• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    基于形態(tài)性狀和SSR 標記的克氏原螯蝦養(yǎng)殖群體遺傳多樣性分析

    2024-01-01 00:00:00胡倩王齊帥黃瑾朱威霖陳曉漢陳秀荔李艷和彭敏
    華中農(nóng)業(yè)大學學報 2024年3期
    關(guān)鍵詞:克氏原螯蝦遺傳多樣性微衛(wèi)星

    關(guān)鍵詞 克氏原螯蝦; 形態(tài)性狀; 微衛(wèi)星; 遺傳多樣性

    中圖分類號 S917.4 文獻標識碼 A 文章編號 1000-2421(2024)03-0258-09

    克氏原螯蝦(Procambarus clarkii),俗稱淡水小龍蝦,因具有較高的商業(yè)價值和食用價值而深受養(yǎng)殖者及消費者的歡迎[1-2],現(xiàn)已被廣泛養(yǎng)殖,是一種重要的水產(chǎn)養(yǎng)殖品種[3]。但由于克氏原螯蝦屬于外來物種,在我國的養(yǎng)殖時間較短,加之人們對其種質(zhì)資源的保護和利用缺乏重視,這導致克氏原螯蝦種質(zhì)退化和病害肆虐等問題日益突出。為了克氏原螯蝦種質(zhì)資源的保護和良種培育,對克氏原螯蝦群體的遺傳多樣性與遺傳結(jié)構(gòu)進行研究具有重要意義。

    物種或種群的遺傳多樣性大小是其生存適應和發(fā)展進化的先決條件[4]。了解種群的遺傳多樣性和遺傳結(jié)構(gòu)有助于防止過度捕撈、保護種質(zhì)資源并確保種群的可持續(xù)開發(fā)。形態(tài)學方法是進行種群遺傳變異分析的最傳統(tǒng)、最直接的方法,已被廣泛應用于克氏原螯蝦的種群變異及種群鑒定等研究中[5-7]。但由于形態(tài)性狀受到遺傳和外部環(huán)境的共同作用,會隨著環(huán)境出現(xiàn)適應性進化[8],基于形態(tài)學的研究方法在一定情況下不能準確反映遺傳變異信息[9],且易受生物生長階段和數(shù)據(jù)處理方法的影響[10]。因此,形態(tài)學方法還需要與遺傳分子標記方法相結(jié)合,才能對研究對象的遺傳多樣性進行客觀的評估。微衛(wèi)星分子標記因其具有多態(tài)性和共顯性特征而在遺傳分析中越來越受青睞,已被廣泛應用于水產(chǎn)動物的遺傳多樣性分析、親子鑒定、連鎖圖譜構(gòu)建和QTL定位等領(lǐng)域[11-13]。因此,為進行更加客觀地評估,本研究分別采用形態(tài)學和微衛(wèi)星分子標記的分析方法對來自廣西南寧(3 個群體)、湖北荊州(1 個群體)和江西湖口(1 個群體)共5 個克氏原螯蝦群體的遺傳多樣性進行分析,旨在更好地了解廣西南寧周邊地區(qū)克氏原螯蝦養(yǎng)殖群體的遺傳多樣性,為克氏原螯蝦的綜合養(yǎng)殖和科學育種提供參考資料。

    1 材料與方法

    1.1 樣本采集

    本試驗采集的5 個克氏原螯蝦群體,包括3 個廣西南寧群體(埃及群體、良慶群體和上林群體)、1 個湖北荊州群體和1 個江西湖口群體。其中,埃及群體為2019 年從埃及引種抗逆性較強的克氏原螯蝦品種親本的F2代;良慶群體為2019 年從湖北荊州和江西鄱陽湖引種親本自然交配產(chǎn)生的F3 代;上林群體為2018 年從湖北監(jiān)利引種親本的F4 代;荊州群體為2016 年采集自湖北荊州區(qū)長江中游南岸;湖口群體為2016 年采集自江西九江湖口縣,為長江與鄱陽湖的交匯處。各群體具體采樣信息見表1。對所有樣本進行了形態(tài)參數(shù)的測量,并取腹部肌肉組織保存于無水乙醇中待用于提取DNA。

    1.2 形態(tài)參數(shù)測量與數(shù)據(jù)處理

    參照王克行[14]的測量方法,使用游標卡尺(精度為0.01 mm)測量每個個體的形態(tài)性狀,包括全長(TL)、頭胸甲長(CL)、頭胸甲寬(CW)、腹節(jié)長(ASL)、腹節(jié)寬(ASW)(圖1)。為了消除形態(tài)特征的個體大小依賴性,測量的5 項形態(tài)性狀均標準化為以全長為基數(shù)的比值或2 個形態(tài)性狀的比值。本研究共使用了6 項形態(tài)比例參數(shù),分別為:CL/TL、CW/TL、ASL/TL、ASW/TL、CL/CW 和ASL/ASW。

