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      砂仁滲漉汁脫色工藝優(yōu)化及對腸道損傷的保護作用

      2023-09-28 03:49:56向詩銀李韋琴劉勝華廖子蔚
      中國釀造 2023年9期
      關(guān)鍵詞:基酒龍腦砂仁

      陳 陽,向詩銀,李韋琴,王 喆,劉勝華,徐 劍*,廖子蔚

      (1.勁牌有限公司 中藥保健食品質(zhì)量與安全湖北省重點實驗室,湖北 黃石 435100;2.勁牌持正堂藥業(yè)有限公司,湖北 黃石 435000;3.湖北省中藥配方顆粒工程技術(shù)研究中心,湖北 黃石 435000)

      砂仁(Amomum villosumLour.)屬姜科豆蔻屬多年生草本植物,廣泛分布于我國的廣東、福建、云南以及廣西等省份[1]。砂仁滋味豐富,具有藥食兩用的功能,常被添加入高湯或米粥中以提高食品的滋味,也有將砂仁應(yīng)用于酒體中作為保健酒中有效活性成分的報道出現(xiàn)[2-3]。砂仁全身均可入藥,具有抗氧化、抑菌、保護胃黏膜、降血糖、抗癌等作用[4-6]。有研究表明,砂仁中的砂仁揮發(fā)油具有良好的胃腸保護作用,其主要功效成分為乙酸龍腦酯[7]。高湲等[8]以海南砂為研究對象,觀察海南砂對胃潰瘍大鼠胃粘膜的影響,結(jié)果發(fā)現(xiàn),海南砂對大鼠胃粘膜損傷具有保護作用,其作用機制可能與提高胃粘膜中相關(guān)蛋白的表達能力有關(guān)。此外,槲皮素與乙酸龍腦酯聯(lián)合使用對細菌脂多糖誘導(dǎo)的小鼠流產(chǎn)具有顯著的保護作用[9]。實驗室前期研究發(fā)現(xiàn)可使用清香型白酒為基酒將砂仁進行滲漉制備得到砂仁滲漉汁,再將適量的砂仁滲漉汁添加入酒體中可使得到的砂仁酒具有一定的保健作用。

      砂仁滲漉汁是砂仁經(jīng)過滲漉工藝制得的酒用添加劑,但由于其顏色較深,含有大量的植物色素,添加入酒體后對酒體的感官色澤影響較大,需要對砂仁滲漉汁進行脫色處理,并在脫色后保持其中的有效成分乙酸龍腦脂含量相對穩(wěn)定,從而維持砂仁酒的保健作用。目前,常用的脫色方法主要有活性炭吸附法、雙氧水氧化法以及樹脂吸附法等,活性炭吸附法消耗時間較長,粒徑較小,極易殘留于料液中難以去除干凈,影響產(chǎn)品品質(zhì);過氧化氫氧化法氧化強度較高,會對料液中的多糖、黃酮等有效成分造成破壞;樹脂吸附法與前兩種方法相比,具有成本較低、吸附效率高、穩(wěn)定性強、可重復(fù)使用等優(yōu)勢在工業(yè)脫色過程中被廣泛使用[10]。邱曉月等[11]比較了活性炭吸附法、雙氧水氧化法和大孔樹脂脫色法對祁白芷多糖的脫色效果,發(fā)現(xiàn)大孔樹脂脫色效果優(yōu)于其他兩種,且脫色后祁白芷多糖的抗氧化性無明顯變化。

      目前,對砂仁滲漉汁進行脫色的報道較少,且無研究表明脫色前后的砂仁滲漉汁是否對胃腸道損傷有影響[12-13]。因此,本研究以脫色率和乙酸龍腦脂保留率為評價指標,利用單因素試驗和響應(yīng)面試驗優(yōu)化砂仁滲漉汁的脫色工藝,并建立大鼠脾虛泄瀉模型,研究砂仁滲漉汁對大鼠腸道的保護作用,為砂仁滲漉汁在酒體中的應(yīng)用提供數(shù)據(jù)支撐。

