標記的二抗（1∶1 000），室溫下孵育1 h，ECL 法顯影并拍照。采用Image J 軟件分析蛋白條帶灰度值，以β-actin 為內參，計算目的蛋白表達水平。目的蛋白表達水平=目的蛋白條帶灰度值/內參蛋白條帶灰度值。

1. 9 統(tǒng)計學分析

采用 SPSS 22. 0軟件進行統(tǒng)計學分析。各組小鼠體質量、轉棒停留時間和力竭游泳時間，血清中BUN 和LA 水平及LDH 活性，肝臟組織中LG 水平和磷酸化磷脂酰肌醇3- 激酶（phosphorylated phosphatidylinositol 3-kinase，p-PI3K）、磷酸化蛋白激酶B （phosphorylatedprotein kinase B， p-AKT）、磷酸化糖原合成酶激酶3β （phosphorylated gluconeogenesis synthasekinase 3β， p-GSK3β） 及糖原合成酶（glycogensynthase，GS） 蛋白表達水平，肌肉組織中MG 和MDA 水平及GSH-Px 和SOD 活性均符合正態(tài)分布， 以x±s 表示， 多組間樣本均數(shù)比較采用單因素方差分析，組間樣本均數(shù)兩兩比較采用LSD-t 檢驗。以Plt;0. 05 為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結 果

2. 1 各組小鼠體質量

與實驗前比較，實驗后各組小鼠體質量均呈現(xiàn)增長趨勢， 增長情況略有差異，但各組間比較差異均無統(tǒng)計學意義（Pgt;0. 05）。見圖1。

2. 2 各組小鼠轉棒停留時間和力竭游泳時間

與對照組比較，生脈飲組小鼠轉棒停留時間差異無統(tǒng)計學意義（Pgt;0. 05）， 五加生脈飲組小鼠轉棒停留時間明顯增加（Plt;0. 01）； 與生脈飲組比較，五加生脈飲組小鼠轉棒停留時間差異無統(tǒng)計學意義（Pgt;0. 05）。與對照組比較，生脈飲組和五加生脈飲組小鼠力竭游泳時間均明顯增加（Plt;0. 01）；與生脈飲組比較，五加生脈飲組小鼠力竭游泳時間差異無統(tǒng)計學意義（Pgt;0. 05）。見表1。

2. 3 各組小鼠血清中 BUN 和 LA 水平及 LDH 活性

與對照組比較，生脈飲組和五加生脈飲組小鼠血清中BUN 水平均明顯降低（Plt;0. 01），LDH 活性均明顯升高（Plt;0. 01）； 生脈飲組小鼠血清中LA 水平差異無統(tǒng)計學意義（Pgt;0. 05），五加生脈飲組小鼠血清中LA 水平明顯降低（Plt;0. 01）。與生脈飲組比較，五加生脈飲組小鼠血清中BUN 和LA 水平均明顯降低（Plt;0. 01），LDH 活性明顯升高（Plt;0. 01）。見表2。

2. 4 各組小鼠肝臟組織中 LG 水平和肌肉組織中MG水平

與對照組比較，生脈飲組和五加生脈飲組小鼠肝臟組織中LG 水平和肌肉組織中MG 水平均明顯升高（Plt;0. 01）。與生脈飲組比較， 五加生脈飲組肝臟組織中LG 水平和肌肉組織中MG 水平均明顯升高（Plt;0. 01）。見表3。

2. 5 各組小鼠肌肉組織中GSH-Px和SOD活性及MDA水平

與對照組比較，生脈飲組和五加生脈飲組小鼠肌肉組織中GSH-Px 和SOD 活性均明顯升高（Plt;0. 01）， MDA 水平明顯降低（Plt;0. 01）；與生脈飲組比較，五加生脈飲組小鼠肌肉組織中GSH-Px 和SOD 活性均明顯升高（Plt;0. 01），MDA 水平明顯降低（Plt;0. 01）。見表4。

