‘黑比諾’、‘馬瑟蘭’和‘北紅’葡萄酚類物質(zhì)差異研究

李光宗,馬軍,雷昊,單守明

(寧夏大學(xué) 農(nóng)學(xué)院,寧夏 銀川,750021)

酚類物質(zhì)是植物生長發(fā)育過程中產(chǎn)生的重要次級代謝物,在植物抵抗生物和非生物脅迫中發(fā)揮重要作用。葡萄果實(shí)中的酚類物質(zhì)主要分布于果皮和種子中,可以分為花色苷和非花色苷兩大類,非花色苷類酚主要包括黃烷醇、黃酮醇、酚酸和芪類物質(zhì)。其中,黃烷醇是賦予葡萄和葡萄酒苦味和收斂感的主要物質(zhì);黃酮醇和酚酸作為輔色物質(zhì),對葡萄和葡萄酒的顏色具有重要作用[1];而芪類物質(zhì)尤以白藜蘆醇,具有抗炎、抗氧化和抗癌等對健康有益的作用[2]。葡萄中的酚類物質(zhì)以浸漬的方式進(jìn)入葡萄酒中,是葡萄酒的重要組成部分,其含量和比例對葡萄酒的品質(zhì)具有重要作用[3-4]。

葡萄果實(shí)酚類物質(zhì)的成分和含量受品種、果實(shí)成熟度、氣候、土壤條件和栽培措施等多方面因素影響[5-8]。品種作為影響酚類物質(zhì)合成的內(nèi)部因素,是造成葡萄果實(shí)中酚類物質(zhì)含量差異的主要原因[9-10]。張娟等[11]研究發(fā)現(xiàn),‘馬瑟蘭’和‘赤霞珠’等品種具有較高的酚類物質(zhì),而‘蛇龍珠’和‘黑虎香’等品種的酚類物質(zhì)含量較低;XIA等[12]研究表明,東方品種葡萄果皮酚類物質(zhì)含量高于歐亞種?！诒戎Z’為傳統(tǒng)釀酒世界名種,所釀酒細(xì)膩質(zhì)優(yōu)[13],是寧夏產(chǎn)區(qū)主栽品種之一;‘馬瑟蘭’為釀酒葡萄新品種,2013年引進(jìn)寧夏產(chǎn)區(qū),其綜合品質(zhì)符合釀造優(yōu)質(zhì)紅葡萄酒的要求[14],是寧夏釀酒品種的潛力股;‘北紅’為高抗寒抗病品種,于2011年引進(jìn)寧夏產(chǎn)區(qū),其能夠很好的適應(yīng)寧夏氣候,綜合性狀優(yōu)良。因此研究3個(gè)品種酚類物質(zhì)含量差異對產(chǎn)區(qū)優(yōu)良品種篩選具有重要意義。近年來,國內(nèi)外對于葡萄酚類物質(zhì)的研究多集中于成熟期花色苷類酚的研究,而對于成熟過程中非花色苷類酚的研究較少,對于非花色苷類酚單體成分、合成積累規(guī)律的研究更鮮有報(bào)道。

基于此,以‘黑比諾’、‘馬瑟蘭’和‘北紅’為試材,研究其非花色苷類酚的積累規(guī)律,以期確定和比較各品種非花色苷酚類物質(zhì)特性差異,為釀酒葡萄品種篩選和葡萄酒品質(zhì)提升提供理論參考。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)地點(diǎn)與材料

本研究于2021年在寧夏銀川平吉堡“寧夏現(xiàn)代農(nóng)業(yè)綜合開發(fā)工程技術(shù)研究”釀酒葡萄示范園進(jìn)行(38°24′ N,106°01′ E),試驗(yàn)地位于銀川平原引黃灌區(qū)中部,海拔1 120 m,年降水量180～200 mm,無霜期160 d左右,沙質(zhì)土壤。供試材料為3種紅色釀酒葡萄品種(表1),其均為7年生,“廠”式架形,栽培方式為南北行向,株行距1.0 m×3.0 m,樹勢基本一致,葡萄園水肥管理一致。

表1 供試品種Table 1 Test varieties

氫氧化鈉、碳酸鈉、醋酸鈉、乙醇、福林酚等(均為分析純),銀川偉博鑫生物科技有限公司;兒茶素、表沒食子兒茶素、表兒茶素、表沒食子兒茶素沒食子酸酯、沒食子兒茶素沒食子酸酯、表兒茶素沒食子酸酯、S-圣草酚、蘆丁、楊梅素、芹菜苷、槲皮苷、柚皮素、香草酸、原兒茶酸、2,5-二羥基苯甲酸、水楊酸、沒食子酸、丁香酸、對香豆酸、阿魏酸、肉桂酸、白藜蘆醇標(biāo)準(zhǔn)品(均為色譜純),美國Sigma公司。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 田間試驗(yàn)設(shè)計(jì)

