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      黑果花楸果酒中活性成分的分析

      2024-02-16 00:00:00李斌孫麗陽(yáng)徐麗麗羅維巍呂琳琳李鐵純刁全平
      遼寧化工 2024年12期
      關(guān)鍵詞:原酸腺肋原兒茶酸

      摘 """""要: 采用GC-MS法和HPLC法分別測(cè)定黑果花楸果酒中揮發(fā)性和非揮發(fā)性成分。以乙醚-正戊烷(體積比1∶1)作為提取溶劑,采用液液萃取法提取樣品中的揮發(fā)性成分,利用GC-MS法對(duì)其進(jìn)行分析檢測(cè)。樣品中共檢測(cè)出46種揮發(fā)性成分,其中酯類15種、醇類6種、酸類8種、芳香類化合物8種。采用HPLC法測(cè)定黑果花楸果酒的非揮發(fā)性成分,檢測(cè)出原兒茶酸、新綠原酸、綠原酸、咖啡酸和槲皮素,其含量質(zhì)量分?jǐn)?shù)分別為73"μg·g-1、152"μg·g-1、67"μg·g-1、92"μg·g-1和、101"μ"μg··g-1。

      關(guān) "鍵 "詞:黑果花楸果酒;"活性成分;"GC-MS;"HPLC

      中圖分類號(hào):O656.31 """""文獻(xiàn)標(biāo)志碼:A """""文章編號(hào):1004-0935(2024)0×12-1975-04

      黑果花楸全稱黑果腺肋花楸,別稱野櫻莓、不老莓,是集食用、藥用、園林和生態(tài)價(jià)值于一身的薔薇科花楸屬灌木[1-2]。黑果花楸中富含多種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),如天然多糖、葡萄糖、甘露糖等,這些物質(zhì)具有很強(qiáng)的活性,可以被人體吸收并盡快為人體補(bǔ)充能量,能增強(qiáng)人體的非特異性免疫功能。黑果花楸富含黃酮、花青素和多酚等物質(zhì)[3-7],其提取物對(duì)治療心臟病、高血壓等心腦血管疾病有特效[8]

      香氣是水果及果酒感官品質(zhì)的重要組成部分[9],與普通的白酒和啤酒相比,用果實(shí)釀造的果酒具有豐富的多酚類化合物,抗氧化能力較強(qiáng)[10]。不同品種水果香氣不同,同一原材料采用不同發(fā)酵工藝或不同酒曲發(fā)酵得到的香氣也會(huì)產(chǎn)生差異,同種工藝生產(chǎn)的果酒年份不同香氣也不相同[11-12]。目前,關(guān)于黑果花楸果酒中活性成分的研究尚未見(jiàn)文獻(xiàn)報(bào)道。

      采用液-液萃取法提取黑果花楸果酒樣品中的揮發(fā)性成分,利用GC-MS法對(duì)其揮發(fā)性成分進(jìn)行分析,利用HPLC法測(cè)定其非揮發(fā)性成分,建立黑果花楸果酒活性成分的檢測(cè)方法,為產(chǎn)品的生產(chǎn)和標(biāo)準(zhǔn)化提供技術(shù)支持。

      1 "材料和實(shí)驗(yàn)部分

      1.1 "樣品來(lái)源

      研究中的黑果花楸果酒樣品由遼寧騰鰲酒業(yè)有限公司提供。

      1.2""材料和試劑

      槲皮素、新綠原酸、綠原酸、咖啡酸、原兒茶酸對(duì)照品均購(gòu)自上海麥克林生化科技有限公司。乙醚、正戊烷為分析純,乙腈為色譜純,水為超純水。

      1.3""儀器與設(shè)備

      Agilent"8890-7000D型氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀,安捷倫科技有限公司;N-1300型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器,東京理化器械株式會(huì)社;WP-UP-11-10型實(shí)驗(yàn)室專用超純水機(jī),四川沃特爾水處理設(shè)備有限公司;1525型高效液相色譜儀,配2996型二極管陣列檢測(cè)器,美國(guó)Waters公司;AL-204電子天平,梅特勒-托利多儀器(上海)有限公司。

      1.4""實(shí)驗(yàn)方法

      1.4.1 "黑果花楸果酒樣品中揮發(fā)性成分的測(cè)定

      1.4.1.1 "揮發(fā)性成分的提取

      取樣品20 mL,用20 mL乙醚-正戊烷(體積比1∶1)混合溶液萃取3次,將混合萃取液在25 ℃下蒸發(fā)濃縮至0.5 mL[13],4"℃冷藏,待測(cè)。

      1.4.1.2""GC-MS測(cè)定條件

      GC測(cè)定條件:色譜柱為HP-FFAP彈性石英毛細(xì)管柱,30 mm×0.20 mm×0.33 μm;進(jìn)樣口溫度為 250 ℃;初始溫度80 ℃,以10 ℃·min-1的速率升溫到240 ℃,保持5 min;載氣為高純He,載氣流速為1 mL·min-1;分流比為20∶1;進(jìn)樣量為0.1 μL。