      1 材料與方法

      1.1 材料與試劑

      1.1.1 原料

      38%vol清香型白酒基酒:勁牌有限公司;砂仁滲漉汁:實驗室自制;大黃(批號20210904)、砂仁:安徽亳藥千草國藥股份有限公司。砂仁經(jīng)湖北師范大學張新潮副教授鑒定為姜科植物陽春砂(Amomum villosumLour.)的干燥成熟果實。

      1.1.2 試劑

      大鼠胃動素(motilin,MTL)酶聯(lián)免疫吸附試劑盒:上海撫生實業(yè)有限公司;大鼠胃泌素(gastrin,GAS)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒:上海佰利萊生物科技有限公司;參苓白術(shù)散:北京同仁堂股份有限公司;D941大孔弱堿陰離子交換樹脂:西安藍曉科技有限公司;乙酸龍腦酯標準品(純度>98%):中國藥品生物制品檢定所;無水乙醇(色譜級):中國醫(yī)藥集團有限公司。

      1.1.3 動物

      6周齡雄性大鼠60只,無特定病原體(specific pathogen free,SPF)級,個體質(zhì)量150~170 g,由湖北省實驗動物研究中心提供,許可證號:SYXK(鄂)2019-0108。飼養(yǎng)條件為清潔級實驗環(huán)境,溫度為22~25 ℃,相對濕度為65%~75%,飼料為常規(guī)消毒大鼠標準飼料,飲用水為超純水。

      1.2 儀器與設(shè)備

      TU-1901紫外可見分光光度計:北京普析通用有限公司;AB135-S分析天平:梅特勒-托利多公司;7890B氣相色譜儀、DB-1毛細管柱(30 m×0.25 mm,0.25 μm):安捷倫科技(中國)有限公司;BioTek酶標儀:美國伯騰儀器有限公司;滲漉筒:勁牌有限公司定制。

      1.3 方法

      1.3.1 砂仁滲漉汁制備和脫色工藝流程及操作要點

      砂仁原料預(yù)處理→稱取原料→滲漉→砂仁滲漉汁→樹脂預(yù)處理→脫色→脫色砂仁滲漉汁

      操作要點:

      砂仁原料預(yù)處理:精選表面干凈的干燥砂仁粉碎,過60目篩后收集篩下物,備用。

      稱取原料:精密稱取1 kg過篩后的砂仁粉加入到滲漉筒中。

      滲漉:加入砂仁粉10倍質(zhì)量的38%vol清香型白酒基酒室溫(20±3)℃密閉浸泡8 h。

      定量:收集砂仁滲漉汁,加入38%vol清香型白酒基酒定容至20 L,得到砂仁滲漉汁,密閉,備用。

      樹脂預(yù)處理:稱取D941陰離子交換樹脂(以濕質(zhì)量計算)200 g于5 L錐形瓶中,加入2 L純凈水,以120 r/min的轉(zhuǎn)速搖動錐形瓶5 min,靜置后移除上清液和上清液中的懸浮雜質(zhì),重復(fù)清洗樹脂2~3次,至上清液pH為中性。然后移除上清液,并加入5倍體積的體積分數(shù)95%乙醇浸泡樹脂2 h,最后使用純凈水沖洗樹脂至酒精度小于2%vol,待用。

      脫色:分別快速取600 g砂仁滲漉汁于2 000 mL錐形瓶中,共3份,按照砂仁滲漉汁與樹脂質(zhì)量比3∶1加入預(yù)處理后的D941陰離子交換樹脂,pH為7.0,密閉錐形瓶,在50 ℃的水浴條件下恒溫脫色6 h,快速冷卻至-4 ℃趁冷過濾,得到脫色后的砂仁滲漉汁,密閉,備用。