    1.3 DNA的提取和PCR擴增

    采用醋酸銨/異丙醇的方法[15]進行克氏原螯蝦基因組DNA 的提取,檢測濃度和質(zhì)量后,稀釋至100ng/μL 保存于?20 ℃冰箱備用。從Wang 等[16]開發(fā)的克氏原螯蝦微衛(wèi)星標記中選擇具有較高多態(tài)性的四堿基重復位點12 個,具體信息見表2。上述微衛(wèi)星位點引物對的正向引物5'端分別用FAM、HEX、ROX進行熒光修飾并合成。12 對熒光引物在5 個克氏原螯蝦群體上得到擴增并進行基因分型。PCR 擴增體系為10 μL,包括PCR Mix 5 μL,ddH2O 4 μL,正反引物(10 μmol/L)各0.25 μL 和DNA 模板(100 ng/μL)0.5 μL。PCR 擴增程序為:95 ℃預變性5 min;95 ℃變性30 s,最適退火溫度下退火30 s,72 ℃延伸30 s,35 個循環(huán);72 ℃延伸5 min,最后4 ℃保存。PCR 擴增產(chǎn)物由武漢擎科生物有限公司在ABI 3730XL 遺傳分析儀上進行分離,利用Gene Marker v1.75 軟件讀取各個體在各微衛(wèi)星位點的基因型。

    1.4 數(shù)據(jù)分析

    本研究中形態(tài)數(shù)據(jù)以平均值和標準差(SD)的形式呈現(xiàn)。采用SPSS 23.0 進行單因素方差分析,通過公式CV=(M1-M2)/(S1+S2)[17]計算差異系數(shù)(CV),式中M1和M2表示某項形態(tài)參數(shù)的平均值,S1和S2為標準差。若CV 值小于1.28,則表示2 個群體在這項形態(tài)參數(shù)上的差異未達到亞種水平。使用SPSS 23.0 軟件對6 項經(jīng)過標準化的形態(tài)參數(shù)采用逐步判別的方法進行判別分析,在計算每個群體的6 項形態(tài)比例參數(shù)的平均值后,采用歐式最短距離系統(tǒng)聚類法進行聚類分析。

    在讀取各群體在各微衛(wèi)星位點的基因型并校準后,使用Cervus 3.0 軟件計算每個位點的等位基因數(shù)(number of alleles,Na)、觀測雜合度(observed heterozygosity,Ho)、期望雜合度(expected heterozygosity,He)和多態(tài)信息含量(polymorphism information content,PIC),使用GenAIEx v6.51 軟件計算每個位點的有效等位基因數(shù)(effective number of alleles,Ne)、固定指數(shù)(fixation index,F(xiàn)st)及Nei’s 遺傳距離(geneticdistance,DA)。并基于Nei’s 遺傳距離用Mega7.0 構(gòu)建UPGMA 系統(tǒng)進化樹。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 形態(tài)學分析

    1)單因素方差分析。分別對克氏原螯蝦雌雄群體的6 項形態(tài)比例參數(shù)進行單因素方差分析。結(jié)果表明,雌雄群體中,6 項形態(tài)比例參數(shù)在群體之間均存在顯著性差異。對克氏原螯蝦雌雄群體的形態(tài)比例參數(shù)進行差異分析,最大差異系數(shù)的結(jié)果顯示,雌性群體中,在6 項形態(tài)比例參數(shù)中僅有2 項(ASW/TL 和ASL/ASW)的最大差異系數(shù)值大于臨界值(1.28);而雄性群體中有3 項(CL/TL、ASW/TL 和CL/CW)的最大差異系數(shù)值大于臨界值(表3)。群體之間的最大差異系數(shù)主要體現(xiàn)在上林群體和湖口群體之間,雄性群體間的形態(tài)差異大于雌性。

    2) 判別分析。對克氏原螯蝦雌雄群體6 項形態(tài)比例參數(shù)的判別F 檢驗結(jié)果表明,判別結(jié)果均較好(Plt;0.01)。利用前2 個判別函數(shù)繪制散點圖可以更直觀地表現(xiàn)出5 個克氏原螯蝦群體的分離和重疊情況(圖2 A、B)。雌雄群體的散點圖顯示了相似的結(jié)果:5 個克氏原螯蝦雌性群體間存在不同程度的重疊,其中埃及群體和上林群體的重疊比例較大,相對難以區(qū)分,而良慶群體、荊州群體和湖口群體的重疊比例較小,相對容易區(qū)分。5 個克氏原螯蝦雄性群體的散布趨勢與雌性群體基于一致,但群體之間的重疊比例均較小。判別分析結(jié)果顯示,雌性群體中,湖口群體的判別準確率最高為82.61%,而上林群體的判別準確率最低為46.67%,綜合判別準確率為68.59%;雄性群體中,判別準確率最高的是埃及群體(83.33%),最低的仍是上林群體(66.67%),綜合判別準確率為73.60%(表4)。

    3)聚類分析。在形態(tài)比例參數(shù)平均值聚類分析中,雌性和雄性群體呈現(xiàn)出相似的分組(圖2 C、D)。5 個群體被分為2 支,其中湖口群體單獨聚為一支,其他4 個群體則聚為另一支。結(jié)果表明,埃及群體、上林群體和荊州群體的形態(tài)相似度較高,湖口群體與其他4 個群體的形態(tài)差異較大。

