篦齒虎耳草正丁醇部位的化學成分研究

向 倫，李文艷，黃慧蓮，任 剛，祝美寧，求加木，普 尺，劉李意，黃玲玲，唐一欽，鐘國躍，羅光明*，蔣 偉*

篦齒虎耳草正丁醇部位的化學成分研究

向 倫1，李文艷2，黃慧蓮2，任 剛1，祝美寧1，求加木3，普 尺3，劉李意2，黃玲玲2，唐一欽2，鐘國躍1，羅光明2*，蔣 偉1*

1. 江西中醫(yī)藥大學 中藥資源與民族藥研究中心，江西 南昌 330004 2. 江西中醫(yī)藥大學藥學院，江西 南昌 330004 3. 西藏藏醫(yī)藥大學，西藏 拉薩 850000

對篦齒虎耳草var.的正丁醇部位化學成分進行研究。利用多種色譜層析方法（硅膠柱色譜、Sephadex LH-20凝膠柱色譜、ODS反相柱色譜和半制備HPLC等）進行分離純化，運用理化性質(zhì)結(jié)合現(xiàn)代波譜學（紫外分光光度法、紅外分光光度法、核磁共振波譜法、質(zhì)譜等）技術(shù)進行結(jié)構(gòu)鑒定。從篦齒虎耳草正丁醇部位中分離得到31個化合物，分別鑒定為(2,4)-6-(4-羥基苯基)已烷-2,4-二醇（1）、(4)-4-羥基-6-(3,4-二羥基苯基)己烷-4-醇（2）、(2)-6-(3,4-二羥基苯基)-2-羥基己烷-4-酮（3）、6-(4-羥基苯基)已烷-2,4-二醇（4）、()-9,10-二羥基-苯已基-2-烯-4-酮（5）、rhododendrin（6）、對香豆酸（7）、對羥基苯丙酸（8）、異落葉松脂素（9）、(5)-5-丁氧基-7-(3,4-二羥基苯基)-1-(4-羥基苯基)-3-庚酮（10）、(5)-5-丁氧基-1,7-二(4-羥基苯基)-3-庚酮（11）、1-(4-羥基苯基)-7-(3,4-二羥基苯基)-5β葡萄糖苷-3-庚酮（12）、5-羥基- 1-(4-羥基苯基)-7-(3,4-二羥基苯基)-3-庚酮（13）、alusenone（14）、白樺林烯酮（15）、hannokinol（16）、alnuheptanoid A（17）、5-羥基-1,7-二(4-羥基苯基)-3-庚酮（18）、槲皮素-3,7-二α--鼠李糖苷（19）、山柰酚-3,7-二α--鼠李糖苷（20）、金絲桃苷（21）、鼠李亭-3半乳糖苷（22）、鼠李素-3鼠李糖苷（23）、槲皮苷（24）、楊梅素-3β半乳糖苷（25）、山柰酚-3(6-乙酰基)-β半乳糖苷（26）、槲皮素（27）、催吐蘿芙木醇（28）、8,9- dihydromegastigmane-4,6-diene-3-one（29）、tubiflorone（30）、chakyunglupulin A（31）?；衔?～3為新化合物，依次命名為虎耳草酚二醇、虎耳草酚和()-纖孔菌酚A，化合物4、8～11、13、17～20、22、23、26、28～31均為首次從虎耳草屬植物中分離報道，化合物6、7、12、14、15、16、24和25均為首次從篦齒虎耳草中分離報道，其中化合物10和11為人工產(chǎn)物。上述黃酮類、二苯庚烷類、單苯烷類和環(huán)烯類成分在虎耳草屬植物中具有一定的化學分類學價值。

篦齒虎耳草；虎耳草酚二醇；虎耳草酚；()-纖孔菌酚A；對羥基苯丙酸；異落葉松脂素；山柰酚-3(6-乙?；?- β半乳糖苷

虎耳草屬植物篦齒虎耳草Hook. f. et Thoms. var.(Marquand et Airy-Shaw) J. T. Pan主要分布在我國西藏[1]，生長地平均海拔4 000 m以上，是藏藥“松蒂”（音譯名）的正品基原品種，被當?shù)夭蒯t(yī)認為在退肝膽熱方面具有“王者”地位[2]，主要用于治療肝膽類疾病。篦齒虎耳草分布的青藏高原是我國虎耳草屬植物多樣性分布中心[3]，由于藏醫(yī)有就地用藥的習慣，所以當?shù)胤植嫉亩喾N虎耳草屬植物也用于“松蒂”藥材的來源，唐古特虎耳草Engl. 便是其中最常見的替代品種。長期以來，國內(nèi)虎耳草屬植物的研究主要集中在低海拔平原地區(qū)的廣布品種虎耳草Curt.[4-7]，隨著民族藥的發(fā)展，近年來我國藏區(qū)虎耳草屬植物的研究不斷增多，化學研究報道的有唐古特虎耳草Engl.[8-13]，小傘虎耳草Hook. f. et Thoms[14-18]，篦齒虎耳草（小傘虎耳草變種）var.(Marquand et Airy-Shaw) J. T. Pan[19-21]，黑蕊虎耳草Franch.[22]，山地虎耳草H. Smith[23]，黑虎耳草Engl.[24]品種，尤以前三者文獻居多，分離報道的成分主要有單苯環(huán)類，二苯庚烷類、二苯壬烷類、黃酮類成分。目前的研究揭示了高原虎耳草屬植物較之低海拔分布的虎耳草，具有更為豐富多樣的次生代謝產(chǎn)物，這有可能是青藏高原為虎耳草屬植物多樣性分布中心的地理屬性造成的。

近年來，本研究小組一直致力于發(fā)現(xiàn)虎耳草屬植物品種之間在化學和生物活性方面的相似性和多樣性，為青藏高原豐富的虎耳草屬藥用植物資源的利用和保護提供研究證據(jù)。之前，本課題組報道了“松蒂”各基原藥材品種之間的生物活性差異[25-26]，以及從篦齒虎耳草提取物的醋酸乙酯部分中分離鑒定的2種新的葫蘆烷型三萜苷[19]，從其石油醚部位分離鑒定的2種新的齊墩果烷型三萜類成分[20]。本研究從篦齒虎耳草提取物正丁醇部位分離得到31個成分，其中單苯環(huán)類8個，分別鑒定為(2,4)- 6-(4-羥基苯基)已烷-2,4-二醇[(2,4)-6-(4-hydroxy- phenyl) hexane-2,4-diol，1]、(4)-6-(3,4-二羥基苯基)己烷-4-醇[(4)-6-(3,4-dihydroxyphenyl) hexane-4-ol，2]、(2)-6-(3,4-二羥基苯基)-2-羥基己烷-4-酮 [(2)- 6-(3,4-dihydroxyphenyl)-2-hydroxyhexan-4-one，3]、6-(4-羥基苯基)已烷-2,4-二醇 [6-(4-hydroxyphenyl) hexane-2,4-diol，4）、()-9,10-二羥基-苯已基-2-烯-4-酮 [()-9,10-dihydroxy-phenylhex-2-en-4-one，5]、rhododendrin（6）、對香豆酸（-coumaric acid，7）、3-(4-羥基苯基)丙酸[3-(4-hydroxyphenyl)propanoic acid，8]；木脂素類1個，鑒別為異落葉松脂素（isolariciresinol，9）；二苯庚烷類9個，分別鑒定為(5)-5-丁氧基-7-(3,4-二羥基苯基)-1-(4-羥基苯基)-3-庚酮[(5)-5-butynoxy-7-(3,4-dihydroxyphenyl)-1-(4- hydroxyphenyl)heptan-3-one，10]、(5)-5-丁氧基-1,7-二(4-羥基苯基)-3-庚酮 [(5)-5-butyloxy-1,7-di (4-hydroxyphenyl)-3-heptanone，11]、1-(4-羥基苯基)-7-(3,4-二羥基苯基)-5β葡萄糖苷-3-庚酮[1-(4-hydroxyphenyl)-7-(3,4-dihydroxyphenyl)-5βglucopyranosyl-heptan-3-one，12]、5-羥基- 7-(3,4-二羥基苯基)-1-(4-羥基苯基)-3-庚酮 [5-hydroxy-1-(4-hydroxyphenyl)-7-(3,4-dihydroxyphenyl)-3-heptanone，13]、alusenone（14）、白樺林烯酮（platyphyllenone，15）、hannokinol（hannokinol，16）、alnuheptanoid A（17）、5-羥基-1,7-二(4-羥基苯基)-3-庚酮 [5-hydroxy-1,7-bis(4-hydroxyphenyl)-3- heptanone，18]；黃酮類9個，槲皮素-3,7-二α--鼠李糖苷（quercetin 3,7-diα--rhamnoside，19）、山柰酚- 3,7-二α--鼠李糖苷（kaempferol 3,7α-- dirhamnopyranoside，20）、金絲桃苷（hyperoside，21）、鼠李素-3半乳糖苷（rhamnetin-3galacto- pyranoside，22）、鼠李亭-3鼠李糖苷（rhamnetin-3rhamnoside，23）、槲皮苷（quercitrin，24）、楊梅素-3β半乳糖苷（myricetin-3βgalactopyranoside，25）、山柰酚-3(6-乙?；?-β半乳糖苷 [kaempferol 3(6-acetyl)-βgalactopyranoside，26]、槲皮素（quercetin，27）；環(huán)烯類4個，分別鑒定為催吐蘿芙木醇（vomifoliol，28）、8,9-dihydromegastigmane-4,6-diene-3-one（29）、tubiflorone（30）、chakyunglupulin A（31）。其中，化合物1～3為新化合物（圖1），分別命名為虎耳草酚二醇、虎耳草酚和()-纖孔菌酚A。化合物4、8～11、13、17～20、22、23、26、28～31均為首次從虎耳草屬植物中報道，化合物6、7、12、14～16、24、25為首次從篦齒虎耳草中分離報道，其中化合物10和11為人工產(chǎn)物。上述黃酮成分類型與在虎耳草屬植物中廣泛報道的黃酮成分類型相似；二苯庚烷類成分目前在我國虎耳草屬植物中的報道主要見于青藏高原分布的小傘虎耳草和唐古特虎耳草，在其他虎耳草屬品種包括我國平原地區(qū)廣布種虎耳草的化學研究中鮮見。單苯環(huán)類成分在虎耳草屬植物中也普遍存在，如沒食子酸和綠原酸，但本研究中發(fā)現(xiàn)的系列單苯己烷類成分及最近一篇篦齒虎耳草化研究報道[21]中的系列單苯己烷類成分在其他虎耳草屬植物品種中鮮有報道。而本研究中分離鑒定的4個環(huán)烯類成分在虎耳草屬植物中報道鮮見。故本研究進一步豐富了對虎耳草屬植物化學物質(zhì)基礎(chǔ)的認識。