于2021年7月14日選取長勢一致的葡萄植株(各品種30株),每株葡萄樹體陰陽面各選擇1串葡萄果穗,共計(jì)60串,用標(biāo)簽牌做好標(biāo)記。分別在2021年8月6日(轉(zhuǎn)色初期,D1)、2021年8月21日(轉(zhuǎn)色盛期,D2)、2021年9月2日(成熟期,D3)、2021年9月23日(采收期,D4)取樣,每次從標(biāo)記好的果穗上、中、下部位采集果粒,各品種共計(jì)180粒,混勻后,液氮速凍,存于-80 ℃冰箱備用。

1.2.2 葡萄果實(shí)酚類品質(zhì)指標(biāo)測定

采用福林-丹尼斯法測定總單寧含量;福林酚試劑比色法測定總酚含量,結(jié)果以沒食子酸記;pH示差法測定總花色苷含量,結(jié)果表示為矢車菊素-3-葡萄糖苷。

1.2.3 葡萄果實(shí)單體酚含量測定

果實(shí)單體酚的提取參照劉迪迪等[3]的方法略作修改。稱取2.0 g葡萄粉末,加入提取液(5 mL蒸餾水和45 mL乙酸乙酯),置于搖床(30 ℃、170 r/min)避光提取30 min,重復(fù)3次,收集上清液于茄形瓶中,用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀蒸干(33 ℃),殘?jiān)? mL色譜甲醇溶洗,用0.45 μm的濾膜過濾后備用。全程避光操作,每個(gè)樣品3個(gè)生物重復(fù)。色譜分析:使用LC-20A島津超快速液相色譜儀配有SPD二極管陣列檢測器對樣品進(jìn)行定性定量檢測,色譜條件為280 nm,柱溫30 ℃,進(jìn)樣量5 μL。流動(dòng)相A:5%甲醇+0.1%甲酸+水,流動(dòng)相B:5%乙腈+0.1%甲酸+甲醇,流速為1.0 mL/min。洗脫程序:0～8 min,10% B;8～30 min,10%～30% B;30～35 min,30% B;35～45 min,30%～40% B,45～50 min,40%～50% B;50～52 min,50%～100% B;52～54 min,100% B;54 min,100%～10% B;54～60 min,10% B。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品的保留時(shí)間定性單體酚成分,標(biāo)準(zhǔn)曲線進(jìn)行定量,含量以鮮重(fresh weight,FW)計(jì),表示為mg/kg FW。

1.3 數(shù)據(jù)分析

采用Excel 2021整理數(shù)據(jù),SPSS 26.0進(jìn)行單因素方差分析(one-way ANOVA),最小顯著差數(shù)法(least significant difference, LSD)進(jìn)行多重比較(P<0.05差異顯著),結(jié)果表示為平均值±標(biāo)準(zhǔn)偏差,使用Origin 2021和SIMCA軟件繪圖。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同品種葡萄果實(shí)中總酚、總單寧和總花色苷含量分析

由表2可知,PN和MS總酚含量均在轉(zhuǎn)色盛期達(dá)到最大值,之后逐漸下降,而BH在轉(zhuǎn)色盛期含量最低,之后逐漸升高,除采收期外,PN葡萄總酚含量均顯著高于MS和BH,采收時(shí),PN、MS和BH的總酚含量分別為8.22、7.68、8.39 mg/g。PN和BH總單寧含量變化與總酚一致,而MS隨果實(shí)成熟呈下降趨勢,與總酚變化有所差異,采收時(shí),BH葡萄總單寧含量顯著高于PN和MS,含量分別為5.85、3.47、2.21 mg/g。3個(gè)品種總花色苷含量均隨果實(shí)成熟不斷上升,采收時(shí)含量表現(xiàn)為MS>BH>PN。

表2 果實(shí)總酚、總單寧和總花色苷含量變化 單位:mg/g FWTable 2 Content changes of total phenols, total tannins, and total anthocyanins in grapes

