澳洲堅(jiān)果葉片黃化期間光合能量代謝相關(guān)基因的表達(dá)研究

摘""要：葉片光合作用是維持植物生命活動(dòng)的能量來源，但在華南地區(qū)一些澳洲堅(jiān)果品種的新梢葉片通常在夏季持續(xù)高溫條件下發(fā)生黃化，嚴(yán)重影響了植株生長和果實(shí)生產(chǎn)。為了探究澳洲堅(jiān)果黃化葉片的光合能量發(fā)生機(jī)制，本研究基于前期獲得的HAES344澳洲堅(jiān)果不同黃化時(shí)期葉片轉(zhuǎn)錄組測序數(shù)據(jù)，鑒定與篩選光合能量代謝相關(guān)基因，并通過qRT-PCR分析光合能量代謝中的關(guān)鍵基因在HAES344澳洲堅(jiān)果葉片黃化過程中的表達(dá)變化。結(jié)果表明：通過KEGG功能注釋和富集分析，在HAES344澳洲堅(jiān)果葉片黃化期間共鑒定出96個(gè)差異表達(dá)基因與能量代謝相關(guān)，以氧化磷酸化路徑富集的差異基因數(shù)量最多，其次是碳固定路徑，而富集到天線蛋白的差異基因最少；經(jīng)過篩選（RPKMgt;0.5），共獲得43個(gè)基因與光合能量代謝相關(guān)，其中有27個(gè)基因的表達(dá)量在黃化葉片中明顯降低，另有16個(gè)基因的表達(dá)量變化則相反。利用qRT-PCR分析光合能量代謝中重要功能基因的相對(duì)表達(dá)量發(fā)現(xiàn)，在HAES344澳洲堅(jiān)果黃化葉片中有關(guān)光系統(tǒng)Ⅱ（PSⅡ）天線蛋白編碼基因CAP10A、ATP合酶亞基蛋白編碼基因（ATPC、ATPF）、碳同化酶基因（GAPA、GPD、At4g2652、rbcL）、硫氧還蛋白編碼基因（Os05g0200100、CXXS1）及質(zhì)體蛋白跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)基因TIC32的轉(zhuǎn)錄水平均顯著低于其正常葉片，而有關(guān)硫代謝基因（SIR、APR3）和環(huán)式電子傳遞介導(dǎo)基因（PGR5、ndhB、ndhD）的相對(duì)表達(dá)量則顯著高于其正常葉片，表明澳洲堅(jiān)果黃化葉片中光合能量代謝相關(guān)基因的表達(dá)模式發(fā)生了較大改變，進(jìn)而影響了光合能量的產(chǎn)生。該研究結(jié)果為深入探討光合能量代謝相關(guān)基因在澳洲堅(jiān)果黃化葉片中的作用機(jī)制提供參考依據(jù)。

關(guān)鍵詞：澳洲堅(jiān)果；葉片黃化；光合作用；能量代謝；電子傳遞中圖分類號(hào)：S664.9""""""文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A

Expression"of"Genes"Related"to"Photosynthetic"Energy"Metabolism"During"Leaf"Yellowing"of"Macadamia

YANG"Weihai，"GUO"Shanxiang，"XU"Ting，"XIAO"Yi，"LEI"Wenjun

College"of"Life"Science"and"Resources"and"Environment，"Yichun"University，"Yichun，"Jiangxi"336000，"China

Abstract："Leaf"photosynthesis"is"the"energy"source"of"plant"life"activities."However，"some"macadamia"varieties"（Macadamia"integrifolia）"planted"in"southern"China"are"prone"to"generate"the"etiolated"leaves"under"the"continuous"high"temperature"in"summer，"which"seriously"affects"the"shoot"growth"and"fruit"production"of"macadamia"trees."In"order"to"explore"the"mechanism"of"photosynthetic"energy"generation"in"the"etiolated"leaves"of"macadamia，"the"genes"related"to"photosynthetic"energy"metabolism"were"identified"and"screened"in"this"study，"based"on"the"previously"obtained"transcriptome"sequencing"data"from"the"leaves"of"HAES344"macadamia"at"different"yellowing"stages，"and"the"expression"changes"of"the"key"genes"in"photosynthetic"energy"metabolism"were"analyzed"during"leaf"yellowing"of"HAES344"macadamia"by"qRT-PCR."96"genes"with"differential"expression"in"the"etiolated"leaves"of"HAES344"macadamia"were"identified"to"be"related"to"energy"metabolism"according"to"KEGG"functional"annotation"and"enrichment"analysis，"and"the"number"of"the"differentially"expressed"genes"enriched"in"the"oxidative"phosphorylation"pathway"was"the"highest，"followed"by"carbon"fixation"pathway，"and"the"least"genes"were"enriched"in"the"antenna"proteins."After"screening"（RPKMgt;0.5），"a"total"of"43"genes"related"to"photosynthetic"energy"metabolism"were"obtained."Among"these"genes，"the"expression"level"of"27"genes"decreased"significantly"in"the"yellowed"leaves，"while"the"remaining"16"genes"did"the"opposite."Through"the"qRT-PCR"analysis"of"the"relative"expression"level"of"key"functional"genes"in"the"photosynthetic"energy"metabolism，"the"CAP10A"gene"encoding"photosystem"Ⅱ"（PSⅡ）"antenna"protein，"the"ATPC"and"ATPF"genes"encoding"ATPase"subunit"protein，"the"enzyme"genes"related"to"carbon"assimilation"（GAPA，"GPD，"At4g2652"and"rbcL），"the"Os05g0200100"and"CXXS1"genes"encoding"thioredoxin，"and"the"TIC32"gene"associated"with"plastid"protein"transmembrane"transport"showed"a"significant"lower"transcription"level"in"the"etiolated"leaves"of"HAES344"macadamia"compared"with"the"normal"leaves，"while"the"SIR"and"APR3"genes"related"to"sulfur"metabolism"and"the"PGR5，"ndhB"and"ndhD"genes"mediating"cyclic"electron"transfer"did"the"opposite，"which"suggested"that"the"greatly"changed"expression"patterns"of"genes"related"to"photosynthetic"energy"metabolism"affected"the"production"of"photosynthetic"energy"in"the"macadamia"yellowing"leaves."The"results"of"this"study"would"provide"a"reference"for"further"exploring"the"mechanism"of"photosynthetic"energy"metabolism-related"genes"in"the"etiolated"leaves"of"macadamia.