    2.2 微衛(wèi)星分析

    1)群體遺傳多樣性分析。5個克氏原螯蝦群體在12 個微衛(wèi)星位點的等位基因數(shù)介于4~12 個(平均9.250 個),有效等位基因數(shù)介于3.268 ~ 6.981 個(平均4.940個),觀測雜合度介于0.430~0.815,期望雜合度介于0.696~0.859,多態(tài)信息含量介于0.632~0.840(表5)。12 個微衛(wèi)星位點均屬于高度多態(tài)性位點(PICgt;0.5),可用于對克氏原螯蝦遺傳結(jié)構(gòu)的分析。

    5 個克氏原螯蝦群體的遺傳多樣性參數(shù)如表6 所示。5 個群體的平均等位基因數(shù)在5.167~6.167,平均有效等位基因數(shù)在3.379~3.797,平均觀測雜合度值在0.574~0.644,平均期望雜合度值在0.674~0.729,平均PIC 值在0.618~0.674。結(jié)果表明,5 個群體均具有較高的遺傳多樣性,具體表現(xiàn)為:良慶群體和埃及群體的遺傳多樣性最高,湖口群體和上林群體次之,荊州群體最低。

    2)群體遺傳分化分析。由表7 可見,5 個克氏原螯蝦群體間發(fā)生了不同程度的分化。其中,上林群體和良慶群體間的固定指數(shù)(Fst)最小,其次是荊州和埃及群體(0.026)與良慶和湖口群體(0.049),均屬于輕微分化水平(Fst lt;0.05),而其他群體間處于中度分化水平(0.05lt; Fst lt;0.15)。群體間遺傳距離為0.065~0.930,結(jié)果顯示,上林和良慶群體間的遺傳距離最?。?.065),荊州和上林群體間的遺傳距離最大(0.930)。

    基于Nei’s 遺傳距離,采用UPGMA 方法構(gòu)建了5 個克氏原螯蝦群體的聚類樹。聚類結(jié)果顯示,研究中涉及的5 個群體可分為兩大分支(圖3),埃及群體和荊州群聚類為一支,而良慶群體先與上林群體聚類為一支后再與湖口群體聚類為另一支。

    3 討論

    形態(tài)學分析方法是研究物種遺傳變異的有效方法之一[18]。在本研究中,單因素方差分析結(jié)果顯示,6 項形態(tài)比例參數(shù)在群體之間均存在顯著性差異,且最大形態(tài)差異主要體現(xiàn)在上林群體和湖口群體之間。判別分析結(jié)果顯示,在281 尾克氏原螯蝦樣本中,有199 尾(70.82%)根據(jù)其外部形態(tài)被正確分類,分類正確率低于韓曉磊等[5]、張萌等[19]、徐濱等[6]的研究結(jié)果。這與本研究中使用的形態(tài)參數(shù)較少有很大關(guān)系。基于形態(tài)的聚類結(jié)果顯示,埃及群體、上林群體和荊州群體的形態(tài)相似性最大,良慶群體與這3個群體聚為一支,而湖口群體單獨聚為一支。聚類的結(jié)果與群體的地理分布的遠近并無一致性,主要體現(xiàn)在荊州群體的異常分類??耸显r作為漁業(yè)產(chǎn)品,由于其經(jīng)濟的重要性被大量開發(fā),并在世界范圍內(nèi)廣泛養(yǎng)殖[20]。因此,其苗種或成蝦可能通過貿(mào)易等其他非自然因素存在于地理位置較遠的水域。Yue 等[21]的研究也表明,克氏原螯蝦群體的遺傳距離與其地理距離的遠近并無顯著相關(guān)性。遺傳距離和固定指數(shù)反映了不同群體之間遺傳關(guān)系的遠近親疏。不同群體間的固定指數(shù)越大,群體間的遺傳分化水平就越高[10, 22],遺傳距離越小,親緣關(guān)系越近[23]。在本研究中,5 個克氏原螯蝦群體的遺傳距離趨勢與遺傳分化系數(shù)趨勢一致。其中,埃及群體和荊州群體的遺傳距離較小,親緣關(guān)系較近,這與埃及群體與荊州群體的形態(tài)的相似性一致,具體原因有待進一步研究。良慶群體與上林群體的遺傳距離最小,親緣關(guān)系最近,表明兩者的親本在被引種前可能已產(chǎn)生了基因交流或兩個群體在養(yǎng)殖過程中產(chǎn)生了基因交流。另外,良慶群體與其雜交親本來源地的2 個早期野生群體的遺傳距離較大,可能原因有:(1)因克氏原螯蝦養(yǎng)殖熱的興起造成各地群體間的基因混雜,導致雜交親本與早期野生群體間遺傳差異較大;(2)雜交后的養(yǎng)殖群體在養(yǎng)殖過程中與其他群體產(chǎn)生了基因混雜。埃及群體作為一個從埃及引種的養(yǎng)殖群體,與上林群體和良慶群體的遺傳距離較大,親緣關(guān)系較遠,但與生活在相近環(huán)境下的上林群體和良慶群體具有較高的形態(tài)相似度。這與甲殼動物較高的環(huán)境可塑性有關(guān)[24],此外,物種外部形態(tài)的變化也通常被解釋為對棲息地環(huán)境的適應[25-26]。