2.2 不同品種葡萄果實(shí)中非花色苷類酚定性分析

本研究使用超高效液相色譜(ultra performance liquid chromatography, UPLC)分析葡萄果實(shí)中的非花色苷類酚。由圖1-a可知,在此色譜條件下,22種非花色苷類酚的標(biāo)準(zhǔn)品可得到較好的分離。不同標(biāo)準(zhǔn)品中沒食子酸極性最強(qiáng),最先出峰;芹菜苷極性最弱,最后出峰。由圖1-b～圖1-d可知,除槲皮苷和柚皮素分別在MS和BH中未檢出外,其他非花色苷類酚均有檢出,且目標(biāo)峰與標(biāo)品的保留時(shí)間一致,在此色譜條件下3個(gè)品種樣品中的非花色苷酚類物質(zhì)得到較好的分離。

1-沒食子酸;2-原兒茶酸;3-表沒食子兒茶素;4-兒茶素;5-2,5-二羥基苯甲酸;6-表沒食子兒茶素沒食子酸酯;7-香草酸;8-表兒茶素;9-丁香酸;10-沒食子兒茶素沒食子酸酯;11-表兒茶素沒食子酸酯;12-阿魏酸;13-對香豆酸;14-水楊酸;15-蘆丁;16-白藜蘆醇;17-楊梅素;18-槲皮苷;19-S-圣草酚;20-肉桂酸;21-柚皮素;22-芹菜苷a-22種單體酚標(biāo)準(zhǔn)品的UPLC色譜圖;b-采收期‘黑比諾’葡萄液相檢測圖譜;c-采收期‘北紅’葡萄液相檢測圖譜;d-采收期‘馬瑟蘭’葡萄液相檢測圖譜圖1 單體酚標(biāo)準(zhǔn)品及樣品UPLC色譜圖Fig.1 UPLC chromatogram of monomeric phenolic standards and samples

2.3 不同品種葡萄果實(shí)中黃烷醇類酚含量分析

如圖2-a所示,3個(gè)品種果實(shí)中共檢測出6種黃烷醇類酚,其中兒茶素為主要成分,其含量隨果實(shí)成熟呈先上升后下降的趨勢,采收時(shí)分別占PN、MS和BH黃烷醇總含量的95.54%、91.12%和92.32%,PN采收時(shí)兒茶素含量為678.90 mg/kg,顯著高于MS和BH,分別是MS和BH的2.91和3.11倍。由圖2-a還可看出,相較于兒茶素,其他黃烷醇類酚含量明顯較低,其中表兒茶素沒食子酸酯在PN葡萄成熟過程中均顯著低于BH和MS,采收時(shí)其含量僅為0.58 mg/kg。

a-黃烷醇類酚含量變化分布圖;b-黃烷醇總含量變化分布圖圖2 果實(shí)黃烷醇含量變化Fig.2 Content changes of flavanols in grapes注:FO1～FO6分別代表兒茶素、表沒食子兒茶素、表兒茶素沒食子酸酯、表沒食子兒茶素沒食子酸酯、沒食子兒茶素沒食子酸酯和表兒茶素;同時(shí)期不同小寫字母表示品種間差異顯著(P<0.05),未標(biāo)字母表示差異不顯著(下同)。

由圖2-b可知,3個(gè)品種果實(shí)中黃烷醇總含量隨果實(shí)成熟呈先上升后下降的趨勢,轉(zhuǎn)色初期,3個(gè)品種黃烷醇類酚含量較低,但此后至果實(shí)采收時(shí),PN均顯著高于MS和BH,采收時(shí)表現(xiàn)為PN>MS>BH,PN中黃烷醇總含量為710.62 mg/kg,分別較MS和BH高63.97%和66.77%。PN葡萄中,無色花青素和花翠素作為前體物質(zhì),大量轉(zhuǎn)化為兒茶素和表沒食子兒茶素,造就其黃烷醇含量明顯高于MS和BH,從而更利于黃烷醇類酚的積累。

2.4 不同品種葡萄果實(shí)中黃酮醇類酚含量分析

如圖3-a所示,共檢測出6種黃酮醇類酚,在PN與BH葡萄果實(shí)中,蘆丁為主要成分,其含量隨果實(shí)成熟逐漸增加,采收時(shí)含量分別為12.45 mg/kg和16.11 mg/kg,占黃酮醇總含量的69.10%和54.38%;MS葡萄中,S-圣草酚和楊梅素含量在各時(shí)期均顯著高于PN和BH,S-圣草酚為主要成分,采收時(shí)含量達(dá)到27.91 mg/kg,占黃酮醇總含量的49.38%。同時(shí),MS各時(shí)期均未檢測到槲皮苷,而BH各時(shí)期未檢測到柚皮素。

a-黃酮醇類酚含量變化分布圖;b-黃酮醇總含量變化分布圖圖3 果實(shí)黃酮醇含量變化Fig.3 Content changes of flavonols in grapes注:FA1～FA6分別代表S-圣草酚、蘆丁、楊梅素、芹菜苷、槲皮苷和柚皮素(下同)。