Keywords："macadamia"（Macadamia"integrifolia）;"leaf"yellowing;"photosynthesis;"energy"metabolism;"electron"transport

DOI："10.3969/j.issn.1000-2561.2024.06.003

澳洲堅(jiān)果（Macadamia"integrifolia）起源于澳大利亞，因其果仁營養(yǎng)豐富、風(fēng)味獨(dú)特而在熱帶及亞熱帶地區(qū)廣泛栽培。中國是澳洲堅(jiān)果生產(chǎn)大國，種植面積超過20萬hm2，穩(wěn)居世界第一[1]。云南與廣西作為我國澳洲堅(jiān)果的兩大重要產(chǎn)區(qū)，其主栽品種HAES344和桂熱1號(hào)在夏季持續(xù)的高溫條件下經(jīng)常出現(xiàn)新梢葉片黃化現(xiàn)象，嚴(yán)重時(shí)甚至干枯，進(jìn)而影響果實(shí)產(chǎn)量[2]，嚴(yán)重制約了當(dāng)?shù)匕闹迗?jiān)果產(chǎn)業(yè)的發(fā)展。

光合作用對(duì)高溫脅迫尤為敏感。高溫能夠破壞光系統(tǒng)Ⅱ（PSⅡ）的捕光天線系統(tǒng)、供體側(cè)放氧復(fù)合體以及反應(yīng)中心結(jié)構(gòu)，影響PSⅡ受體側(cè)電子傳遞及其光合放氧功能；同時(shí)，高溫影響光合反應(yīng)過程中相關(guān)酶的活性，進(jìn)而影響碳同化效率[3]。核酮糖-1，5-二磷酸（RuBP）羧化酶/加氧酶（Rubisco）是碳同化的關(guān)鍵酶和限速酶，該酶在葉綠體基質(zhì)中大部分處于鈍化形態(tài)，只有經(jīng)Rubisco活化酶（RCA）活化后才具備活性[4]。然而，RCA對(duì)高溫非常敏感，因RCA活性受到抑制而造成活化的Rubisco數(shù)量減少，是高溫脅迫下葉片Rubisco活性及光合速率降低的一個(gè)重要原因[5]。在梨黃化葉片中，RCA活性及其編碼基因Rubisco"activase"Ⅳ/Ⅴ的表達(dá)均正向調(diào)控光合作用[6]。Rubisco的大亞基（rbcL）在光合作用中起著關(guān)鍵性作用[7]，脅迫條件下rbcL基因的表達(dá)量下調(diào)可導(dǎo)致其光合作用下降[8-9]。另外，甘油醛-3-磷酸脫氫酶（GAPDH）[10]、果糖-1，6-二磷酸醛縮酶（FBA）[11]、核糖-5-磷酸異構(gòu)酶（RPI）[12]等酶的活性水平也與卡爾文循環(huán)的運(yùn)轉(zhuǎn)速率有關(guān)，影響著植物的光合能力。高溫條件下，葉綠體中GAPDH[13]與FBA[6，"14]顯著上調(diào)表達(dá)，有利于提高其編碼酶的蛋白表達(dá)水平及活性，增強(qiáng)葉片光合能力。

正常情況下，光反應(yīng)能夠?yàn)樘纪峁┍壤线m的ATP/NADPH能量分子。然而，發(fā)生在類囊體片層的光反應(yīng)是容易受到高溫脅迫損傷的關(guān)鍵位點(diǎn)，造成ATP及NADPH的生產(chǎn)和消耗失衡，進(jìn)而誘導(dǎo)光化學(xué)電子傳遞鏈組分過度還原與活性氧（ROS）過量產(chǎn)生，導(dǎo)致光抑制的增強(qiáng)和光系統(tǒng)的氧化損傷[15-16]。在葉綠體中，ATP是由ATP合酶（ATPase）催化光合磷酸化反應(yīng)而產(chǎn)生，NADPH則是在線性電子傳遞鏈末端通過葉型鐵氧還蛋白（Fd）-NADP+氧化還原酶（LFNR）催化而成。高溫脅迫明顯降低苜蓿葉綠體的ATPase"活性和ATP含量，光合速率亦明顯下降[17]。葉面噴施亞精胺可顯著增加熱脅迫下ATPase亞基CF1及其編碼基因ATPA的表達(dá)[18]。ZHANG等[19]指出，高溫脅迫容易使得光合線性電子傳遞受阻，導(dǎo)致非循環(huán)光合磷酸化活性下降，影響ATP的產(chǎn)生。HUANG等[20]發(fā)現(xiàn)，在短暫的溫度脅迫下，植物會(huì)激活圍繞光系統(tǒng)Ⅰ（PSⅠ）的環(huán)式電子傳遞，亦可通過ATPase驅(qū)動(dòng)ATP合成，保證有足夠的ATP用于碳同化、光呼吸以及PSⅡ修復(fù)。YAMORI等[21]認(rèn)為，環(huán)式電子傳遞循環(huán)對(duì)提高葉綠體內(nèi)ATP含量或者ATP/NADPH比值以及保護(hù)光系統(tǒng)免遭脅迫引起的氧化損害具有重要作用。然而，環(huán)式電子傳遞循環(huán)對(duì)各電子載體的氧化還原平衡高度敏感。溫度變化可通過影響硫氧還蛋白（Trx）的氧化還原狀態(tài)來調(diào)節(jié)電子載體的氧化還原活性及其電子傳遞效率[22]。KANG等[23]認(rèn)為，Trx不僅可以通過依賴Fd的Trx氧化還原酶（FTR）調(diào)節(jié)PGR5/PGRL1介導(dǎo)的環(huán)式電子傳遞途徑，也可以通過依賴NADPH的Trx還原酶C（NTRC）控制光合電子傳遞和非光化學(xué)淬滅，還能夠?qū)θ~綠體酶（如GAPDH、RCA）的巰基進(jìn)行還原調(diào)控，以調(diào)節(jié)光合碳同化過程。過表達(dá)NTRC能夠促進(jìn)葉綠體ATPase和Trx調(diào)節(jié)酶的活化[23]，提高PGR5表達(dá)量可增強(qiáng)環(huán)式電子流[24]，進(jìn)而增強(qiáng)植物的抗性。

前期研究已表明，受高溫脅迫引發(fā)的HAES344澳洲堅(jiān)果黃化葉片中葉綠素含量和PSⅡ活性均明顯降低[2]，但在葉片黃化過程中光合能量代謝相關(guān)基因的表達(dá)情況尚不清楚。因此，本研究基于前期測序的HAES344澳洲堅(jiān)果黃化葉片轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)[25]，采用生物信息學(xué)方法對(duì)其光合能量代謝相關(guān)差異表達(dá)基因進(jìn)行篩選，通過qRT-PCR進(jìn)一步分析其中重要基因的表達(dá)變化，進(jìn)而解析澳洲堅(jiān)果葉片黃化過程中光合能量代謝相關(guān)基因的差異表達(dá)規(guī)律，為深入認(rèn)識(shí)澳洲堅(jiān)果葉片黃化機(jī)理奠定基礎(chǔ)。