      MS測(cè)定條件:離子源為電子轟擊離子源,溫度為230 ℃;電子能量為70 eV;電子倍增器電壓為1 988 V;發(fā)射電流為34.6 μA;接口溫度為230 ℃;掃描質(zhì)量范圍m/z=20~500;溶劑的延遲時(shí)間為3 min。

      1.4.1.3 "樣品測(cè)試

      按照步驟1.4.1.2中GC-MS條件對(duì)樣品進(jìn)行測(cè)試。

      1.4.2 "黑果花楸果酒樣品中非揮發(fā)性成分的測(cè)定

      1.4.2.1 "對(duì)照品溶液的配制

      精密稱取原兒茶酸、槲皮素、綠原酸、新綠原酸和咖啡酸對(duì)照品,質(zhì)量分別為3.0、3.0、3.3、3.5、3.6 mg,用甲醇溶解并定容于50 mL容量瓶中,混合均勻,得到各組分質(zhì)量濃度分別為0.060、0.060、0.066、0.070、0.072 mg·mL-1的混合對(duì)照品溶液。

      1.4.2.2 "HPLC測(cè)定條件

      色譜柱為Supersil ODS2"C18柱(250 mm×╳4.6 mm,5"μm);流動(dòng)相A為乙腈,流動(dòng)相B為0.1 %磷酸水溶液。洗脫程序:A(0~1 min,16%;"1~4 min,16%~24%;4~11 min,24%;11~21 min,24%~64%; 21~28 min,64%;28~35 min,64%~16%);柱溫為30"℃;流速為1.0 mL·min-1;進(jìn)樣量為10 μL。

      1.4.2.3 "樣品測(cè)試

      按照步驟1.4.2.2中HPLC條件對(duì)樣品進(jìn)行測(cè)試。

      2 "結(jié)果與討論

      2.1 "黑果花楸果酒樣品中揮發(fā)性成分分析

      黑果花楸果酒樣品中揮發(fā)性成分的總離子流圖如圖1所示,樣品中揮發(fā)性成分分析結(jié)果分析結(jié)果如見(jiàn)表1所示。

      由表1可知,從樣品中共檢測(cè)出46種揮發(fā)性成分,其中包括2種烯類,、3種烷類,、15種酯類,、6種醇類,、8種芳香類,、2種醛類,、8種酸類,、1種酚類,、1種胡蘿卜素。

      2.2 "黑果花楸果酒樣品中非揮發(fā)性成分分析

      2.2.1 "樣品及對(duì)照品的色譜圖分析

      樣品和對(duì)照品的色譜圖如圖2所示。

      2.2.2 "線性關(guān)系考察

      分別精密移取混合對(duì)照品溶液0.1、0.5、1.0、1.5、3.0、5.0、10.0 mL,用甲醇定容于10 mL容量瓶中,混合均勻,得到梯度對(duì)照品溶液。繪制5種多酚類化合物的標(biāo)準(zhǔn)曲線,結(jié)果如表2所示。

      2.2.3 "重復(fù)性實(shí)驗(yàn)

      精密移取樣品6份,按照1.4.2.2項(xiàng)測(cè)試,經(jīng)計(jì)算,5種多酚類化合物的RSD均小于1.37%,說(shuō)明實(shí)驗(yàn)的重復(fù)性較好。

      2.2.4 "精密度實(shí)驗(yàn)

      樣品按照1.4.2.2項(xiàng)測(cè)試,重復(fù)進(jìn)樣6次,經(jīng)計(jì)算,5種多酚類化合物的RSD均小于0.96%,說(shuō)明實(shí)驗(yàn)的精密度較好。

      2.2.5 "樣品質(zhì)量分?jǐn)?shù)測(cè)定

      對(duì)黑果花楸果酒樣品進(jìn)行測(cè)定,計(jì)算其中多酚類化合物的質(zhì)量分?jǐn)?shù)。經(jīng)計(jì)算,樣品中原兒茶酸、新綠原酸、綠原酸、咖啡酸和槲皮素的質(zhì)量分?jǐn)?shù)分別為73、152、67、92、101 μg·g-1,5種化合物的回收率為99.39%~100.97%。

      2.3 "結(jié)果分析

      從結(jié)果可以看出,黑果花楸果酒中揮發(fā)性成分含有酯類、酸類和醇類,其中酯類占比最多,其次是酸類和醇類,此外還有少量酚類和芳香類物質(zhì)。非揮發(fā)性成分中原兒茶酸、新綠原酸、綠原酸、咖啡酸和槲皮素等5種多酚類化合物的質(zhì)量分?jǐn)?shù)均較可觀。

      3 "結(jié)"論

      黑果花楸具有較高的藥用價(jià)值、食用價(jià)值和商業(yè)價(jià)值,果實(shí)內(nèi)含有多種對(duì)人體有益的成分,具有較好的開發(fā)前景。研究結(jié)果表明,用黑果花楸果實(shí)釀造的果酒中揮發(fā)性成分種類較多,風(fēng)味獨(dú)特。檢測(cè)出多種非揮發(fā)性有效成分,如原兒茶酸、新綠原酸等,具有抗氧化和活血化瘀的功效。這些多酚類物質(zhì)的存在,為開發(fā)黑果花楸作為釀酒原料提供一定的依據(jù)和支持。

      參考文獻(xiàn):

      [1]"孫怡,,邢麗穎,,李艷林,,等.黑果腺肋花楸成分活性及質(zhì)量評(píng)價(jià)方法的研究進(jìn)展[J].食品研究與開發(fā),,2022,,43((05))::217-224.

