• 
    

    
    

      99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

      塞來昔布自微乳的制備及體外溶出研究

      2023-08-28 02:22:12楊雪華毛楷凡劉正平李大偉張岱州
      食品與藥品 2023年4期
      關(guān)鍵詞:單純形網(wǎng)格法丙三醇

      楊雪華,毛楷凡,劉正平,,李大偉,*,張岱州,*

      (1. 山東省藥學(xué)科學(xué)院 新型緩控釋制劑與藥物靶向遞送系統(tǒng)山東省工程研究中心,山東 濟(jì)南250101;2. 國(guó)家藥監(jiān)局藥物制劑技術(shù)研究與評(píng)價(jià)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,山東 濟(jì)南 250101; 3. 山東福瑞達(dá)醫(yī)藥集團(tuán)有限公司 山東省黏膜與皮膚給藥技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,山東 濟(jì)南 250101)

      塞來昔布(celecoxib,CXB)是新一代非甾體抗炎藥(nonsteroidal anti-inflammatory drug,NSAID),可通過選擇性抑制環(huán)氧化酶2來抑制前列腺素的生成,繼而發(fā)揮抗炎鎮(zhèn)痛作用[1]。與其他NSAID相比,CXB同樣用于治療骨關(guān)節(jié)炎、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎和急性疼痛,但不同的是,CXB治療效果更好,且上消化道潰瘍及其他并發(fā)癥的發(fā)生率最低[2]。然而根據(jù)生物制藥分類系統(tǒng),CXB屬于II類藥物(高滲透性和低溶解性),其有限的水溶性極大地影響了其口服生物利用度。因此,亟需通過各種增溶技術(shù)來增加CXB的水溶性。近年,研究人員將CXB制備成固體分散體、納米混懸液及脂質(zhì)體等來改善其水溶性,但這些手段增溶有限,且都存在制備工藝復(fù)雜、難以放大生產(chǎn)的缺點(diǎn)[3]。

      自微乳藥物遞送系統(tǒng)(self-microemulsifying drug delivery system,SMEDDS)是由油相、乳化劑、助乳化劑混合而成的液態(tài)或類固態(tài)制劑[4]。SMEDDS口服后能在胃腸道的蠕動(dòng)下與胃液、腸液融合,自發(fā)分散形成粒徑小于100 nm的O/W型乳液,可極大地提高藥物的溶解度和口服生物利用度[5]。且SMEDDS具有生物相容性好、穩(wěn)定性高及容易放大生產(chǎn)的優(yōu)點(diǎn)[6]。因此,本研究擬將CXB制備成SMEDDS,以期實(shí)現(xiàn)增加CXB溶解度、改善胃腸道吸收、提高口服生物利用度的目的。

      1 儀器與材料

      1.1 儀器

      Agilent 8454型紫外分光光度計(jì)(美國(guó)安捷倫公司);LOGAN 860DL型智能溶出儀(美國(guó)LOGAN公司);MS204TS/02型電子天平(美國(guó)梅特勒-托利多儀器有限公司);C-MAG HS4型磁力攪拌器(德國(guó)IKA公司);Nano-ZS90型馬爾文激光粒度分布與電勢(shì)分析儀(英國(guó)Malvern公司);Talos F200s型透射電子顯微鏡(FEI公司);KQ-500E型超聲波清洗器(昆山市超聲設(shè)備有限公司)。

      1.2 材料

      塞來昔布原料藥(自制,批號(hào):210304);中鏈甘油三酯(MCT,批號(hào):177185,法國(guó)嘉法獅公司);聚氧乙烯35蓖麻油(ELP35,批號(hào):7778402UO,北京鳳禮精求醫(yī)藥有限公司);丙三醇(批號(hào):B2108262,西隴科學(xué)股份有限公司);甲醇(批號(hào):20211118),無水乙酸鈉(批號(hào):20180307),磷酸二氫鈉(批號(hào):20161011),十二烷基硫酸鈉(SDS,批號(hào):20170904),鹽酸(批號(hào):20190320,國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司);醋酸(批號(hào):20170712,天津市科密歐化學(xué)試劑有限公司);氫氧化鈉(批號(hào):20210504,天津市大茂化學(xué)試劑廠)。

