固相萃取-氣相色譜/質(zhì)譜聯(lián)用法檢測(cè)茶葉中15種農(nóng)藥殘留

李琳 馬淑青 代飛飛 聶丹丹

摘 要：目的：建立同時(shí)測(cè)定茶葉中15種農(nóng)藥殘留的氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法。方法：準(zhǔn)確稱取樣品，經(jīng)均勻粉碎、加水浸泡后，乙腈萃取，氮?dú)獯抵两?，采用丙酮、二氯甲烷?fù)溶，PC/NH2-SPE固相萃取柱凈化，上機(jī)測(cè)定，外標(biāo)法定量。結(jié)果：同時(shí)測(cè)定15種農(nóng)藥分離效果好，標(biāo)準(zhǔn)曲線相關(guān)系數(shù)均大于0.996，檢出限為0.024～0.840 μg·kg-1，平均加標(biāo)回收率為85.3%～92.8%，RSD為3.8%～8.6%。結(jié)論：所建立的方法回收效果好，操作簡(jiǎn)便快速，準(zhǔn)確度與精密度均較高，適用于茶葉中多種農(nóng)藥殘留的測(cè)定。

關(guān)鍵詞：氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用；固相萃??；茶葉；農(nóng)藥殘留

Determination of 15 pesticides Residues in Tea by Solid Phase Extraction-Gas Chromatography/Mass Spectrometry

LI Lin， MA Shuqing， DAI Feifei， NIE Dandan

（Weifang Center for Disease Control and Prevention， Weifang 261061， China）

Abstract： Objective： To establish a method for detecting 15 pesticides residues in tea by gas chromatography/mass spectrometry. Method： Crushed the sample and soak it in water， then extracted by acetonitrile， and blow the organic nitrogen to dry. Redissolved by acetone and dichloromethane the sample and purified through PC/NH2-SPE column. Detected the homogenized samples by gas chromatography/mass spectrometry and analysed by external standard method. Result： Simultaneous determination of 15 pesticides has good separation effect. The correlation coefficients of the standard curve are all more than 0.996. The minimum detection concentration were 0.024～

0.860 mg·kg-1， the average recovery rates were 85.3%～92.8% and the RSD were 3.8%～8.6%. Conclusion： The established method has good recovery effect， simple and convenient operation， high accuracy and precision， and is suitable for the determination of various pesticides residues in tea.

Keywords： gas chromatography/mass spectrometry; solid phase extraction; tea; pesticide residues

山東省作為江北茶區(qū)之一，所產(chǎn)日照綠茶、嶗山綠茶、莒南茶、沂蒙綠茶等受到廣大消費(fèi)者的歡迎。近年來(lái)，由于茶葉飲用安全問(wèn)題，其多類農(nóng)藥殘留的分析檢測(cè)成為行業(yè)關(guān)注的焦點(diǎn)[1-2]?？紤]到茶葉基質(zhì)復(fù)雜，建立了固相萃取[3]-氣相色譜/質(zhì)譜聯(lián)用

法[4-5]（Gas Chromatography-Mass Spectrometry，GC/MS）測(cè)定茶葉中15種農(nóng)藥殘留的分析方法。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

15種農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品（100 μg·mL-1），均購(gòu)自農(nóng)業(yè)農(nóng)村部環(huán)境保護(hù)科研監(jiān)測(cè)所；乙腈、丙酮、正己烷和二氯甲烷，美國(guó)Fisher；氯化鈉（優(yōu)級(jí)純）、無(wú)水硫酸鎂（分析純），國(guó)藥集團(tuán)；Cleanert PC/NH2-SPE固相萃取柱（500 mg/500 mg/6 mL），美國(guó)Agela。

1.2 儀器與設(shè)備

手動(dòng)固相萃取儀（北京萊伯泰科）；ISQ單四極桿GC/MS聯(lián)用儀（美國(guó)賽默飛）；N-EVAP氮吹儀（美國(guó)Organomation）；渦旋振蕩器（德國(guó)Heidolph）；LYNX400高速落地離心機(jī)（美國(guó)賽默飛）；ARA520電子天平（奧豪斯）。

1.3 標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液與標(biāo)準(zhǔn)溶液配制

將置于室溫平衡后的15種農(nóng)殘標(biāo)準(zhǔn)溶液全部移入50 mL容量瓶中，用正己烷溶液（色譜級(jí)）少量多次清洗各標(biāo)準(zhǔn)溶液小瓶合并洗液至容量瓶中，定容至50 mL，配制成濃度為2.0 μg·mL-1的混合標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液。再將標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液稀釋成濃度為0.2 μg·mL-1、