    物種的遺傳多樣性越高,對環(huán)境的適應能力越強,進化的潛力就越大。對物種遺傳多樣性的研究是育種研究的基礎(chǔ),明確其遺傳多樣性,獲得理想的種質(zhì)資源后才能更好地進行育種研究,提高育種效率[27-28]。本研究結(jié)果顯示,12 個位點在5 個群體上均表現(xiàn)出高多態(tài)性(0.632lt;PIClt;0.840)[29],滿足對克氏原螯蝦遺傳多樣性分析的要求。雜合度表示位點上雜合子的頻率,是對群體的遺傳多樣性評價的重要指標之一,雜合度越高,遺傳變異程度越大。期望雜合度是指當種群處于平衡狀態(tài)時的理論雜合子頻率,與觀測雜合度相比,能夠更準確地反映群體的遺傳多樣性水平[10,30-31]。本研究中,12 個微衛(wèi)星位點的期望雜合度平均值為0.786,表明群體雜合度水平較高,與以往的報道相比,高于江蘇地區(qū)[32]、長江水系的一些群體[33-35]和廣西地區(qū)的其他群體[36],與安徽地區(qū)[37-38]和原產(chǎn)地種群[39]相當。本研究中的5個克氏原螯蝦群體均具有高水平的遺傳多樣性(0.674lt;Helt;0.840,0.618lt;PIClt;0.674),5 個群體的平均期望雜合度均遠高于平均觀測雜合度,說明在5 個克氏原螯蝦群體中均存在雜合子丟失現(xiàn)象[40],這可能是由于群體的規(guī)模較小且出現(xiàn)了瓶頸效應,產(chǎn)生了遺傳漂變等原因,導致了等位基因丟失[36]。

    綜上所述,本研究基于12 個微衛(wèi)星位點對克氏原螯蝦的養(yǎng)殖群體的遺傳多樣性進行評估,結(jié)果表明廣西南寧周邊的克氏原螯蝦養(yǎng)殖群體具有較高的遺傳多樣性,從國外引種或國內(nèi)不同地理來源群體的雜交可能是提高克氏原螯蝦群體遺傳多樣性的重要途徑,該研究為克氏原螯蝦的綜合養(yǎng)殖和科學育種提供了參考資料。

    (責任編輯:邊書京)

