Th22、Th17、Treg淋巴細(xì)胞在白癜風(fēng)患者中的表達及其與血清5-HT、MT水平的關(guān)系

郭冰心,田卓,翟翊然

(南陽市中心醫(yī)院 皮膚科,河南 南陽 473000)

白癜風(fēng)是一種常見的后天性限局性或泛發(fā)性皮膚色素脫失病,多數(shù)由皮膚黑素細(xì)胞功能異常引起[1]。目前,臨床上普遍認(rèn)為白癜風(fēng)與患者自身免疫、微量元素缺乏、精神及神經(jīng)化學(xué)等有關(guān),好發(fā)于指、背、顏面、腕、生殖器周圍等,影響患者形象[2-3]。輔助性T淋巴細(xì)胞22(T helper lymphocyte 22,Th22)由朗格漢斯細(xì)胞分化而來,直接參與白細(xì)胞介素-6(interleukin-6,IL-6)及腫瘤壞死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)分化[4-5]。輔助性T淋巴細(xì)胞17(T helper lymphocyte 17,Th17)是CD4+Th淋巴細(xì)胞亞群,具有獨立的分化、發(fā)育機制,能特異性產(chǎn)生IL-17,且在白癜風(fēng)中的作用已經(jīng)有報答,能參與機體免疫調(diào)節(jié)[6]。調(diào)節(jié)性T淋巴細(xì)胞(Treg)在維持機體免疫自穩(wěn)、免疫耐受中發(fā)揮了重要的作用[7]。5-羥色胺(5-hydroxytryptamine,5-HT)的代謝產(chǎn)物直接影響色素脫失,5-HT在白癜風(fēng)發(fā)病過程中存在相關(guān)的癥狀有非常重要的作用,人類皮膚的顏色主要與表皮中黑素細(xì)胞合成黑素以及黑素傳遞至周圍角質(zhì)形成細(xì)胞有關(guān)。酪氨酸酶是黑素合成的關(guān)鍵酶,是黑素細(xì)胞分化成熟的一個特征性標(biāo)志,其活性與黑素合成含量呈正相關(guān),因而增加黑素細(xì)胞數(shù)量、激活酪氨酸酶和加速黑素合成的治療手段對白癜風(fēng)的復(fù)色有治療效果。但是,臨床上對于Th22、Th17及Treg淋巴細(xì)胞在白癜風(fēng)患者中的表達及與血清5-HT、褪黑素(melatonin,MT)水平相關(guān)性研究較少[8-9]。本文采旨在探討Th22、Th17、調(diào)節(jié)性T淋巴細(xì)胞Treg在白癜風(fēng)患者中的表達及與5-HT、MT水平的相關(guān)性。

1 對象與方法

1.1 研究對象

選擇2020年5月至2022年6月醫(yī)院收治的78例白癜風(fēng)患者作為研究對象,作為觀察組,分為活動期白癜風(fēng)(48例)和靜止期白癜風(fēng)(30例),根據(jù)分型分為尋常型白癜風(fēng)(36例)和節(jié)段型白癜風(fēng)(42例)。觀察組男29例,女49例,年齡(24～63)歲,平均(43.98±5.71)歲;病程(12～68)個月,平均(35.71±3.49)個月。選擇同期健康體檢者37例,設(shè)為對照組,男21例,女16例;年齡(25～64)歲,平均(44.11±5.79)歲。觀察組和對照組的一般資料差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。本研究經(jīng)醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會審批。

1.2 納入及排除標(biāo)準(zhǔn)

(1)納入標(biāo)準(zhǔn):符合白癜風(fēng)相關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn)[10];活動期患者近3個月白斑擴大、增多,且具有新發(fā)皮損、邊界模糊。(2)排除標(biāo)準(zhǔn):合并其他皮膚疾病;合并腦血管疾病;合并精神異常;有自身免疫系統(tǒng)疾病;凝血功能異常;近期使用其他方法治療影響預(yù)后評估。

1.3 方法

1.3.1儀器與設(shè)備

酶標(biāo)儀(南京華東電子醫(yī)療設(shè)備有限責(zé)任公司)、臺式自動高速低溫離心機TG16-W(德國Eppendorf公司)、酶聯(lián)免疫吸附試驗試劑盒(天根生化科技有限公司)、超低溫冰箱(美國Termo Forma公司)。

1.3.2標(biāo)本采集及檢測

觀察組次日早晨復(fù)診空腹?fàn)顟B(tài)下取靜脈血3 mL,對照組健康體檢當(dāng)天取空腹靜脈血3 mL,15 min離心,離心力1 184 g,血清分離后放置在-30 ℃冰箱中備用。采用酶聯(lián)免疫吸附試驗測定5-HT、MT水平[11]。采集外周靜脈血,分離外周血單個核細(xì)胞,通過流式細(xì)胞技術(shù)定量分析Th22、Th17等。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法

2 結(jié)果

2.1 Th22、Th17、Treg、5-HT、MT水平

觀察組患者Th22、Th17水平高于對照組(P<0.05),Treg、5-HT、MT水平低于對照組(P<0.05),見表1。

表1 觀察組與對照組Th22、Th17、Treg、5-HT、MT水平比較

2.2 觀察組患者疾病活動期和靜止期Th22、Th17、Treg、5-HT、MT水平

觀察組患者活動期Th22、Th17水平高于靜止期(P<0.05),Treg、5-HT、MT水平低于靜止期(P<0.05),見表2。

表2 觀察組患者疾病活動期和靜止期Th22、Th17、Treg、5-HT、MT水平比較

2.3 觀察組疾病尋常型和節(jié)段型患者IL-22、IL-17、Foxp3、5-HT、MT水平

觀察組尋常型Th22、Th17水平高于節(jié)段型(P<0.05),Treg、5-HT、MT水平低于節(jié)段型(P<0.05),見表3。

表3 觀察組疾病尋常型和節(jié)段型患者IL-22、IL-17、Foxp3、5-HT、MT水平比較

2.4 白癜風(fēng)患者Th22、Th17、Treg水平與5-HT、MT水平相關(guān)性

Pearson相關(guān)性分析結(jié)果顯示患者Th22、Th17與5-HT、MT水平呈負(fù)相關(guān)(P<0.05),Treg水平與5-HT、MT水平呈正相關(guān)(P<0.05),見表4。