      2 方法與結(jié)果

      2.1 CXB-SMEDDS的制備

      分別以中鏈甘油三酯(MCT)、聚氧乙烯35蓖麻油(ELP35)、丙三醇作為油相、乳化劑及助乳化劑。參考相關(guān)文獻(xiàn)[7]確定了CXB-SMEDDS的制備工藝,即先稱取一定量的MCT、ELP35及丙三醇,磁力攪拌10 min后得到空白SMEDDS,稱取一定量的CXB加入空白SMEDDS中,磁力攪拌10 min,得到CXB-SMEDDS。

      2.2 處方篩選

      先通過偽三元相圖的繪制確定能發(fā)生乳化的處方比例范圍,再通過單純形網(wǎng)格法進(jìn)行處方優(yōu)化。

      2.2.1 偽三元相圖的繪制 按乳化劑與助乳化劑的質(zhì)量比為1:9,2:8,3:7,4:6,5:5,6:4,7:3,8:2,9:1,分別稱取相應(yīng)量的ELP35與丙三醇,再將此混合乳化劑與油相MCT按9:1~5:5的質(zhì)量比分別混勻,然后將CXB按25 mg/g的載藥量加入上述空白SMEDDS中,混勻,即得系列CXB-SMEDDS。將0.5 g CXB-SMEDDS在磁力攪拌條件下(100 r/min)緩慢加入50 ml 37 ℃蒸餾水中,觀察各CXB-SMEDDS能否發(fā)生自乳化。乳化的標(biāo)準(zhǔn)分為5個(gè)等級(jí):A:乳化時(shí)間<1 min,溶液呈澄清或略泛藍(lán)光;B:乳化時(shí)間<1 min,略濁,呈藍(lán)白色;C:乳化時(shí)間1~2 min,呈亮白色不透明液體;D:乳化時(shí)間>2 min,色澤暗,呈灰白色,略帶油狀;E:難乳化,一直有油滴存在[8]。記錄形成A、B等級(jí)微乳時(shí)MCT、ELP35及丙三醇各自的質(zhì)量分?jǐn)?shù),并以各組分為三元相圖頂點(diǎn),利用origin軟件繪制三元相圖。圖1為根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果繪制的偽三元相圖,由圖1可知,能發(fā)生乳化的各組分比例范圍為,MCT 10 %~40 %,ELP35 9 %~81 %,丙三醇6 %~81 %。

      圖1 CXB-SMEDDS的偽三元相圖

      2.2.2 單純形網(wǎng)格法優(yōu)化處方 固定處方中MCT、ELP35、丙三醇的總比例為100 %,以2.2.1項(xiàng)下各組分比例范圍為基礎(chǔ),結(jié)合單純形網(wǎng)格法比例約束及各組分一般用量,確定M C T 比例范圍為10 %~40 %,ELP35為30 %~60 %,丙三醇為30 %~60 %。以CXB-SMEDDS的平均粒徑(Y1)、多分散指數(shù)(PDI,Y2)、乳化時(shí)間(Y3)為評(píng)價(jià)指標(biāo),采用Design Expert軟件中Simplex Lattice對(duì)處方進(jìn)行設(shè)計(jì),見表1。按表1稱取各組分,磁力攪拌10 min,得空白SMEDDS,按25 mg/g的比例稱取CXB,加入空白SMEDDS中,磁力攪拌10 min,得CXB-SMEDDS。稱取1 g CXB-SMEDDS,磁力攪拌條件下(100 r/min)緩慢加入到100 ml 37 ℃蒸餾水中。記錄乳化時(shí)間,并取部分乳液用馬爾文激光粒度分布儀測(cè)定其粒徑和PDI。

      表1 單純形網(wǎng)格法優(yōu)化實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)及結(jié)果