      1.3.2 砂仁滲漉汁樹脂脫色工藝優(yōu)化單因素試驗

      根據(jù)課題組預(yù)試驗的結(jié)果,選取初始試驗條件為砂仁滲漉汁與樹脂質(zhì)量比3∶1、脫色pH 7、脫色時間6 h、脫色溫度50 ℃。分別考察砂仁滲漉汁與樹脂質(zhì)量比(1∶1、2∶1、3∶1、4∶1、5∶1)、脫色pH(5.0、6.0、7.0、8.0、9.0)、脫色時間(2 h、4 h、6 h、8 h、10 h)及脫色溫度(30 ℃、40 ℃、50 ℃、60 ℃、70 ℃)對砂仁滲漉汁脫色效果的影響;以砂仁滲漉汁脫色率和乙酸龍腦酯保留率為評價指標,明確各個單因素的最佳脫色參數(shù)。

      1.3.3 響應(yīng)面法優(yōu)化砂仁滲漉汁樹脂脫色工藝

      根據(jù)1.3.2項中單因素試驗的結(jié)果,選取砂仁滲漉汁與樹脂質(zhì)量比(A)、脫色pH(B)、脫色時間(C)和脫色溫度(D)為自變量,設(shè)定砂仁滲漉汁脫色率為響應(yīng)值(Y),進行4因素3水平響應(yīng)面優(yōu)化試驗,并對試驗數(shù)據(jù)進行分析,從而確定最佳的脫色工藝參數(shù),響應(yīng)面試驗設(shè)計因素與水平見表1。

      表1 砂仁滲漉汁脫色工藝響應(yīng)面試驗因素與水平Table 1 Factors and levels of response surface experiments for decolorization process optimization of Amomum villosum percolating juice

      1.3.4 脫色率的計算

      參考楊申明等[14]的方法,測定樣品的脫色率。

      1.3.5 乙酸龍腦酯保留率的測定

      稱取適量的乙酸龍腦酯標準品于10 mL容量瓶中,使用無水乙醇配制成質(zhì)量濃度為0.3 mg/mL的乙酸龍腦酯標準品溶液。取樣品約1 mL于25 mL容量瓶中,加無水乙醇定容至刻度線,稱質(zhì)量,超聲處理0.5 h后自然冷卻,再使用無水乙醇補足損失的質(zhì)量,混勻,過0.22 μm微孔濾膜,取濾液,備用。參考黃綠等[15]的方法,采用氣相色譜法測定乙酸龍腦酯的含量。

      1.3.6 動物試驗

      (1)大黃藥液的制備

      取適量的生大黃粗粉碎,加入純凈水浸泡過夜,過濾收集濾液并在65 ℃下濃縮藥液至質(zhì)量濃度為1.5 g/mL用于大鼠脾虛泄瀉模型建模。

      (2)陽性藥組的制備

      參考石坤等[16]的方法,以參苓白術(shù)散作為陽性對照藥。稱取參苓白術(shù)散適量,按照說明書內(nèi)容加入無菌水配置成終質(zhì)量濃度為231.5 mg/mL的藥液,即為陽性藥組。

      (3)砂仁滲漉汁樣品的制備

      取脫色前砂仁滲漉汁作為脫色前砂仁滲漉汁組備用,脫色后砂仁滲漉汁作為脫色后砂仁滲漉汁組備用。

      (4)分組與建模

      將60只SPF級大鼠隨機分成6組,每組10只,分別命名為:空白組,模型組,陽性藥組,基酒組(用于砂仁滲漉),脫色前砂仁滲漉汁組,脫色后砂仁滲漉汁組。除空白組以外,其余各組均需要進行建模,使用大黃藥液(25 mL/kg)對大鼠進行灌胃,每天2次,連續(xù)建模7 d。當大鼠出現(xiàn)飲水減少、食欲降低、便溏、精神萎靡、嗜睡且毛發(fā)散亂等現(xiàn)象時,說明脾虛泄瀉模型建模成功。然后分別使用同等劑量(15 mL/kg)的生理鹽水(空白組)、生理鹽水(模型組)、參苓白術(shù)散混懸液(陽性藥組)、基酒(基酒組)、脫色前砂仁滲漉汁(脫色前砂仁滲漉汁組)、脫色后砂仁滲漉汁(脫色后砂仁滲漉汁組)對大鼠進行灌胃,每天1次,連續(xù)7 d。