圖1 新化合物1～3的結(jié)構(gòu)

1 儀器及材料

AX-600核磁共振波譜儀（德國Bruker公司）；AB TripleTOFM5600超高效液相-高分辨飛行時間質(zhì)譜（美國ABSCIEX公司）；LC-20A型島津高效液相色譜儀（日本島津公司）；UV-1800型紫外分光光度計（日本島津公司）；APIV-1W型微量旋光儀（美國Rudolph Research Analytical公司）；Rotavapor-210旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（瑞士步琪公司）；ZF-20D型三用紫外分析儀（驥輝分析儀器上海有限公司）；FA2004G型電子分析天平（上海四科儀器設(shè)備有限公司）；YMC-TriartC18EXRS半制備柱（250 mm×10 mm，5 μm）；硅膠薄層板（青島海洋化工廠）；柱色譜（60～90、200～300目，青島海洋化工廠）；色譜乙腈（美國TEDIA公司）；氘代甲醇（美國劍橋CIL公司）；氘代吡啶（美國劍橋CIL公司）；其他試劑均為分析純，水為超純水。

篦齒虎耳草全草于2019年9月購自西藏自治區(qū)藏藥廠，藥材經(jīng)由江西中醫(yī)藥大學鐘國躍教授鑒定為Hook. f. et Thoms. var.(Marquand et Airy-Shaw) J. T. Pan的全草，標本（20190903）存放于江西中醫(yī)藥大學標本館。

2 提取與分離

篦齒虎耳草干燥藥材（4.0 kg）粗粉經(jīng)40 L 95%乙醇滲漉提取，所得提取物依次通過石油醚、醋酸乙酯、正丁醇液液萃取得到各極性段萃取部位。正丁醇部位（181 g）經(jīng)MCI微孔樹脂柱色譜，分別以水及20%（ZDC20）、60%（ZDC60）、90%（ZDC90）甲醇水溶液洗脫，棄去水洗脫部位，依次得到ZDC20部位（20 g）、ZDC60部位（40 g）和ZDC90部位（5 g）。ZDC60部位經(jīng)硅膠柱色譜，以二氯甲烷-甲醇體系（80∶1～10∶1）沖洗得到流分Z1～Z5，Z4上于硅膠柱，以二氯甲烷-甲醇（70∶1～5∶1）洗脫得到流分Z4.1和Z4.2。Z4.1經(jīng)凝膠柱色譜，以甲醇洗脫收集目標流分后繼續(xù)經(jīng)半制備色譜，流動相為36%乙腈水溶液洗脫得到化合物12（40 mg）和9（5.2 mg）。Z4.2經(jīng)硅膠柱色譜，以二氯甲烷-甲醇體系（20∶1～5∶1）洗脫得到流分Z4.2.1、Z4.2.2和Z4.2.3。Z4.2.1經(jīng)凝膠柱色譜，甲醇洗脫，得到化合物14（5 mg）和15（80 mg）。Z4.2.2經(jīng)凝膠柱色譜，甲醇洗脫收集目標流分后繼續(xù)經(jīng)半制備色譜進行等度洗脫，流動相為70%乙腈水溶液，得到化合物16（5.3 mg）和17（10.2 mg）。Z4.2.3經(jīng)凝膠柱色譜，純甲醇洗脫收集目標流分后繼續(xù)經(jīng)半制備色譜進行等度洗脫，流動相為72%乙腈水溶液，得到化合物18（5.8 mg）和13（6.8mg）。Z2部位經(jīng)硅膠柱，以二氯甲烷-甲醇（60∶1～10∶1）洗脫得到流分Z2.1和Z2.2。Z2.1經(jīng)凝膠柱色譜，甲醇洗脫收集目標流分后繼續(xù)經(jīng)半制備液相色譜等度洗脫，流動相為50%乙腈水溶液，得到化合物21（50 mg）和27（5.8 mg）。Z2.2經(jīng)凝膠柱色譜，甲醇洗脫收集目標流分后繼續(xù)經(jīng)半制備液相色譜等度洗脫，流動相為55%乙腈水溶液，得到化合物22（5.4 mg）和23（19.2 mg）。Z3經(jīng)硅膠柱色譜，以二氯甲烷-甲醇（60∶1～30∶1）洗脫得到流分Z3.1和Z3.2，Z3.1上于凝膠柱色譜，純甲醇洗脫收集目標流分后繼續(xù)經(jīng)半制備液相色譜進行等度洗脫，流動相為54%乙腈水溶液，得到化合物24（10.5 mg）。Z3.2經(jīng)凝膠柱色譜，甲醇洗脫后合并目標流分后經(jīng)半制備色譜進行等度洗脫，流動相為56%乙腈水溶液，得到化合物26（8.5 mg）。

將ZDC20部位與ZDC60部位中Z1合并并經(jīng)ODS色譜柱色譜，以20%～90%甲醇水溶液梯度洗脫，通過TLC檢識，合并得到流分H1～H4。H1經(jīng)硅膠柱色譜，以二氯甲烷-甲醇（50∶1～10∶1）洗脫得到流分H1.1和H1.2，H1.1經(jīng)膠柱色譜，以純甲醇洗脫收集目標流分后繼續(xù)經(jīng)硅膠柱色譜，以二氯甲烷-甲醇（15∶1）洗脫得到化合物19（5 mg）。H1.2經(jīng)硅膠柱色譜，以二氯甲烷-甲醇（18∶1）洗脫，得到化合物20（85.2 mg）和25（4.8 mg）。H3經(jīng)硅膠柱色譜，以二氯甲烷-甲醇（60∶1～40∶1）洗脫得到流分H3.1～H3.3。H3.1經(jīng)凝膠柱色譜，以甲醇洗脫得到流分H3.1.1和H3.1.2。H3.1.1經(jīng)半制備液相色譜進行等度洗脫，流動相為38%乙腈水溶液，得到化合物1（5.5 mg）。H3.1.2上于半制備液相色譜進行等度洗脫，流動相為37%乙腈水溶液，得到化合物2（4.8 mg）和3（15.78 mg）。H3.2經(jīng)凝膠柱色譜，以甲醇洗脫收集目標流分后經(jīng)半制備液相色譜等度洗脫，流動相為35%乙腈水溶液，得到化合物4（5 mg）和5（15.78 mg）。H2經(jīng)凝膠柱色譜，以純甲醇洗脫得到流分H2.1和H2.2。H2.1再次經(jīng)凝膠柱色譜，以純甲醇洗脫得到化合物6（85.2 mg）和7（10.2 mg）。H2.2經(jīng)半制備液相色譜等度洗脫，流動相為32%乙腈水溶液，得到化合物8（15.4 mg）

ZDC90部位經(jīng)硅膠柱色譜，以二氯甲烷-甲醇（80 :1～15∶1）洗脫得到流分S1～S5。S5經(jīng)硅膠柱色譜，以二氯甲烷-甲醇（60∶1～5∶1）洗脫得到流分S5.1和S5.2。S5.1上經(jīng)凝膠柱色譜，以甲醇洗脫收集目標流分繼續(xù)經(jīng)半制備色譜等度洗脫，流動相為30%乙腈水溶液，得到化合物10（5.6 mg）和11（3.5 mg）。S3與S4均經(jīng)凝膠柱色譜，以純甲醇洗脫，從S3中得到化合物28（5.2 mg）和29（8.5 mg）；從S4中得到化合物30（6.2 mg）和31（5.2 mg）。