      單純形網(wǎng)格法優(yōu)化處方實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表1。采用Design Expert軟件,以Y1、Y2、Y3為評(píng)價(jià)指標(biāo),通過模型擬合得響應(yīng)方程分別為:Y1=182.01A+18.16B+25.87C-265.30AB-232.02AC-2.08BC-2238.07A2BC+1381.37AB2C+1281.95ABC(P<0.0001,R2=0.9994);Y2=0.2405A+0.0707B+0.0964C-0.3584AB-0.2005AC+0.0209BC(P<0.0001,R2=0.9660);Y3=70.85A+8.79B+9.15C+65.78AB-63.83AC-0.5055BC-347.69A2BC+253.15AB2C+65.98ABC2(P<0.0001,R2=0.9999)。對(duì)上述回歸模型進(jìn)行方差分析,結(jié)果表明,模型的P值均小于0.0001,遠(yuǎn)小于 0.05,表明模型顯著可靠;模型的回歸方程系數(shù)R2及校正決定系數(shù)(adjustR2)均大于 0.95,表明模型相關(guān)系數(shù)較高,非線性擬合的效果良好。

      根據(jù)上述回歸模型,繪制三維效應(yīng)面圖,見圖2。由圖2可見,MCT用量對(duì)3個(gè)評(píng)價(jià)指標(biāo)的影響最大,隨著MCT比例的增大,粒徑、PDI和乳化時(shí)間都逐漸增大,可能是因?yàn)殡S著油相比例增大,乳化過程變得困難,導(dǎo)致乳化時(shí)間延長(zhǎng),形成的乳液粒徑較大,粒徑均一性也較差。ELP35用量對(duì)3個(gè)評(píng)價(jià)指標(biāo)的影響弱于MCT,但也有一定影響,粒徑、PDI和乳化時(shí)間都隨著ELP35比例的增大而減小,表明隨著乳化劑用量的增加,CXBSMEDDS在水中更易自發(fā)形成粒徑較小的乳液。而助乳化劑丙三醇對(duì)3個(gè)評(píng)價(jià)指標(biāo)的影響比較小,其主要起增溶藥物、促進(jìn)微乳形成并增加微乳穩(wěn)定性的作用。

      圖2 各組分比例對(duì)CXB-SMEDDS的粒徑(A)、PDI(B)及乳化時(shí)間(C)影響的三維效應(yīng)面圖

      2.2.3 最優(yōu)處方確定與驗(yàn)證 CXB-SMEDDS的粒徑越小,比表面積越大,藥物溶出與吸收就越快;自乳化時(shí)間越短,乳化效果越好;PDI值小于0.2時(shí),乳液的分散性較好。綜合3個(gè)指標(biāo),通過軟件預(yù)測(cè)得最優(yōu)處方為MCT 10 %、ELP35 59.45 %、丙三醇30.55 %。為便于實(shí)驗(yàn)操作,將處方調(diào)整為MCT 10 %、ELP35 60 %、丙三醇30 %。根據(jù)預(yù)測(cè)的最優(yōu)處方制備 3 批CXB-SMEDDS,測(cè)定其粒徑、PDI與乳化時(shí)間,計(jì)算預(yù)測(cè)值與實(shí)測(cè)值之間的偏差,結(jié)果見表2。結(jié)果表明,各評(píng)價(jià)指標(biāo)的預(yù)測(cè)值與實(shí)測(cè)值之間的偏差較小,說明所建立的數(shù)學(xué)模型具有良好的預(yù)測(cè)效果。

      表2 最優(yōu)處方驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)結(jié)果( ±s,n=3)

      表2 最優(yōu)處方驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)結(jié)果( ±s,n=3)

      評(píng)價(jià)指標(biāo)預(yù)測(cè)值實(shí)測(cè)值偏差/%粒徑/nm15.5316.21±0.724.38 PDI0.0660.072±0.0112.26乳化時(shí)間/s8.748.42±0.633.66

      2.3 CXB-SMEDDS的質(zhì)量評(píng)價(jià)

      2.3.1 外觀性狀 將新鮮制備的CXB-SMEDDS置于西林瓶中,肉眼觀察其外觀性狀,見圖3。稱取CXB-SMEDDS 1 g,磁力攪拌條件下(100 r/min)緩慢加入到100 ml 37 ℃蒸餾水中,觀察乳液的外觀性狀。由圖3A可見,CXB-SMEDDS在室溫(25 ℃)下呈無色透明溶液,流動(dòng)性較好。由圖3B可見,CXB自乳化后能形成略泛藍(lán)光的溶液。

