我國(guó)多地區(qū)獻(xiàn)漿者總蛋白水平調(diào)查

高陽(yáng) 周蓉 楊洪芳 韓鯉伊 黃榮 杭燕 董德梅

（1.北京天壇生物制品股份有限公司，北京 100000；2.成都蓉生藥業(yè)有限責(zé)任公司；3.十堰市鄖陽(yáng)區(qū)單采血漿站有限公司；4.常熟市白茆單采血漿有限責(zé)任公司）

總蛋白是生物體的基本組成成分之一，是人體含量最高的生物大分子，約占人體固有成分的45%，有10 萬(wàn)多種。機(jī)體攝取外源性的蛋白質(zhì)，經(jīng)過(guò)胃腸道消化為氨基酸，在腸道中吸收入血，經(jīng)門靜脈系統(tǒng)進(jìn)入肝臟，在多種酶的作用下重新合成蛋白質(zhì)[1]。人體總蛋白可分為白蛋白和球蛋白2 大類，在機(jī)體中具有維持血液正常膠體滲透壓和pH、運(yùn)輸多種代謝物、免疫以及營(yíng)養(yǎng)等多種重要的生理功能[2]。國(guó)內(nèi)外均有文獻(xiàn)報(bào)道血漿總蛋白水平較血清總蛋白水平高，但研究標(biāo)本量均不大（200 例左右）。由于我國(guó)各地區(qū)所處地理環(huán)境不同，人群生活習(xí)慣不同，飲食結(jié)構(gòu)不同，故人群總蛋白水平可能存在地域差異。有研究顯示總蛋白水平無(wú)男女性別差異，但是該研究為某一地區(qū)調(diào)查結(jié)果，可能存在一定的局限性[3]。之前國(guó)內(nèi)外均未有人針對(duì)獻(xiàn)漿者的總蛋白水平進(jìn)行研究分析，對(duì)于獻(xiàn)漿者總蛋白水平是否會(huì)受到捐獻(xiàn)血漿、性別、地域等因素的影響缺少參考依據(jù)。為此，本研究調(diào)查了6個(gè)省/自治區(qū)共11 家單采血漿站共1 373 名獻(xiàn)漿者的血清與血漿總蛋白水平，并根據(jù)不同采血管、不同性別、不同地域等角度進(jìn)行研究分析，可為業(yè)界提供一些參考數(shù)據(jù)，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 對(duì)象與方法

1.1 研究對(duì)象

選取2021 年3—4 月來(lái)自6 個(gè)省/自治區(qū)共11家單采血漿站共1 373名獻(xiàn)漿者。采漿站包括四川省都江堰、簡(jiǎn)陽(yáng)、金堂、南江、通江單采血漿站；甘肅省高臺(tái)單采血漿站；寧夏回族自治區(qū)青銅峽單采血漿站；湖北省老河口、鄖陽(yáng)單采血漿站；江蘇省常熟單采血漿站；江西省宜春?jiǎn)尾裳獫{站。獻(xiàn)漿者均符合國(guó)家衛(wèi)生行政主管部門印發(fā)的《獻(xiàn)血漿者須知》相關(guān)規(guī)定，年齡18～55 周歲（平均43.3 周歲），體重男性（597 名）≥50 kg、女性≥45 kg，采漿間隔在＞14 d，單次采集量為580 mL（600 g），均使用單采血漿機(jī)采集血漿。所有獻(xiàn)漿者均在近半年內(nèi)至少捐獻(xiàn)過(guò)2次血漿。獻(xiàn)血漿者均進(jìn)行過(guò)嚴(yán)格的體檢，無(wú)肝膽疾病及溶血性疾病，無(wú)高血壓、糖尿病、急慢性腎炎、代謝綜合征和心腦血管疾病，既往身體健康，內(nèi)外科檢查均正常。

1.2 試劑與儀器

雙縮脲215500（北京萬(wàn)泰公司，批號(hào)：GG0206A、GG0210A）；校準(zhǔn)品（英國(guó)朗道公司，批號(hào)：1155UE）；質(zhì)控品（英國(guó)朗道公司，批號(hào)：1012UE）。ES-380全自動(dòng)生化分析儀（南京頤蘭貝公司），LD-5M 大容量冷凍離心機(jī)（四川蜀科儀器有限公司）。