    猜你喜歡
    克氏原螯蝦遺傳多樣性微衛(wèi)星
    梅花鹿基因組微衛(wèi)星分布特征研究
    林麝全基因組微衛(wèi)星分布規(guī)律研究
    四川動物(2017年4期)2017-07-31 23:54:19
    克氏原螯蝦消化道一種新型抗菌物質(zhì)的分離與鑒定
    茄子種質(zhì)資源農(nóng)藝性狀遺傳多樣性分析
    淺析田間水稻紋枯病抗性鑒定體系的確立與完善
    西藏野核桃的表型特征及其保育措施
    免疫多糖的生物學功能及其在克氏原螯蝦飼料中的應用
    湖南飼料(2016年2期)2016-05-12 08:28:10
    水稻紋枯病抗性鑒定體系的確立與遺傳多樣性研究
    克氏原螯蝦選育后代生長特性的初步研究
    基于轉(zhuǎn)錄組測序的波紋巴非蛤微衛(wèi)星標記研究
    久久免费观看电影| 国产男女超爽视频在线观看| av网站免费在线观看视频| 又大又黄又爽视频免费| 久久久精品94久久精品| 欧美精品亚洲一区二区| 午夜视频国产福利| 91午夜精品亚洲一区二区三区| 亚洲av.av天堂| av国产精品久久久久影院| 少妇 在线观看| 日本欧美视频一区| 高清黄色对白视频在线免费看| 99香蕉大伊视频| 成人影院久久| 亚洲五月色婷婷综合| 欧美丝袜亚洲另类| 最近的中文字幕免费完整| 国产在视频线精品| 一本久久精品| 最近2019中文字幕mv第一页| 蜜桃国产av成人99| 热99久久久久精品小说推荐| 亚洲国产精品一区二区三区在线| 久久人人爽人人爽人人片va| 丝袜脚勾引网站| 国产成人精品一,二区| 夫妻性生交免费视频一级片| 亚洲成国产人片在线观看| 日日爽夜夜爽网站| 久久精品国产a三级三级三级| 久久鲁丝午夜福利片| 母亲3免费完整高清在线观看 | 国产极品天堂在线| 久久午夜综合久久蜜桃| 欧美丝袜亚洲另类| 国产在线免费精品| 国产 一区精品| 国产精品一区二区在线不卡| 久久精品久久久久久久性| 日韩在线高清观看一区二区三区| 91aial.com中文字幕在线观看| 久久ye,这里只有精品| a级毛片黄视频| 国产免费又黄又爽又色| 91午夜精品亚洲一区二区三区| 国产精品免费大片| 国产精品99久久99久久久不卡 | 乱人伦中国视频| 五月开心婷婷网| av福利片在线| 精品少妇内射三级| 日韩制服丝袜自拍偷拍| 成人亚洲欧美一区二区av| 国产熟女午夜一区二区三区| 国产成人免费无遮挡视频| 亚洲精品国产av成人精品| 三上悠亚av全集在线观看| 国产精品嫩草影院av在线观看| 亚洲美女视频黄频| 一区二区av电影网| 91国产中文字幕| 成人毛片a级毛片在线播放| 99久久精品国产国产毛片| 精品少妇内射三级| 一二三四在线观看免费中文在 | 一级爰片在线观看| 日本黄色日本黄色录像| 国产精品久久久久久久电影| 亚洲美女黄色视频免费看| 亚洲av.av天堂| 久久综合国产亚洲精品| 人妻人人澡人人爽人人| 国产亚洲一区二区精品| 亚洲第一av免费看| 免费大片黄手机在线观看| 国产极品天堂在线| 啦啦啦在线观看免费高清www| 天堂8中文在线网| 精品卡一卡二卡四卡免费| 男男h啪啪无遮挡| 男人爽女人下面视频在线观看| 亚洲第一av免费看| 日韩在线高清观看一区二区三区| 99精国产麻豆久久婷婷| 国产黄色免费在线视频| 亚洲一级一片aⅴ在线观看| 国产日韩一区二区三区精品不卡| 又黄又粗又硬又大视频| 午夜视频国产福利| 亚洲精品乱码久久久久久按摩| 日韩大片免费观看网站| 成人国语在线视频| 日本爱情动作片www.在线观看| 精品一区二区三区视频在线| 精品亚洲成a人片在线观看| 欧美+日韩+精品| 寂寞人妻少妇视频99o| 欧美bdsm另类| 久久人人爽人人爽人人片va| 久久99热这里只频精品6学生| 老司机亚洲免费影院| 自线自在国产av| 宅男免费午夜| 亚洲欧美精品自产自拍| 中文字幕人妻熟女乱码| www.熟女人妻精品国产 | 欧美激情极品国产一区二区三区 | 日韩 亚洲 欧美在线| 国产亚洲av片在线观看秒播厂| 日韩,欧美,国产一区二区三区| 日韩中字成人| 亚洲四区av| 午夜福利视频在线观看免费| 国产精品麻豆人妻色哟哟久久| 免费大片18禁| 久久热在线av| 亚洲高清免费不卡视频| 在线 av 中文字幕| 三上悠亚av全集在线观看| 国产又色又爽无遮挡免| 九九在线视频观看精品| 又大又黄又爽视频免费| 校园人妻丝袜中文字幕| 欧美成人午夜精品| 午夜视频国产福利| 人体艺术视频欧美日本| 国产亚洲最大av| 在线观看www视频免费| 岛国毛片在线播放| 成人国产av品久久久| 国产麻豆69| 丰满少妇做爰视频| 