雙歧桿菌三聯(lián)活菌膠囊輔治晚期肝癌對(duì)患者療效及免疫功能的影響

羅仕華,何良梅,范琳,范飛燕,劉威

肝癌可分為原發(fā)性與繼發(fā)性兩種,前者指肝細(xì)胞或肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞發(fā)生的惡性腫瘤;后者多為轉(zhuǎn)移瘤[1]。流行病學(xué)結(jié)果顯示,我國是肝癌高發(fā)國家,每年約有新發(fā)病例46萬,且患者病死率亦相對(duì)較高[2]。越來越多的研究結(jié)果證實(shí):腸道菌群在促進(jìn)肝癌發(fā)展中發(fā)揮了關(guān)鍵作用[3]。腸道菌群在病理狀態(tài)下則會(huì)引起腸道菌群紊亂、失調(diào),引起機(jī)體免疫功能受損,直接參與疾病的發(fā)生、發(fā)展[4]。研究證實(shí),腸道菌群與惡性腫瘤存在緊密的聯(lián)系,持續(xù)的胃腸道菌群紊亂,能影響腸道菌群的生態(tài)調(diào)節(jié),為腫瘤的增殖創(chuàng)造條件[5]。故積極采取干預(yù)措施,調(diào)節(jié)機(jī)體腸道菌群,能預(yù)防疾病的發(fā)生。本研究觀察雙歧桿菌三聯(lián)活菌膠囊輔治晚期肝癌對(duì)患者療效及免疫功能的影響,報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選取2018年4月—2020年6月贛南醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院收治的晚期肝癌患者60例,采用隨機(jī)數(shù)字表法分為觀察組和對(duì)照組,每組30例。觀察組男19例,女11例;年齡43～82(65.97±5.91)歲;體質(zhì)指數(shù)(BMI)17～29(23.58±3.32)kg/m2;肝功能分級(jí):A級(jí)10例,B級(jí)14例,C級(jí)6例;巴塞羅那臨床肝癌分期系統(tǒng)(BCLC)分期:C期25例,D期5例;肝硬化:是20例,否10例。對(duì)照組男17例,女13例;年齡46～81(63.26±5.68)歲;BMI 18～29(23.51±3.29)kg/m2;肝功能分級(jí):A級(jí)12例,B級(jí)13例,C級(jí)5例;BCLC分期:C期26例,D期4例;肝硬化:是22例,否8例。2組患者臨床資料比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),具有可比性。本研究經(jīng)醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)核準(zhǔn),患者及家屬已知曉研究?jī)?nèi)容并簽署知情同意書。

1.2 病例選擇標(biāo)準(zhǔn)[6-7]納入標(biāo)準(zhǔn):(1)符合中晚期肝癌診斷標(biāo)準(zhǔn);(2)BCLC分期C～D期,存在影像學(xué)可測(cè)量病灶;(3)預(yù)計(jì)生存期>6個(gè)月,符合索拉菲尼藥物適應(yīng)證,均無相關(guān)藥物過敏史。排除標(biāo)準(zhǔn):(1)存在靶向藥物用藥禁忌證者;(2)妊娠期或哺乳期女性;(3)血常規(guī)、凝血功能及心電圖異常者;(4)合并心、腦、肺等非腫瘤性嚴(yán)重疾病者。