表4 白癜風(fēng)患者Th22、Th17、Treg與5-HT、MT水平相關(guān)性分析

3 討論

白癜風(fēng)是臨床上常見的皮膚病,以皮膚黑素細(xì)胞破壞為特征,導(dǎo)致皮損部位黑素細(xì)胞明顯減少或缺失[12]。目前,臨床上對于白癜風(fēng)發(fā)病機制尚不完全知曉,普遍認(rèn)為與自身免疫、黑色細(xì)胞毒性、神經(jīng)體液調(diào)節(jié)及遺傳因素有關(guān)[13]。白癜風(fēng)的發(fā)生是一個多因素過程,常伴有多種免疫細(xì)胞與細(xì)胞因子參與,而細(xì)胞毒T細(xì)胞能通過細(xì)胞凋亡形式破壞黑素細(xì)胞,導(dǎo)致黑素細(xì)胞分化抗原特異性細(xì)胞毒T細(xì)胞免疫破壞[14],但是其具體機制尚未明確。Th22淋巴細(xì)胞是近年來新發(fā)現(xiàn)的CD4+T和淋巴亞群,獨立于Th1、Th2及Th14淋巴細(xì)胞水平[15]。Th22在諸多自身免疫性皮膚病如銀屑病、系統(tǒng)性紅斑狼瘡等發(fā)揮了重要的作用[16]。Th22是一類以IL-22、IL-26、IL-22為主的淋巴細(xì)胞,其在表皮免疫及重構(gòu)中發(fā)揮重要作用,與皮膚疾病的發(fā)生、發(fā)展及皮膚功能平衡有著密切聯(lián)系,在T細(xì)胞介導(dǎo)的皮膚中發(fā)揮了重要的作用。同時,Th22亦可發(fā)揮促進抗微生肽生存、抵抗細(xì)菌或病毒感染作用,能促進角質(zhì)細(xì)胞的增殖。白癜風(fēng)患者Th22水平相對較高,且活動期水平高于靜止期時。尋常型白癜風(fēng)高于節(jié)段型[17]。Th17淋巴細(xì)胞是近年來發(fā)現(xiàn)的一種CD4+T淋巴細(xì)胞。Th17淋巴細(xì)胞在腫瘤、自身免疫性疾病及炎癥等疾病中發(fā)揮了重要的作用[18]。白癜風(fēng)免疫機制相對復(fù)雜,Th17淋巴細(xì)胞能產(chǎn)生并接到IL-17,從而能介導(dǎo)前炎癥反應(yīng)[19]。本次研究結(jié)果顯示白癜風(fēng)患者Th17水平高于正常人群,且活動期高于靜止期,尋常型高于節(jié)段型。Treg淋巴細(xì)胞是一種對機體免疫具有負(fù)性調(diào)節(jié)作用的T淋巴細(xì)胞亞群,在免疫平衡中能發(fā)揮免疫調(diào)節(jié)與監(jiān)控作用。Treg淋巴細(xì)胞能誘發(fā)皮膚黑素細(xì)胞分泌IL-6,從而能引起自身免疫反應(yīng)、炎癥及氧化應(yīng)激機制,能參與白癜風(fēng)的發(fā)生、發(fā)展[20-21]。本研究結(jié)果顯示觀察組白癜風(fēng)患者Th22、Th17水平高于對照組,Treg、5-HT、MT水平低于對照組。觀察組活動期Th22、Th17水平高于靜止期,Treg、5-HT、MT水平低于靜止期。觀察組尋常型Th22、Th17水平高于節(jié)段型,Treg、5-HT、MT水平低于節(jié)段型。

5-HT是一種重要的神經(jīng)遞質(zhì),主要在腦神經(jīng)細(xì)胞內(nèi)合成酶的作用下合成,其合成減少會引起機體免疫及微環(huán)境發(fā)生異常,且在白癜風(fēng)中多呈低表達[22]。MT是5-HT的衍生物,能發(fā)揮免疫調(diào)節(jié)、抗氧化、保持與平衡內(nèi)分泌等多種生理作用。本研究結(jié)果顯示5-HT、MT在白癜風(fēng)患者中均呈低表達,直接參與白癜風(fēng)的發(fā)生、發(fā)展。Pearson相關(guān)性分析結(jié)果顯示白癜風(fēng)患者Th22、Th17與5-HT、MT水平呈負(fù)相關(guān),Treg水平與5-HT、MT水平呈正相關(guān),說明白癜風(fēng)患者伴有免疫功能紊亂,且與5-HT、MT水平存在緊密的聯(lián)系,加強患者5-HT、MT水平及免疫測定能反映患者疾病嚴(yán)重程度,對于確診者應(yīng)及時制定有效的措施干預(yù),且治療期間可加強5-HT、MT水平評估預(yù)后及指導(dǎo)臨床治療[23-24]。

4 結(jié)論

白癜風(fēng)患者中Th22、Th17呈高表達,而Treg淋巴細(xì)胞呈低低表達,且與5-HT、MT水平呈相關(guān)性,能相互促進、相互影響,疾病的進展可能與Th22、Th17、5-HT及MT的表達相關(guān)。