3 結(jié)構(gòu)鑒定

表1 化合物1～4的1H-NMR和13C-NMR數(shù)據(jù)(600/150 MHz, CD3OD)

Table 1 1H-NMR and 13C-NMR data for compounds 1—4 (600/150 MHz, CD3OD)

圖2 化合物1～3的主要1H-1H COSY和HMBC相關(guān)信號

化合物4：淡黃色油狀物，HRESIMS/: 209.119 4 [M－H]?，確定分子式為C12H18O3，1H-NMR和13C-NMR數(shù)據(jù)見表1，與文獻報道數(shù)據(jù)一致[27]，故鑒定化合物4為6-(4-羥基苯基)已烷-2,4-二醇。

化合物5：褐色油狀物，HRESIMS/: 205.087 2[M－H]?，確定分子式為C12H14O3。1H-NMR (600 MHz, CD3OD): 6.91 (1H, dq,15.8, 6.8 Hz, H-2), 6.65 (1H, d,8.0 Hz, H-11), 6.62 (1H, d,2.1 Hz, H-8), 6.50 (1H, dd,8.0, 2.1 Hz, H-12), 6.12 (1H, dq,15.8, 1.6 Hz, H-3), 2.81 (2H, m, H2-5), 2.73 (2H, t,7.5 Hz, H2-6), 1.88 (3H, dd,6.8, 1.7 Hz, H3-1)；13C-NMR (150 MHz, CD3OD): 18.4 (C-1), 145.2 (C-2), 132.8 (C-3), 202.6 (C-4), 42.6 (C-5), 30.8 (C-6), 134.1 (C-7), 116.3 (C-8), 146.2 (C-9), 144.5 (C-10), 116.5 (C-11), 120.5 (C-12)。其核磁數(shù)據(jù)與文獻報道一致[21]，故鑒定化合物5為 ()-9,10-二羥基-苯已基-2-烯-4-酮。

化合物6：白色粉末，HRESIMS/: 327.211 8 [M－H]?，確定分子式為C16H24O7，1H-NMR (600 MHz, CD3OD): 7.03 (2H, d,= 8.4 Hz, H-6, 10), 6.68 (2H, d,=8.5 Hz, H-7, 9), 4.33 (1H, d,= 7.8 Hz, H-1), 3.89 (2H, m, H-2, 6a), 3.72 (1H, dd,= 11.8, 5.6 Hz, H-6b), 3.37 (1H, m, H-3), 3.35 (1H, m, H-4), 3.27 (1H, m, H-5), 3.20 (1H, m, H-2), 2.63 (2H, m, H-4), 1.88 (1H, m, H-3a), 1.70 (1H, m, H-3b), 1.22 (3H, d,= 6.2 Hz, H3-1)；13C-NMR (150 MHz, CD3OD): 156.2 (C-8), 134.7 (C-5), 130.4 (C-6), 130.4 (C-10), 116.0 (C-7), 116.0 (C-9), 102.2 (C-1), 78.2 (C-3), 77.8 (C-2), 75.1 (C-2), 75.1 (C-5), 71.7 (C-4), 62.8 (C-6), 40.6 (C-3), 31.8 (C-4), 19.9 (CH3)。其核磁數(shù)據(jù)與文獻報道基本一致[8,34]，故鑒定化合物6為rhododendrin。

化合物7：褐色膠狀物。1H-NMR (600 MHz, CD3OD): 7.60 (1H, d,= 15.9 Hz, H-7), 7.45 (2H, d,= 8.5 Hz, H-2, 6), 6.81 (2H, d,= 8.6 Hz, H-3, 5), 6.28 (1H, d,= 15.9 Hz, H-8)；13C-NMR (150 MHz, CD3OD): 171.0 (C-9), 161.0 (C-1), 146.6 (C-7), 127.3 (C-4), 131.1 (C-3, 5), 116.8 (C-2, 6), 115.6 (C-8)。其核磁數(shù)據(jù)與文獻報道基本一致[15]，故鑒定化合物7為對香豆酸。

化合物8：褐色膠狀物。1H-NMR (600 MHz, CD3OD): 7.02 (2H, d,= 8.4 Hz, H-5, 9), 6.69 (2H, d,= 8.4 Hz, H-6, 8), 2.80 (2H, t,= 7.7 Hz, H2-3), 2.53 (2H, t,= 7.7 Hz, H2-2)；13C-NMR (150 MHz, CD3OD): 177.1 (C-1), 156.8 (C-7), 133.1 (C-4), 130.4 (C-5, 9), 116.3 (C-6, 8), 37.3 (C-2), 31.4 (C-3)。其核磁數(shù)據(jù)與文獻報道基本一致[35]，故鑒定化合物8為對羥基苯丙酸。

化合物9：褐色膠狀物；1H-NMR (600 MHz, CD3OD3): 6.74 (1H, d,= 8.0 Hz, H-5), 6.68 (1H, d,= 1.7 Hz, H-2), 6.66 (1H, s, H-2), 6.62 (1H, dd,= 8.0, 1.8 Hz, H-6), 6.18 (1H, s, H-5), 3.81 (1H, m, H-7), 3.81 (3H, s, 3-OCH3), 3.78 (3H, s, 3-OCH3), 3.40, 3.62～3.72 (4H, m, H2-9, 9), 2.78 (2H, d,= 7.7 Hz, H-7), 2.00 (1H, m, H-8), 1.76 (1H, tt,= 10.1, 3.5 Hz, H-8)；13C-NMR (150 MHz, CD3OD3): 149.0 (C-3),147.2 (C-3), 145.9 (C-4), 145.3 (C-4), 138.6 (C-1), 134.2 (C-6), 129.0 (C-1), 123.2 (C-6), 117.4 (C-5), 116.0 (C-5), 113.8 (C-2), 112.4 (C-2), 65.9 (C-9), 62.2 (C-9), 56.4 (3-OCH3), 56.3 (3-OCH3), 48.1 (C-7), 48.0 (C-8), 40.0 (C-8), 33.6 (C-7)。其核磁數(shù)據(jù)與文獻報道基本一致[36]，故鑒定化合物9為異落葉松脂素。

化合物11：淡黃色膠狀物。[α]20 D?11o (0.20，MeOH)。HRESIMS/: 371.222 7 [M－H]?, 297.145 0 [M－H－BuOH]?確定分子式為C23H30O4。1H-NMR和13C-NMR數(shù)據(jù)見表2，與文獻報道數(shù)據(jù)一致[37]，故鑒定化合物11為(5)-5-丁氧基-1,7-二(4-羥基苯基)-3-庚酮。因其是從正丁醇部位分離得到，且在原植物粗提物中的UPLC-Q/TOF-MS分析中沒有檢測到它的存在，所以認定為人工產(chǎn)物。

表2 化合物10、11和13的1H-NMR和13C-NMR數(shù)據(jù)(CD3OD, 600/150 MHz)

Table 2 1H-NMR and 13C-NMR spectroscopic data for compounds 10, 11 and 13 (CD3OD, 600/150 MHz)

圖3 人工產(chǎn)物10的主要1H-1H COSY和HMBC相關(guān)信號

化合物12：黃色無定型粉末，HRESIMS/: 491.191 4 [M－H]?，確定分子式為C25H32O10；1H-NMR (600 MHz, CD3OD): 7.01 (2H, t,= 8.4 Hz, H-2, 6), 6.68 (2H, d,= 8.4 Hz, H-3, 5), 6.67 (1H, d,= 8.1 Hz, H-5), 6.62 (1H, d,= 2.0 Hz, H-2), 6.49 (1H, dd,= 8.1, 2.1 Hz, H-6), 4.28 (1H, d,= 7.8 Hz, H-1), 4.16 (1H, m, H-5), 3.88, 3.69 (2H, m, H2-6), 3.25～3.35 (3H, m, H-3～5), 3.15 (1H, t,= 8.3 Hz, H-2), 2.74 (2H, m, H2-1), 2.70 (2H, m, H2-2), 2.80, 2.60 (each 1H, m, H2-4), 2.58 (2H, m, H2-7), 1.84, 1.74 (each 1H, m, H2-6)；13C-NMR (150 MHz, CD3OD): 212.1 (C-3), 156.2 (C-4), 146.1 (C-3), 144.5 (C-4), 134.4 (C-1), 134.0 (C-1), 130.4 (C-2, 6), 120.6 (C-6), 116.6 (C-5), 116.4 (C-2), 116.1 (C-3, 5), 103.4 (C-1), 78 (C-3) , 77.8 (C-5), 76.2 (C-5), 75.2 (C-2), 71.6 (C-4), 62.7 (C-6), 49.6 (C-4), 46.4 (C-2), 38.5 (C-6), 31.8 (C-7), 30.1 (C-1)。其核磁數(shù)據(jù)與文獻報道基本一致[38]，故鑒定化合物12為1-(4-羥基苯基)- 7-(3,4-二羥基苯基)-5β葡萄糖苷-3-庚酮。