由圖3-b可知,隨著果實(shí)成熟,3個(gè)品種黃酮醇總含量呈上升趨勢,PN和BH在成熟過程中黃酮醇總量均顯著低于MS,于采收時(shí)達(dá)到最大值(18.01 mg/kg和29.62 mg/kg),而MS高達(dá)56.52 mg/kg,分別是BH和PN的1.91和3.13倍。柚皮素是黃酮醇代謝的重要前體物質(zhì),其可能作為底物大量用于合成其他酚類物質(zhì),這種作用在BH中更為明顯;MS葡萄中,S-圣草酚和楊梅素競爭優(yōu)勢強(qiáng)于PN和BH,因此其黃酮醇含量更高,而在BH和PN中,相較于槲皮苷,蘆丁更具有競爭優(yōu)勢,槲皮素作為底物多數(shù)用于蘆丁合成。

2.5 不同品種葡萄果實(shí)中酚酸類酚含量分析

2.5.1 羥基苯甲酸

如圖4-a所示,共檢測出6種羥基苯甲酸類酚,3個(gè)品種中香草酸為主要成分,隨著果實(shí)成熟,其在PN中表現(xiàn)出先上升后下降的趨勢,而在MS和BH中呈現(xiàn)不同的變化趨勢,采收時(shí),BH中香草酸含量顯著高于PN和MS,分別占羥基苯甲酸總含量的77.23%、81.01%和74.14%。

由圖4-b可知,羥基苯甲酸總含量與黃烷醇類酚變化趨勢較為相似,3個(gè)品種均在轉(zhuǎn)色盛期達(dá)到最高含量,而后逐漸下降,采收時(shí)BH顯著高于PN和MS,BH為114.08 mg/kg,較PN和MS分別高12.27%、28.31%。3個(gè)品種中,阿魏酸作為底物多數(shù)轉(zhuǎn)化為香草酸,導(dǎo)致香草酸含量明顯增加而丁香酸含量較低。此外,原兒茶酸、2,5-二羥基苯甲酸和水楊酸以苯甲酸作為同一底物,三者存在競爭關(guān)系,MS和BH葡萄中原兒茶酸和2,5-二羥基苯甲酸更具有競爭優(yōu)勢。

2.5.2 羥基肉桂酸

如圖5-a所示,共檢測出3種羥基肉桂酸,對香豆酸在3個(gè)品中變化趨勢相似,隨著果實(shí)成熟,表現(xiàn)為先上升后下降的趨勢,其為MS的主要成分,采收時(shí)占總含量的62.62%。BH中阿魏酸含量最高,采收時(shí),占總含量的56.23%;而PN中3種物質(zhì)含量相當(dāng)。

a-羥基肉桂酸類酚含量變化分布圖;b-羥基肉桂酸總含量變化分布圖圖5 果實(shí)羥基肉桂酸含量變化Fig.5 Content changes of hydroxycinnamic acids in grapes注:HCI～HC3分別表示對香豆酸、阿魏酸和肉桂酸(下同)。

由圖5-b可知,隨著果實(shí)成熟,羥基肉桂酸總含量呈先上升后下降的趨勢,與羥基苯甲酸不同,3個(gè)品種均在成熟期含量達(dá)到最大值。MS在各時(shí)期均顯著高于BH和PN,采收時(shí),含量分別為3.37、3.02、2.00 mg/kg。相較于其他非花色苷類酚,羥基肉桂酸含量較低,但其具有重要的作用,肉桂酸、對香豆酸和阿魏酸均為合成其他類酚的前體物質(zhì)(圖6)。

PAL-苯丙氨酸解氨酶;C4H-肉桂酸-4-羥化酶;C3H-香豆酸-3-羥化酶;COMT-咖啡酸-O-甲基轉(zhuǎn)移酶;4CL-4-香豆酰輔酶A連接酶;CHS-查爾酮合酶;CHI-查爾酮異構(gòu)酶;F3′H-類黃酮3′-羥化酶;F3′5′H-類黃酮3′5′-羥化酶;F3H-黃烷酮-3-羥化酶;FLS-黃酮醇合成酶;DFR-黃烷酮醇-4-還原酶;LAR-無色花色素還原酶;ECGT-沒食子?；D(zhuǎn)移酶;LDOX-無色花色素雙加氧酶;ANR-花色素還原酶圖6 非花色苷類酚代謝通路[15-16]Fig.6 Metabolic pathway of non-anthocyanins[15-16]

