稻谷中脂肪酸值的測定及關(guān)鍵點控制的探索

◎ 陳垂鳳

（?？谑屑Z油產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)測站，海南 ?？?570145）

脂肪酸值是反映稻谷品質(zhì)優(yōu)劣的主要指標(biāo)，是判定稻谷儲存品質(zhì)優(yōu)劣的主要依據(jù)之一。因此，準(zhǔn)確測定稻谷中脂肪酸值的重要性不言而喻。稻谷中脂肪酸值的測定方法雖是一項簡單的酸堿滴定法，然而，要取得理想的檢測結(jié)果并非易事，因為影響脂肪酸檢測結(jié)果的因素很多，特別是滴定終點的顏色變化不明顯、不容易判定，從而容易產(chǎn)生較大的誤差[1]。

1 實驗部分

1.1 儀器與試劑

1%天平、礱谷機、錘式旋風(fēng)磨、振蕩器；95%乙醇、無水乙醇、1%酚酞-乙醇溶液；具塞三角瓶、三角瓶、量筒、50 mL比色管、25 mL移液管、50 mL移液管、中速定性濾紙、微量滴量管、容量瓶等。

1.2 0.5 mol/L 氫氧化鉀標(biāo)準(zhǔn)儲備液的配制

稱取32 g優(yōu)級純氫氧化鉀放在200 mL的燒杯中，用無二氧化碳的蒸餾水少量多次溶解氫氧化鉀到1000 mL的容量瓶中，并定容至刻度，放置到第2天標(biāo)定。

1.3 0.5 mol/L 氫氧化鉀標(biāo)準(zhǔn)儲備液的標(biāo)定

用8個30×60 mm的稱量瓶，每瓶約裝4 g鄰苯二甲酸氫鉀放在105 ℃的烘箱中烘到恒重，按GB/T 601—2016《化學(xué)試劑 標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液的制備》規(guī)定，稱取8份鄰苯二甲酸氫鉀3.6 g（精確到0.00001 g）放在250 mL的錐形瓶中，各加80 mL無二氧化碳的蒸餾水振搖到溶解，加2滴1%的酚酞-乙醇溶液，用配制好的氫氧化鉀溶液滴定到微紅色，30 s不褪為終點。記錄消耗KOH溶液的體積，同時做空白試驗，計算氫氧化鉀標(biāo)準(zhǔn)儲備液的濃度。

1.4 臨用時稀釋成0.01 mol/L的氫氧化鉀標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液

準(zhǔn)確移取10 mL已經(jīng)標(biāo)定好的氫氧化鉀標(biāo)準(zhǔn)儲備液至500 mL容量瓶中，用中性95%乙醇稀釋定容至刻度。

1.5 扦樣

扦樣前先了解糧堆的情況，制定扦樣方案，科學(xué)扦取具有代表性的樣品。

1.6 試樣制備

分樣、去雜（包括石頭、沙子、凝土；稻梗、2.0篩的篩下物等無使用價值的無機、有機雜質(zhì)和異種糧粒等），但不去除谷外糙米，取適量混合均勻樣品脫殼，取混合均勻的糙米約80 g,經(jīng)錘式旋風(fēng)磨粉碎,裝入磨口瓶中備用。

1.7 試樣處理

稱取制備好的試樣約10 g,于250 mL具塞磨口錐形瓶中，并用移液管加入50 mL無水乙醇，振搖10 min，靜置1～2 min，用定性濾紙過濾。棄去最初幾滴濾液，收集濾液約30 mL。

1.8 測定

用移液管移取 25 mL濾液于150 mL錐形瓶中，加50 mL一級水，滴加4滴1%酚酞-乙醇指示劑,用已標(biāo)定好的氫氧化鉀標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液滴定至變色，再繼續(xù)滴加5～8滴氫氧化鉀標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液到顏色呈現(xiàn)淡粉色，取下加50 mL一級水顯粉紅色即為滴定終點。記下耗用的氫氧化鉀標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液體積（V1），同時做空白試驗，計算結(jié)果。

2 影響稻谷中脂肪酸值檢測結(jié)果的關(guān)鍵點控制

本文是通過對十年糧油檢驗工作的總結(jié)，綜合分析影響稻谷脂肪酸測定的各種因素，最終達到提高稻谷脂肪酸值測定準(zhǔn)確度的目的。下文將細述影響稻谷中脂肪酸值檢測結(jié)果的關(guān)鍵點控制[2]。

2.1 樣品

樣品是一批糧油的代表和判定這批糧油質(zhì)量的依據(jù)，是否具有代表性，是影響檢測結(jié)果的關(guān)鍵因素。

2.2 扦樣

由于大量儲存的稻谷來自多個農(nóng)戶，各個農(nóng)戶的稻谷品質(zhì)都不相同，所以扦樣前必須先了解糧堆的情況，科學(xué)制定扦樣方案，確保扦樣具有代表性。

2.3 溫度

在進行稻谷脂肪酸值測定試驗時，溫度是一個非常敏感的因素。試驗表明，隨著環(huán)境溫度的升高，脂肪酸值也隨之升高。原因可能是隨著環(huán)境溫度的升高，脂肪酸在乙醇中的溶解度增大，脂肪酸的提取率增大，從而使脂肪酸值增大；滴定過程環(huán)境的溫度最好控制在20 ℃，因為體積的讀數(shù)在20 ℃時是不需要校正的，因此20 ℃是最理想的環(huán)境溫度。無水乙醇、一級水和磨粉后的樣品，都需要放在此環(huán)境下冷卻再使用[3]。