化合物13：淡黃色膠狀物，HRESIMS/: 353.135 6 [M＋Na]+，確定分子式為C19H22O5，1H-NMR和13C-NMR數(shù)據(jù)見表2，與文獻報道數(shù)據(jù)一致[39]，故鑒定化合物13為5-羥基-7-(3,4-二羥基苯基)-1-(4-羥基苯基)-3-庚酮。

化合物14：黃色無定型粉末，HRESIMS/: 311.130 7 [M－H]?，確定分子式為C19H20O4。1H-NMR (600 MHz, CD3OD): 6.99 (2H, d,= 8.5 Hz, H-2, 6), 6.87 (1H, dt,= 15.9, 6.9 Hz, H-5), 6.69 (2H, m, H-3, 5), 6.65 (1H, d,= 8.0 Hz, H-5), 6.61 (1H, d,= 2.1 Hz, H-2), 6.48 (1H, dd,= 8.0, 2.1 Hz, H-6), 6.06 (1H, dt,= 15.9, 1.5 Hz, H-4), 2.80 (2H, m, H2-2), 2.71 (2H, t,= 7.2 Hz, H2-1), 2.66 (2H, t,= 7.6 Hz, H2-7), 2.47 (2H, dtd,= 8.6, 7.0, 1.5 Hz, H2-6)；13C-NMR (150 MHz, CD3OD): 202.9 (C-3), 156.7 (C-4), 149.2 (C-5), 146.2 (C-4), 144.5 (C-3), 134.0 (C-1), 133.0 (C-1), 131.7 (C-4), 130.4 (C-2), 130.4 (C-6), 120.6 (C-6), 116.5 (C-2), 116.3 (C-5), 116.2 (C-5), 116.2 (C-3), 42.7 (C-2), 35.8 (C-6), 34.6 (C-7), 31.0 (C-1)。其核磁數(shù)據(jù)與文獻報道基本一致[40]，故鑒定化合物14為alusenone。

化合物15：淡黃色油狀物，HRESIMS/: 295.135 2 [M－H]?，確定分子式為C19H20O3。1H-NMR (600 MHz, CD3OD): 6.98 (4H, t,= 8.2 Hz, H-2, 6, 2, 6), 6.86 (1H, dt,= 15.9, 7.0 Hz, H-5), 6.69 (4H, m, H-3, 5, 3, 5), 6.05 (1H, dt,= 15.9, 1.5 Hz, H-4), 2.79 (4H, m, H2-1, 7), 2.66 (2H, t,= 7.5 Hz, H2-2), 2.46 (2H, m, H-6)；13C-NMR (150 MHz, CD3OD): 202.8 (C-3), 156.6 (C-4), 156.6 (C-4), 149.2 (C-5), 133.2 (C-1), 133.1 (C-1), 131.6 (C-4), 130.4 (C-2, 6), 130.3 (C-2, 6), 116.2 (C-3, 5), 116.2 (C-3, 5), 42.7 (C-2), 35.7 (C-6), 34.6 (C-7), 30.7 (C-1)。其核磁數(shù)據(jù)與文獻報道基本一致[41]，故鑒定化合物15為白樺林烯酮。

化合物16：淡黃色油狀物，HRESIMS/: 315.158 3 [M－H]?，確定分子式為C19H24O4。1H-NMR (600 MHz, CD3OD): 7.00 (4H, d,= 8.5 Hz, H-2, 6, 2, 6), 6.68 (4H,= 8.5 Hz, H-3, 5, 3, 5), 3.81 (2H, m, H-3, 5), 2.66 (2H, m, H-2a, 6a), 2.55 (2H, m, H-2b, 6b), 1.67 (4H, m, H2-1, 7),1.54 (2H, dd,= 6.7, 5.7 Hz, H2-4)；13C-NMR (150 MHz, CD3OD): 156.3 (C-4, 4), 134.5 (C-1, 1), 130.3 (C-2, 6, 2, 6), 116.1 (C-3, 5, 3, 5), 68.7 (C-3, 5), 45.7 (C-4), 41.4 (C-2, 6), 32.1 (C-1, 7)。其核磁數(shù)據(jù)與文獻報道一致[41]，故鑒定化合物16為hannokinol。

化合物17：褐色膠狀物，HRESIMS/: 367.151 2 [M＋Na]+，確定分子式為C20H24O5。1H-NMR (600 MHz, CD3OD): 6.97 (2H, d,= 8.5 Hz, H-2, 6), 6.69 (2H,= 8.5 Hz, H-3, 5), 6.65 (1H, d,= 8.0 Hz, H-5), 6.61 (1H, d,= 2.1 Hz, H-2), 6.49 (1H, dd,= 8.0, 2.1 Hz, H-6), 3.63 (1H, m, H-5), 3.63 (1H, m, H-5), 3.27 (3H, s, 5-OCH3), 2.70 (2H, m, H2-1), 2.70 (2H, m, H2-2), 2.66, 2.51 (each 1H, m, H2-4), 2.55 (2H, m, H2-7), 1.70 (2H, m, H2-6)；13C-NMR (150 MHz, CD3OD): 211.7 (C-3), 156.6 (C-4), 146.3 (C-3), 144.6 (C-4), 134.2 (C-1), 134.1 (C-1), 130.4 (C-2, 6), 120.7 (C-6), 116.7 (C-5), 116.5 (C-2), 116.3 (C-3, 5), 78.1 (C-5), 57.2 (5-CH3O), 48.4 (C-4), 46.5 (C-2), 37.2 (C-6), 31.6 (C-7), 30.2 (C-1)。其核磁數(shù)據(jù)與文獻報道基本一致[42]，故鑒定化合物17為alnuheptanoid A。

化合物18：淡黃色油狀物，HRESIMS/: 313.144 8 [M－H]?，確定分子式為C19H22O4。1H-NMR (600 MHz, CD3OD): 6.98 (4H, t,= 8.5 Hz, H-2, 6, 2, 6), 6.68 (4H, m, H-3, 5, 3, 5), 4.0 (1H, m, H-5), 2.73 (4H, m, H2-1, 2), 2.49～2.66 (4H, m, H2-4, 7), 1.66 (2H, m, H2-6)；13C-NMR (150 MHz, CD3OD): 211.9 (C-3), 156.6 (C-4), 156.4 (C-4), 134.1 (C-1), 133.2 (C-1), 130.3, 130.2 (C-2，6, C-2，6), 116.2 , 116.1 (C-3, 5, 3, 5), 68.2 (C-5), 51.3 (C-4), 46.4 (C-2), 40.5 (C-6), 31.9 (C-7), 29.8 (C-1)。其核磁數(shù)據(jù)與文獻報道基本一致[41]，故鑒定化合物18為5-羥基-1,7-二(4-羥基苯基)-3-庚酮。

化合物19：黃色無定型粉末，HRESIMS/: 595.164 9 [M＋H]+，確定分子式為C27H30O15；1H-NMR (600 MHz, CD3OD): 7.37 (1H, d,= 2.1 Hz, H-2), 7.34 (1H, dd,= 8.3, 2.1 Hz, H-6), 6.92 (1H, d,= 8.3 Hz, H-5), 6.73 (1H, d,= 2.2 Hz, H-8), 6.47 (1H, d,= 2.2 Hz, H-6), 5.56 (1H, d,= 1.8 Hz, H-1), 5.38 (1H, d,= 1.7 Hz, H-1), 4.22 (1H, dd,= 3.4, 1.7 Hz, H-5), 4.02 (1H, dd,= 3.5, 1.8 Hz, H-5), 3.83 (1H, dd,= 9.5, 3.5 Hz, H-3), 3.75 (1H, dd,= 9.5, 3.4 Hz, H-3), 3.60～3.35 (4H, m, H-2, 2, 4, 4), 1.27 (3H, d,= 6.2 Hz, H3-6), 0.95 (3H, d,= 6.2 Hz, H3-6)；13C-NMR (150 MHz, CD3OD): 179.8 (C-4), 163.5 (C-5), 163.0 (C-7), 159.8 (C-9), 158.1 (C-2), 150 (C-4), 146.5(C-3), 136.5 (C-3), 123 (C-1), 122.7 (C-6), 116.9 (C-2), 116.4 (C-5), 107.5 (C-10), 103.6 (C-1), 100.5 (C-1″), 99.9 (C-6), 95.6 (C-8), 73.6 (C-4), 73.2 (C-4″), 72.1 (C-2), 72.1 (C-2), 71.9 (C-3), 71.9 (C-3), 71.7 (C-5″), 71.3 (C-5), 18.1 (C-6), 17.7 (C-6″)。其核磁數(shù)據(jù)與文獻報道基本一致[43]，故鑒定化合物19為槲皮素-3,7-二α--鼠李糖苷。