2.6 不同品種葡萄果實(shí)中芪類物質(zhì)含量分析

由表3可知,隨著果實(shí)成熟,MS和BH中白藜蘆醇含量呈上升趨勢,而PN中略有差異。PN和BH白藜蘆醇含量在各時(shí)期均顯著低于MS,采收時(shí)MS含量高達(dá)5.24 mg/kg,分別為BH與PN的2.15和9.03倍。值得注意的是,BH中白藜蘆醇從轉(zhuǎn)色初期至成熟期含量均較低,其在采收期含量迅速上升。

表3 果實(shí)白藜蘆醇含量變化 單位:mg/kg FWTable 3 Content changes of resveratrol in grapes

2.7 不同品種葡萄果實(shí)酚類物質(zhì)的主成分分析和差異物質(zhì)篩選

為了探究3個(gè)品種葡萄果實(shí)中非花色苷類酚含量的差異,對采收期果實(shí)單體酚進(jìn)行主成分分析(principal component analysis, PCA),結(jié)果如圖7所示。由圖7-a可知,t[1]和t[2]的累計(jì)貢獻(xiàn)率為97.6%,能夠很好的代表原始數(shù)據(jù)。t[1]解釋了總方差的67.1%,從x軸方向看,PN和BH位于x軸負(fù)半軸,MS位于x軸正半軸,t[1]能夠很好的將正、負(fù)半軸2個(gè)區(qū)域個(gè)區(qū)分開;t[2]解釋了總方差的30.5%,從y軸方向看,PN位于y軸正半軸,MS和BH位于y軸負(fù)半軸,t[2]能夠很好的區(qū)分開這兩部分。結(jié)合圖7-b可以看出,PN葡萄中單體酚成分主要分布在x軸負(fù)半軸和y軸正半軸,PN葡萄中兒茶素、表沒食子兒茶素、沒食子兒茶素沒食子酸酯含量更高;MS葡萄中單體酚成分主要分布在x軸正半軸和y軸負(fù)半軸,MS葡萄中丁香酸、芹菜苷、表兒茶素、S-圣草酚、對香豆酸、楊梅素、表兒茶素沒食子酸酯、白藜蘆醇和2,5-二羥基苯甲酸更高;BH葡萄中單體酚成分主要分布在x、y軸負(fù)半軸,BH葡萄中香草酸、水楊酸、蘆丁、槲皮苷、原兒茶酸、阿魏酸和表沒食子兒茶素沒食子酸酯含量更高。

a-得分圖;b-載荷圖圖7 不同品種葡萄果實(shí)酚類物質(zhì)的主成分分析Fig.7 Principal component analysis of phenolics in different varieties of grape berries

為進(jìn)一步捕捉3個(gè)品種果實(shí)中單體酚特征差異物質(zhì),利用果實(shí)中單體酚含量數(shù)據(jù)進(jìn)行有監(jiān)督的正交偏最小二乘判別分析(orthogonal partial least squares-discriminant analysis, OPLS-DA),所得到的模型可以很好的將3個(gè)品種區(qū)分開(圖8-a),模型的R2x、R2y和Q2值分別為0.976、0.996和0.992,表明模型擬合結(jié)果可接受。經(jīng)過200次置換檢驗(yàn)后,R2和Q2的縱截距分別為0.187和-0.719,說明模型無過擬合現(xiàn)象,模型驗(yàn)證有效。采用變量重要性投影值(variable importance in projection, VIP)篩選3個(gè)品種果實(shí)中單體酚的特征差異化合物(圖8-b),其中VIP>1的物質(zhì)是體現(xiàn)樣品間差異的主要成分。共篩選出10個(gè)VIP>1的物質(zhì),按貢獻(xiàn)度從高到低依次為兒茶素、表沒食子兒茶素、沒食子兒茶素沒食子酸酯、2,5-二羥基苯甲酸、柚皮素、阿魏酸、原兒茶酸、白藜蘆醇、表沒食子兒茶素沒食子酸酯和槲皮苷。

a-正交偏最小二乘判別分析圖;b-差異物質(zhì)篩選圖圖8 不同品種葡萄果實(shí)酚類物質(zhì)的正交偏最小二乘判別分析及差異物質(zhì)篩選Fig.8 OPLS-DA analysis of phenolics in grape berries of different varieties and screening of different substances