午夜免费观看性视频| 欧美日韩成人在线一区二区| 久久99热这里只频精品6学生| 久久久久久久国产电影| 成人亚洲欧美一区二区av| 国产成人精品婷婷| 在线亚洲精品国产二区图片欧美| 男女免费视频国产| 亚洲精品久久午夜乱码| 精品一区二区三卡| 观看av在线不卡| 咕卡用的链子| 午夜福利,免费看| 草草在线视频免费看| 在线 av 中文字幕| 国产在线免费精品| 一边亲一边摸免费视频| 成年av动漫网址| 久久人妻熟女aⅴ| 亚洲欧洲精品一区二区精品久久久 | 少妇 在线观看| 欧美精品高潮呻吟av久久| 一级,二级,三级黄色视频| 亚洲精品久久午夜乱码| 成年女人在线观看亚洲视频| 国产一区二区在线观看日韩| 97人妻天天添夜夜摸| 99国产精品免费福利视频| 少妇人妻 视频| 欧美 亚洲 国产 日韩一| 80岁老熟妇乱子伦牲交| 久久久久久伊人网av| 国产精品一区www在线观看| 人妻一区二区av| 国产国语露脸激情在线看| 日韩欧美精品免费久久| 日日啪夜夜爽| 国产乱来视频区| 国产日韩欧美视频二区| 亚洲精华国产精华液的使用体验| 制服丝袜香蕉在线| 日韩制服骚丝袜av| xxxhd国产人妻xxx| 国产亚洲一区二区精品| 亚洲,欧美精品.| 免费人妻精品一区二区三区视频| 激情五月婷婷亚洲| 丝袜脚勾引网站| 亚洲精品久久成人aⅴ小说| 在线天堂最新版资源| 亚洲av.av天堂| 午夜福利视频精品| 女人被躁到高潮嗷嗷叫费观| 日本黄大片高清| 国产精品女同一区二区软件| 日本欧美视频一区| 久久精品久久久久久噜噜老黄| 亚洲精品日本国产第一区| 国产成人一区二区在线| 日韩三级伦理在线观看| 久久人人97超碰香蕉20202| 国产成人精品久久久久久| 国产精品女同一区二区软件| 久久久国产欧美日韩av| 欧美bdsm另类| 青春草国产在线视频| 插逼视频在线观看| 久久99热这里只频精品6学生| 国产精品麻豆人妻色哟哟久久| 欧美亚洲 丝袜 人妻 在线| 少妇猛男粗大的猛烈进出视频| 成年动漫av网址| 国产欧美日韩综合在线一区二区| 伦理电影免费视频| 久久久久久久国产电影| 91国产中文字幕| 日韩欧美精品免费久久| h视频一区二区三区| 午夜福利在线观看免费完整高清在| 免费不卡的大黄色大毛片视频在线观看| 韩国av在线不卡| 免费av不卡在线播放| 久久ye,这里只有精品| 十八禁高潮呻吟视频| 蜜臀久久99精品久久宅男| 美国免费a级毛片| 亚洲精华国产精华液的使用体验| 啦啦啦在线观看免费高清www| 女的被弄到高潮叫床怎么办| 午夜日本视频在线| 五月天丁香电影| 久久鲁丝午夜福利片| 国产男女内射视频| 久久精品国产亚洲av天美| 1024视频免费在线观看| 大香蕉97超碰在线| 久久精品人人爽人人爽视色| xxxhd国产人妻xxx| 日韩成人伦理影院| 国国产精品蜜臀av免费| 在线观看人妻少妇| 国产极品粉嫩免费观看在线| 侵犯人妻中文字幕一二三四区| 国产成人精品在线电影| 亚洲欧美日韩卡通动漫| 午夜福利乱码中文字幕| 亚洲一级一片aⅴ在线观看| 久热久热在线精品观看| 亚洲精品,欧美精品| 国产精品嫩草影院av在线观看| 黄色一级大片看看| 9色porny在线观看| 久久精品熟女亚洲av麻豆精品| 免费在线观看黄色视频的| 少妇人妻精品综合一区二区| 国产女主播在线喷水免费视频网站| 中文字幕av电影在线播放| 亚洲人成网站在线观看播放| 亚洲国产欧美在线一区| 在线亚洲精品国产二区图片欧美| 制服诱惑二区| 欧美成人午夜精品| 日本-黄色视频高清免费观看| 啦啦啦中文免费视频观看日本| 男人添女人高潮全过程视频| 一级毛片 在线播放| 婷婷色av中文字幕| 免费高清在线观看视频在线观看| 曰老女人黄片| 人人妻人人澡人人爽人人夜夜| 爱豆传媒免费全集在线观看| 国产精品99久久99久久久不卡 | 丝瓜视频免费看黄片| 日韩av不卡免费在线播放| 日韩欧美精品免费久久| 国产精品一区二区在线观看99| 丰满迷人的少妇在线观看| 国产精品久久久av美女十八| 极品人妻少妇av视频| 在线观看www视频免费| 人成视频在线观看免费观看| 女性被躁到高潮视频| 久久久国产精品麻豆| 两个人看的免费小视频| 国产av一区二区精品久久| 99久久中文字幕三级久久日本| 女的被弄到高潮叫床怎么办| 免费观看a级毛片全部| 亚洲欧美日韩另类电影网站| 中文天堂在线官网| 国内精品宾馆在线| 99视频精品全部免费 在线| 亚洲精品久久午夜乱码| 午夜福利,免费看| √禁漫天堂资源中文www| 精品亚洲成a人片在线观看| 国产一区二区在线观看日韩| 如何舔出高潮| 日本午夜av视频| 人妻系列 视频| 高清黄色对白视频在线免费看| 