      (5)胃動素水平及胃泌素水平的測定

      對最后一次各給藥組的大鼠進行12 h禁食不禁水處理,用3%的戊巴比妥鈉麻醉大鼠取血,4 ℃、3 500 r/min離心25 min,取上層血清,使用大鼠胃動素酶聯(lián)免疫吸附試劑盒、大鼠胃泌素酶聯(lián)免疫吸附試劑盒按照說明書上的操作方法測定各組大鼠血清的胃動素和胃泌素水平。

      (6)大鼠腸道蘇木精-伊紅染色切片

      分別取各組大鼠的結(jié)腸組織,使用生理鹽水洗去腸道內(nèi)容物,然后用濾紙吸去表面多余水分,經(jīng)過4%多聚甲醛溶液固定36 h后,進行石蠟包埋、切片、蘇木精-伊紅(hematoxylin-eosin,HE)染色,最后觀察結(jié)腸組織的病變情況。

      1.3.7 數(shù)據(jù)處理

      所有試驗均重復(fù)進行3次操作,利用軟件SPSS20.0對各組數(shù)據(jù)進行T檢驗分析;采用Origin8.6軟件繪制圖形;使用Design-Expert V8.0.6軟件進行響應(yīng)面試驗設(shè)計與數(shù)據(jù)分析。

      2 結(jié)果與分析

      2.1 砂仁滲漉汁中色素特征吸收波長的確定

      砂仁滲漉汁在200~800nm波長之間的吸收光譜見圖1。由圖1可知,砂仁滲漉汁中色素在波長276 nm處具有明顯的特征吸收峰。因此,砂仁滲漉汁中色素的特征吸收波長為276 nm。

      圖1 砂仁滲漉汁的吸收光譜圖Fig.1 Absorption spectrum of the percolating juice of Amomum villosum

      2.2 砂仁滲漉汁脫色工藝優(yōu)化單因素試驗結(jié)果

      課題組前期預(yù)試驗發(fā)現(xiàn)砂仁滲漉汁在脫色過程中會導(dǎo)致其中的主要活性成分乙酸龍腦酯損失,從而影響砂仁滲漉汁的藥理活性。在優(yōu)化砂仁滲漉汁脫色工藝時不僅需要考慮提高砂仁滲漉汁的脫色率還需盡可能保留其中的活性成分乙酸龍腦酯。因此,單因素試驗選擇砂仁滲漉汁脫色率作為主要考察指標,乙酸龍腦酯保留率作為輔助考察指標。

      2.2.1 砂仁滲漉汁與樹脂質(zhì)量比對砂仁滲漉汁脫色效果的影響

      砂仁滲漉汁與樹脂質(zhì)量比對砂仁滲漉汁脫色效果的影響見圖2。

      圖2 砂仁滲漉汁與樹脂質(zhì)量比對砂仁滲漉汁脫色效果的影響Fig.2 Effect of mass ratio of Amomum villosum percolating juice to resin on the decolorization effect of A.villosum percolation juice

      由圖2可知,隨著砂仁滲漉汁與樹脂質(zhì)量比的提高,砂仁滲漉汁脫色率逐漸降低,乙酸龍腦酯保留率先升高后基本不變。因為大孔樹脂不僅能吸附色素還能吸附乙酸龍腦酯,當樹脂吸附能力逐漸飽和時,樹脂表面吸附活性位點數(shù)量被色素占據(jù),乙酸龍腦酯幾乎不再吸附,出現(xiàn)脫色率顯著降低(P<0.05),而乙酸龍腦酯保留率無顯著增加的現(xiàn)象(P>0.05)[17]。當砂仁滲漉汁與樹脂質(zhì)量比為3∶1時,脫色率下降幅度較小且乙酸龍腦酯保留率最高。因此,最佳砂仁滲漉汁與樹脂質(zhì)量比為3∶1。