化合物20：棕色無定型粉末，HRESIMS/: 577.157 2 [M－H]?，確定分子式為C27H30O14；1H-NMR (600 MHz, CD3OD): 7.77 (2H, d,= 8.1 Hz, H-2, 6), 6.93 (2H, d,= 7.3 Hz, H-3, 5), 6.70 (1H, brs, H-8), 6.44 (1H, brs, H-6), 5.57 (1H, brs, H-1), 5.39 (1H, brs, H-l), 4.23 (1H, brs, H-5), 4.03 (1H, brs, H-5), 3.35～3.85 (6H, m, H-2,2,3,3, 4,4), 1.27 (3H, d,= 6.1 Hz, H3-6), 0.94 (3H, d,= 5.6 Hz, H3-6)；13C-NMR (150 MHz, CD3OD): 179.7 (C-4), 163.5 (C-7), 162.9 (C-5), 161.7 (C-4), 159.7 (C-9), 158.0 (C-2), 136.5 (C-3), 132.0 (C-2, 6), 122.4 (C-1), 116.6 (C-3, 5), 107.5 (C-10), 103.5 (C-1), 100.5 (C-1), 99.8 (C-6), 95.6 (C-8), 73.6 (C-4), 73.2 (C-4), 72.1 (C-5), 72.1 (C-3), 72.1 (C-3), 71.9 (C-2), 71.7 (C-2), 71.3 (C-5), 18.1 (C-6), 17.7 (C-6)。其核磁數(shù)據(jù)與文獻報道基本一致[43]，故鑒定化合物20為山柰酚-3,7-二--鼠李糖苷。

化合物21：黃色無定形粉末，HRESIMS/: 463.092 7 [M－H]?，確定分子式為C21H20O12；1H-NMR (400 MHz, CD3OD): 7.84 (1H, d,= 2.2 Hz, H-2), 7.59 (1H, dd,= 8.5, 2.2 Hz, H-6), 6.87 (1H, d,= 8.5 Hz, H-5), 6.41 (1H, d,= 2.0 Hz, H-8), 6.21 (1H, d,= 1.9 Hz, H-6), 5.16 (1H, d,= 7.8 Hz, H-1), 3.89～3.42 (6H, m, sugar-H)；13C-NMR (100 MHz, CD3OD): 179.5 (C-4), 166.1 (C-7), 163.0 (C-5), 158.8 (C-2), 158.4 (C-9), 149.9 (C-4), 145.8 (C-3), 135.8 (C-3), 123.0 (C-6) , 122.9 (C-1) , 117.8 (C-2) 116.1 (C-5), 105.6 (C-10), 105.4 (C-1), 99.9 (C-6), 94.7 (C-8), 77.2 (C-3), 75.1 (C-5), 73.2 (C-2), 70.0 (C-4), 61.9 (C-6)。其核磁數(shù)據(jù)與文獻報道基本一致[43]，故鑒定化合物21為金絲桃苷。

化合物22：黃色無定型粉末，HRESIMS/: 501.100 3 [M＋Na]+，確定分子式為C22H22O12；1H-NMR (600 MHz, DMSO-6): 7.70 (1H, dd,= 8.0, 2.0 Hz, H-6), 7.57 (1H, d,= 2.0 Hz, H-2), 6.82 (1H, d,= 8.0 Hz, H-5), 6.71 (1H, d,= 2.0 Hz, H-8), 6.38 (1H,= 2.0 Hz, H-6), 5.40 (1H, d,= 7.5 Hz, H-1), 3.86 (3H, s, 7-OCH3), 3.30～3.58 (6H, m, sugar-H)；13C-NMR (150 MHz, DMSO-6): 177.6 (C-4), 165.1 (C-7), 160.7 (C-5), 156.6 (C-2), 156.2 (C-9), 151.3 (C-3), 148.7 (C-4), 144.9 (C-3), 133.7 (C-3), 122.1 (C-6), 119.7 (C-1), 116.0 (C-2), 115.1 (C-5), 104.9 (C-1), 101.7 (C-1), 97.9 (C-6), 92.1 (C-8), 75.9 (C-5), 73.2 (C-3), 71.2 (C-2), 67.9 (C-4), 60.1 (C-6), 56.1 (7-OCH3)。其核磁數(shù)據(jù)與文獻報道基本一致[44]，故鑒定化合物22為鼠李亭-3半乳糖苷。

化合物23：黃色無定型粉末，HRESIMS/: 461.108 9 [M－H]?，確定分子式為C22H22O11；1H-NMR (600 MHz, DMSO-6)7.34 (1H, d,= 2.0 Hz, H-2), 7.28 (1H, dd,= 8.0, 2.0 Hz, H-6), 6.87 (1H,d,= 8.0 Hz, H-5), 6.69 (1H, d,= 2.2 Hz, H-8), 6.38 (1H, d,= 2.2 Hz, H-6), 5.28 (1H, s, Rha-H-1), 3.86 (3H, s, 7-OCH3), 3.13～3.52 (4H, m, sugar-H), 0.82 (3H, d,= 6.0 Hz, Rha-CH3)；13C-NMR (150 MHz, DMSO-6): 177.9 (C-4), 165.2 (C-7), 161.0 (C-5), 157.7 (C-2), 156.4 (C-9), 148.6 (C-4), 145.3 (C-3), 134.4 (C-3), 121.2 (C-6), 120.6 (C-1), 115.7 (C-5), 115.5 (C-2), 105.1 (C-10), 101.8 (C-1), 97.9 (C-6), 92.3 (C-8), 71.2 (C-4), 70.6 (C-3), 70.4 (C-2), 70.0 (C-5), 56.1 (7-OCH3), 17.5 (C-6)。其核磁數(shù)據(jù)與文獻報道基本一致[45]，故鑒定化合物23為鼠李素-3鼠李糖苷。

化合物24：黃色無定型粉末，HRESIMS 447.092 5 [M－H]?，確定分子式為C21H20O11；1H-NMR (400 MHz, CD3OD): 7.34 (1H, d,= 2.1 Hz, H-2), 7.31 (1H, dd,= 8.2, 2.0 Hz, H-6), 6.91 (1H, d,= 8.3 Hz, H-5), 6.37 (1H, brs, H-8), 6.20 (1H, brs, H-6), 5.35 (1H, brs, H-1), 4.22 (1H, m, H-2), 3.76 (1H, d,=3.4 Hz, H-3), 3.42 (1H, dd,= 9.6, 6.0 Hz, H-5), 3.35 (1H, d,= 9.5 Hz, H-4), 0.94 (3H, d,= 6.1 Hz, H3-6)；13C-NMR (100 MHz, CD3OD): 179.6 (C-4), 165.8 (C-7), 163.1 (C-5), 159.3 (C-9), 158.5 (C-2), 149.8 (C-4), 146.4 (C-3), 136.2 (C-3), 122.9 (C-1), 122.9 (C-6), 116.9 (C-5), 116.4 (C-2), 105.9 (C-10), 103.5 (C-1), 99.8 (C-6), 94.7 (C-8), 73.2 (C-4), 72.1 (C-3), 72.0 (C-2), 71.9 (C-5), 17.7 (C-6)。核磁數(shù)據(jù)與文獻報道基本一致[46]，故鑒定化合物24為槲皮苷。

化合物25：黃色無定型粉末，HRESIMS/: 481.264 3 [M＋H]+，確定分子式為C21H20O13。1H-NMR (600 MHz, CD3OD): 7.38 (2H, s, H-2, 6), 6.40 (1H, d,= 2.1 Hz, H-8), 6.20 (1H, d,= 2.0 Hz, H-6), 5.20 (1H, d,= 7.8 Hz, H-1), 3.87 (1H, d,= 3.3 Hz, H-4), 3.84 (1H, dd,= 9.7, 7.8 Hz, H-2), 3.66 (1H, dd,= 11.2, 6.0 Hz, H-6a), 3.59 (1H, m, H-3), 3.58 (1H, m, H-6b), 3.50 (1H, m,H-5)；13C-NMR (150 MHz, CD3OD): 179.4 (C-4), 166.1 (C-7), 163.0 (C-5), 158.7 (C-2), 158.4 (C-9), 146.4 (C-3, 5), 138.2 (C-4), 136.0 (C-3), 121.7 (C-1), 109.9 (C-2, 6), 105.6 (C-10), 105.5 (C-1), 99.9 (C-6), 94.6 (C-8), 77.2 (C-5), 75.1 (C-3), 73.3 (C-2), 70.0 (C-4), 61.9 (C-6)。其核磁數(shù)據(jù)與文獻報道基本一致[47]，故鑒定化合物25為楊梅素-3β半乳糖苷。

化合物26：淡黃色膠狀物，HRESIMS/: 491.120 5 [M＋H]+，確定分子式為C23H22O12；1H-NMR (600 MHz, DMSO-6): 6.21 (1H, d,= 2.1 Hz, H-6), 6.44 (1H, d,= 2.1 Hz, H-8), 8.04 (2H, d,= 8.9 Hz, H-2, 6), 6.86 (2H, d,= 8.9 Hz, H-3, 5), 5.33 (1H, d,= 7.7 Hz, H-1), 3.38～4.11 (6H, m, sugar-H), 1.72 (3H, s, 6-CH3COO)；13C-NMR (150 MHz, DMSO-6): 156.4 (C-2, 9), 133.3 (C-3), 177.5 (C-4), 161.2 (C-5), 98.7 (C-6), 164.2 (C-7), 93.7 (C-8), 103.8 (C-10), 120.8 (C-1), 130.9 (C-2, 6), 115.1 (C-3, 5), 160.0 (C-4), 101.7 (C-1), 71.0 (C-2), 72.8 (C-3, 5), 68.1 (C-4), 63.1 (C-6), 169.8 (6- CH3COO), 20.1 (6-CH3COO)。其核磁數(shù)據(jù)與文獻報道基本一致[48]，故鑒定化合物26為山奈酚-3(6-乙酰基)-β半乳糖苷。