      圖3 CXB-SMEDDS自乳化前(A)和自乳化后(B)的外觀性狀

      2.3.2 微觀形態(tài) 采用透射電子顯微鏡觀察CXBSMEDDS的微觀形態(tài)。稱取CXB-SMEDDS 1 g,磁力攪拌條件下(100 r/min)緩慢加入37 ℃蒸餾水100 ml中,得到CXB乳液。將該乳液滴在覆有支持膜的銅網(wǎng)上,靜置10 min,再滴加1 %磷鎢酸溶液于銅網(wǎng)上,負(fù)染2 min后用濾紙片吸干,過夜干燥,透射電鏡下觀察,結(jié)果見圖4。結(jié)果表明,CXBSMEDDS 自乳化后形成的乳滴呈均一的圓球形,粒徑為20 nm左右。

      圖4 CXB-SMEDDS的透射電鏡圖

      2.3.3 粒徑與電位分布 稱取CXB-SMEDDS 1 g,磁力攪拌條件下(100 r/min)緩慢加入到100 ml 37 ℃蒸餾水中,得到CXB乳液。用Malvern激光粒度分布與電勢(shì)分析儀測(cè)定該乳液平均粒徑及Zeta電位分布,結(jié)果見圖5。結(jié)果表明,CXB-SMEDDS自乳化后形成的乳滴的平均粒徑為(16.21±0.72)nm,粒徑較小。PDI為0.072±0.011,表明粒度分布比較均勻。電位為(-15.8±1.2)mV。

      圖5 CXB-SMEDDS和CXB原料藥在水(A)、pH 1.2鹽酸溶液(B)、pH 4.5醋酸鹽溶液(C)和pH 6.8磷酸鹽溶液(D)中的溶出曲線

      2.3.4 載藥量與包封率

      2.3.4.1 CXB的含量測(cè)定 采用紫外分光光度法測(cè)定CXB的含量。精密稱取CXB原料藥細(xì)粉30.00 mg,置于100 ml量瓶中,加適量甲醇超聲溶解,并用甲醇稀釋至刻度,配成300 μg/ml的儲(chǔ)備液。精密移取200 μl儲(chǔ)備液至10 ml量瓶,用甲醇稀釋至刻度,得6 μg/ml的溶液,紫外掃描確定CXB的最大吸收波長(zhǎng)。精密移取儲(chǔ)備液50,100,200,300,400,500 μl至10 ml量瓶,用甲醇稀釋至刻度,于最大波長(zhǎng)條件下測(cè)定吸光度,以吸光度A為縱坐標(biāo),質(zhì)量濃度C(μg/ml)為橫坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。按上述步驟配制低、中、高3種不同濃度的溶液,測(cè)定吸光度,計(jì)算回收率和精密度。結(jié)果顯示,CXB在甲醇中的標(biāo)準(zhǔn)曲線為y=0.0563x-0.0143,R2=0.9998,表明CXB在1.5~15 μg/ml范圍內(nèi)線性關(guān)系良好?;厥章屎途芏仍囼?yàn)的結(jié)果也表明,本含量測(cè)定方法的回收率與精密度良好。

      2.3.4.2 載藥量與包封率的測(cè)定 精密稱取1.0000 g CXB-SMEDDS(其中含CXB的量為W0),置于100 ml量瓶中,加適量甲醇超聲溶解,并用甲醇稀釋至刻度,配成儲(chǔ)備液。精密移取500 μl儲(chǔ)備液至10 ml量瓶,加甲醇稀釋至刻度,于最大波長(zhǎng)條件下測(cè)定其吸光度,按2.2.4.1 項(xiàng)下方法計(jì)算其藥物含量(W1)。精密稱取1.0000 g CXB-SMEDDS,磁力攪拌條件下(100 r/min)緩慢加入100 ml 37 ℃蒸餾水中,得CXB乳液。取該乳液2 ml,置于離心管中,10 000 r/min離心 15 min,精密移取上清500 μl至10 ml量瓶中,用甲醇稀釋至刻度,于最大波長(zhǎng)條件下測(cè)定其吸光度,按2.2.4.1 項(xiàng)下方法計(jì)算其藥物含量(W2)。根據(jù)公式:載藥量=W1/W0,包封率=W2/W1,計(jì)算相應(yīng)的載藥量與包封率。最終測(cè)得CXB-SMEDDS的載藥量為標(biāo)示量的101.42 %±0.29 %,包封率為98.05 %±0.18 %,均符合要求。

