肺炎支原體肺炎合并哮喘患兒血清維生素D、CD5L、補(bǔ)體C3、IgE水平變化及與病情和炎癥反應(yīng)程度的關(guān)系*

覃軍，陳玲，鄧蓉蓉，胡荊江

（長(zhǎng)江大學(xué)附屬荊州醫(yī)院 兒科，湖北 荊州 434020）

哮喘是一種氣道慢性炎癥反應(yīng)性疾病，急性發(fā)作時(shí)可引起患者呼吸困難，反復(fù)發(fā)作可引起氣道重構(gòu)和肺功能下降[1]。肺炎支原體肺炎（mycoplasma pneumoniae pneumonia,MPP）是由肺炎支原體感染所致，好發(fā)于兒童和青少年，可引起陣發(fā)性、刺激性干咳和發(fā)熱。MPP 是哮喘急性發(fā)作的重要誘因，MPP合并哮喘患兒的治療更加棘手[2]。

血清維生素D 不僅是人體必需維生素，還參與調(diào)節(jié)兒童機(jī)體免疫功能[3]。CD5 抗原樣蛋白（CD5 antigen like protein,CD5L）表達(dá)于免疫細(xì)胞表面，與配體結(jié)合后可激活抗原提呈細(xì)胞，參與機(jī)體免疫炎癥反應(yīng)[4]。補(bǔ)體C3 升高常見于急性炎癥、傳染性疾病。免疫球蛋白E（Immunoglobulin E,IgE）介導(dǎo)I 型變態(tài)反應(yīng)，刺激各種細(xì)胞因子、炎性介質(zhì)釋放，引起呼吸道炎癥反應(yīng)[5]。本研究探討MPP 合并哮喘患兒血清維生素D、CD5L、補(bǔ)體C3、IgE 的水平變化及其臨床意義，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

回顧性選取2020年1月—2022年6月長(zhǎng)江大學(xué)附屬荊州醫(yī)院確診的55 例MPP 合并支氣管哮喘患兒為觀察組，另隨機(jī)選取同期來(lái)本院就診的55 例MPP 但無(wú)支氣管哮喘患兒為對(duì)照組。納入標(biāo)準(zhǔn)：①年齡3～12 歲；②支氣管哮喘患兒的診斷標(biāo)準(zhǔn)參考《兒童支氣管哮喘診斷與防治指南（2016年版）》[6]，患兒接受X 射線片、支氣管舒張?jiān)囼?yàn)檢查確診；③MPP 患兒的診斷標(biāo)準(zhǔn)參考《諸福棠實(shí)用兒科學(xué)》[7]，患兒肺炎支原體IgM 抗體（MP-IgM）滴度≥ 1∶80；④患兒在本院全程完成治療。排除標(biāo)準(zhǔn)：①有肺結(jié)核感染；②入院時(shí)患兒已經(jīng)接受激素、茶堿、抗感染藥物相關(guān)藥物治療；③HIV 感染、免疫功能障礙；④伴白血病、心肝腎疾?。虎葜夤芑?、先心??；⑥合并其他系統(tǒng)的重大疾病。兩組性別、年齡、身高、體重、病程比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）（見表1）。本研究經(jīng)醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理學(xué)委員會(huì)批準(zhǔn)，患兒及家屬均簽署知情同意書。

表1 兩組一般資料比較 （n=55）

1.2 方法

1.2.1 肺功能和血清學(xué)檢查于清晨抽取患兒外周血標(biāo)本5 mL，以3 000 r/min 離心10 min。通過(guò)RT-96A 型酶標(biāo)儀（深圳邁瑞生物醫(yī)療電子股份有限公司）采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測(cè)血清的維生素D、CD5L、補(bǔ)體 C3、補(bǔ)體 C4、免疫球蛋白 G（Immunoglobulin G,IgG）、IgM、IgE、、血清腫瘤壞死因子-α（tumor necrosis factor α,TNF-α）、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β1（transforming growth factor-β1,TGF-β1）、基質(zhì)金屬蛋白酶-2（matrix metalloproteinase-2,MMP-2）、MMP-9 水平。試劑盒購(gòu)自上海森雄科技實(shí)業(yè)有限公司。采用肺功能儀（日本CHEST 公司）檢測(cè)患兒用力肺活量（forced vital capacity,FVC）、第1 秒用力呼氣容積（forced expiratory volume in the first second,FEV1）、呼氣流量峰值（percentage of peak expiratory flow rate in predicted value,PEF）。