化合物27：黃色無定型粉末，HRESIMS/: 303.05.6 [M＋H]+，確定分子式為C15H10O7；1H-NMR (600 MHz, CD3OD): 7.83 (1H, d,= 2.0 Hz, H-2), 7.70 (1H, dd,= 8.5, 2.0 Hz, H-6), 6.99 (1H, d,= 8.5 Hz, H-5), 6.52 (1H, d,= 1.3 Hz, H-8), 6.26 (1H, d,= 1.5 Hz, H-6)；13C-NMR (150 MHz, CD3OD): 148.3 (C-2), 136.7 (C-3), 176.6 (C-4), 165.0 (C-5) , 99.1 (C-6), 162.3 (C-7), 94.4 (C-8), 157.8 (C-9), 104.1 (C-10), 123.7 (C-1), 116.2 (C-2), 145.8 (C-3), 146.9 (C-4), 115.8 (C-5), 121.4 (C-6)。其核磁數(shù)據(jù)與文獻報道基本一致[43]，故鑒定化合物27為槲皮素。

化合物28：淡黃色膠狀物，HRESIMS/: 269.140 5 [M＋COOH]?，確定分子式為C13H20O3。1H-NMR (600 MHz, CD3OD): 5.88 (1H, m, H-8), 5.80 (1H, d,= 4.8 Hz, H-7), 5.79 (1H, s, H-4), 4.32 (1H, m, H-9), 2.45 (1H, d,= 16.9 Hz, H-2a), 2.16 (1H, d,= 16.9 Hz, H-2b), 1.92 (3H, d,= 1.3 Hz, H3-13), 1.24 (3H, d,= 6.4 Hz, H3-10), 1.05 (3H, s, H3-11), 1.01 (3H, s, H3-12)；13C-NMR (150 MHz, CD3OD): 201.3 (C-3), 167.6 (C-5), 137.1 (C-7), 130.1 (C-8), 127.3 (C-4), 80.1 (C-6), 68.8 (C-9), 50.9 (C-2), 42.6 (C-1), 24.7 (C-12), 24.0 (C-11), 23.6 (C-10), 19.7 (C-13)。其核磁數(shù)據(jù)與文獻報道基本一致[49]，故鑒定化合物28為催吐蘿芙木醇。

化合物29：黃色無定型粉末，HRESIMS/: 269.140 0 [M＋COOH]?，確定分子式為C13H20O3。1H-NMR (600 MHz, CD3OD): 6.06 (1H, d,= 9.4 Hz, H-7), 5.96 (1H, s, H-4), 4.68 (1H, dd,= 9.4, 5.1 Hz, H-8), 3.75 (1H, m, H-9), 2.39 (1H, d,= 16.0 Hz, H-2a), 2.34 (1H, d,= 16.0 Hz, H-2b), 2.15 (3H, d,= 1.0 Hz, H3-13), 1.39 (3H, s, H3-11), 1.34 (3H, s, H3-12), 1.21 (3H, d,= 6.4 Hz, H3-10)；13C-NMR (150 MHz, CD3OD): 201.9 (C-3), 158.9 (C-5), 145.2 (C-6), 135.7 (C-7), 127.1 (C-4), 72.5 (C-8), 71.8 (C-9), 54.4 (C-2), 40.0 (C-1), 29.9 (C-11), 29.8 (C-12), 22.7 (C-13), 18.8 (C-10)。其核磁數(shù)據(jù)與文獻報道基本一致[50]，故鑒定化合物29為8,9-dihydromegastigmane-4,6-diene-3-one。

化合物30：黃色無定型粉末，HRESIMS/: 285.135 4 [M＋COOH]?，確定分子式為C13H20O4。1H-NMR (600 MHz, CD3OD): 5.83 (1H, s, H-4), 4.11 (1H, d,= 8.7 Hz, H-7), 3.82 (1H, t,= 8.8 Hz, H-8), 3.74 (1H, m, H-9), 3.41 (1H, d,= 17.7 Hz, H-2a), 1.96 (1H, d,= 17.6 Hz, H-2b), 2.04 (3H, s, H3-13), 1.32 (3H, d,= 6.0 Hz, H3-10), 1.21 (3H, s, H3-11), 0.97 (3H, s, H3-12)；13C-NMR (150 MHz, CD3OD): 202.3 (C-3), 169.8 (C-5), 126.3 (C-4), 86.4 (C-6), 85.7 (C-7), 81.2 (C-8), 77.2 (C-9), 49.8 (C-2), 41.6 (C-1), 26.1 (C-11), 25.9 (C-12), 18.8 (C-13), 18.5 (C-10)。其核磁數(shù)據(jù)與文獻報道基本一致[51]，故鑒定化合物30為tubiflorone。

化合物31：淡黃色無定形粉末，HRESIMS/: 197.117 2 [M－H2O＋H]+，確定分子式為C11H18O4；1H-NMR (600 MHz, CD3OD): 5.78 (1H, s, H-2), 4.10 (1H, tt,= 11.5, 4.2 Hz, H-6), 2.47 (1H, ddd,= 11.7, 4.0, 2.1 Hz, H-5β), 2.01 (1H, ddd,= 13.1, 4.3, 2.2 Hz, H-7β), 1.59 (3H, s, H3-11), 1.42 (1H, t,= 11.6 Hz, H-5α), 1.31 (3H, s, H3-10), 1.29 (3H, s, H3-9), 1.29 (1H, 與甲基重疊, H-7α)；13C-NMR (150 MHz, CD3OD): 183.9 (C-1), 173.9 (C-3), 113.7 (C-2), 88.6 (C-4), 65.3 (C-6), 50.7 (C-7), 48.4 (C-5), 36.2 (C-8), 30.3 (C-10), 25.8 (C-11), 25.3 (C-9)。核磁數(shù)據(jù)與文獻報道基本一致[52]，故鑒定化合物31為chakyunglupulin A。

4 討論

本研究擴展了對篦齒虎耳草及所屬虎耳草屬植物的化學物質(zhì)基礎(chǔ)認識，從篦齒虎耳草正丁醇部位分離鑒定了31個化合物，其中3個為新化合物，25個為首次從篦齒虎耳草或者虎耳草屬植物中分離得到。對上述成分在虎耳草屬植物中的化學分類學價值進行進一步探討。

單苯環(huán)類化合物在虎耳草屬多種植物中有報道，比如Dang等[8-9]先后從唐古特虎耳草中分離到11個單苯環(huán)類化合物，但未見報道本研究中發(fā)現(xiàn)的系列單苯已烷類化合物（1～5），而Huang等[21]最近報道了從篦齒虎耳草中分離得到的7個單苯已烷類新化合物，其中含有本研究中的化合物5，這些在篦齒虎耳草中發(fā)現(xiàn)的單苯己烷類化合物均未在虎耳草屬其他品種植物中有報道，說明單苯己烷類化合物有可能作為化學分類學標志物區(qū)分篦齒虎耳草和虎耳草屬植物其他品種。本研究首次從篦齒虎耳草中分離報道的發(fā)現(xiàn)的單苯丁烷類成分化合物6（rhododendrin）是從虎耳草科巖白菜屬植物Haw.和L.中首次分離鑒定報道[53]，在虎耳草屬植物唐古特虎耳草[8]和L.也報道過[54]，說明化合物6在這虎耳草科和虎耳草屬植物中具有一定的化學分類學價值?；衔?（對羥基香豆酸）在我國低海拔地區(qū)廣布種虎耳草Curt.中也有化學研究報道[6]，說明了虎耳草屬品種之間的化學親緣關(guān)系。本次研究分離鑒定的化合物9是首次從虎耳草屬植物分離鑒定的1個木脂素類成分，木脂素是苯丙素的二聚物，化合物7和8以及虎耳草屬植物中存在的苯丙素類成分[9]為這種木脂素類成分的形成提供了生源合成途徑基礎(chǔ)。

二苯庚烷類成分常見于姜科（Zingiberaceae）和樺木科（Betulaceae）植物的化學研究報道[55]，在早期的虎耳草屬植物的化學研究中幾乎沒有報道，近年來黨軍等從唐古特虎耳草分離鑒定了15個二苯庚烷類成分[9-10]并討論了該類成分在虎耳草科植物中的化學分類學價值，Yang等[15, 17-18]從小傘虎耳草（篦齒虎耳草為小傘虎耳草變種）中報道過6個二苯庚烷類成分。本研究分離鑒定的9個二苯庚烷類成分進一步證明了該類成分在虎耳草屬植物中的分類學價值，其中化合物14～16在唐古特虎耳草的化學研究中報道過[9-10]，Yang等[17]也從小傘虎耳草中分離報道過與化合物10和11結(jié)構(gòu)類似的正丁基化人工產(chǎn)物。除了目前在小傘虎耳草、篦齒虎耳草（小傘虎耳草變種）和唐古特虎耳草中發(fā)現(xiàn)了系列二苯庚烷類成分，其他虎耳草科植物中的該類成分鮮有報道，這說明在虎耳草科或?qū)俚闹参锲贩N中，小傘虎耳草和唐古特虎耳草之間的親緣關(guān)系更近，這也與小傘虎耳草與唐古特虎耳草同屬于虎耳草屬山羊臭亞屬植物，具有更近的植物分類學親緣關(guān)系相符，同時也為唐古特虎耳草作為小傘虎耳草的代用品種提供了物質(zhì)基礎(chǔ)方面的合理性解釋。故二苯庚烷類成分有潛力作為化學分類學標志物區(qū)分小傘虎耳草、唐古特虎耳草與其他虎耳草屬植物。