1.3 方法

1.3.1 檢測(cè)流程

獻(xiàn)血漿者在捐獻(xiàn)血漿前分別用無(wú)抗凝劑采血管、肝素抗凝采血管、枸櫞酸鈉抗凝采血管（4%枸櫞酸鈉抗凝劑與全血的混合比例約為1∶16）坐位采集空腹靜脈全血，每人采3 管，5 mL/管。3 種血液標(biāo)本5 200×g,離心15 min，立即分離血清和血漿，選取無(wú)黃疸、無(wú)脂血、無(wú)溶血標(biāo)本，吸取上清液用全自動(dòng)生化分析儀對(duì)血清和血漿標(biāo)本進(jìn)行總蛋白檢測(cè)。所有標(biāo)本采集離心后于48 h內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)，若采集當(dāng)日未檢測(cè)，置于2～8℃保存。本實(shí)驗(yàn)使用雙縮脲法檢測(cè)總蛋白，原理見(jiàn)文獻(xiàn)[4]。檢測(cè)前使用英國(guó)朗道校準(zhǔn)品與質(zhì)控品進(jìn)行校準(zhǔn)與質(zhì)控檢測(cè)，確保實(shí)驗(yàn)受控有效。

1.3.2 研究對(duì)象分組

1）獻(xiàn)漿者按照采血管內(nèi)抗凝劑的類型分為無(wú)抗凝(血清)組、肝素抗凝組、枸櫞酸鈉抗凝組。2）無(wú)抗凝(血清)組與肝素抗凝組按性別將獻(xiàn)漿者分為男性組（597人）與女性組（776人）。3）獻(xiàn)漿者按照地域分組，由于有些省份數(shù)據(jù)量較少故歸入鄰近省份，寧夏回族自治區(qū)組歸入甘肅組，江蘇省、江西組歸入湖北組，最終（剔除異常值后）分為3 組：四川組（748人）、甘肅組（167人）、湖北組（458人）。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

采用SPSS24 軟件做數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)。3 種采血管比較采用多個(gè)獨(dú)立樣本的秩和檢驗(yàn)Kruskal-Wallis檢驗(yàn)，再進(jìn)行兩兩比較。不同性別比較采用獨(dú)立樣本T檢驗(yàn)，不同地域比較采用Welch方差分析，再采用Games-Howell 檢驗(yàn)，進(jìn)行兩兩比較，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 不同采血管獻(xiàn)漿者總蛋白比較見(jiàn)表1。

表1 不同采血管獻(xiàn)漿者總蛋白比較Table 1 Comparison of total protein of plasma donors from different groups

2.2 不同性別獻(xiàn)漿者總蛋白比較

依據(jù)表1 結(jié)果枸櫞酸鈉抗凝組與無(wú)抗凝（血清）組和肝素抗凝組結(jié)果比較有差異（P＜0.05），不同性別獻(xiàn)漿者總蛋白比較只納入無(wú)抗凝（血清）組與肝素抗凝組，見(jiàn)表2。

表2 不同性別獻(xiàn)漿者總蛋白比較Table 2 Comparison of total protein between different genders

2.3 不同地域獻(xiàn)漿者總蛋白比較

依據(jù)業(yè)內(nèi)大部分實(shí)驗(yàn)室采用血清檢測(cè)總蛋白水平，故僅用無(wú)抗凝劑的血清總蛋白水平進(jìn)行比較，見(jiàn)表3。

表3 不同地域獻(xiàn)漿者總蛋白比較Table 3 Comparison of total protein of plasma donors from different regions

3 討論

多地區(qū)1 373名健康定期獻(xiàn)漿者的血清總蛋白水平中位數(shù)為73.1 g/L，這與WS/T 404《臨床常用生化檢驗(yàn)項(xiàng)目參考區(qū)間》[5]中給出的我國(guó)血清總蛋白參考值范圍（65～85）g/L 相符合。說(shuō)明按照國(guó)家衛(wèi)生行政部門印發(fā)的《獻(xiàn)血漿者須知》要求，符合獻(xiàn)漿條件的獻(xiàn)漿者不會(huì)由于捐獻(xiàn)血漿導(dǎo)致體內(nèi)總蛋白水平異常，因?yàn)楦闻K是合成蛋白質(zhì)的重要器官，具有較強(qiáng)的代償功能，可以合成白蛋白、糖蛋白、脂蛋白、凝血因子以及各種轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白等，捐獻(xiàn)血漿后，蛋白質(zhì)水平降低，肝臟啟動(dòng)代償功能，迅速合成人體所需各種蛋白質(zhì)。