0.4 μg·mL-1、0.6 μg·mL-1、0.8 μg·mL-1和1.0 μg·mL-1的標(biāo)準(zhǔn)系列溶液。

1.4 實(shí)驗(yàn)條件

1.4.1 色譜條件

色譜柱：TG-5MS（30 m×0.25 mm，0.25 μm）；載氣：高純He；柱流量：1.0 mL·min-1；進(jìn)樣口溫度：280 ℃；采用不分流進(jìn)樣，進(jìn)樣量：1 μL；程序升溫：40 ℃保持1 min，之后以30 ℃·min-1升溫至130 ℃，再以5 ℃·min-1升溫至250 ℃，最后以10 ℃·min-1升溫至300 ℃并保持5 min；接口溫度：280 ℃。

1.4.2 質(zhì)譜條件

轟擊電子能量：70 eV；全掃描范圍：40～550 amu；采用全掃描模式和選擇離子監(jiān)測(cè)模式采集信號(hào)；電離源溫度：230 ℃。

1.5 樣品提取與凈化

準(zhǔn)確稱取1.0 g均勻粉碎的茶葉樣品于50 mL離心管中，加水10 mL渦旋混勻并浸泡30 min，再加入10 mL乙腈和1 g氯化鈉，渦旋振蕩0.5 min，待液液分層后加入4 g無(wú)水硫酸鈉，迅速旋上瓶蓋，振蕩渦旋1 min，10 000 r·min-1離心5 min，取5.0 mL上清液于45 ℃水浴中氮吹至近干，10 mL丙酮分3次加入，提取液采用二氯甲烷（1∶1）洗脫樣品，洗脫液經(jīng)過(guò)PC/NH2-SPE固相萃取柱凈化提取，收集于KD濃縮瓶中，氮吹至0.5 mL，待GC/MS分析測(cè)定。

2 結(jié)果與分析

2.1 色譜條件的優(yōu)化

根據(jù)“相似相容”原理，選擇適合各待測(cè)組分化學(xué)性質(zhì)的TG-5MS色譜柱分離15種農(nóng)藥殘留；40 ℃保持1 min，以30 ℃·min-1升溫至130 ℃，以5 ℃·min-1升溫至250 ℃，再以10 ℃·min-1升溫至300 ℃保持5 min；進(jìn)樣方式選擇不分流進(jìn)樣。通過(guò)全掃描方式確定每種待測(cè)目標(biāo)物的保留時(shí)間和定性定量離子，見(jiàn)表1。總離子流圖（見(jiàn)圖1）顯示，在TG-5MS色譜柱中15種農(nóng)藥殘留能有效分離。

2.2 方法的線性范圍、標(biāo)準(zhǔn)曲線和檢出限

混合農(nóng)藥殘留標(biāo)準(zhǔn)系列配制5個(gè)濃度，濃度在0.2～1.0 μg·mL-1，以濃度為橫坐標(biāo)、以峰面積為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線并進(jìn)行線性回歸分析。15種農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)溶液的回歸方程、相關(guān)系數(shù)、檢出限見(jiàn)表2。

2.3 方法的精密度與回收率

準(zhǔn)確稱取1.0 g空白茶葉樣品6份，分別加入0.8 μg·mL-1的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，混勻后靜置1 h，按上述1.5試驗(yàn)步驟提取凈化后上機(jī)測(cè)定，分別計(jì)算其加標(biāo)回收率與相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（Relative Standard Deviation，RSD），結(jié)果見(jiàn)表2。結(jié)果表明，方法的平均加標(biāo)回收率為85.3%～92.8%，各待測(cè)組分相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（n=6）為3.8%～8.6%，符合農(nóng)藥殘留分析的要求。

2.4 樣品測(cè)定

用本文建立的方法對(duì)80份茶葉進(jìn)行檢測(cè)，檢出農(nóng)藥殘留46份，檢出率57.5%；超標(biāo)樣品5份，超標(biāo)率6.25%。

3 結(jié)論

本文建立了同時(shí)測(cè)定茶葉中15種常見(jiàn)農(nóng)藥殘留的固相萃取-氣相色譜/質(zhì)譜聯(lián)用分析方法，方法回收效果好，操作簡(jiǎn)便快速，準(zhǔn)確度與精密度均較高，適用于茶葉中多種農(nóng)藥殘留的測(cè)定。

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