      2.2.2 脫色pH對砂仁滲漉汁脫色效果的影響

      脫色pH對砂仁滲漉汁脫色效果的影響見圖3。由圖3可知,砂仁滲漉汁pH值在5~7之間時,脫色率逐漸提高,當pH值為7時,脫色率達到最高值(70.22±0.10)%,當pH值高于7時,脫色率開始明顯下降(P<0.05),這可能是因為砂仁滲漉汁中存在酚類物質(zhì),堿性環(huán)境會使料液顏色更深,降低脫色效果[11]。在pH 5~9之間進行脫色操作,各組的乙酸龍腦酯保留率均在80%以上,無顯著統(tǒng)計學差異(P>0.05)。因此,確定最佳砂仁滲漉汁脫色pH值為7。

      圖3 脫色pH對砂仁滲漉汁脫色效果的影響Fig.3 Effect of pH on the decolorization effect of Amomum villosum percolation juice

      2.2.3 脫色時間對砂仁滲漉汁脫色效果的影響

      脫色時間對砂仁滲漉汁脫色效果的影響見圖4。由圖4可知,隨著脫色時間的延長,砂仁滲漉汁脫色率先升高再保持穩(wěn)定,脫色時間6 h時脫色率達到最高,且此時隨著脫色時間的延長,乙酸龍腦酯保留率開始下降,這可能是因為脫色6h時,樹脂對砂仁滲漉汁中的色素吸附量已達到飽和狀態(tài),脫色過程基本達到平衡狀態(tài),而當脫色時間大于6 h時,樹脂對乙酸龍腦酯仍具有吸附能力,從而導(dǎo)致乙酸龍腦酯保留率逐漸下降。因此,確定最佳脫色時間為6 h。

      圖4 脫色時間對砂仁滲漉汁脫色效果的影響Fig.4 Effect of time on the decolorization effect of Amomum villosum percolation juice

      2.2.4 脫色溫度對砂仁滲漉汁脫色效果的影響

      脫色時間對砂仁滲漉汁脫色效果的影響見圖5。由圖5可知,隨著脫色溫度的提高,砂仁滲漉汁脫色率逐漸升高,脫色溫度為50 ℃時,脫色率最高為(70.13±0.11)%,當溫度繼續(xù)升高時脫色率逐漸下降。溫度升高加速反應(yīng)體系中色素與樹脂柱活性位點的碰撞結(jié)合機率,促使脫色率提高,但當脫色溫度超過最適脫色溫度時,色素與樹脂活性位點的解析機率增大,出現(xiàn)脫色效果下降的現(xiàn)象[18-19]。當脫色溫度為50 ℃時脫色率最高且此時乙酸龍腦酯保留率未出現(xiàn)顯著下降(P>0.05)。因此,最佳脫色溫度為50 ℃。

      圖5 脫色溫度對砂仁滲漉汁脫色效果的影響Fig.5 Effect of temperature on the decolorization effect of Amomum villosum percolation juice

      2.3 砂仁滲漉汁脫色工藝優(yōu)化響應(yīng)面試驗

      2.3.1 響應(yīng)面多元回歸方程的建立

      根據(jù)表2中的響應(yīng)面試驗數(shù)據(jù)結(jié)果,使用Design-Expert V8.0.6軟件進行多元回歸方程擬合分析,得到以砂仁滲漉汁脫色率為響應(yīng)值的多元回歸方程式:Y=68.29-0.60A-1.10B+0.18C+2.16D-8.20AB-0.53AC+0.42AD+1.39BC-2.37BD-0.013CD-5.42A2-8.52B2-3.86C2-7.78D2。

      表2 砂仁滲漉汁脫色工藝條件優(yōu)化響應(yīng)面試驗設(shè)計及結(jié)果Table 2 Design and results of response surface experiments for decolorization process optimization of Amomum villosum percolation juice