1.2.2 抗體滴度檢測(cè)于清晨抽取觀察組患兒外周血標(biāo)本2 mL，以3 000 r/min 離心10 min。取血清采用被動(dòng)凝集法檢測(cè)MP-IgM 水平，MP-IgM ≥ 1∶160為高滴度，MP-IgM ≥ 1∶80～＜1∶160 為低滴度，并作為高滴度組和低滴度組，分別有34 和21 例。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

數(shù)據(jù)分析采用SPSS 21.0 統(tǒng)計(jì)軟件。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，比較用t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以率（%）表示，比較用χ2檢驗(yàn)；相關(guān)性分析用Pearson 法。P＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 觀察組與對(duì)照組維生素D、CD5L、補(bǔ)體、免疫球蛋白水平比較

觀察組與對(duì)照組維生素D、CD5L、補(bǔ)體C3、補(bǔ)體C4、IgG、IgM、IgE 水平比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），觀察組維生素D、CD5L 低于對(duì)照組，補(bǔ)體C3、補(bǔ)體C4、IgG、IgM、IgE 高于對(duì)照組。見表2。

表2 觀察組與對(duì)照組維生素D、CD5L、補(bǔ)體、免疫球蛋白水平比較 （n=55，±s）

表2 觀察組與對(duì)照組維生素D、CD5L、補(bǔ)體、免疫球蛋白水平比較 （n=55，±s）

組別觀察組對(duì)照組t 值P 值維生素D/（ng/mL）14.61±3.70 22.67±5.02-9.585 0.000 CD5L/（ng/mL）176.8±19.4 195.0±21.3-4.685 0.000補(bǔ)體C3/（g/L）2.87±0.60 2.34±0.57 4.749 0.000補(bǔ)體C4/（g/L）0.89±0.21 0.63±0.20 6.649 0.000 IgG/（g/L）124.9±17.5 110.2±15.8 4.624 0.000 IgM/（g/L）6.8±1.2 5.4±0.9 6.922 0.000 IgE/（g/L）128.3±16.0 105.7±14.3 7.811 0.000

2.2 觀察組與對(duì)照組肺功能指標(biāo)、炎癥指標(biāo)比較

觀察組與對(duì)照組FVC、FEV1、PEF、TNF-α、MMP-2、MMP-9 水平比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），觀察組FVC、FEV1、PEF 低于對(duì)照組，TNF-α、MMP-2、MMP-9 高于對(duì)照組。觀察組與對(duì)照組TGF-β1水平比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。見表3。

表3 觀察組與對(duì)照組肺功能指標(biāo)、炎癥指標(biāo)比較 （±s）

表3 觀察組與對(duì)照組肺功能指標(biāo)、炎癥指標(biāo)比較 （±s）

組別觀察組對(duì)照組t 值P 值FVC/%70.51±8.83 74.02±7.16-2.290 0.024 FEV1/%66.84±10.20 71.70±9.81-2.547 0.012 PEF/%57.83±7.00 61.04±6.93-2.417 0.017 TNF-α/（pg/mL）44.71±5.96 38.04±8.83 4.643 0.000 TGF-β1/（pg/mL）32.77±5.03 31.42±5.63 1.326 0.188 MMP-2/（ng/L）318.9±76.4 240.3±55.0 6.192 0.000 MMP-9/（ng/L）146.3±34.0 95.6±21.3 9.372 0.000

2.3 高滴度組與低滴度組維生素D、CD5L、補(bǔ)體免疫球蛋白水平比較

、

高滴度組與低滴度組維生素D、補(bǔ)體C3、IgG、IgM、IgE 水平比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），高滴度組維生素D 低于低滴度組，補(bǔ)體C3、IgG、IgM、IgE 高于低滴度組。高滴度組與低滴度組CD5L、補(bǔ)體C4 水平比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。見表4。

表4 高滴度組與低滴度組維生素D、CD5L、補(bǔ)體、免疫球蛋白水平比較 （±s）

表4 高滴度組與低滴度組維生素D、CD5L、補(bǔ)體、免疫球蛋白水平比較 （±s）

組別高滴度組低滴度組t 值P 值n 34 21維生素D/（ng/mL）12.01±3.31 18.82±3.46-7.287 0.000 CD5L/（ng/mL）173.9±18.2 178.6±17.5 0.944 0.349補(bǔ)體C3/（g/L）3.08±0.55 2.74±0.51-2.289 0.026補(bǔ)體C4/（g/L）0.90±0.19 0.87±0.17 0.592 0.557 IgG/（g/L）129.6±16.7 117.3±16.1 2.690 0.010 IgM/（g/L）7.2±1.0 6.1±0.9 4.114 0.000 IgE/（g/L）133.0±14.8 120.7±12.8 3.148 0.003