咕卡用的链子| 人体艺术视频欧美日本| 性色avwww在线观看| 国产在线免费精品| 黄色毛片三级朝国网站| 精品少妇黑人巨大在线播放| 亚洲国产精品一区三区| 国产成人午夜福利电影在线观看| 精品一区在线观看国产| 少妇被粗大的猛进出69影院 | 亚洲少妇的诱惑av| 亚洲国产精品专区欧美| 97在线人人人人妻| 日本wwww免费看| 一级黄片播放器| 久久精品国产亚洲av天美| 尾随美女入室| 免费播放大片免费观看视频在线观看| 久久国产亚洲av麻豆专区| 韩国精品一区二区三区 | 国产精品麻豆人妻色哟哟久久| 精品人妻偷拍中文字幕| 黑人欧美特级aaaaaa片| 亚洲欧美日韩另类电影网站| 精品一品国产午夜福利视频| 国产永久视频网站| 国产激情久久老熟女| 国产精品久久久久久精品电影小说| 国产免费现黄频在线看| 热re99久久国产66热| 免费大片黄手机在线观看| 视频中文字幕在线观看| 精品人妻熟女毛片av久久网站| 在线观看国产h片| 成年女人在线观看亚洲视频| 国产亚洲午夜精品一区二区久久| 亚洲精品久久成人aⅴ小说| 国产男人的电影天堂91| 久久久久久久亚洲中文字幕| 国产成人精品婷婷| 亚洲精品久久成人aⅴ小说| 欧美精品国产亚洲| 在线观看免费视频网站a站| 亚洲综合色网址| 国产日韩欧美亚洲二区| 黑人高潮一二区| 国产精品久久久久久精品古装| 插逼视频在线观看| 精品久久蜜臀av无| av女优亚洲男人天堂| 欧美激情国产日韩精品一区| av免费观看日本| av电影中文网址| 色94色欧美一区二区| 啦啦啦视频在线资源免费观看| 日本黄色日本黄色录像| 一二三四中文在线观看免费高清| 在线观看一区二区三区激情| 欧美亚洲 丝袜 人妻 在线| av国产精品久久久久影院| 又黄又爽又刺激的免费视频.| 国产精品成人在线| 国产免费一区二区三区四区乱码| 国产精品国产av在线观看| 国产男人的电影天堂91| 久久这里有精品视频免费| 午夜久久久在线观看| 在线观看免费视频网站a站| 一边亲一边摸免费视频| 少妇的逼水好多| 男女高潮啪啪啪动态图| 久久亚洲国产成人精品v| 成人影院久久| 久久精品国产亚洲av涩爱| 黑人欧美特级aaaaaa片| 国产欧美亚洲国产| 大片免费播放器 马上看| 国产精品一区二区在线观看99| 亚洲婷婷狠狠爱综合网| 日本免费在线观看一区| 亚洲国产成人一精品久久久| 精品国产乱码久久久久久小说| 亚洲国产成人一精品久久久| 极品人妻少妇av视频| 亚洲少妇的诱惑av| 亚洲av福利一区| 日韩电影二区| 久久午夜综合久久蜜桃| 十八禁网站网址无遮挡| 丝袜美足系列| 亚洲第一区二区三区不卡| 免费日韩欧美在线观看| 久久久久久久久久久久大奶| 黄网站色视频无遮挡免费观看| 久久99蜜桃精品久久| 亚洲精品中文字幕在线视频| 少妇被粗大猛烈的视频| 极品少妇高潮喷水抽搐| 精品久久蜜臀av无| 少妇的逼水好多| 亚洲av电影在线观看一区二区三区| 美女视频免费永久观看网站| 熟女电影av网| 精品少妇久久久久久888优播| 久久精品国产亚洲av涩爱| 一区二区三区四区激情视频| 成人亚洲精品一区在线观看| 国语对白做爰xxxⅹ性视频网站| 色94色欧美一区二区| 天堂8中文在线网| 亚洲精品一区蜜桃| 午夜福利在线观看免费完整高清在| 中国国产av一级| 新久久久久国产一级毛片| 国产精品偷伦视频观看了| av电影中文网址| 欧美激情国产日韩精品一区| 少妇的逼好多水| 新久久久久国产一级毛片| 亚洲色图 男人天堂 中文字幕 | av视频免费观看在线观看| 黑人猛操日本美女一级片| 免费看不卡的av| 黄片播放在线免费| 伦理电影大哥的女人| 亚洲国产最新在线播放| 男女下面插进去视频免费观看 | 视频区图区小说| av线在线观看网站| 国产成人精品婷婷| 中国美白少妇内射xxxbb| 看免费av毛片| 99精国产麻豆久久婷婷| 最近手机中文字幕大全| 欧美激情极品国产一区二区三区 | 男女无遮挡免费网站观看| 日韩制服骚丝袜av| 亚洲成人一二三区av| 亚洲精品乱码久久久久久按摩| 2021少妇久久久久久久久久久| 欧美最新免费一区二区三区| 免费观看性生交大片5| 久久这里有精品视频免费| 亚洲av男天堂| 999精品在线视频| 男女免费视频国产| 国精品久久久久久国模美| 国产成人午夜福利电影在线观看| 日韩中文字幕视频在线看片| 亚洲精品国产av蜜桃| 久久免费观看电影| 国产精品久久久久成人av| 亚洲国产日韩一区二区| 青春草亚洲视频在线观看| 国产精品久久久av美女十八| 男人添女人高潮全过程视频| 国产激情久久老熟女| 日韩成人伦理影院| 美女福利国产在线| 成年美女黄网站色视频大全免费| 麻豆乱淫一区二区| 