1""材料與方法

1.1""材料

以廣東省湛江市的3株樹冠生長較一致、夏梢正常抽生的8～10年生HAES344澳洲堅(jiān)果植株作為供試材料，于2019年6月1日（S1：全綠葉片）、20日（S2：中度黃化葉片，黃化面積占總?cè)~面積的50%～70%）和28日（S3：重度黃化葉片，黃化面積接近100%）分別在樹冠外圍采集夏梢上初始成熟的第4～5輪葉片作為樣品（圖1），將葉片用超純水沖洗干凈后剪碎，置于–80"℃冰箱中備用。

1.2""方法

1.2.1""能量代謝相關(guān)基因的篩選""基因表達(dá)量數(shù)據(jù)來源于前期獲得的HAES344澳洲堅(jiān)果不同黃化時(shí)期葉片（各時(shí)期均為3個(gè)生物學(xué)重復(fù)）轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)[25]。利用DESeq2軟件進(jìn)行差異基因分析，結(jié)合KEGG、Nr、Pfam等數(shù)據(jù)庫的基因功能注釋，按照Plt;0.05且[∣log2"（Fold"Change）∣≥1]的標(biāo)準(zhǔn)，篩選出HAES344澳洲堅(jiān)果葉片黃化過程中與能量代謝相關(guān)的差異表達(dá)基因。

1.2.2""qRT-PCR分析""從能量代謝差異基因中選擇與光合作用相關(guān)的部分重要基因進(jìn)行qRT-PCR分析。根據(jù)轉(zhuǎn)錄組測序結(jié)果中的轉(zhuǎn)錄本序列，應(yīng)用Primer"Premier"6.0軟件設(shè)計(jì)引物，以澳洲堅(jiān)果中的蘋果酸脫氫酶基因MDH為內(nèi)參基因[26]。基因的引物序列委托南京集思慧遠(yuǎn)生物科技有限公司合成（表1）。

應(yīng)用多糖多酚植物總RNA試劑盒（DP441，北京天根生化科技有限公司）提取葉片樣品的RNA，經(jīng)檢測RNA質(zhì)量后，使用Hifair?Ⅲ"1st"Strand"cDNA"Synthesis"SuperMix"for"qPCR試劑盒（YEASEN，上海翌圣生物科技股份有限公司）反轉(zhuǎn)錄合成第1鏈cDNA，再采用Genious"2×"SYBR"Green"Fast"qPCR"Mix試劑盒（ABclonal，武漢愛博泰克生物科技有限公司）對(duì)目標(biāo)基因進(jìn)行qRT-PCR檢測。PCR反應(yīng)體系（20"μL）為：1.0"μL"cDNA，1.0"μL正向引物，1.0"μL反向引物，10"μL"SYBR"Premix"Ex"Taq，7.0"μL"ddH2O。測定儀器為BIOER實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀（FQD-96A），反應(yīng)程序（兩步法）為：95"℃"5"min，95"℃"10"s，60"℃"30"s，40個(gè)循環(huán)。試驗(yàn)設(shè)置3個(gè)生物學(xué)重復(fù)，每個(gè)樣品重復(fù)3次；用2-??CT法計(jì)算基因的相對(duì)表達(dá)量。

1.3""數(shù)據(jù)處理

所有的試驗(yàn)數(shù)據(jù)均是3個(gè)獨(dú)立生物學(xué)重復(fù)的平均值，利用SPSS"16.0統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行One-"Way"ANOVA（LSD測驗(yàn)）檢驗(yàn)，Plt;0.05表示顯著性差異。應(yīng)用GraphPad"Prism"8.0軟件制圖。

2""結(jié)果與分析

2.1""能量代謝相關(guān)基因的鑒定

基于前期獲得的HAES344澳洲堅(jiān)果不同黃化時(shí)期（S1、S2和S3）葉片轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)[25]，根據(jù)KEGG的注釋結(jié)果，鑒定出96個(gè)與能量代謝途徑相關(guān)的差異基因。如圖2A所示，S1"vs"S2、S1"vs"S3和S2"vs"S3比較組分別有6、17和14個(gè)上調(diào)基因以及33、46和6個(gè)下調(diào)基因。韋恩圖分析表明，僅有2個(gè)差異基因共同存在于S1"vs"S2、S1"vs"S3和S2"vs"S3比較組中，但S1"vs"S2和S1"vs"S3共同包含的差異基因最多，達(dá)到18個(gè)（圖2B）。

KEGG富集分析表明，S1"vs"S2、S1"vs"S3和S2"vs"S3分別有20、29和8個(gè)差異基因注釋到氧化磷酸化路徑，是基因數(shù)量富集最多的路徑；其次是碳固定路徑，3個(gè)比較組中分別有9、14和7個(gè)差異基因得到注釋，但注釋到天線蛋白的差異基因最少，僅在S1"vs"S3中發(fā)現(xiàn)有1個(gè)基因被注釋（表2）。

2.2""光合能量代謝相關(guān)基因的表達(dá)分析

篩除低表達(dá)豐度的基因（RPKMlt;0.5）后，共獲得1個(gè)天線蛋白基因CAP10A和6個(gè)光合作用相關(guān)基因（圖3A）以及16個(gè)碳固定相關(guān)基因（圖3B）、14個(gè)光合磷酸化相關(guān)基因（圖3C）與6個(gè)硫代謝相關(guān)基因（圖3D），這些基因在HAES344澳洲堅(jiān)果葉片黃化過程中具有不同的表達(dá)趨勢。