2. 6 各組小鼠肝臟組織中糖代謝相關蛋白表達水平

與對照組比較，生脈飲組和五加生脈飲組小鼠肝臟組織中p-PI3K、p-AKT、p-GSK3β 及GS 蛋白表達水平均明顯升高（Plt;0. 05 或Plt;0. 01）。與生脈飲組比較，五加生脈飲組小鼠肝臟組織中p-PI3K、p-AKT、p-GSK3 和GS 蛋白表達水平均明顯升高（Plt;0. 01）。見圖2。

3 討 論

本研究在生脈飲基礎上，對經(jīng)典名方進行二次開放， 制成五加生脈飲。生脈飲是著名的補益方劑，具有益氣復脈和養(yǎng)陰生津的功效，臨床上常通過加減方治療各種體虛引起的全身性癥狀。中藥刺五加是五加科植物刺五加的干燥根或根莖，為吉林長白山地區(qū)的道地藥材，具有補氣健脾、益腎強腰和養(yǎng)心安神等功效，對脾虛乏力、腰膝酸軟和心悸失眠等癥狀具有較好的療效，可與人參、蛤蚧和五味子等藥物配伍使用［9］。根據(jù)中藥配伍理論加味后制成的五加生脈飲，在原生脈飲方劑基礎上，針對抗疲勞功效進行深入研究和開發(fā)，具有良好的應用前景。

本研究結果顯示：五加生脈飲可明顯延長小鼠的疲勞轉棒停留時間和力竭游泳時間，提示五加生脈飲對小鼠運動疲勞具有明顯的改善作用。此外，與生脈飲比較，五加生脈飲對小鼠的抗疲勞作用更明顯。

BUN 是蛋白質的有氧代謝產(chǎn)物。長時間運動后，若脂肪和糖類的代謝無法滿足機體所需的能量消耗，蛋白質和氨基酸代償性地增加代謝分解，使機體BUN 水平升高。劇烈運動后，核苷酸代謝增強，分解產(chǎn)生大量氨，其轉化為尿素進而引起B(yǎng)UN 水平升高。機體BUN 水平能夠反映機體的疲勞程度，加快BUN 清除速度， 有助于盡快消除疲勞感［10］。在劇烈運動時，有氧代謝無法快速滿足機體對能量的需要，以糖酵解為主要形式的無氧代謝水平迅速升高，MG 被快速消耗，產(chǎn)生大量的LA 堆積導致肌肉疲勞［11］。LDH 可以加速分解過量LA， 恢復機體功能，從而減輕疲勞癥狀［12］。MG 是糖在肌肉中的儲存形式，機體運動時，血糖轉變?yōu)镸G 被消耗后，LG 分解并繼續(xù)為機體供能，即MG 在運動中直接提供能量， LG 儲備能量［13-14］。 本研究結果顯示：五加生脈飲能夠明顯降低運動性疲勞小鼠血清中LA 和BUN 水平，升高MG 和LG 水平，提高LDH 活性。提示五加生脈飲可有效提高機體清除LA 和BUN 的能力，增強機體糖原的儲備，發(fā)揮抗疲勞的作用。

研究［15-16］ 顯示： 運動耗能會使氧化系統(tǒng)和抗氧化系統(tǒng)失衡，機體會產(chǎn)生過多的自由基，導致骨骼肌和肝臟線粒體脂質過氧化損傷從而降低抗氧化能力，增加脂質過氧化物MDA 的產(chǎn)生，進而導致機體抗氧化物酶SOD 和GSH-Px 等活性降低［17］。大強度運動或者力竭運動時，人體對氧氣需求量增加，骨骼肌的血流量也會產(chǎn)生變化，從而導致自由基的產(chǎn)生和肌肉穩(wěn)態(tài)的紊亂、骨骼肌氧化損傷及肌肉疲勞［18］。本研究結果顯示： 五加生脈飲能夠提高疲勞小鼠肌肉組織中的SOD 和GSH-Px 活性并降低MDA 水平，提示五加生脈飲可調節(jié)小鼠體內氧自由基水平，增強其抗氧化能力和運動能力，從而緩解疲勞癥狀。