午夜av观看不卡| 在线观看www视频免费| 最新的欧美精品一区二区| 国产片特级美女逼逼视频| 国产精品久久久久久久电影| 精品国产国语对白av| 亚洲欧美一区二区三区黑人 | 精品视频人人做人人爽| 综合色丁香网| 国产熟女欧美一区二区| 亚洲欧美日韩另类电影网站| 又大又黄又爽视频免费| 精品国产一区二区三区四区第35| 黑人欧美特级aaaaaa片| 色网站视频免费| 熟女人妻精品中文字幕| 婷婷色综合大香蕉| tube8黄色片| 国产片内射在线| 免费大片黄手机在线观看| 美国免费a级毛片| 男女啪啪激烈高潮av片| 如何舔出高潮| 欧美人与性动交α欧美精品济南到 | 如日韩欧美国产精品一区二区三区| 欧美人与性动交α欧美软件 | 国产欧美日韩一区二区三区在线| 七月丁香在线播放| 久久这里有精品视频免费| 久久久久久久精品精品| 中文字幕人妻丝袜制服| 久久99热6这里只有精品| 国产极品粉嫩免费观看在线| 亚洲国产看品久久| 日本av手机在线免费观看| 熟女电影av网| 国产精品一二三区在线看| 菩萨蛮人人尽说江南好唐韦庄| 日韩视频在线欧美| 日本av手机在线免费观看| 国产精品久久久久久久电影| 三级国产精品片| 国产一区二区在线观看av| 久久精品aⅴ一区二区三区四区 | 啦啦啦中文免费视频观看日本| 91精品三级在线观看| 亚洲 欧美一区二区三区| 欧美激情极品国产一区二区三区 | 一级片免费观看大全| 三级国产精品片| 亚洲精品日韩在线中文字幕| 国产精品99久久99久久久不卡 | 午夜精品国产一区二区电影| 99香蕉大伊视频| 纯流量卡能插随身wifi吗| 日本午夜av视频| 狠狠精品人妻久久久久久综合| 最黄视频免费看| 飞空精品影院首页| 精品国产乱码久久久久久小说| 欧美日韩亚洲高清精品| 久久99精品国语久久久| 狂野欧美激情性bbbbbb| 免费观看在线日韩| 99久国产av精品国产电影| 国产福利在线免费观看视频| a 毛片基地| a级毛片在线看网站| 最近2019中文字幕mv第一页| 国产精品偷伦视频观看了| 男女午夜视频在线观看 | 91精品三级在线观看| 日本欧美国产在线视频| 欧美精品一区二区免费开放| 国产精品久久久av美女十八| 校园人妻丝袜中文字幕| 国产免费一级a男人的天堂| 成人二区视频| 啦啦啦在线观看免费高清www| 国产在线视频一区二区| 热99国产精品久久久久久7| 亚洲熟女精品中文字幕| 精品国产一区二区三区四区第35| 国精品久久久久久国模美| 交换朋友夫妻互换小说| 久久久久久人妻| √禁漫天堂资源中文www| 成人亚洲精品一区在线观看| 久久人人爽人人片av| 国产成人免费观看mmmm| 国产成人一区二区在线| 国产精品熟女久久久久浪| 香蕉国产在线看| 国产高清三级在线| 久久99热这里只频精品6学生| 国产福利在线免费观看视频| 激情视频va一区二区三区| 观看av在线不卡| 97在线人人人人妻| 大片电影免费在线观看免费| 国产伦理片在线播放av一区| 看免费av毛片| 欧美xxⅹ黑人| 久久久久久人人人人人| 黑人猛操日本美女一级片| 夫妻性生交免费视频一级片| 99热这里只有是精品在线观看| 一本色道久久久久久精品综合| 亚洲久久久国产精品| 久久国内精品自在自线图片| 两性夫妻黄色片 | 日本vs欧美在线观看视频| 中国美白少妇内射xxxbb| 国产亚洲精品久久久com| 亚洲激情五月婷婷啪啪| 啦啦啦啦在线视频资源| 国产国语露脸激情在线看| 在线观看人妻少妇| 国产高清国产精品国产三级| av.在线天堂| 久久久久久久大尺度免费视频| 男女边吃奶边做爰视频| 亚洲成人av在线免费| 青春草国产在线视频| xxx大片免费视频| 性高湖久久久久久久久免费观看| 一级黄片播放器| 日韩三级伦理在线观看| 国产不卡av网站在线观看| 亚洲欧美日韩卡通动漫| 国产有黄有色有爽视频| 国产精品嫩草影院av在线观看| 婷婷色麻豆天堂久久| 涩涩av久久男人的天堂| 免费观看性生交大片5| 日韩一本色道免费dvd| 国产亚洲av片在线观看秒播厂| 亚洲精品久久午夜乱码| 一级,二级,三级黄色视频| 午夜福利视频在线观看免费| 一区二区三区四区激情视频| 插逼视频在线观看| 久久久久精品性色| 一区二区三区精品91| 国产爽快片一区二区三区| 少妇的丰满在线观看| 少妇被粗大的猛进出69影院 | 久久久欧美国产精品| av国产精品久久久久影院| av.在线天堂| 免费黄色在线免费观看| 国产熟女午夜一区二区三区| 亚洲国产看品久久| 18禁在线无遮挡免费观看视频| 香蕉国产在线看| 人妻 亚洲 视频| 性色avwww在线观看| 欧美日韩精品成人综合77777| 国产午夜精品一二区理论片| 国内精品宾馆在线|