與正常綠葉（S1）相比，在天線蛋白與光合作用途徑中，除PSⅠ相關(guān)基因psaI在黃化葉片S2中顯著上調(diào)表達(dá)外，其余6個(gè)基因則在黃化葉片（S2、S3）中顯著下調(diào)表達(dá)，包括2個(gè)ATPase相關(guān)基因（ATPC與atpI）和4個(gè)PSⅡ復(fù)合體組成蛋白相關(guān)基因（CAP10A、PSBP和2個(gè)PSBR）（圖3A）；在碳固定途徑中，包括3個(gè)FBA編碼基因（2個(gè)FBA1和At4g26520）、3個(gè)GAPDH編碼基因（GAPA和2個(gè)GPD）等在內(nèi)的10個(gè)基因在黃化葉片中顯著下調(diào)表達(dá)，而另外的6個(gè)基因的表達(dá)則相反，其中包括2個(gè)RPI編碼基因（RPI2）和3個(gè)Rubisco相關(guān)基因（rbcL、RBCS和RBCS1）（圖3B）；在光合磷酸化途徑中，包括4個(gè)Trx編碼基因（Trx1、CXXS1、Os05g0200100、Atlg76760）、2個(gè)NADH-質(zhì)體醌氧化還原酶相關(guān)基因（ndhK與ndhB2）和2個(gè)LFNR跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)相關(guān)基因（TIC32）等在內(nèi)的9個(gè)基因均在黃化葉片中發(fā)生下調(diào)表達(dá)，而包括Trx還原酶編碼基因NTR2、PGR5蛋白編碼基因PGR5、NADH脫氫酶（NDH）相關(guān)基因ndhB等在內(nèi)的5個(gè)基因的表達(dá)則相反（圖3C）；對(duì)于硫代謝相關(guān)基因，包括亞硫酸還原酶（SIR）編碼基因（SIR和SIR1）、5'-腺苷酰硫酸還原酶（APR）基因APR3等在內(nèi)的4個(gè)基因均在黃化葉片中明顯上調(diào)表達(dá)，其余2個(gè)基因的表達(dá)則相反（圖3D）。這一結(jié)果顯示，上述基因的顯著上調(diào)或下調(diào)表達(dá)可能在HAES344澳洲堅(jiān)果葉片黃化過程中對(duì)光合能量代謝具有正調(diào)控或負(fù)調(diào)控作用。

2.3""光合能量代謝相關(guān)基因的qRT-PCR分析

對(duì)20個(gè)重要的光合能量代謝相關(guān)基因進(jìn)行qRT-PCR分析發(fā)現(xiàn)，CAP10A、ATPC、ATPF、rbcL、GAPA、GPD、At4g26520、ndhK、TIC32、CXXS1和Os05g0200100的相對(duì)表達(dá)量在葉片黃化過程中逐漸降低。其中，CAP10A、ATPC、GAPA、GPD、At4g26520和ndhK在S1時(shí)期的相對(duì)表達(dá)量均顯著高于S2和S3，但其在S2與S3之間的表達(dá)量差異均不顯著；ATPF、rbcL、TIC32和CXXS1在S3時(shí)期的相對(duì)表達(dá)量均顯著低于S1和S2，而其在S1與S2之間的表達(dá)量差異均不顯著；Os05g0200100在S1時(shí)期的相對(duì)表達(dá)量顯著高于S3，但其在S1與S2之間以及S2與S3之間的表達(dá)量差異均不顯著（圖4）。

在葉片黃化期間，RPI2、ndhD、PGR5、NTR2、APR3和SIR的相對(duì)表達(dá)量逐漸升高。其中，ndhD、PGR5、NTR2和APR3在S1時(shí)期的相對(duì)表達(dá)量均顯著低于S2和S3，但其在S2與S3之間的表達(dá)量差異均不顯著；RPI2和SIR在S3時(shí)期的相對(duì)表達(dá)量均顯著高于S1和S2，而其在S1與S2之間的表達(dá)量差異均不顯著。另外，ATPA和ndhB的相對(duì)不同小寫字母表示不同時(shí)期間差異顯著（Plt;0.05）。

表達(dá)量均呈現(xiàn)先升后降的變化趨勢，RCA的表達(dá)變化則相對(duì)平穩(wěn)。其中，ATPA在S2和S3時(shí)期的相對(duì)表達(dá)量均顯著高于S1，但其在S2與S3之間差異不明顯；ndhB在S2時(shí)期的相對(duì)表達(dá)量均顯著高于S1和S3，但其在S1與S3之間差異不顯著（圖4）。

3""討論

在本研究中，基于KEGG注釋和富集分析，從鑒定出的96個(gè)與能量代謝途徑相關(guān)的差異基因中篩選到了43個(gè)參與光合能量代謝的功能基因，發(fā)現(xiàn)有27個(gè)基因在HAES344澳洲堅(jiān)果黃化葉片中下調(diào)表達(dá)，其余16個(gè)基因則在黃化葉片中上調(diào)表達(dá)，說明這些基因?qū)S化葉片的光合能量代謝發(fā)揮了重要作用。進(jìn)一步選取20個(gè)關(guān)鍵的光合能量代謝相關(guān)基因進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR分析發(fā)現(xiàn)，大部分基因的相對(duì)表達(dá)量變化與轉(zhuǎn)錄組中基因的RPKM值變化趨勢基本一致，進(jìn)一步表明本研究挑選的20個(gè)關(guān)鍵基因極可能參與了光合能量代謝。

3.1""PSⅡ結(jié)構(gòu)與功能

夏季高溫常導(dǎo)致HAES344澳洲堅(jiān)果新梢葉片變黃，這與ROS積累引起的葉綠素降解和PSⅡ損傷密切相關(guān)[2]。葉綠素作為光合作用的決定性因素，影響著光合同化產(chǎn)物的形成[27]。植物在進(jìn)行光合作用時(shí)，葉綠素只有與葉綠素a/b結(jié)合蛋白結(jié)合形成色素蛋白復(fù)合體后才能行使其吸收與傳遞光能以及參與光化學(xué)反應(yīng)的功能。CP24是PSⅡ捕光天線中的一種外周捕光天線蛋白，在傳遞光能、維持PSII及類囊體膜結(jié)構(gòu)、耗散過量激發(fā)能方面起著重要作用[28]。賈兵等[6]認(rèn)為，增強(qiáng)碭山酥梨黃化葉片中葉綠素a/b結(jié)合蛋白編碼基因Chl"a-b"P4/CP24/29.1的表達(dá)量可提升類囊體膜中電子及質(zhì)子的轉(zhuǎn)移能力。KOVáCS等[29]證實(shí)，CP24蛋白與ROS的清除有關(guān)，在敲除其編碼基因的擬南芥植株中ROS的積累明顯較野生型更高。本研究中，編碼CP24的CAP10A在澳洲堅(jiān)果葉片黃化期間顯著下調(diào)表達(dá)，可能是由于澳洲堅(jiān)果黃化葉片中ROS過量累積所引起的CP24蛋白降解所致，進(jìn)而影響光能的吸收與傳遞。另外，PSBP和PSBR也在黃化葉片中顯著下調(diào)表達(dá)，意味著PSⅡ復(fù)合體的結(jié)構(gòu)完整性和驅(qū)動(dòng)電子傳遞反應(yīng)功能可能遭到破壞[30]。