磷脂酰肌醇3- 激酶（phosphatidylinositol 3-kinase，PI3K） 為酪氨酸激酶和G 蛋白偶聯(lián)受體的主要下游分子，其催化產(chǎn)生第二信使磷脂酰肌醇-3， 4， 5- 三磷酸（phosphatidylinositol-3， 4， 5-triphosphate， PIP3） 激活下游靶點蛋白激酶B（protein kinase B， AKT）、糖原合成酶激酶3β（gluconeogenesis synthase kinase 3β， GSK3β） 和GS 蛋白，激活信號傳導通路，調節(jié)葡萄糖轉運等生理過程［19-21］。PI3K/AKT 信號通路是調控糖原合成的關鍵通路， GS 是催化糖原合成的關鍵酶，PI3K 激活AKT 后會磷酸化GSK3 抑制其活性，進而促進GS 蛋白表達水平升高，將葡萄糖轉化為糖原增加糖原合成［22-25］。本研究結果顯示：五加生脈飲 可 以 激 活 PI3K/AKT/GSK3β 信號通路，促進p-PI3K 、p-AKT、p-GSK3β 和GS 蛋白的表達，增加糖原的合成，從而緩解機體疲勞。

綜上所述，五加生脈飲對小鼠的運動疲勞具有明顯的改善作用， 該作用可能與其調節(jié) PI3K/AKT/GSK3β 信號通路和糖代謝及增加糖原生成有關。

利益沖突聲明：所有作者聲明不存在利益沖突。

作者貢獻聲明：韓迦南參與研究實施、數(shù)據(jù)收集和論文撰寫，劉倬睿參與數(shù)據(jù)收集和統(tǒng)計學分析，曾沛涌參與文獻查閱、數(shù)據(jù)處理和圖片整理，姜爽參與研究指導和論文修改，李洪宇參與研究設計和指導、論文撰寫指導及修改。

[參考文獻]

［1］ 鄭哲君， 李曉莉， 王 朔. 抗疲勞功能食品的研究進展［J］. 食品科技， 2006， 31（2）： 4-7.

［2］ WANG N L， LIOU Y L， LIN M T， et al. Chineseherbal medicine， Shengmai San， is effective forimproving circulatory shock and oxidative damage in thebrain during heatstroke［J］. J Pharmacol Sci， 2005，97（2）： 253-265.

［3］ ZHANG K， ZHANG J Y， WANG X R， et al.Cardioprotection of Sheng Mai Yin a classic formula onadriamycin induced myocardial injury in Wistar rats［J］.Phytomedicine， 2018， 38： 1-11.

［4］ HUANG L Z， HUANG B K， LIANG J， et al.Antifatigue activity of the liposoluble fraction fromAcanthopanax senticosus［J］. Phytother Res， 2011，25（6）： 940-943.

［5］ HUANG L Z， HUANG B K， YE Q， et al. Bioactivityguidedfractionation for anti-fatigue property ofAcanthopanax senticosus［J］. J Ethnopharmacol， 2011，133（1）： 213-219.

［6］ 國家藥典委員會. 中華人民共和國藥典-二部： 2020年版［M］. 北京： 中國醫(yī)藥科技出版社， 2020： 853.

［7］ LEE B H， KIM J， LEE R M， et al. Gintonin enhancesperformance of mice in rotarod test： involvement oflysophosphatidic acid receptors and catecholaminerelease［J］. Neurosci Lett， 2016， 612： 256-260.

［8］ NI W H， GAO T T， WANG H L， et al. Anti-fatigueactivity of polysaccharides from the fruits of four TibetanPlateau indigenous medicinal plants［J］.J Ethnopharmacol， 2013， 150（2）： 529-535.

［9］ HUANG L Z， ZHAO H F， HUANG B K， et al.Acanthopanax senticosus： review of botany， chemistryand pharmacology［J］. Pharmazie， 2011， 66（2）： 83-97.