      2.3.2 響應(yīng)面模型方差分析

      利用Design-Expert 8.0.6軟件對砂仁滲漉汁脫色工藝優(yōu)化響應(yīng)面模型進行方差分析以及顯著性檢驗,結(jié)果見表3。

      表3 回歸方程模型方差分析Table 3 Analysis of variance of regression equation model

      由表3可知,模型項P<0.000 1且失擬項P=0.1431>0.05,表明多元回歸方程模型極顯著,且失擬項不顯著,模型與數(shù)據(jù)之間具有較高的擬合度,可以用來優(yōu)化砂仁滲漉汁的脫色工藝[20]。由P值可知,一次項B、D、交互項AB、BD、二次項A2、B2、C2和D2對砂仁滲濾汁脫色率的影響極顯著(P<0.01),交互項BC影響顯著(P<0.05),一次項A、C、交互項AC、AD以及CD對砂仁滲濾汁脫色率的影響不顯著(P>0.05)。比較F值的大小可知,各因素對砂仁滲漉汁脫色率的影響大小順序為:D>B>A>C,即脫色溫度>脫色pH>砂仁滲漉汁與樹脂質(zhì)量比>脫色時間。另外,本試驗中多元回歸方程模型的決定系數(shù)為R2=0.988 6,且調(diào)整決定系數(shù)R2Adj=0.977 3,說明通過該多元回歸方程模型得到的優(yōu)化試驗結(jié)果相關(guān)性和可信度均較高,可以利用該模型分析和預(yù)測砂仁滲漉汁的脫色率[21]。

      砂仁滲漉汁與樹脂質(zhì)量比、脫色pH、脫色時間和脫色溫度4個因素之間的交互作用對砂仁滲漉汁脫色率的影響見圖6。

      圖6 各因素之間交互作用對砂仁滲漉汁脫色率影響的響應(yīng)面和等高線Fig.6 Response surface plots and contour lines of effects of interaction between various factors on the decolorization rate of Amomum villosum percolation juice

      由圖6可知,砂仁滲漉汁與樹脂質(zhì)量比與脫色時間、砂仁滲漉汁與樹脂質(zhì)量比與脫色溫度、脫色時間與脫色溫度之間的交互作用等高曲線近似于圓形,說明兩兩之間的交互作用對砂仁滲漉汁脫色率的影響均不顯著(P>0.05),這與表3中顯著性分析結(jié)果一致[22]。通過響應(yīng)面軟件對砂仁滲漉汁最佳脫色工藝條件進行預(yù)測,獲得砂仁滲漉汁脫色的最佳工藝參數(shù)為砂仁滲漉汁與樹脂質(zhì)量比2.02∶1,脫色pH 6.90,脫色時間6.01 h,脫色溫度51.54 ℃,預(yù)測獲得的砂仁滲漉汁脫色率最高為68.50%。結(jié)合生產(chǎn)實際操作的便捷性,將最佳脫色工藝條件修正為砂仁滲漉汁與樹脂質(zhì)量比2∶1,脫色pH 6.9,脫色時間6 h,脫色溫度51 ℃。在此最佳脫色工藝條件下分別進行三次驗證試驗,砂仁滲漉汁脫色率實際值為(68.96±1.05)%,與多元回歸方程得到的預(yù)測值相近,另外,乙酸龍腦酯保留率為(79.76±0.95)%,有效成分保留率較高,表明優(yōu)化后的脫色工藝實用性較好。

      2.4 大鼠胃動素和胃泌素的變化

      中醫(yī)理論認為脾虛會導(dǎo)致胃腸動力功能失調(diào),消化能力降低,胃腸內(nèi)的激素水平也相應(yīng)下降。胃動素和胃泌素是表征胃腸運動能力的兩種典型代表激素,其中胃動素主要對胃腸道上的平滑肌起作用,能促進胃收縮和腸道分節(jié)運動,而胃泌素可以刺激胃酸以及胃蛋白酶原加速分泌,兩者的水平上升能較好的指示樣品在健脾方面的效果[23-25]。各試驗組對大鼠MTL及GAS的影響見圖7。