3.2""葉綠體ATP合成

碳同化是葉綠體利用光反應(yīng)中形成的同化力（ATP和NADPH）將CO2轉(zhuǎn)化為穩(wěn)定碳水化合物的過程。其中，ATP是由ATPase催化光合磷酸化反應(yīng)而產(chǎn)生。高溫下編碼葉綠體ATPase中CF1蛋白α亞基的ATPA和γ亞基的ATPC1在白楊葉片中顯著上調(diào)表達(dá)，促進(jìn)ATP的合成以用于PSⅡ修復(fù)[31]，但在遭受熱脅迫的黃瓜葉片中ATPA明顯下調(diào)表達(dá)[18]。本研究中，ATPC和編碼CF0蛋白a亞基的ATPF均在HAES344澳洲堅(jiān)果黃化葉片中顯著下調(diào)表達(dá)，表明ATPase的CF1及CF0蛋白含量明顯減少，可能使得CF0與CF1的結(jié)合更松散，導(dǎo)致CF1脫離CF0，進(jìn)而造成ATPase喪失ATP合成功能而表現(xiàn)出ATP酶水解ATP的活性[30]。因此，ATPA在黃化葉片中表現(xiàn)為顯著上調(diào)表達(dá)，說明ATPase水解ATP的能力增強(qiáng)，可能是通過釋放能量來提高黃化葉片應(yīng)對(duì)ROS過量積累的一種防衛(wèi)反應(yīng)[32]。

3.3""環(huán)式電子傳遞

電子傳遞鏈?zhǔn)枪夂献饔眯纬赏Φ暮诵沫h(huán)節(jié)。在高等植物的葉綠體中，NADPH是在光合線性電子傳遞的最后一步反應(yīng)中通過LFNR催化還原NADP+而成。楊超等[33]認(rèn)為，位于葉綠體內(nèi)膜上的易位子TIC參與了將LFNR前體蛋白從細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)中轉(zhuǎn)運(yùn)至葉綠體的定位過程。TIC32屬于TIC復(fù)合體的亞基，介導(dǎo)了質(zhì)體蛋白這一轉(zhuǎn)運(yùn)過程[34]。本研究發(fā)現(xiàn)，TIC32在黃化葉片中顯著下調(diào)表達(dá)，意味著LFNR的跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)可能發(fā)生減弱，進(jìn)而限制了線性電子傳遞，降低了葉綠體基質(zhì)中NADPH的生成能力。環(huán)式電子傳遞是葉綠體中ATP合成的一個(gè)重要替代路徑，存在PGRL1/PGR5介導(dǎo)途徑與NAD（P）H脫氫酶（NDH）復(fù)合體介導(dǎo)途徑，對(duì)植物正常生長發(fā)育和抵御逆境具有重要作用[35]。DALCORSO等[36]認(rèn)為，PGRL1/PGR5復(fù)合體可作為質(zhì)子梯度調(diào)節(jié)蛋白參與高溫條件下線性電子流到環(huán)式電子流的轉(zhuǎn)換，對(duì)誘導(dǎo)熱耗散和保護(hù)PSⅡ免遭光抑制是必需的。NDH介導(dǎo)的環(huán)式電子傳遞能夠緩解葉綠體基質(zhì)過度還原，維持電子傳遞鏈氧化還原系統(tǒng)的平衡，驅(qū)動(dòng)ATP合成[35]。敲除編碼NDH基因的煙草對(duì)高溫脅迫敏感[37]。本研究中，PGR5、ndhB和ndhD在黃化葉片中顯著上調(diào)表達(dá)，意味著黃化葉片能通過增強(qiáng)環(huán)式電子流來生成ATP和耗散過剩熱量，用以修復(fù)或減輕氧化脅迫對(duì)光系統(tǒng)造成的損傷。然而，ndhK和ndhB2在黃化葉片中顯著下調(diào)表達(dá)，說明黃化葉片中構(gòu)成NDH復(fù)合體的亞基含量明顯減少，暗示了整個(gè)NDH復(fù)合體的穩(wěn)定性可能受到影響[35]。

3.4""葉綠體氧化還原狀態(tài)

硫氧還蛋白（Trx）是一類小分子蛋白，不僅直接參與ROS的清除，還能通過改變其氧化還原狀態(tài)來調(diào)節(jié)光合電子傳遞速率[22]。KANG等[23]認(rèn)為，在Trx系統(tǒng)中，氧化態(tài)的Trx和Trx類蛋白可被NTR還原，用以維持葉綠體的氧化還原平衡。本研究表明，編碼Trx的Trx1和Os05g0200100以及編碼Trx類蛋白的CXXS1均在黃化葉片中顯著下調(diào)表達(dá)，意味著Trx的功能可能受到抑制，導(dǎo)致黃化葉片細(xì)胞內(nèi)的氧化還原狀態(tài)失衡，進(jìn)而影響了光合電子傳遞；然而，NTR2顯著上調(diào)表達(dá)，表明黃化葉片可能發(fā)生了氧化應(yīng)激，通過將Trx從氧化態(tài)轉(zhuǎn)化為還原態(tài)，提高其清除ROS的能力，以緩解氧化脅迫。硫代謝在植物體的生長發(fā)育中起著至關(guān)重要的作用，SIR和APR可充當(dāng)電子供體來還原Trx[38]。在黃化葉片中，SIR和APR3的相對(duì)表達(dá)量顯著增加，說明更多的Trx可能得到還原，用以維持光合電子傳遞和抵抗氧化脅迫。

3.5""碳同化能力

在光合碳同化過程中，Rubisco是最重要的限速酶，但Rubisco活性受到RCA的調(diào)控[4]。紫花苜蓿葉片中編碼Rubisco大亞基的rbcL在干熱脅迫下呈現(xiàn)出先顯著增加、后持續(xù)降低的表達(dá)變化趨勢[9]，干旱脅迫下rbcL的下調(diào)表達(dá)導(dǎo)致冬油菜葉片光合作用的下降[8]。PERDOMO等[5]認(rèn)為，高溫脅迫下葉片中Rubisco活性的降低是因?yàn)镽CA活性受到高溫抑制而造成活化的Rubisco數(shù)量減少所致。本研究發(fā)現(xiàn)，rbcL在重度黃化葉片中顯著下調(diào)表達(dá)，表明Rubisco的大亞基發(fā)生了降解，可能是黃化葉片中ROS引起的酶促或非酶促裂解所致[7]。然而，RCA的表達(dá)在葉片黃化過程中未發(fā)生顯著性變化，意味著RCA可能發(fā)生了熱聚合，使得RCA從可溶性組分向不溶性組分轉(zhuǎn)移，導(dǎo)致RCA含量變化不明顯[39]。另外，卡爾文循環(huán)的運(yùn)轉(zhuǎn)速率與GAPDH、FBA、RPI等酶的活性水平關(guān)系密切[10-12]。GAPDH是催化光合最初產(chǎn)物1，3-二磷酸甘油酸還原為3-磷酸甘油醛的關(guān)鍵調(diào)節(jié)酶，其活性的高低會(huì)影響光合速率及光合產(chǎn)物的積累。葉綠體GAPDH上調(diào)表達(dá)及其編碼的酶活性提高，有利于增強(qiáng)光合代謝在逆境下的抗性[13]。本研究結(jié)果表明，編碼GAPDH的GAPA和GPD在黃化葉片中顯著下調(diào)表達(dá)，說明黃化葉片的光合能力下降，也意味著GAPDH的活性變化可能與葉綠體所遭受的氧化還原失衡有關(guān)[23]。FBA所催化的反應(yīng)位于RuBP再生階段，在很大程度上控制碳的固定和流量。本研究中，編碼FBA的At4g2652也在黃化葉片中顯著下調(diào)表達(dá)，意味著RuBP的再生能力減弱，與HAAKE等[11]發(fā)現(xiàn)馬鈴薯葉中因FBA表達(dá)減弱而引起光合作用顯著降低的結(jié)果較一致。然而，編碼核糖-"5-磷酸異構(gòu)酶的RPI2在重度葉片黃化中顯著上調(diào)表達(dá)，可能是黃化葉片對(duì)高溫環(huán)境的應(yīng)激響應(yīng)所致。