3 結(jié)論與討論

酚類物質(zhì)對葡萄和葡萄酒的品質(zhì)至關(guān)重要,盡管葡萄果實(shí)中酚類物質(zhì)含量和組成受一系列環(huán)境和管理因素影響,但品種的基因型仍為主要影響因素[10,17]。本研究中發(fā)現(xiàn)‘黑比諾’總酚含量在成熟過程中均顯著高于‘馬瑟蘭’,而總單寧含量也表現(xiàn)為‘馬瑟蘭’(除轉(zhuǎn)色初期)顯著低于‘黑比諾’和‘北紅’,與前人研究相似[18]。與總酚和總單寧含量不同,本研究中3個(gè)品種總花色苷含量隨著成熟不斷上升,至采收時(shí)含量達(dá)到最高,與前人研究一致[19]。而在成熟過程中‘馬瑟蘭’總花色苷含量均顯著高于‘黑比諾’和‘北紅’,這與邢婷婷等[20]的研究較為相似。

葡萄果實(shí)中非花色苷類酚主要由黃烷醇、黃酮醇、酚酸和芪類物質(zhì)組成,是葡萄中重要的生物活性物質(zhì)。黃烷醇類酚主要存在于果皮和種子中,占葡萄總酚含量的13%～30%,其為本研究3個(gè)品種中主要的非花色苷類酚,主要體現(xiàn)在兒茶素含量上,這與前人在研究品麗珠及其不同營養(yǎng)系和赤霞珠葡萄中的結(jié)果一致[21-22],本研究中‘黑比諾’黃烷醇含量最高,可能相較于‘北紅’和‘馬瑟蘭’,其兒茶素合成更具有競爭優(yōu)勢。黃酮醇類酚呈黃色,具有保護(hù)葡萄酒顏色的作用[23],本探究中,3個(gè)品種黃酮醇含量隨著成熟持續(xù)上升,與前人研究一致[19],同時(shí)本試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)黃酮醇類物質(zhì)含量較低,其可能原因?yàn)辄S酮醇類酚主要以糖苷的形式存在于葡萄組織中[24]。葡萄果實(shí)中的酚酸類物質(zhì)主要存在于果肉中,本研究3個(gè)品種主要的酚酸類酚為羥基苯甲酸,而肉桂酸類酚含量較低,可能原因?yàn)樽鳛榈孜镉糜谄渌宇愇镔|(zhì)合成,3個(gè)品種羥基苯甲酸含量差異主要體現(xiàn)在香草酸含量上,這與前人研究不同[25]。值得注意的是,本研究發(fā)現(xiàn)3個(gè)品種果實(shí)中黃酮醇和白藜蘆醇含量的變化趨勢與總花色苷極為相似,推測其可能原因?yàn)椴糠址腔ㄉ辗悠疠o色作用能與花色苷糖苷部位結(jié)合[26-27],而至于其具體內(nèi)在機(jī)制還需要進(jìn)一步深入研究。

有研究表明,黃酮醇類酚含量和成分在不同品種中差異顯著,可以作為識別不同品種的標(biāo)志[23,28]。本研究通過對采收時(shí)葡萄中非花色苷類酚進(jìn)行PCA將3個(gè)品種很好的區(qū)分開,并篩選出每個(gè)品種中的特征非花色苷酚類物質(zhì),經(jīng)過進(jìn)一步的OPLS-DA,篩選出區(qū)分3個(gè)品種差異的物質(zhì)主要為黃烷醇和酚酸類酚,與前人研究有所不同。

綜上所述,3個(gè)釀酒葡萄酚類物質(zhì)含量因品種不同存在較大差異,其中黃烷醇類酚含量最高,主要體現(xiàn)在兒茶素上,‘黑比諾’葡萄黃烷醇含量顯著高于‘馬瑟蘭’和‘北紅’;羥基苯甲酸是含量第二高類酚,3個(gè)品種的主要作用成分為香草酸,‘北紅’顯著高于‘黑比諾’和‘馬瑟蘭’;‘馬瑟蘭’中黃酮醇、羥基肉桂酸和白藜蘆醇含量顯著高于其他品種?；诜腔ㄉ疹惙雍康腜CA可以很好的區(qū)分3個(gè)品種,OPLS-DA進(jìn)一步篩選出3個(gè)品種間差異的主要物質(zhì)為黃烷醇類酚。