［10］汪 洪， 方 昊， 馮 緯， 等. 生曬參-甘草-桂花提取物對 Balb/C 小鼠運動疲勞抗性的影響［J］. 食品工業(yè)科技， 2023， 44（5）： 356-362.

［11］LAURENT D， SCHNEIDER K E， PRUSACZYK W K，et al. Effects of caffeine on muscle glycogen utilizationand the neuroendocrine axis during exercise［J］. J ClinEndocrinol Metab， 2000， 85（6）： 2170-2175.

［12］XIN C， ZHAO M Y， WANG J H， et al. Hawthornpolyphenols， D-chiro-inositol， and epigallocatechingallate exert a synergistic hypoglycemic effect［J］. J FoodBiochem， 2021， 45（7）： e13771.

［13］QU Y S， JI H W， SONG W K， et al. The anti-fatigueeffect of the Auxis thazard oligopeptide via modulationof the AMPK/PGC-1α pathway in mice ［J］. FoodFunct， 2022， 13（3）： 1641-1650.

［14］DING D X， WANG Y， YAN W， et al. MYCT1 altersthe glycogen shunt by regulating selective translation ofRACK1-mediated enzymes［J］. iScience， 2022， 25（3）：103955.

［15］CUI X R， SAWASHITA J， DAI J， et al. Exercisesuppresses mouse systemic AApoAⅡ amyloidosisthrough enhancement of the p38 MAPK signalingpathway［J］. Dis Models Mech， 2022， 15（3）： 1-16.

［16］LI D J， LI Y H， YUAN H B， et al. The novel exerciseinducedhormone irisin protects against neuronal injuryvia activation of the Akt and ERK1/2 signaling pathwaysand contributes to the neuroprotection of physicalexercise in cerebral ischemia［J］. Metabolism， 2017， 68：31-42.

［17］LIU X H， LIU T， YANG K L， et al. Antifatigue effectof asiaticoside in mice by attenuating oxidative stress［J］.Discov Med， 2023， 35（176）： 275-282.

［18］LU X D， CHEN J Q， HUANG L Y， et al. The antifatigueeffect of glycoprotein from hairtail fish（Trichiurus lepturus） on BALB/c mice［J］. Foods，2023， 12（6）： 1245.

［19］DURONIO V. The life of a cell： apoptosis regulation bythe PI3K/PKB pathway［J］. Biochem J， 2008， 415（3）：333-344.

［20］FRANKE T F， KAPLAN D R， CANTLEY L C.PI3K： downstream AKTion blocks apoptosis［J］. Cell，1997， 88（4）： 435-437.

［21］ENGELMAN J A， CHEN L， TAN X H， et al.Effective use of PI3K and MEK inhibitors to treat mutantKras G12D and PIK3CA H1047R murine lungcancers［J］. Nat Med， 2008， 14（12）： 1351-1356.

［22］REN Z L， ZHONG H， SONG C C， et al. Insulin promotes mitochondrial respiration and survival throughPI3K/AKT/GSK3 pathway in human embryonic stemcells［J］. Stem Cell Reports， 2020， 15（6）： 1362-1376.

［23］LYU S Y， WANG H R， MA T J. Optimization ofsupercritical fluid CO2 extraction from yellow horn seedand its anti-fatigue and antioxidant activity ［J］.Molecules， 2023， 28（12）： 4853.

［24］SUN W D， ZU S L， SHAO G F， et al. Long noncodingDANCR targets miR-185-5p to upregulate LIMand SH3 protein 1 promoting prostate cancer via theFAK/PI3K/AKT/GSK3β/snail pathway［J］. J GeneMed， 2021， 23（7）： e3344.

［25］YADAV U C， NAURA A S， AGUILERAAGUIRREL， et al. Aldose reductase inhibitionprevents allergic airway remodeling through PI3K/AKT/GSK3β pathway in mice［J］. PLoS One， 2013， 8（2）：e57442.

[基金項目] 吉林省教育廳“十三五”科學技術項目（JJKH20200078KJ）