4""結(jié)論

本研究基于轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)分析，確定了43個(gè)光合能量代謝相關(guān)基因在HAES344澳洲堅(jiān)果夏梢葉片自然黃化過程的表達(dá)模式；通過qRT-PCR分析發(fā)現(xiàn)，CAP10A、ATPC、ATPF、GAPA、GPD、At4g2652與rbcL等基因在黃化葉片中顯著下調(diào)表達(dá)，可能導(dǎo)致了PSⅡ捕獲天線蛋白降解、葉綠體ATP合成功能減弱和碳同化能力下降，而PGR5、ndhB、ndhD、NTR2、SIR和APR3等基因顯著上調(diào)表達(dá)以及TIC32、Os05g0200100、CXXS1等基因顯著下調(diào)表達(dá)，可能造成葉綠體內(nèi)氧化還原狀態(tài)失衡，并激發(fā)環(huán)式電子流，用以減輕氧化脅迫對(duì)光合能量機(jī)構(gòu)的損傷。本研究為深入探討澳洲堅(jiān)果葉片黃化機(jī)制提供參考依據(jù)。

參考文獻(xiàn)

[1]"楊為海，"曾利珍，"曾輝，"萬繼鋒，"陳倪，"鄒明宏，"陸超忠，"張漢周，"羅煉芳，"朱文華."澳洲堅(jiān)果種質(zhì)資源葉片形態(tài)性狀觀測分析[J]."熱帶作物學(xué)報(bào)，"2020，"41（1）："69-76."YANG"W"H，"ZENG"L"Z，"ZENG"H，"WAN"J"F，"CHEN"N，"ZOU"M"H，"LU"C"Z，"ZHANG"H"Z，"LUO"L"F，"ZHU"W"H."Investigation"and"analysis"on"leaf"morphological"characters"of"macadamia"germplasm"resources[J]."Chinese"Journal"of"Tropical"Crops，"2020，"41（1）："69-76."（in"Chinese）