1.3 方法

1.3.1 治療方法:2組均予常規(guī)治療,包括補(bǔ)充維生素,予抗過敏、止吐等,患者接受治療前至少進(jìn)行1次系統(tǒng)的抗腫瘤治療,即索拉非尼結(jié)合晚期肝癌綜合治療。甲苯磺酸索拉非尼片(Bayer AG生產(chǎn))每次400 mg,每天2次,服藥前2 h禁食。同時(shí),治療前對(duì)患者ECOG體力狀況及臨床癥狀等進(jìn)行全面評(píng)估,治療4周期間加強(qiáng)患者CT或MRI檢查,記錄所發(fā)現(xiàn)的可測(cè)量的病灶并將其作為基線資料,用藥后第6周、12周分別完成上述影像學(xué)檢查,后每8周進(jìn)行1次影像學(xué)檢查。觀察組在上述基礎(chǔ)上聯(lián)合雙歧桿菌三聯(lián)活菌膠囊(上海上藥信誼藥廠有限公司生產(chǎn),規(guī)格:0.21 g)治療,每次2?？诜?每天3次,連續(xù)治療4周(1個(gè)療程)后隨訪6個(gè)月比較近期療效差異。

1.3.2 腸道菌群標(biāo)本采集與檢測(cè):采集患者治療前、治療后4周新鮮糞便及靜脈血液標(biāo)本,采用實(shí)時(shí)熒光PCR法(購自于美國ABI PCR擴(kuò)增儀)測(cè)定雙歧桿菌、乳酸桿菌、大腸桿菌、腸球菌水平,反應(yīng)引物見表1[8]。

表1 引物設(shè)計(jì)

借助Blast在線完成特異性核實(shí)后,完成引物設(shè)計(jì)。參數(shù)測(cè)定:30 ℃下操作10 min;42 ℃處理30 min;99 ℃下處理5 min;5 ℃下處理5 min,合計(jì)完成循環(huán)35個(gè),最終10 min延長(zhǎng),溫度72 ℃。將上述反應(yīng)得到的產(chǎn)物置于1.5%瓊脂凝膠中電泳。

1.4 觀察指標(biāo) 比較2組近期療效、治療前后腸道菌群(雙歧桿菌、乳酸桿菌、大腸桿菌、腸球菌)水平變化、炎性指標(biāo)[內(nèi)毒素、白介素-10(IL-10)、腫瘤壞死因子-α(TNF-α)]差異,以及不良反應(yīng)(惡心嘔吐、脫發(fā)、白細(xì)胞異常、血壓波動(dòng)及肝腎異常)發(fā)生情況。治療前與治療4周后采集患者糞便樣本,采用實(shí)時(shí)熒光PCR法測(cè)定雙歧桿菌、乳酸桿菌、大腸桿菌、腸球菌水平;采集空腹靜脈血液樣本3 ml,采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)測(cè)定患者免疫指標(biāo)水平。

1.5 近期療效判定標(biāo)準(zhǔn) (1)完全緩解(CR):患者癥狀體征消失,腫瘤消失;(2)部分緩解(PR):患者癥狀體征得到改善,腫瘤體積縮小;(3)穩(wěn)定(SD):患者癥狀體征緩解,瘤體體積未見明顯變化;(4)進(jìn)展(PD):患者瘤體變大或出現(xiàn)新發(fā)病灶?？陀^緩解率(ORR)=(CR+PR)/總例數(shù)×100%。

2 結(jié) 果

2.1 近期療效比較 觀察組患者ORR為70.00%,高于對(duì)照組的43.33%,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=4.343,P=0.037),見表2。

表2 對(duì)照組與觀察組治療效果比較 [例(%)]

2.2 腸道菌群比較 治療前,2組患者雙歧桿菌、乳酸桿菌、大腸桿菌、腸球菌水平比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);治療后,2組雙歧桿菌、乳酸桿菌水平均較治療前上升,大腸桿菌、腸球菌水平下降,且觀察組上升或下降的程度大于對(duì)照組,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均<0.01),見表3。

表3 對(duì)照組與觀察組治療前后腸道菌群比較對(duì)數(shù)/g糞便)

2.3 免疫指標(biāo)比較 治療前,2組患者內(nèi)毒素、IL-10及TNF-α水平比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);治療后,2組內(nèi)毒素、IL-10及TNF-α水平均降低,且觀察組低于對(duì)照組,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均<0.01),見表4。