本研究從篦齒虎耳草中分離鑒定的11個黃酮類成分，多以黃酮苷（7個單糖苷和2個雙糖苷）形式存在，其黃酮類型有槲皮素類、山柰酚類、楊梅素類和異鼠李素類，糖基類型有葡萄糖、半乳糖和鼠李糖，化合物19、20、22、23和26為首次從虎耳草屬植物分離鑒定的黃酮類成分。Bohm等[56]曾闡述北美分布的幾種虎耳草[(Haw.) Steud.，T. & G.，L.和Rottb.]中黃酮類成分主要為系列槲皮素類、山柰酚類、楊梅素類黃酮，常以各種甲氧基化和糖基化形式存在，糖基化形式有葡萄糖苷、半乳糖苷、木糖苷、異構(gòu)阿拉伯糖苷和阿拉伯糖苷?；?。我國虎耳草屬植物的化學研究中，楊愛梅等從唐古特虎耳草中分離得到3個黃酮類成分[13]，從小傘虎耳草中分離鑒定了11個黃酮類成分[16,18]；黨軍等[11]從唐古特虎耳草分離鑒定了18種黃酮類成分，還從黑虎耳草中分離鑒定了蘆丁和異槲皮苷2個黃酮[57]；Liu等[23]從山地虎耳草中分離鑒定了7個黃酮類成分；左國營等從黑蕊虎耳草中分離了7個黃酮類成分[22]；在低海拔廣布品種虎耳草中，也先后報道了多種黃酮類成分[4-7]。我國虎耳草屬植物中報道的黃酮類成分也多為槲皮素類、山柰酚類和異鼠李素類黃酮，常以單糖苷和雙糖苷形式存在，糖基主要有葡萄糖、半乳糖、鼠李糖、阿拉伯糖和木糖，說明黃酮類成分在虎耳草屬植物各品種中普遍存在，且結(jié)構(gòu)類型具有相似性和普遍性，最常見的黃酮有金絲桃苷、異槲皮苷和蘆丁等。

另外本研究中發(fā)現(xiàn)的4個環(huán)烯（cycloenes）類成分均為首次從在虎耳草屬植物中分離報道，類似結(jié)構(gòu)成分在同屬植物鮮有報道，僅見馮衛(wèi)生等[5]報道了從虎耳草中分離鑒定的與本研究中化合物28～30結(jié)構(gòu)相似的1個甲基環(huán)己烯類（megastigmane）成分，說明甲基環(huán)己烯類成分對于虎耳草屬植物可能具有一定的化學分類學價值，值得進一步考察。

本研究對黃酮類、二苯庚烷類、單苯環(huán)類和環(huán)烯類成分在虎耳草屬植物中的化學分類學價值探討對我國虎耳草屬植物的利用與保護具有一定的意義，由于高原虎耳草屬植物品種的資源非常脆弱，本研究為尋找“松蒂”藥材的新基原品種提供了一定的線索。

利益沖突所有作者均聲明不存在利益沖突

[1] 中國科學院中國植物志編輯委員會. 中國植物志(第八卷) [M]. 北京: 科學出版社, 1992: 165.

[2] 文檢, 張藝, 劉川, 等. 藏藥“蒂達”的基原、藥性及功效的考證[J]. 中國中藥雜志, 2016, 41(4): 609-612.

[3] 張得鈞, 陳生云, 高慶波, 等. 虎耳草屬山羊臭組的界定和系統(tǒng)發(fā)育: 核糖體DNA ITS序列證據(jù) [J]. 植物分類學報, 2008, 46(5): 667-675.

[4] 蒲祥, 宋良科. 虎耳草的研究進展 [J]. 安徽農(nóng)業(yè)科學, 2009, 37(31): 15224-15226.

[5] 馮衛(wèi)生, 李振, 鄭曉珂, 等. 虎耳草的化學成分研究 [J]. 藥學學報, 2010, 45(6): 742-746.

[6] 先春, 龔小見, 趙超, 等. 虎耳草的化學成分研究 [J]. 中國實驗方劑學雜志, 2012, 18(10): 124-126.

[7] 先春, 黃志金, 周欣, 等. 虎耳草的化學成分及生物活性研究 [J]. 天然產(chǎn)物研究與開發(fā), 2014, 26(1): 64-68.

[8] Dang J, Tao Y, Shao Y,. Antioxidative extracts and phenols isolated from Qinghai–Tibet Plateau medicinal plantEngl [J]., 2015, 78: 13-18.

[9] Dang J, Jiao L J, Wang W D,. Chemotaxonomic importance of diarylheptanoids and phenylpropanoids in(Saxifragaceae) [J]., 2017, 72: 29-31.

[10] Dang J, Zhao J Q, Tao Y D,. A new diarylheptanoid from[J]., 2017, 53(1): 48-50.

[11] Dang J, Zhang L, Wang Q L,. Target separation of flavonoids fromusing two-dimensional hydrophilic interaction chromatography/ reversed-phase liquid chromatography [J]., 2018, 41(24): 4419-4429.

[12] 王琪, 潘國慶, 黨軍. 唐古特虎耳草抗肝損傷藥效物質(zhì)基礎(chǔ)研究 [J]. 青?？萍? 2021, 28(2): 34-37.

[13] 楊愛梅, 李玉蘭. 藏藥甘青虎耳草化學成分研究 [J]. 中華中醫(yī)藥雜志, 2011, 26(9): 1975-1977.

[14] Yang A M, Wu R, Li J Y,. Chemical constituents of[J]., 2013, 781-784: 2289-2291.

[15] Yang A M, Wu R, Yuan H J,. Chemical constituents of[J]., 2015, 51(2): 330-331.

[16] Yang A M, Ma S Y, Wu R,. Flavonoids of[J]., 2017, 53(3): 551-552.

[17] Yang A M, Qi G Y, Zheng Z S,. Chemical constituents of[J]., 2018, 54(4): 757-759.

[18] Yang A M, Yang K, Shang H L,. Chemical constituents of[J]., 2022, 58(6): 1143-1145.

[19] Jiang W, Fei Y, Du X L,. Saxifraganoids A and B, two novel cucurbitane triterpenoid glycosides fromvar.[J].2017, 58: 3541-3544.

[20] Jiang W, Wu R, Ren G,. Two olean-27-carboxylic acid-type triterpenoids as chemical markers isolated from[J]., 2022, 19(4): e202100902.

[21] Huang J, Chen D L, Liu M Y,. Seven new phenylhexanoids with antioxidant activity fromvar.[J]., 2023, 28(9): 3928.

[22] 左國營, 張志軍, 陳麗蓉, 等. 藏藥黑蕊虎耳草的化學成分 [J]. 云南植物研究, 2005, 27(6): 691-694.

[23] Liu J X, Di D L, Shi Y P. Diversity of chemical constituents fromH.[J]., 2008, 55(4): 863-870.

[24] Dawa Y, Du Y R, Wang Q,. Targeted isolation of 1, 1-diphenyl-2-picrylhydrazyl inhibitors fromusing medium- and high- pressure liquid chromatography combined with online high performance liquid chromatography-1, 1-diphenyl-2-picrylhydrazyl detection [J]., 2021, 1635: 461690.

[25] 王日康, 杜小浪, 慕澤涇, 等. 3種虎耳草屬藥材提取物對CCl4致小鼠急性肝損傷防治作用的比較 [J]. 中成藥, 2018, 40(7): 1595-1599.

[26] 李姍姍, 李博, 張壽文, 等. 藏藥“蒂達”的6種主要基原植物提取物對急性肝內(nèi)膽汁淤積小鼠藥理作用的比較研究 [J]. 中藥新藥與臨床藥理, 2017, 28(3): 314-319.

[27] 曲揚, 劉超, 任欣宇, 等. 黃絲郁金的化學成分 [J]. 中國藥科大學學報, 2013, 44(3): 207-209.

[28] Kikuzaki H, Tsai S M, Nakatani N. Gingerdiol related compounds from the rhizomes of[J]., 1992, 31(5): 1783-1786.

[29] Soberón J R, Sgariglia M A, Sampietro D A,. Purification and identification of antibacterial phenolics fromleaves [J]., 2010, 108(5): 1757-1768.

[30] Nguyen T H T, Pham H V T, Pham N K T,. Chemical constituents fromBacker and theircytotoxicity and acetylcholinesterase inhibitory activities [J]., 2015, 25(11): 2366-2371.

