ICP-MS測(cè)定紅花續(xù)斷膏中鉛砷鎘汞銅含量

黃煥霞，劉金磊，陸蓉蓉，趙曉輝*

（1. 山東明仁福瑞達(dá)制藥股份有限公司，山東 濟(jì)南 250104；2. 山東古金中醫(yī)藥科技有限公司，山東 濟(jì)南 250104）

黑膏藥是我國(guó)傳統(tǒng)中藥劑型，具有兩千多年的歷史，廣泛用于多種疾病治療[1]。紅花續(xù)斷膏為紅花、續(xù)斷、蜈蚣、象皮、血竭、川烏、草烏等多味中藥制成的黑膏藥，具有活血化瘀，續(xù)筋接骨，消腫止痛，補(bǔ)益肝腎的功能，對(duì)骨折后愈合具有促進(jìn)作用。在制備過(guò)程中鉛丹與麻油在高溫中形成脂肪酸鉛鹽，有報(bào)道黑膏藥中鉛可能會(huì)被人體吸收而造成鉛中毒[2-3]，近年黑膏藥質(zhì)量控制研究報(bào)道較少，現(xiàn)黑膏藥多數(shù)僅有軟化點(diǎn)、錐入度等物理指標(biāo)檢測(cè)[4-6]，安全性指標(biāo)研究報(bào)道較少，故本研究對(duì)紅花續(xù)斷膏中鉛及砷、鎘、汞、銅元素含量進(jìn)行研究，指導(dǎo)黑膏藥的質(zhì)量控制及臨床用藥。

1 儀器與材料

1.1 儀器

AUW120D型電子天平（日本島津）；HH-6恒溫水浴鍋（上海力辰邦西）；ICPMS-2030電感耦合等離子體質(zhì)譜儀（日本島津）；MDS-6微波消解儀（上海新儀微波）。

1.2 試藥

紅花續(xù)斷膏（山東古金中醫(yī)藥科技有限公司，50 g/貼，批號(hào)：20200818，20200819，20200820，20210222，20210223，20210224，20210225）。鉛元素標(biāo)準(zhǔn)溶液（中國(guó)計(jì)量科學(xué)研究院，1000 μg/ml）；砷元素標(biāo)準(zhǔn)溶液（中國(guó)計(jì)量科學(xué)研究院，1000 μg/ml）；鎘元素標(biāo)準(zhǔn)溶液（中國(guó)計(jì)量科學(xué)研究院，1000 μg/ml）；汞元素標(biāo)準(zhǔn)溶液（中國(guó)計(jì)量科學(xué)研究院，1000 μg/ml）；銅元素標(biāo)準(zhǔn)溶液（中國(guó)計(jì)量科學(xué)研究院，1000 μg/ml）；鍺元素標(biāo)準(zhǔn)溶液（國(guó)家有色金屬及電子材料分析測(cè)試中心， 1000 μg/ml ）；銦元素標(biāo)準(zhǔn)溶液（國(guó)家有色金屬及電子材料分析測(cè)試中心，1000 μg/ml）；鉍元素標(biāo)準(zhǔn)溶液（國(guó)家有色金屬及電子材料分析測(cè)試中心，1000 μg/ml）；甲醇為色譜純，乙醇、丙酮等其他試劑均為分析純。

2 方法與結(jié)果

2.1 測(cè)定方法

2.1.1 供試品溶液制備 取供試品約0.5 g，精密稱定，置聚四氟乙烯消解罐中，加硝酸10 ml，密閉，置微波消解儀中消解，消解完全后，冷卻，將消解液轉(zhuǎn)入50 ml量瓶中，用少量水洗滌消解罐3次，洗液合并于量瓶中，加入金單元素標(biāo)準(zhǔn)溶液（l μg/ml）200 μl，用水稀釋至刻度，搖勻，即得砷、鎘、汞、銅供試品溶液。精密吸取上溶液1 ml置100 ml量瓶中，用10 %硝酸溶液稀釋至刻度，搖勻，精密吸取1 ml置100 ml量瓶中，用10 %硝酸溶液稀釋至刻度，搖勻，即得鉛供試品溶液。同法制備試劑空白溶液。