• 楊為海，"曾輝，"萬繼鋒，"張漢周，"陸超忠."高溫條件下澳洲堅(jiān)果葉片黃化的生理特性[J]."熱帶作物學(xué)報(bào)，"2021，"42（3）："830-838.YANG"W"H，"ZENG"H，"WAN"J"F，"ZHANG"H"Z，"LU"C"Z."Preliminary"study"on"physiological"characteristics"of"macadamia"leaf"etiolation"under"high"temperature[J]."Chinese"Journal"of"Tropical"Crops，"2021，"42（3）："830-838."（in"Chinese）
• 唐婷，"鄭國偉，"李唯奇."植物光合系統(tǒng)對(duì)高溫脅迫的響應(yīng)機(jī)制[J]."中國生物化學(xué)與分子生物學(xué)報(bào)，"2012，"28（2）："127-132.TANG"T，"ZHENG"G"W，"LI"W"Q."Defense"mechanisms"of"plants"photosystem"to"heat"stress[J]."Chinese"Journal"of"Biochemistry"and"Molecular"Biology，"2012，"28（2）："127-132."（in"Chinese）
• PORTIS"J"A"R."Rubisco"activase-rubisco’s"catalytic"chaperone[J]."Photosynthesis"Research，"2003，"75："11-27.
• PERDOMO"J"A，"CAPó-BAUCà"S，"CARMO-SILVA"E，"GALMéS"J."Rubisco"and"rubisco"activase"play"an"important"role"in"the"biochemical"limitations"of"photosynthesis"in"rice，"wheat，"and"maize"under"high"temperature"and"water"deficit[J]."Frontiers"in"Plant"Science，"2017，"8："490."
• 賈兵，"董煒昱，"郭國凌，"張舒琴，"陳猛，"許波，"衡偉."外源Fe2+對(duì)梨黃化葉光合能力及糖合成代謝的影響[J]."果樹學(xué)報(bào)，"2022，"39（1）："25-35.JIA"B，"DONG"W"Y，"GUO"G"L，"ZHANG"S"Q，"CHEN"M，"XU"B，"HENG"W."Effects"of"ferrous"sulfate"applied"by"foliar"spray"on"photosynthesis"and"photoproducts"metabolism"of"the"chlorotic"pear"leaves"（Pyrus"bretschneideri"‘DangshanSuli’）[J]."Journal"of"Fruit"Science，"2022，"39（1）："25-35."（in"Chinese）
• 劉擁海，"彭新湘，"李明啟."水稻葉片中過氧化氫與核酮糖-1，5-二磷酸羧化酶/加氧酶降解的關(guān)系[J]."植物生理學(xué)報(bào)，"2000，"26（6）："481-486."LIU"Y"H，"PENG"X"X，"LI"M"Q."Degradation"of"ribulose-1，5-bisphosphate"carboxylase/oxygenase"in"rice"leaves"under"oxidative"stress"induced"by"methyl"viologen[J]."Acta"Phytophysiologica"Sinica，"2000，"26（6）："481-486."（in"Chinese）
• 米超，"趙艷寧，"劉自剛，"陳其鮮，"孫萬倉，"方彥，"李學(xué)才，"武軍艷."白菜型冬油菜"RuBisCo"蛋白亞基基因rbcL和rbcS的克隆及其在干旱脅迫下的表達(dá)[J]."作物學(xué)報(bào)，"2018，"44（12）："1882-1890.MI"C，"ZHAO"Y"N，"LIU"Z"G，"CHEN"Q"X，"SUN"W"C，"FANG"Y，"LI"X"C，"WU"J"Y."Cloning"of"RuBisCo"subunits"genes"rbcL"and"rbcS"from"winter"rapeseed"（Brassica"rapa）"and"their"expression"under"drought"stress[J]."Acta"Agronomica"Sinica，"2018，"44（12）："1882-1890."（in"Chinese）
• 許超，"何承剛，"牟蘭，"畢玉芬，"姜華."干熱脅迫下紫花苜蓿Rubisco羧化酶和活化酶活性變化及其基因表達(dá)的研究[J]."草地學(xué)報(bào)，"2021，"29（2）："228-293."XU"C，"HE"C"G，"MU"L，"BI"Y"F，"JIANG"H."The"activities"of"rubisco"carboxylase"and"activase"and"their"gene"expressions"in"alfalfa"under"drought"and"heat"stresses[J]."Acta"Agrestia"Sinica，"2021，"29（2）："228-293."（in"Chinese）
• 張愛軍，"商振清，"董永華，"李廣敏，"張曉紅."6-BA和KT對(duì)干旱條件下小麥旗葉甘油醛-3-磷酸脫氫酶及光合作用的影響[J]."河北農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，"2000，"32（2）："37-41."ZHANG"A"J，"SHANG"Z"Q，"DONG"Y"H，"LI"G"M，"ZHANG"X"H."Effect"of"6-BA"and"KT"on"glyceraldehy-3-phospate"dehydrogenase"activity"and"phytosynthesis"in"wheat"flag"leaves"under"soil"drought[J]."Journal"of"Agricultural"University"of"Hebei，"2000，"32（2）："37-41."（in"Chinese）
• HAAKE"V，"ZRENNER"R，"SONNEWALD"U，"STITT"M."Amoderate"decrease"of"plastid"aldolase"activity"inhibits"photosynthesis，"alters"the"levels"of"sugars"and"starch，"and"inhibits"growth"of"potato"plants[J]."The"Plant"Journal，"1998，"14（2）："147-157.
• 巴桑玉珍，"扎桑，"王玉林，"徐齊君，"原紅軍，"尼瑪扎西."青稞新光合作用相關(guān)基因的克隆和序列分析[J]."大麥與谷類科學(xué)，"2017，"34（6）："1-7."BASANG"YUZHEN，"ZASANG，"WANG"Y"L，"XU"Q"J，"YUAN"H"J，"NYIMA"TASHI."Cloning"and"sequence"analysis"of"photosynthesis-related"genes"in"Tibetan"hulless"barley"（Hordeum"vulgare"L."var."Nudum"HK."f.）[J]."Barley"and"Cereal"Sciences，"2017，"34（6）："1-7."（in"Chinese）
• 吳巧玉，"何天久."五種相關(guān)光合蛋白基因在馬鈴薯野生種冷馴化中的表達(dá)分析[J]."種子，"2021，"40（12）："56-60.WU"Q"Y，"HE"T"J."Expression"analysis"of"five"photosynthesis-related"protein"genes"in"cold"acclimation"of"wild"potato"varieties[J]."Seed，"2021，"40（12）："56-60."（in"Chinese）
• MICHELIS"R，"GEPSTEIN"S."Identification"and"characterization"of"a"heat"induced"isoform"of"aldolase"in"oat"chloroplast[J]."Plant"Molecular"Biology，"2000，"44："487-498.
• LI"H，"AHAMMED"G"J，"ZHOU"G"N，"XIA"X"J，"ZHOU"J，"SHI"K，"YU"J"Q，"ZHOU"Y"H."Unraveling"main"limiting"sites"of"photosynthesis"under"below-"and"above-ground"heat"stress"in"cucumber"and"the"alleviatory"role"of"luffa"rootstock[J]."Frontiers"in"Plant"Science，"2016，"7："746.
• CHOUDHURY"F"K，"RIVERO"R"M，"BLUMWALD"E，"MITTLER"R."Reactive"oxygennbsp;species，"abiotic"stress"and"stress"combination[J]."The"Plant"Journal，"2017，"90："856-867.
• 莫億偉，"郭振飛."溫度脅迫對(duì)苜蓿和柱花草光合作用及N同化的影響[J]."草地學(xué)報(bào)，"2008，"16（1）："100-102."MO"Y"W，"GUO"Z"F."The"Effects"of"temperature"stress"on"photosynthesis"and"nitrogen"reduction"of"alfalfa"and"Guyana"stylosanthes[J]."Acta"Agrestia"Sinica，"2008，"16（1）："100-102."（in"Chinese）
• WANG"L，"ZHOU"H，"GUO"S，"AN"Y，"SHU"S，"LU"N，"SUN"J."Exogenous"spermidine"maintains"the"chloroplast"structure"of"cucumber"seedlings"and"inhibits"the"degradation"of"photosynthetic"protein"complexes"under"high-temperature"stress[J]."Acta"Physiologiae"Plantarum，"2018，"40（3）：1-15.