表4 對(duì)照組與觀察組治療前后免疫指標(biāo)比較

2.4 不良反應(yīng)比較 觀察組與對(duì)照組不良反應(yīng)總發(fā)生率(26.67% vs. 30.00%)比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=0.082,P=0.774),見表5。

表5 對(duì)照組與觀察組不良反應(yīng)比較 [例(%)]

3 討 論

索拉非尼是晚期肝癌患者常用的靶向治療藥物,能抑制腫瘤細(xì)胞的增生、促進(jìn)腫瘤細(xì)胞凋亡,廣泛用于治療對(duì)標(biāo)準(zhǔn)療法沒有響應(yīng)或難以耐受的胃腸道基質(zhì)腫瘤和轉(zhuǎn)移性腎細(xì)胞,能選擇性的靶向某些蛋白受體?，F(xiàn)代藥理研究表明,索拉非尼能抑制腫瘤細(xì)胞增殖及抗血管生成,能作用于腫瘤細(xì)胞通路信號(hào)、血管生成與凋亡[9]。

近年來,益生菌在晚期肝癌患者靶向治療過程中得到廣泛應(yīng)用,且效果較為理想。研究表明,內(nèi)毒素位于細(xì)胞壁的最外層、覆蓋在細(xì)胞壁的黏肽上,各種細(xì)菌的內(nèi)毒素的毒力相對(duì)較弱,能引起微循環(huán)障礙、內(nèi)毒素休克等。因此,內(nèi)毒素水平能反映腸道菌群的定植及危害性。IL-10是一種多細(xì)胞源、多功能的細(xì)胞因子,能調(diào)節(jié)細(xì)胞的生長(zhǎng)與分化,可參與機(jī)體炎性反應(yīng)和免疫反應(yīng),屬于臨床公認(rèn)的炎癥與免疫抑制因子。TNF-α是腫瘤壞死因子的1種,能直接殺傷腫瘤細(xì)胞而對(duì)正常細(xì)胞無明顯毒性的細(xì)胞因子,亦是人體炎性因子,其表達(dá)水平能反應(yīng)機(jī)體的炎性狀態(tài)。而益生菌有助于提升晚期肝癌患者靶向治療的有效率,使獲得良好預(yù)后。這主要是由于益生菌可抑制有害菌生長(zhǎng),刺激酵解作用,刺激腸黏膜細(xì)胞增生和激活免疫系統(tǒng),從而能維持腸道微生態(tài)平衡,保證腸黏膜的完整性。由于肝臟炎性反應(yīng)及肝硬化均能引發(fā)肝癌,而益生菌在肝臟炎癥及肝硬化等治療中發(fā)揮了積極的效果,能有效的預(yù)防肝癌的發(fā)生[10-11]。益生菌干預(yù)用于晚期肝癌患者靶向治療過程中,能改善機(jī)體炎性免疫水平,鞏固靶向藥物治療效果,可獲得良好的預(yù)后,且安全性較好。

本研究結(jié)果顯示,觀察組患者ORR高于對(duì)照組;治療后,2組雙歧桿菌、乳酸桿菌水平均較治療前上升,而內(nèi)毒素、大腸桿菌、腸球菌水平和IL-10及TNF-α水平下降;觀察組與對(duì)照組不良反應(yīng)總發(fā)生率(26.67% vs. 30.00%)比較差異不明顯。說明將益生菌用于晚期肝癌患者靶向治療中,有助于調(diào)節(jié)機(jī)體免疫炎性因子水平,利于鞏固藥物效果,可獲得良好的預(yù)后的同時(shí)其藥物安全性較高。這與前述研究結(jié)果相一致。

綜上所述,雙歧桿菌三聯(lián)活菌膠囊輔治晚期肝癌對(duì)患者療效及免疫功能的影響較為積極,有助于提升患者免疫功能,降低炎性因子水平,值得臨床推廣應(yīng)用。

利益沖突：所有作者聲明無利益沖突。