本研究調(diào)查顯示肝素抗凝組總蛋白水平略高于無(wú)抗凝（血清）組。2002 年世界衛(wèi)生組織(WHO)調(diào)查發(fā)現(xiàn)，大部分實(shí)驗(yàn)室首選血漿標(biāo)本用于檢測(cè)總蛋白含量，因?yàn)檠獫{中的成分比血清中的成分更能反應(yīng)患者的情況，但也有些實(shí)驗(yàn)室選擇血清樣本[6]。據(jù)報(bào)道，堿性磷酸酶、鈣、二氧化碳、氯、肌酸激酶、乳酸脫氫酶、葡萄糖、無(wú)機(jī)磷、鉀和總蛋白水平血清與血漿檢測(cè)結(jié)果有顯著差異[7-8]。Lum 等[9]分析了120份標(biāo)本得出血清中總蛋白的平均值為72.1 g/L，而肝素抗凝血漿中總蛋白水平為74.5 g/L (P＜0.05)，與Ladenson等[10]報(bào)告的血清和血漿中總蛋白水平分別為72.9 g/L、75.8 g/L(P＜0.05）結(jié)果類似。血清與血漿的區(qū)別在于血漿含有纖維蛋白原而血清沒(méi)有，因?yàn)檠逯欣w維蛋白原與血液中紅細(xì)胞、白細(xì)胞和血小板結(jié)合轉(zhuǎn)化為纖維蛋白凝塊，因此血清中不含有纖維蛋白原[11]。血漿中因含有纖維蛋白原而血清中沒(méi)有的緣故，肝素抗凝血漿總蛋白含量高于血清，這與前面文獻(xiàn)報(bào)道相符。雖然血漿含有纖維蛋白，而血清沒(méi)有，但血清中特種蛋白如轉(zhuǎn)鐵蛋白、觸珠蛋白、α-1抗胰蛋白酶、C3、IgG、IgM和IgA、血管細(xì)胞粘附分子1（VCAM-1）、表皮生長(zhǎng)因子(EGF)、血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子A(VEGF-A)和抵抗素等濃度高于血漿[12]，但因?yàn)檫@些特種蛋白在血清中總含量較低，故對(duì)總蛋白含量影響不大。枸櫞酸鈉抗凝組總蛋白含量低于無(wú)抗凝（血清）組和肝素抗凝組的可能原因是，枸櫞酸鈉抗凝劑溶液與全血約按1∶16 比例混合，標(biāo)本中總蛋白被抗凝劑溶液稀釋，故導(dǎo)致總蛋白水平降低，因此不推薦使用枸櫞酸鈉抗凝管采集全血用于總蛋白或其他生化項(xiàng)目的檢測(cè)。

本研究結(jié)果顯示血清總蛋白水平女性高于男性，可能是因?yàn)榕郧虻鞍赘哂谀行?。有?bào)道白蛋白男性高于女性，除了男性蛋白質(zhì)攝入量多于女性，還可能與性激素影響血清蛋白質(zhì)合成有關(guān)，雄激素可促進(jìn)蛋白質(zhì)合成[13]。也有研究證明，女性球蛋白高于男性，其原因可能與女性機(jī)能有關(guān)，女性易感因素多于男性，而易感因素刺激機(jī)體產(chǎn)生球蛋白，提高機(jī)體免疫力[14]。總蛋白由白蛋白和球蛋白組成，白蛋白占血漿總蛋白的40%～60%，球蛋白占總蛋白的30%～50%，白球比值（A/G）一般為1.5～2.5，故如果女性球蛋白水平增高幅度大于男性白蛋白增高幅度，就會(huì)出現(xiàn)女性總蛋白水平高于男性總蛋白水平。

總體來(lái)看，南方地區(qū)獻(xiàn)漿者的總蛋白水平高于北方地區(qū)，本研究中湖北組總蛋白最高，其次四川組，最后甘肅組，兩兩比較，湖北組與四川組總蛋白水平無(wú)差異，甘肅組與湖北組及四川組有差異，獻(xiàn)漿者的總蛋白水平地域差異可能與不同地區(qū)人群飲食習(xí)慣、生活環(huán)境等相關(guān)。這與之前江硯芳等[15]的研究結(jié)果相符。但本次研究甘肅組人數(shù)少于其他2組，可能對(duì)分析結(jié)果也有一定的影響。

此外，已經(jīng)被證實(shí)總蛋白水平還受體位、年齡、體重、飲食等的影響。李梅等[16]報(bào)告總蛋白與季節(jié)變換有一定的相關(guān)性，總蛋白有冬季高于夏季的變化趨勢(shì)。這可能與不同季節(jié)飲食習(xí)慣、能量代謝等因素相關(guān)，因此應(yīng)該參考多種因素來(lái)分析總蛋白的水平。