2.4 高滴度組與低滴度組肺功能指標(biāo)、炎癥指標(biāo)比較

高滴度組與低滴度組FVC、FEV1、PEF、TNF-α、MMP-2、MMP-9 水平比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），高滴度組FVC、FEV1、PEF 低于低滴度組患者，TNF-α、MMP-2、MMP-9 高于低滴度組。高滴度組與低滴度組TGF-β1比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。見表5。

表5 高滴度組與低滴度組肺功能指標(biāo)、炎癥指標(biāo)比較 （±s）

表5 高滴度組與低滴度組肺功能指標(biāo)、炎癥指標(biāo)比較 （±s）

組別高滴度組低滴度組t 值P 值n 34 21 FVC/%68.14±8.13 74.35±7.43-2.842 0.006 FEV1/%64.56±7.81 70.53±8.66-2.642 0.011 PEF/%56.21±5.92 60.45±6.34-2.512 0.015 TNF-α/（pg/mL）46.71±5.47 41.47±5.68 3.402 0.001 TGF-β1/（pg/mL）33.41±4.78 31.73±5.32 1.213 0.231 MMP-2/（ng/L）331.6±60.2 298.3±58.4 2.016 0.049 MMP-9/（ng/L）152.7±29.6 135.9±25.5 2.152 0.036

2.5 相關(guān)性分析

Pearson 相關(guān)性分析顯示，MPP 合并哮喘患兒血清維生素D 與TNF-α、MMP-2 和MMP-9 呈負(fù)相關(guān)（r=-0.471、-0.663 和-0.682，均P=0.000）；CD5L 與TNF-α、MMP-2、MMP-9 呈負(fù)相關(guān)（r=-0.502、-0.610和-0.634，均P=0.000）；TNF-α 與補(bǔ)體C3、補(bǔ)體C4、IgG、IgM、IgE 測(cè)定值水平無(wú)相關(guān)性（r=0.201、0.114、0.238、0.217 和0.226，P=0.181、0.401、0.161、0.174 和0.168）；TGF-β1與維生素D、CD5L、補(bǔ)體C3、補(bǔ)體C4、IgG、IgM、IgE 無(wú)相關(guān)性（r=-0.083、-0.112、0.233、0.172、0.132、0.094 和0.104，P=0.443、0.442、0.154、0.281、0.352、0.382 和0.387）；MMP-2 與補(bǔ)體C3、補(bǔ)體C4、IgG、IgM、IgE 無(wú)相關(guān)性（r=0.182、0.158、0.192、0.216 和0.171，P=0.276、0.317、0.287、0.173 和0.254）；患兒MMP-9 與補(bǔ)體C3、補(bǔ)體C4、IgG、IgM、IgE 無(wú)相關(guān)性（r=0.169、0.134、0.207、0.236 和0.185，P=0.295、0.342、0.178、0.164 和0.231）。

3 討論

MPP 是兒童常見的呼吸道感染性疾病，而哮喘患兒氣道處于高敏狀態(tài)，呼吸道感染可誘發(fā)急性發(fā)作，因此在臨床工作中MPP 合并哮喘的情況并不鮮見，兩種疾病相互影響、相互促進(jìn)，導(dǎo)致病情復(fù)雜化[8]。本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，MPP 合并支氣管哮喘患兒FVC、FEV1、PEF 低于單純MPP 患兒。提示MPP 合并哮喘患兒的肺功能較單純MPP 患兒更差，可能與哮喘反復(fù)發(fā)作引起氣道重構(gòu)、影響肺通換氣功能有關(guān)，這與楊能等[9]的研究結(jié)果一致。