2.1.2 標(biāo)準(zhǔn)貯備溶液的制備 分別精密量取鉛、砷、鎘、汞、銅單元素標(biāo)準(zhǔn)溶液適量，用10 % 硝酸溶液稀釋制成每l ml分別含鉛、砷、鎘、汞、銅為l，0.5，l，l，10 μg的溶液，即得。

2.1.3 系列標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備 精密量取鉛、砷、鎘、銅標(biāo)準(zhǔn)貯備液適量，用10 %硝酸溶液稀釋制成每l ml含鉛0，2，5，10，20，50 ng，含砷0，l，2，5，10，20 ng，含鎘0，0.2，0.4，0.8，1，2 ng，含銅0，10，20，50，100，200 ng 的系列濃度混合溶液。另精密量取汞標(biāo)準(zhǔn)貯備液適量，用10 %硝酸溶液稀釋制成每l ml分別含汞0，0.2，0.4，0.8，l，2 ng的溶液，臨用新配。

2.1.4 內(nèi)標(biāo)溶液的制備 精密量取鍺、銦、鉍單元素標(biāo)準(zhǔn)溶液適量，用水稀釋制成每l ml各含l μg的混合溶液，即得。

2.1.5 測(cè)定法 測(cè)定時(shí)選取的同位素為63Cu、75As、114Cd、202Hg和208Pb，其中63Cu、75As以72Ge為內(nèi)標(biāo)，114Cd以115In為內(nèi)標(biāo)，202Hg和208Pb以209Bi為內(nèi)標(biāo)，選擇碰撞反應(yīng)模式，選用校正方程對(duì)測(cè)定的元素進(jìn)行校正。

儀器的內(nèi)標(biāo)進(jìn)樣管在儀器分析工作過(guò)程中始終插入內(nèi)標(biāo)溶液中，依次將儀器的樣品管插入各個(gè)濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液中進(jìn)行測(cè)定（濃度依次遞增），以測(cè)量值（3次讀數(shù)的平均值）為縱坐標(biāo)，濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。將儀器的樣品管插入供試品溶液中，測(cè)定，取3次讀數(shù)的平均值。從標(biāo)準(zhǔn)曲線上計(jì)算得相應(yīng)的濃度[7-9]。

2.2 線性

取2.1.3項(xiàng)下鉛、砷、鎘、汞、銅系列標(biāo)準(zhǔn)溶液及2.1.4項(xiàng)下鍺、銦、鉍內(nèi)標(biāo)溶液，注入電感耦合等離子體質(zhì)譜儀，以內(nèi)標(biāo)校正濃度為橫坐標(biāo)，以對(duì)應(yīng)的元素響應(yīng)值為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，結(jié)果表明本法測(cè)定鉛、砷、鎘、汞、銅的線性關(guān)系均良好。結(jié)果見(jiàn)表1。

表1 線性結(jié)果

2.3 系統(tǒng)精密度

取2.1項(xiàng)下鉛、砷、鎘、汞、銅3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)溶液，分別連續(xù)進(jìn)樣6次，結(jié)果RSD分別為5.4 %，3.3 %，5.7 %，3.4 %，4.3 %，RSD均小于10 %，表明系統(tǒng)精密度良好。

2.4 檢測(cè)限和定量限

取空白溶液，按2.1.5項(xiàng)下方法測(cè)定，連續(xù)進(jìn)樣12次，結(jié)果顯示鉛元素的檢測(cè)限為0.1077 ng/ml，定量限為0.3589 ng/ml；砷元素的檢測(cè)限為0.0668 ng/ml，定量限為0.2226 ng/ml；鎘元素的檢測(cè)限為0.0052 ng/ml，定量限為0.0173 ng/ml；汞元素的檢測(cè)限為0.0301 ng/ml，定量限為0.9032 ng/ml；銅元素的檢測(cè)限為0.0514 ng/ml，定量限為0.1713 ng/ml。

2.5 重復(fù)性

取樣品，按2.1.5項(xiàng)下方法測(cè)定，結(jié)果鉛、砷、鎘、汞、銅平均含量分別為2.40×105，0.091，0.173，<0.003，6.61 mg/kg，RSD分別為5.5 %，4.8 %，6.3 %，7.4 %，5.5 %（n=6），RSD均小于10 %，表明重復(fù)性良好。