[31] Kou R W, Du S T, Xia B,. Phenolic and steroidal metabolites from the cultivated ediblemushroom and their bioactivities [J]., 2021, 69(2): 668-675.

[32] Ding S S, Zhang C C, Shi W S,. Absolute configuration of two novel compounds from theusing optical rotation, electronic circular dichroism and vibrational circular dichroism [J]., 2016, 57(1): 75-79.

[33] Feng T, Su J, Ding Z H,. Chemical constituents and their bioactivities of “tongling white ginger” () [J]., 2011, 59(21): 11690-11695.

[34] Dehghan H, Salehi P, Amiri M S. Bioassay-guided purification of α-amylase, α-glucosidase inhibitors and DPPH radical scavengers from roots of[J]., 2018, 117: 303-309.

[35] OwenR W, Haubner R, Mier W,. Isolation, structure elucidation and antioxidant potential of the major phenolic and flavonoid compounds in brined olive drupes [J]., 2003, 41(5): 703-717.

[36] Jutiviboonsuk A, Zhang H J, Tan G T,. Bioactive constituents from roots of[J]., 2005, 66(23): 2745-2751.

[37] Lai Y C, Chen C K, Lin W W,. A comprehensive investigation of anti-inflammatory diarylheptanoids from the leaves of[J]., 2012, 73(1): 84-94.

[38] Novakovi? M, Stankovi? M, Vu?kovi? I,. Diarylheptanoids frombark and their chemoprotective effect on human lymphocytes DNA [J]., 2013, 79(6): 499-505.

[39] Li J, Liao C R, Wei J Q,. Diarylheptanoids fromand their inhibitory activity on nitric oxide production in lipopolysaccharide-activated macrophages [J]., 2011, 21(18): 5363-5369.

[40] Tung N H, Kim S K, Ra J C,. Antioxidative and hepatoprotective diarylheptanoids from the bark of[J]., 2010, 76(6): 626-629.

[41] 馮文明, 韓竹箴, 王崢濤. 山藥化學成分研究 [J]. 中草藥, 2018, 49(21): 5034-5039.

[42] Ibrahim S R M, Fouad M A, Abdel-Lateff A,. Alnuheptanoid A: A new diarylheptanoid derivative from[J]., 2014, 28(20): 1765-1771.

[43] 巴寅穎, 劉倩穎, 石任兵, 等. 鬼箭羽中黃酮類化學成分研究 [J]. 中草藥, 2012, 43(2): 242-246.

[44] Miliauskas G, van Beek T A, Venskutonis P R,. Antioxidant activity of[J]., 2004, 84(15): 1997-2009.

[45] Fukunaga T, Nishiya K, Kajikawa I,. Chemical studies on the constituents ofHosokawa from different host trees [J]., 1988, 36(3): 1180-1184.

[46] Wang Q, Xu D R, Shi X H,. Flavones fromBunge [J]., 2009, 7(5): 361-364.

[47] Lee J I, Kong C S, Jung M E,. Antioxidant activity of the halophyteand its major active components [J]., 2011, 16(5): 992-999.

[48] Foo L Y, Lu Y, Molan A L,. The phenols and prodelphinidins of white clover flowers [J]., 2000, 54(5): 539-548.

[49] 楊佳倩, 賀文軍, 譚寧華, 等. 頭花馬先蒿和管花馬先蒿的化學成分 [J]. 天然產(chǎn)物研究與開發(fā), 2009, 21(4): 600-603.

[50] Nguyen T H T, Pham N K T, Pudhom K,. Structure elucidation of four new megastigmanes fromBacker [J]., 2014, 52(12): 795-802.

[51] Huang H C, Huang G J, Liaw C C,. A new megastigmane fromtubiflora (Harvey) Hamet [J]., 2013, 6(3): 379-382.

[52] Kim K H, Clardy J, Senger D,. Chakyunglupulins A and B, two novel 4, 8, 8-trimethylcyclooct-2-enone derivatives from[J]., 2015, 56(21): 2732-2734.

[53] Thieme H, Walewska E, Winkler H J. Isolation of rhododendrine from-varieties [J]., 1969, 24(10): 648.

[54] ChevalleyI, MarstonA, HostettmannK. New phenolic radical scavengers from[J]., 2000, 38(3): 222-228.

[55] 吳杰, 李丹, 沈秉正, 等. 姜黃素類化合物的藥理活性研究進展 [J]. 中國藥師, 2013, 16(12): 1918-1920.

[56] Bohm B A, Bhat U G, Miller J M. Further studies of flavonoids in[J]., 1984, 12(4): 367-368.

[57] 黨軍, 陶燕鐸, 王啟蘭, 等. 黑虎耳草中天然自由基清除劑的分離制備工藝及其應(yīng)用: 中國, CN111171042B [P]. 2021-05-28.

Chemical constituents of n-butanol fraction ofvar.

XIANG Lun1, LI Wenyan2, HUANG Huilian2, REN Gang1, ZHU Meining1, QIU Jiamu3, PU Chi3, LIU Liyi2, HUANG Lingling2, TANG Yiqin2, ZHONG Guoyue1, LUO Guangming2, JIANG Wei1

1. Research Center for Traditional Chinese Medicine Resources and Ethnic Minority Medicine, Jiangxi University of Chinese Medicine, Nanchang 330004, China 2. School of Pharmacy, Jiangxi University of Chinese Medicine, Nanchang 330004, China 3. University of Tibetan Medicine, Lhasa 850000, China

To investigate the chemical constituents ofvar.(SUP).-butanol fraction of SUP extract was isolated and purified by a variety of chromatographic methods including silica gel, Sephadex LH-20 gel and semi-preparative HPLC. And the isolated compoundsstructures were elucidated through the analysis of their physico-chemical properties combined with the modern spectroscopic techniques, such as UV, IR, NMR and MS,.A total of 31 compounds were isolated. They were identified as (2,4)-6-(4-hydroxyphenyl)hexane-2,4-diol (1), (4)-6-(3,4- dihydroxyphenyl) hexane-4-ol (2), (2)-6-(3,4-dihydroxyphenyl)-2-hydroxyhexan-4-one (3), 6-(4-hydroxyphenyl)hexane-2,4-diol (4), ()9, 10-dihydroxy-phenylhex-2-en-4-one (5), rhododendrin (6),-coumaric acid (7), 3-(4-hydroxyphenyl)propanoic acid (8), isolariciresinol (9), (5)-5-butynoxy-7-(3,4-dihydroxyphenyl)-1-(4-hydroxyphenyl)heptan-3-one (10), (5)-5-Butyloxy-1,7- di(4-hydroxyphenyl)-3-heptanone (11), 1-(4-hydroxyphenyl)-7-(3,4-dihydroxyphenyl)-5βglucopyranosyl-heptan-3-one (12), 5-hydroxy-1-(4-hydroxyphenyl)-7- (3,4-dihydroxyphenyl)-3-heptanone (13), alusenone (14), platyphyllenone (15), hannokinol (16), alnuheptanoid A (17), 5-hydroxy-1,7-bis(4-hydroxyphenyl)-3-heptanone (18), quercetin 3,7-diα--rhamnoside (19), kaempferol 3,7α--dirhamnopyranoside (20), hyperoside (21), rhamnetin-3galactopyranoside (22), rhamnetin-3rhamnoside (23), quercitrin (24), myricetin-3βgalactopyranoside (25), kaempferol 3(6-acetyl)-βgalactopyranoside (26), quercetin (27), vomifoliol (28), 8,9-dihydromegastigmane-4,6-diene-3-one (29), tubiflorone (30), chakyunglupulin A (31).Compounds 1—3 are new compounds, sequentially named as saxiphenadiol, saxifraphenol, and ()-inonophenol A. Compounds 4, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 17—20, 22, 23, 26, and 28—31 were isolated from Genusfor the first time. Compounds 6, 7, 12, 14, 15, 16, 24 and 25 were isolated fromvar.for the first time. Compounds 10 and 11 are the butylated artificial substances produced during the extraction. Furthermore, the above-mentioned flavonoids, diphenylheptanes, monophenyls, and cycloenes have certain chemical taxonomic value in plants of the genus.

Hook. f. et Thoms.var.(Marquand et Airy-Shaw) J. T. Pan; saxiphenadiol; saxifraphenol; ()-inonophenol A; 3-(4-hydroxyphenyl)propanoic acid; isolariciresinol; kaempferol 3(6-acetyl)-βgalactopyranoside

R284.1

A

0253 - 2670(2024)08 - 2510 - 14

10.7501/j.issn.0253-2670.2024.08.002

2024-01-15

國家自然科學基金地區(qū)基金資助項目（82260825）；江西中醫(yī)藥大學校級科技創(chuàng)新團隊發(fā)展計劃（CXTD22002）

向 倫，男，碩士研究生，從事中藥學研究。E-mail: 1950512428@qq.com

通信作者：蔣 偉，男，副教授，從事中藥與民族藥藥效物質(zhì)與質(zhì)量標準研究。E-mail: jiangwei001@jxutcm.edu.cn

羅光明，男，教授，從事中藥藥效物質(zhì)與質(zhì)量標準研究。E-mail: jzlgm88@163.com

[責任編輯 王文倩]