      2.4 CXB-SMEDDS的體外溶出評(píng)價(jià)

      2.4.1 CXB溶出度測(cè)定方法的建立 建立CXB在4種不同溶出介質(zhì)(水、pH 1.2鹽酸溶液、pH 4.5醋酸鹽溶液、pH 6.8磷酸鹽溶液)中的含量測(cè)定方法。精密稱取CXB原料藥細(xì)粉 15.00 mg,置于100 ml量瓶中,加適量溶出介質(zhì)(含SDS)超聲溶解,并稀釋至刻度,配成150 μg/ml儲(chǔ)備液。精密移取400 μl儲(chǔ)備液至10 ml量瓶,用溶出介質(zhì)稀釋至刻度,得6 μg/ml的溶液,紫外掃描確定CXB的最大吸收波長(zhǎng)。精密移取儲(chǔ)備液100,200,400,600,800,1000 μl至 10 ml量瓶,用溶出介質(zhì)稀釋至刻度,于最大波長(zhǎng)條件下測(cè)定吸光度,以吸光度A為縱坐標(biāo),質(zhì)量濃度C(μg/ml)為橫坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。按上述步驟配制低、中、高3種不同濃度的溶液,測(cè)定吸光度,計(jì)算回收率和精密度。結(jié)果見表3。由表3可知,本方法回收率與精密度良好,CXB在各溶出介質(zhì)中線性關(guān)系良好。

      表3 CXB在各溶出介質(zhì)中的標(biāo)準(zhǔn)曲線、精密度與回收率測(cè)定結(jié)果

      2.4.2 CXB-SMEDDS體外溶出度的測(cè)定 按《中國(guó)藥典》2020年版溶出度測(cè)定法第二法(槳法)進(jìn)行CXB-SMEDDS的溶出度測(cè)定。溶出度測(cè)定要求為:溶出介質(zhì)為水、pH 1.2鹽酸溶液、pH 4.5醋酸鹽溶液及pH 6.8磷酸鹽溶液,溶出介質(zhì)的體積為500 ml,轉(zhuǎn)速為 50 r/min,溫度為(37±0.5)℃。精密稱取原料藥12.50 mg和CXB-SMEDDS 0.5000 g,分別投入溶出杯中,分別于 5,10,15,30,45,60,90,120 min取樣7 ml,并及時(shí)補(bǔ)入同溫度介質(zhì)7 ml,所取樣品用0. 45 μm微孔濾膜濾過。按2.4.1項(xiàng)下方法,測(cè)定溶出量,繪制溶出曲線。

      CXB-SMEDDS和CXB原料藥在各介質(zhì)中的溶出曲線見圖5。由圖5可見,CXB原料藥在各介質(zhì)中的溶出都比較少,24 h內(nèi)累積溶出度均小于10 %,表明原料藥較差的水溶性限制了其溶出。而CXB-SMEDDS在4種溶出介質(zhì)的溶出均較快,5 min內(nèi)平均溶出度大于43.94 %,45 min的累積溶出度達(dá)到了87.48 %以上,此后一直維持在這個(gè)水平,溶出較完全。CXB-SMEDDS在各個(gè)介質(zhì)中溶出行為沒有差異,可以預(yù)測(cè)CXB-SMEDDS口服后在胃以及小腸、十二指腸等部位的溶出行為也相似,都能實(shí)現(xiàn)較快較完全的溶出。綜上,與CXB原料藥相比,CXB-SMEDDS的溶出度大大提高,由此推測(cè),將CXB制成CXB-SMEDDS后可改善CXB的胃腸道吸收,大大提高CXB的口服生物利用度。

      3 討論

      SMEDDS體系通常由油相、乳化劑及助乳化劑組成,油相對(duì)SMEDDS的形成十分重要。本研究選擇MCT作為油相,是因?yàn)镸CT是脂溶性藥物強(qiáng)大的增溶劑,CXB在MCT中的溶解度可達(dá)到載藥量的要求,同時(shí)MCT脂肪鏈較短,易微乳化,消化吸收快。且MCT還具有很多其他優(yōu)良性質(zhì),如安全性高、預(yù)防肥胖、抗疲勞及提高免疫力等[9]。