      [2] 趙明優(yōu).黑果腺肋花楸的應(yīng)用價(jià)值[J].果樹實(shí)用技術(shù)與信息,,2020,((03))::44-46.

      [3] 王亞菲,,杜琳,,潘勇韜,,等.黑果腺肋花楸多酚提取工藝優(yōu)化及其抗氧化性研究[J].食品工業(yè),,2024,,45((01))::46-51.

      [4]"胡樂(lè)妍,,夏祎琳,,劉賀,,等.黑果腺肋花楸果實(shí)總黃酮的抗氧化活性探究[J].中國(guó)林副特產(chǎn),,2023,((04))::"4-6,8.

      [5]"楊俊峰,,沈越,,張耀丹,,等.黑果腺肋花楸花青素理化性質(zhì)及抗氧化活性研究[J].中國(guó)調(diào)味品,,2023,,48((11))::190-195.

      [6]"楊承恩,,李萌,,盧秋宇,,等.FTIR結(jié)合ELM對(duì)黑果腺肋花楸黃酮、多糖含量快速預(yù)測(cè)[J].光譜學(xué)與光譜分析,,2024,,44((01))::62-68.

      [7]"陳浩,,王曉林,,鐘方麗,,等.柱層析提取黑果腺肋花楸果多種活性成分及體外活性研究[J].吉林化工學(xué)院學(xué)報(bào),,2023,40(11)::7-14.

      [8] 劉君宇,,王曉林,,鐘方麗,,等.柱層析提取黑果腺肋花楸原花青素、維生素C及體外活性研究[J].綿陽(yáng)師范學(xué)院學(xué)報(bào),,2024,,43((02))::""""56-62.

      [9]"周怡曉,,張笑穎,,馬芯迎,,等.黑果花楸風(fēng)味白酒揮發(fā)性成分的分析[J]. 遼寧化工,,2024,,53((01))::166-169.

      [10]"魏春雨.黑果腺肋花楸酒釀造工藝的研究[D]."無(wú)錫:江南大學(xué),,2021.

      [11]"殷俊偉,,龔霄,,王曉芳,,等.紅心火龍果果酒揮發(fā)性成分分析[J].中國(guó)釀造,,2016,,35((09))::159-162.

      [12] 陳彥輝,,董建方,,朱銀龍,,劉樂(lè),馬艷,黨文宏,馮天霞等.黑果花楸枸杞混釀酒釀造工藝研究[J].釀酒科技,,2023((01))::45-50.

      [12] 侯冬巖,,李鐵純,,刁全平,,等.騰鰲老窖白酒風(fēng)味成分組成的分析[J].鞍山師范學(xué)院學(xué)報(bào),,2019,,21((06))::32-38.

      [13] 侯冬巖,,李鐵純,,刁全平,,等.固相萃取-氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用分析冰葡萄酒的香氣成分[J].鞍山師范學(xué)院學(xué)報(bào),,2018,,20((02))::44-47.

      Analysis of Active Constituents in Aronia Melanocarpa Fruit Wine

      LI Bin1,2, SUN Liyang1,2, XU Lili3, LUO Weiwei1,2, LV LYU"Linlin1,2, LI Tiechun1,2, DIAO Quanping1,2*

      (1. School of Chemistry and Life Science, Anshan Normal University, Anshan Liaoning 114007, China;2. Liaoning Key Laboratory of Development and Utilization for Natural Products Active Molecules,Anshan Liaoning 114007, China;"3. Weifang Biomedical Industrial Park Service Center, Weifang Shandong 261000, China)

      Abstract:"GC-MS and HPLC methods were used"to respectively determine the volatile and non-volatile components in Aronia melanocarpa"fruit wine."Ether and n-pentane (volume ratio 1∶1) as the extraction solvent, the volatile components in the sample were extracted using liquid-liquid extraction method, and were analyzed by GC-MS"method. A total of 46 volatile components were detected in the sample, including 15 kinds of esters, 6 kinds of alcohols, 8 kinds of acids and 8 kinds of aromatic compounds. HPLC method was used to determine the non-volatile components of sample. The mass"fractions of protocatechuic acid, neochlorogenic acid, chlorogenic acid, caffeic acid and quercetin were 73,152,67,92,101 μg·g-1,respectively.

      Key words:"Aronia"melanocarpa fruit wine; Active constituents; GC-MS; HPLC

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