本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，MPP 合并支氣管哮喘患兒維生素D、CD5L 測(cè)定值低于單純MPP 患兒。上述結(jié)果提示，MPP 合并哮喘患兒機(jī)體免疫炎癥反應(yīng)更加嚴(yán)重。維生素D 不僅是人體必需的維生素，還參與機(jī)體免疫調(diào)節(jié)，代樹棟等[10]研究認(rèn)為，支原體肺炎合并哮喘患兒血清維生素D 水平較低。維生素D 及其受體對(duì)免疫反應(yīng)具有雙向調(diào)節(jié)作用，參與維持Th1/Th2平衡，維生素D 水平降低導(dǎo)致這一調(diào)節(jié)作用減弱而易誘發(fā)感染。CD5L 屬于巨噬細(xì)胞凋亡抑制因子，多表達(dá)于巨噬細(xì)胞，其在哮喘、氣道感染等疾病中低表達(dá)，可能在上述疾病的發(fā)病過(guò)程中發(fā)揮重要的作用[11-13]。本研究結(jié)果還發(fā)現(xiàn)，MPP 合并哮喘患兒血清補(bǔ)體C3、補(bǔ)體C4、IgG、IgM、IgE 測(cè)定值及TNF-α、MMP-2、MMP-9 測(cè)定值高于單純MPP 患兒。眾所周知，補(bǔ)體C3、補(bǔ)體C4 是補(bǔ)體系統(tǒng)的重要成分，其增高常見于組織損傷、炎癥性疾病及各種傳染病。孫京煥等[14]研究認(rèn)為，肺炎支原體感染并發(fā)支氣管哮喘患者的補(bǔ)體表達(dá)水平高于單純肺炎患者，與本研究結(jié)果一致。IgG、IgM、IgE 是人體重要的免疫球蛋白，在機(jī)體免疫炎癥反應(yīng)中發(fā)揮重要作用[15-16]。TNF-α 是重要的促炎因子，可引起其他促炎因子釋放，而引起組織炎癥損傷[17-18]。MMP-2、MMP-9 可降解細(xì)胞外基質(zhì)，與氣道重構(gòu)有關(guān)[19-20]。合并哮喘患者本身存在氣道高反應(yīng)性，機(jī)體免疫紊亂狀態(tài)更加嚴(yán)重，因此補(bǔ)體C3、補(bǔ)體C4、IgG、IgM、IgE 及TNF-α水平更高。此外，哮喘反復(fù)發(fā)作時(shí)患兒出現(xiàn)氣道重塑，MMPs 水平也會(huì)升高，同時(shí)伴有細(xì)胞因子和炎性介質(zhì)大量釋放。

本研究對(duì)比了不同滴度MPP 合并支氣管哮喘患兒肺功能及血清指標(biāo)的差異，發(fā)現(xiàn)抗體高滴度組FVC、FEV1、PEF 測(cè)定值低于低滴度組；高滴度組維生素D 測(cè)定值低于抗體低滴度組；抗體高滴度組補(bǔ)體C3、IgG、IgM、IgE 測(cè)定值高于抗體低滴度組；抗體高滴度組TNF-α、MMP-2、MMP-9 測(cè)定值高于抗體低滴度組。結(jié)果提示病毒抗體滴度水平高的患兒肺功能更差，機(jī)體免疫紊亂狀態(tài)更加嚴(yán)重，主要是由于肺炎支原體感染后可損傷氣道上皮細(xì)胞，刺激TNF-α 等促炎因子釋放，激活補(bǔ)體系統(tǒng)，促進(jìn)免疫球蛋白合成，增加氣道高反應(yīng)。

本研究中的相關(guān)性分析結(jié)果表明，MPP 合并哮喘患兒的血清維生素D 與TNF-α、MMP-2、MMP-9呈負(fù)相關(guān)；CD5L 與TNF-α、MMP-2、MMP-9 呈負(fù)相關(guān)。上述結(jié)果提示，MPP 合并哮喘患兒血清維生素D、CD5L 水平越低，機(jī)體炎癥反應(yīng)和氣道重構(gòu)情況就越嚴(yán)重。今后可通過(guò)檢測(cè)血清維生素D、CD5L 與TNF-α、MMP-2、MMP-9 水平來(lái)輔助診斷和評(píng)估病情。

綜上所述，MPP 合并哮喘患兒維生素D、CD5L水平降低，補(bǔ)體C3、IgE 水平升高，并且與患兒病毒抗體滴度水平、炎癥反應(yīng)程度有一定的關(guān)系。今后臨床上可通過(guò)檢測(cè)上述指標(biāo)水平綜合評(píng)估MPP 合并哮喘患兒的病情，并指導(dǎo)臨床合理用藥。