      圖7 各試驗組對大鼠胃動素(A)和胃泌素(B)的影響Fig.7 Effect of each drug administration group on motilin (A) and gastrin (B) in rats

      由圖7A可知,與空白組相比,除陽性藥物組外,其余各組大鼠的胃動素水平顯著降低(P<0.05)。與模型組比,陽性藥物組胃動素水平顯著升高(P<0.05),而基酒組顯著降低(P<0.05),這說明陽性藥能有效提高大鼠的胃動素水平,而基酒能降低大鼠胃動素水平,這項研究結(jié)果與張云東等[26]的研究結(jié)果相似。與基酒組相比,脫色前后砂仁滲漉汁組的胃動素水平均有顯著提高(P<0.05),這說明砂仁滲漉汁中的砂仁對大鼠胃動素水平的提高有一定的作用。由圖7B可知,與空白組相比,模型組大鼠的胃泌素水平顯著降低(P<0.05)。與模型組相比,基酒組大鼠的胃泌素水平顯著降低(P<0.05),脫色前后砂仁滲漉汁組的胃泌素水平均顯著提高(P<0.05)。與基酒組相比,脫色前后砂仁滲漉汁組的胃泌素水平均顯著提高(P<0.05)。結(jié)果表明,以基酒作為溶劑制備的砂仁滲漉汁能有效降低基酒對脾虛大鼠的胃腸道損傷。

      2.5 大鼠腸道HE染色切片

      由圖8可知,模型組大鼠結(jié)腸組織結(jié)構(gòu)被明顯破壞,上皮杯狀細胞數(shù)量減少且出現(xiàn)炎性細胞浸潤現(xiàn)象。與模型組大鼠相比,空白組和陽性藥組大鼠的結(jié)腸組織染色切片形態(tài)正常,上皮杯狀細胞以及黏膜較為完整,未出現(xiàn)炎性細胞浸潤的現(xiàn)象,而基酒組大鼠上皮和黏膜破壞程度較高,出現(xiàn)大量炎性細胞浸潤現(xiàn)象。與基酒組相比,脫色前后砂仁滲漉汁組大鼠的結(jié)腸組織完整性均稍有缺失,杯狀細胞排列未出現(xiàn)散亂現(xiàn)象,其基層仍然存在少量的炎性細胞,這說明砂仁可能具有降低腸道組織損傷的功效,這項結(jié)果與2.4項中的試驗結(jié)果基本一致。

      3 結(jié)論

      本試驗以砂仁為主要原料制備砂仁滲漉汁,并對砂仁滲漉汁進行脫色工藝研究,以脫色率作為評價指標,通過單因素試驗和響應(yīng)面試驗確定砂仁滲漉汁的最佳脫色工藝參數(shù)為砂仁滲漉汁與樹脂質(zhì)量比2∶1(g∶g),脫色pH 6.9,脫色時間6 h,脫色溫度51 ℃。在此優(yōu)化參數(shù)下,砂仁滲漉汁脫色率為(68.96±1.05)%,乙酸龍腦酯保留率為(79.76±0.95)%。另外,本研究建立大鼠脾虛泄瀉模型,并研究各樣品組對大鼠胃腸道損傷的影響,發(fā)現(xiàn)以清香型白酒基酒作為滲漉溶劑制備的砂仁滲漉汁在脫色前后均能有效降低清香型白酒基酒對脾虛大鼠的胃腸道損傷。因此,砂仁滲漉汁可作為一種潛在的保護胃腸的酒用資源,從而擴大砂仁的應(yīng)用空間。本研究為砂仁滲漉汁在酒體中的應(yīng)用提供了試驗依據(jù),但本研究應(yīng)用的砂仁滲漉汁中成分復(fù)雜,有待進一步分離、純化,進而明確是何種成分對胃腸道損傷具有保護作用。

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