• ZHANG"R，"SHARKEY"T"D."Photosynthetic"electron"transport"and"proton"flux"under"moderate"heatstress[J]."Photosynthesis"Research，"2009，"100："29-43.
• HUANG"W，"ZHANG"S"B，"CAO"K"F."Cyclic"electron"flow"plays"an"important"role"in"photoprotection"of"tropical"trees"illuminated"at"temporal"chilling"temperature[J]."Plant"Cell"Physiology，"2011，"52："297-305.
• YAMORI"W，"SHIKANAI"T."Physiological"functions"of"cyclic"electron"transport"around"photosystem"Ⅰ"in"sustaining"photosynthesis"and"plant"growth[J]."Annual"Review"of"Plant"Biology，"2016，"67（1）："81-106.
• DIETZ"K"J，"PFANNSCHMIDT"T."Novel"regulators"in"photosynthetic"redox"control"of"plant"metabolism"and"gene"expression[J]."Plant"Physiology，"2011，"155（4）：1477-1485.
• KANG"Z，"QIN"T，"ZHAO"Z."Thioredoxins"and"thioredoxin"reductase"in"chloroplasts："a"review[J]."Gene，"2019，"706："32-42."
• OKEGAWA"Y."Characterization"of"factors"affecting"the"activity"of"photosystem"I"cyclic"electron"transport"in"chloroplasts[J]."Plant"amp;"Cell"Physiology，"2008，"49（5）："825-834.
• YANG"W"H，"XU"H"Y，"XIAO"Q"S，"LI"X"P，"SHAO"Q."Combined"analysis"of"metabolome"and"transcriptome"provides"insights"into"metabolisms"of"chlorophylls，"carotenoids，"and"flavonoids"in"the"yellowing"leaves"of"‘HAES344’"macadamia[J]."Scientia"Horticulturae，"2023，"308："111600.
• 楊倩，"楊子平，"周婭麗，"陳東泉，"劉恒."澳洲堅(jiān)果實(shí)時(shí)熒光定量"PCR"分析中內(nèi)參基因的篩選[J]."熱帶作物學(xué)報(bào)，"2020，"41（8）："1505-1512."YANG"Q，"YANG"Z"P，"ZHOU"Y"L，"CHEN"D"Q，"LIU"H."Screening"of"stable"reference"genes"for"qRT-PCR"analysis"in"Macadamia"integrifolia[J]."Chinese"Journal"of"Tropical"Crops，"2020，"41（8）："1505-1512."（in"Chinese）
• LI"J，"CAO"X"M，"JIA"X"C，"LIU"L"Y，"CAO"H"W，"QIN"W"Q，"LI"M."Iron"deficiency"leads"to"chlorosis"through"impacting"chlorophyll"synthesis"and"nitrogen"metabolism"in"Areca"catechu"L.[J]."Frontiers"in"Plant"Science，"2021，"12："710093."
• 李韻佳."低溫脅迫下三倍體枇杷微量捕光天線蛋白基因EjLhcb4.1/5/6的功能分析[D]."重慶："西南大學(xué)，"2021.LI"Y"J."Functional"characterization"of"light"harvesting"chlorophyll"a/b"binding"antenna"proteins"EjLhcb4.1/5/6"genes"in"triploid"loquat"（Eriobotrya"japonica）"under"cold"stress[D]."Chongqing："Southwest"University，"2021."（in"Chinese）
• KOVáCS"L，"DAMKJ?R"J，"KERE?CHE"S，"LLIOAIA"C，"RUBAN"A"V，"BOEKEMA"E"J，"JANSSON"S，"HORTON"P."Lack"of"the"light"harvesting"complex"CP24"affects"the"structure"and"function"of"the"grana"membranes"of"higher"plant"chloroplasts[J]."The"Plant"Cell，"2006，"18（11）："3106-3120.
• 武維華."植物生理學(xué)[M]."3版."北京："科學(xué)出版社，"2018："122-130.WU"W"H."Plant"physiology[M]."3rd"ed."Beijing："Science"Press，"2018："129-130."（in"Chinese）
• SONG"Y"P，"CHEN"Q"Q，"CI"D，"SHAO"X"N，"ZHANG"D"Q."Effects"of"high"temperature"on"photosynthesis"and"related"gene"expression"in"poplar[J]."BMC"Plant"Biology，"2014，"14："111.
• 蔡智博."擬南芥atpA基因調(diào)控植物響應(yīng)低溫脅迫的分子機(jī)制研究[D]."哈爾濱："東北農(nóng)業(yè)大學(xué)，"2020.CAI"Z"B."Studies"on"molecular"mechanism"of"atpA"gene"regulating"plants"response"to"low"temperature"stress"in"Arabidopsis[D]."Harbin："Northeast"Agricultural"University，"2020."（in"Chinese）
• 楊超，"胡紅濤，"吳平，"莫肖蓉."高等植物鐵氧還蛋白-"NADP+氧化還原酶研究進(jìn)展[J]."植物生理學(xué)報(bào)，"2014，"50"（9）："1353-1366."YANG"C，"HU"H"T，"WU"P，"MO"X"R."Advances"in"the"research"of"ferredoxin-NADP+"oxidoreductase"in"higher"plants[J]."Plant"Physiology"Journal，"2014，"50（9）："1353-1366."（in"Chinese）
• ARONSSON"H，"JARVIS"P."The"chloroplast"protein"import"apparatus，"its"components，"and"their"roles[C]//SANDELIUS"A"S，"ARONSSON"H."Plant"cell"monographs，"Vol."13："the"chloroplast-interactions"with"the"environment."Heidelberg："Springer-Verlag，"2009："100-102.
• 劉玉鳳，"王珍琪，"鹿嘉智，"張耀豐，"劉翰林，"王峰，"齊明芳，"李天來."葉綠體NAD（P）H脫氫酶復(fù)合體調(diào)控光合作用的研究進(jìn)展[J]."植物生理學(xué)報(bào)，"2019，"55（7）："932-940."LIU"Y"F，"WANG"Z"Q，"LU"J"Z，"ZHANG"Y"F，"LIU"H"L，"WANG"F，"QI"M"F，"LI"T"L."Regulation"of"chloroplast"NAD（P）H"dehydrogenase"complex"in"photosynthesis[J]."Plant"Physiology"Journal，"2019，"55（7）："932-940."（in"Chinese）
• DALCORSO"G，"PESARESI"P，"MASIERO"S，"ASEEVA"E，"SCHüNEMANN"D，"FINAZZI"G，"JOLIOT"P，"BARBATO"R，"LEISTER"D."A"complex"containing"PGRL1"and"PGR5"is"involved"in"the"switch"between"linear"and"cyclic"electron"flow"in"Arabidopsis[J]."Cell，"2008，"132（2）："273-285."
• PENG"W，"WEI"D，"TAKABAYASHI"A，"ENDO"T，"SHIKANAI"T，"YE"J"Y，"MI"H"L."Chloroplastic"NAD（P）H"dehydrogenase"in"tobacco"leaves"functions"in"alleviation"of"oxidative"damage"caused"by"temperature"Stress[J]."Plant"Physiology，"2006，"141（2）："465-474.
• KIM"S"K，"RAHMAN"A，"MASON"J"T，"HIRASAWA"M，"CONOVER"R"C，"JOHNSON"M"K，"MIGINIAC-MASLOW"M，"KERYER"E，"KNAFF"D"B，"LEUSTEK"T."The"interaction"of"5′-adenylylsulfate"reductase"from"Pseudomon"asaeruginosa"with"its"substrates[J]."Biochimica"et"Biophysica"Acta，"2005，"1710："103-112."
• 陳候鳴，"陳躍，"王盾，"蔣德安."核酮糖-1，5-二磷酸羧化酶/加氧酶活化酶在植物抗逆性中的作用[J]."植物生理學(xué)報(bào)，"2016，"52（11）："1637-1648.CHEN"H"M，"CHEN"Y，"WANG"D，"JIANG"D"A."The"role"of"ribulose-1，5-bisphosphate"carboxylase/oxygenase"activase"in"resistance"of"plant"to"abiotic"stresses[J]."Plant"Physiology"Journal，"2016，"52"（11）："1637-1648."（in"Chinese）