2.6 中間精密度

取樣品，分別由不同操作人員在不同日期按2.1.5項(xiàng)下方法分別測(cè)定6份供試品，結(jié)果鉛、砷、鎘、汞、銅平均含量分別為2.45×105，0.101，0.171，<0.003，6.59 mg/kg，RSD分別為6.1 %，6.9 %，7.5 %，8.2 %，6.6 %（n=6），RSD均小于10 %，表明本法測(cè)定中間精密度良好。

2.7 準(zhǔn)確度

精密稱取樣品5 g，置研缽中，加熱軟化，精密加入硅藻土5 g，研勻備用。取適量，精密稱定，置聚四氟乙烯消解罐中，分別精密加入鉛單元素標(biāo)準(zhǔn)液2000 ng、砷單元素標(biāo)準(zhǔn)液25 ng、鎘單元素標(biāo)準(zhǔn)液25 ng、汞單元素標(biāo)準(zhǔn)液25 ng、銅單元素標(biāo)準(zhǔn)液25 ng，加硝酸10 ml，搖勻，密閉，置微波消解儀中消解，消解完全后，冷卻，將消解液轉(zhuǎn)入50 ml量瓶中，用少量水洗滌消解罐3次，洗液合并于量瓶中，加入金單元素標(biāo)準(zhǔn)溶液（l μg/ml）200 μl，用水稀釋至刻度，搖勻，即得砷、鎘、汞、銅混合準(zhǔn)確度溶液。精密吸取上溶液1 ml置100 ml量瓶中，用10 %硝酸溶液稀釋至刻度，搖勻，精密吸取1 ml置100 ml量瓶中，用10 %硝酸溶液稀釋至刻度，搖勻，即得鉛準(zhǔn)確度溶液。同法制備6份，注入電感耦合等離子質(zhì)譜儀，依法測(cè)定，結(jié)果見(jiàn)表2。

表2 準(zhǔn)確度結(jié)果

結(jié)果顯示鉛平均回收率為102.7 %，RSD為5.9 %，砷平均回收率為91.99 %，RSD為7.4 %，鎘平均回收率為111.16 %，RSD為3.7 %，汞平均回收率為109.39 %，RSD為9.5 %，銅平均回收率為94.12 %，RSD為7.5 %，表明方法準(zhǔn)確度良好。

2.8 樣品測(cè)定

取7批膏藥，按2.1.5項(xiàng)下方法測(cè)定，結(jié)果見(jiàn)表3。

表3 檢測(cè)結(jié)果

結(jié)果顯示紅花續(xù)斷膏中鉛含量在2.07×105～2.54×105mg/kg范圍內(nèi)，砷含量在0.05～0.14 mg/kg范圍內(nèi)，鎘含量在0.16～0.19 mg/kg范圍內(nèi)，汞含量均小于0.003 mg/kg，銅含量在6.2～8.7 mg/kg范圍內(nèi)。

3 討論

研究中發(fā)現(xiàn)黑膏藥較黏，需加熱至70～80 ℃使成液態(tài)后稱量。準(zhǔn)確度試驗(yàn)中樣品黏稠，無(wú)法與標(biāo)準(zhǔn)溶液混勻，故先用硅藻土將樣品充分分散，使成固態(tài)粉末，便于試驗(yàn)操作，隨行空白對(duì)照。研究顯示紅花續(xù)斷膏中鉛含量較高，約占樣品總重的21 %～25 %，測(cè)定鉛含量時(shí)需將供試品溶液稀釋1×104倍后進(jìn)樣測(cè)定。本法所測(cè)鉛含量為總鉛含量，包含脂肪酸鉛鹽及反應(yīng)剩余鉛丹中鉛含量，與文獻(xiàn)報(bào)道基本一致[8]，另表明樣品中砷、鎘、汞、銅含量較低，膏藥一般為完整皮膚應(yīng)用，可吸收砷、鎘、汞、銅元素量較低。

紅花續(xù)斷膏中鉛是主要輔料鉛丹的成分，又是有一定毒性的成分，其應(yīng)用后鉛吸收與樣品中鉛含量、臨床應(yīng)用周期之間關(guān)系有待進(jìn)一步研究。