      篩選最佳處方是制備SMEDDS的中心環(huán)節(jié)。SMEDDS一般先通過偽三元相圖的繪制,確定能發(fā)生自乳化的各因素的比例范圍,再通過單純網(wǎng)格優(yōu)化確定各因素的最佳比例。當(dāng)實(shí)驗(yàn)因素總量恒定時(shí),單純形網(wǎng)格法僅需確定各因素比例范圍就可準(zhǔn)確預(yù)測(cè)實(shí)驗(yàn)區(qū)域內(nèi)其他點(diǎn)的性能,被廣泛用于SMEDDS制劑處方優(yōu)選[7]。與其他方法相比,單純形網(wǎng)格法可通過較少的實(shí)驗(yàn)次數(shù),確定最優(yōu)處方,大大簡(jiǎn)化了實(shí)驗(yàn)操作,且預(yù)測(cè)性良好[10]。使用單純形網(wǎng)格法優(yōu)化處方時(shí),把粒徑、PDI、乳化時(shí)間作為參考因素,這是因?yàn)镾MEDDS粒徑越小,比表面積越大,越容易被吸收;較小的PDI可保證乳液的分散性;乳化時(shí)間越短,自乳化過程越容易進(jìn)行??傊?,合適的粒徑、PDI、乳化時(shí)間可保證SMEDDS優(yōu)良的體內(nèi)外性質(zhì)。

      體外溶出試驗(yàn)結(jié)果表明與C X B 原料藥相比,CXB-SMEDDS的溶出度大大提高,據(jù)此預(yù)測(cè),CXB-SMEDDS可提高CXB的口服生物利用度。體外溶出試驗(yàn)可以一定程度上預(yù)測(cè)藥物的體內(nèi)行為,但體外溶出并不能完全模擬藥物的體內(nèi)吸收情況,因此后續(xù)試驗(yàn)還可以進(jìn)行CXB-SMEDDS的藥動(dòng)學(xué)試驗(yàn),通過測(cè)定CXB原料藥和CXB-SMEDDS的血藥濃度,進(jìn)一步驗(yàn)證CXB-SMEDDS確實(shí)能大大提高CXB的體內(nèi)吸收[11]。同時(shí),還可比較體內(nèi)體外試驗(yàn)的結(jié)果,進(jìn)行體內(nèi)外相關(guān)性研究。

      猜你喜歡
      單純形網(wǎng)格法丙三醇
      Au/Co3O4-ZnO催化劑上CO2-丙三醇羰基化合成丙三醇碳酸酯
      葉絲氣流干燥過程中水分和丙三醇遷移特性
      煙草科技(2022年11期)2022-12-20 05:58:40
      雙重稀疏約束優(yōu)化問題的一種貪婪單純形算法
      丙三醇制丙三醇碳酸酯催化研究進(jìn)展
      遼寧化工(2021年8期)2021-09-07 09:14:46
      雷擊條件下接地系統(tǒng)的分布參數(shù)
      角接觸球軸承的優(yōu)化設(shè)計(jì)算法
      基于遺傳算法的機(jī)器人路徑規(guī)劃研究
      基于GIS的植物葉片信息測(cè)量研究
      基于改進(jìn)單純形算法的Topmodel參數(shù)優(yōu)化研究
      丙三醇對(duì)氧化鋁陶瓷支撐體性能的影響
      无极县| 长宁区| 赤壁市| 文昌市| 长葛市| 乌鲁木齐市| 佛坪县| 辽源市| 遂宁市| 绵竹市| 奎屯市| 墨竹工卡县| 盖州市| 罗平县| 贵德县| 黄梅县| 连南| 同江市| 云和县| 莱阳市| 乳山市| 渑池县| 永福县| 遵义市| 遂宁市| 吉木萨尔县| 青州市| 黄浦区| 柘城县| 黄石市| 蓬莱市| 宜州市| 灵川县| 双流县| 寿光市| 许昌市| 荔波县| 聊城市| 抚松县| 阳高县| 福泉市|