2.4 滴定

2.4.1 氫氧化鉀標(biāo)準(zhǔn)儲備液的優(yōu)化

由于儲備液存放的時間比較長，且乙醇又容易揮發(fā)，因此，用一級水配儲備液穩(wěn)定性好；氫氧化鉀標(biāo)準(zhǔn)儲備液最好配0.5 mol/L的，因為0.5 mol/L的氫氧化鉀溶液2人共做8平行標(biāo)定時顏色變化明顯，重現(xiàn)性很好，經(jīng)多次配制和標(biāo)定，2人共做8平行的極差的平均值都小于0.18%，臨用時用調(diào)到中性的95%的乙醇稀釋到0.01 mol/L。

2.4.2 滴定時用一級水代替無二氧化碳的蒸餾水

隨機取8份稻谷樣品，分別以現(xiàn)制無二氧化碳蒸餾水和一級水測定相同樣品的脂肪酸值，結(jié)果見表1。

表1 稻谷在不同測定用水條件下的脂肪酸值表(mg/100 g)

經(jīng)多次試驗，滴定時用一級水和用無二氧化碳的蒸餾水結(jié)果接近，差值在0.03～0.26之間，而脂肪酸值平行試驗的允許差為2。因此，可以用一級水代替無二氧化碳的蒸餾水進行滴定；機制的一級水剛接出來時溫度有點高，須降到20 ℃再使用。

2.4.3 滴定速度

滴定速度是影響檢測結(jié)果的關(guān)鍵因素，滴定速度過快會造成反應(yīng)不充分，終點會提前出現(xiàn)，檢測結(jié)果偏低；反之，滴定速度過慢會造成空氣中更多的二氧化碳與氫氧化鉀反應(yīng)，致使消耗的氫氧化鉀量增多，從而使檢測結(jié)果偏大。因此，滴定前期最佳速度一般保持在6～8 mL/min，接近終點時應(yīng)減慢滴定速度,逐滴加入。

2.4.4 滴定臺面光線

由于稻谷中脂肪酸值滴定終點顏色變化不明顯，滴定時光線不足會影響終點顏色判定，滴定應(yīng)在散射日光或日光性日光燈下對著光源方向進行[4]。

2.4.5 滴定終點判定

脂肪酸的終點判定對測定結(jié)果的影響很大，GB/T 20569—2006附錄A規(guī)定，滴至微紅色30 s不褪視為滴定終點，因操作人員對顏色的敏感程度不一致，從而造成較大的誤差[5]。方法1：滴定過程中看到顏色變化時再加5～8滴氫氧化鉀標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液，直至顏色變粉，就可作為滴定終點，之后，可以向滴定液中加入50 mL一級水驗證，若看到粉紅色為滴定終點判斷正確。在此過程中，至少要做2個平行，同一分析者需要對同一試樣同時進行2次測定，脂肪酸值結(jié)果的差值應(yīng)不超過2 mg/100g。因為不同的稻谷品質(zhì)不同，有少數(shù)稻谷在滴定過程中不變色，若向滴定液中加入50 mL一級水時顯紅色，這種情況應(yīng)多稱樣再測，下一個樣品滴定時適當(dāng)減少滴定液體積，直到向滴定液中加入50 mL一級水時顯粉紅色為適，且兩平行試驗結(jié)果之差不能超過2 mg/100g；也有少數(shù)稻谷在滴定過程中顏色已明顯變深，但向滴定液中加入50 mL一級水時不變紅，這種情況應(yīng)多稱樣再測，下一個樣品滴定時適當(dāng)增加滴定液體積，直到向滴定液中加入50 mL一級水時顯粉紅色為適，且兩平行試驗結(jié)果之差不能超過2 mg/100g。方法2：滴定過程中看到液面瞬間有紅色鋪滿時，一般就為滴定終點，接著可以向滴定液中加入50 mL一級水驗證，若看到粉紅色為滴定終點判斷正確。2019年11月17—22日，在湖南國家糧食質(zhì)量監(jiān)測中心參加國家糧食質(zhì)量監(jiān)測機構(gòu)檢驗技術(shù)培訓(xùn)結(jié)束后，我們將國家糧食和物資儲備局標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)量管理辦公室發(fā)放的盲樣帶回單位檢測，采用以上2種方法判定滴定終點，考核結(jié)果為滿意。

3 討論

影響稻谷脂肪酸值的因素還有玻璃器皿是否干凈、讀數(shù)是否準(zhǔn)確、儀器設(shè)備是否符合標(biāo)準(zhǔn)要求（是否經(jīng)過檢定或校準(zhǔn)）、操作是否規(guī)范等。此外，操作人員要多練習(xí)，特別是對于滴定終點的判定，因為顏色變化不明顯，只能靠自己多練、多摸索，才能找到感覺。因此，為了減少測定誤差，操作人員必須嚴(yán)格采用規(guī)范的扦樣方法、檢測步驟、操作和測定條件等進行檢驗，力爭做到檢測結(jié)果真實準(zhǔn)確。

勤儉節(jié)約，珍愛生命。