DKK-1、TAT-2聯(lián)合血清胃蛋白酶原、胃泌素-17在胃癌早期診斷中的臨床價(jià)值分析*

郭 沛,蘆永福,王學(xué)紅

1.青海大學(xué)臨床醫(yī)學(xué)院,青海西寧 810000;2.青海大學(xué)附屬醫(yī)院消化科,青海西寧 810000

胃癌是起源于胃黏膜上皮的惡性腫瘤,是預(yù)后較差的一類腫瘤,具有發(fā)病率、轉(zhuǎn)移率高和5年生存率低等特點(diǎn)[1]。我國(guó)2020年新增胃癌患者47.9萬(wàn)例,死亡37.4萬(wàn)例,死亡率居第3位[2]。目前胃癌的篩查金標(biāo)準(zhǔn)為胃鏡加活檢,但因?yàn)榫哂星秩胄?、檢查費(fèi)高,人群接受度低等特點(diǎn),難以用于我國(guó)胃癌的大規(guī)模篩查[3],因此尋找合適的血清學(xué)檢測(cè)指標(biāo)至關(guān)重要,血清胃蛋白酶原(PG)是反映胃黏膜形態(tài)和功能狀態(tài)的可靠生物標(biāo)志物,其水平變化是胃癌前兆的亞臨床指標(biāo),PG分為PG-Ⅰ和PG-Ⅱ,一項(xiàng)胃癌普查研究發(fā)現(xiàn),血清PG檢測(cè)用于胃癌篩查的陽(yáng)性率為77%,特異度為73%[4]。血清胃泌素-17(G-17)水平可提示胃竇黏膜萎縮或功能狀況,G-17水平在正常胃黏膜向惡性腫瘤的發(fā)展過程中逐漸升高。Dickkopf相關(guān)蛋白1(DKK-1)通過自分泌或旁分泌等方式,參與腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)、浸潤(rùn)及轉(zhuǎn)移等過程,DKK-1的水平升高促進(jìn)胃癌進(jìn)展[5]。腫瘤相關(guān)胰蛋白酶原-2(TAT-2)與腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移有密切關(guān)系,倉(cāng)慧等[6]研究表明,與健康者比較,胃癌患者血清TAT-2水平升高。本研究旨在探討血清G-17、PG-Ⅰ、PG-Ⅱ聯(lián)合DKK-1、TAT-2檢測(cè)在早期胃癌中的價(jià)值,旨在尋找一種更為高效、準(zhǔn)確的診斷方式。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2021年10月至2022年10月在本院因上腹部不適進(jìn)行胃鏡檢查發(fā)現(xiàn)胃黏膜病變的患者125例作為研究對(duì)象,其中癌前病變31例(癌前病變組)、早期胃癌32例(早期胃癌組)、進(jìn)展期胃癌32例(進(jìn)展期胃癌組)、慢性非萎縮性胃炎30例(對(duì)照組)。癌前病變組中男15例,女16例;年齡30～71歲,平均(55.45±9.37)歲。早期胃癌組中男24例,女8例;年齡45～73歲,平均(60.53±8.76)歲。進(jìn)展期胃癌組中男22例,女10例;年齡39～77歲,平均(63.03±9.31)歲。對(duì)照組中男14例,女16例;年齡28～50歲,平均(37.93±6.14)歲。各組性別、年齡比較,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),具有可比性。本研究經(jīng)本院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

全部患者須結(jié)合臨床癥狀、內(nèi)鏡及病理組織學(xué)檢查確診。納入標(biāo)準(zhǔn):(1)長(zhǎng)期生活于青海的本地居民(>10年),年齡在25～80歲,性別不限;(2)入組前2周內(nèi)無(wú)服用影響本研究觀察的藥物(PPI制劑、H2受體拮抗劑、抗菌藥物、抗凝藥、抗腫瘤藥、非湽體抗炎藥);(3)知情同意且自愿參加本研究。排除標(biāo)準(zhǔn):(1)近期有胃部手術(shù)史,放化療史者;(2)有肝病、胰腺疾病、急性上消化道出血史者;(3)嚴(yán)重的心、肺功能不全者,嚴(yán)重的神經(jīng)病變或精神疾病患者,胃鏡檢查禁忌證者。

1.2判斷標(biāo)準(zhǔn) 慢性非萎縮性胃炎:胃黏膜示淺表性胃炎,可有輕微炎癥細(xì)胞浸潤(rùn);癌前病變:胃黏膜可有炎癥細(xì)胞浸潤(rùn),伴明顯腺體腸化,低級(jí)別上皮內(nèi)瘤變;早期胃癌:只要癌組織浸潤(rùn)深度僅限于黏膜層或黏膜下層均稱早期胃癌,病理包括高級(jí)別上皮內(nèi)瘤變或者腺癌;進(jìn)展期胃癌:病理診斷為胃癌,包括腺癌、鱗癌、印戒細(xì)胞癌等。

1.3方法 收集患者臨床資料,包括性別、年齡、腫瘤位置、分化程度等。PG-Ⅰ、PG-Ⅱ、G-17的檢測(cè):采集患者清晨空腹靜脈血,靜置完成后分離血清,采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)檢測(cè)PG-Ⅰ、PG-Ⅱ、G-17水平。DKK-1、TAT-2的檢測(cè):采集患者空腹靜脈血,靜置后分離血清,通過ELISA檢測(cè)血清TAT-2、DKK-1水平,所有操作均按照試劑盒說(shuō)明書步驟進(jìn)行。比較4組血清PG-Ⅰ、PG-Ⅱ、G-17及DKK-1、TAT-2水平及評(píng)價(jià)以上指標(biāo)在胃癌早期診斷中的價(jià)值。

2 結(jié) 果

2.1各組患者PG-Ⅰ、PG-Ⅱ、G-17、DKK-1、TAT-2水平比較 與對(duì)照組比較,癌前病變組、早期胃癌組、進(jìn)展期胃癌組PG-Ⅰ、TAT-2水平逐漸降低,PG-Ⅱ、G-17、DKK-1水平逐漸升高,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),但早期胃癌組與進(jìn)展期胃癌組TAT-2水平比較,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見表1。

表1 各組患者PG-Ⅰ、PG-Ⅱ、G-17、DKK-1、TAT-2水平比較或M(P25,P75)]

2.2血清DKK-1、TAT-2水平與臨床病理特征的關(guān)系 血清DKK-1水平與患者淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、腫瘤最大徑、臨床分期、分化程度有關(guān)(P<0.05),TAT-2水平與患者浸潤(rùn)深度有關(guān)(P<0.05)。見表2。

表2 血清DKK-1、TAT-2水平與臨床病理特征的關(guān)系[M(P25,P75),μg/L]

2.3各項(xiàng)指標(biāo)診斷早期胃癌的臨床價(jià)值分析 PG-Ⅰ、PG-Ⅱ、G-17、DKK-1、TAT-2診斷早期胃癌的曲線下面積(AUC)分別為0.731、0.896、0.704、0.625、0.747(P<0.05),新ABC法+DKK-1、新ABC法+TAT-2診斷早期胃癌的AUC分別為0.935,0.958(P<0.05),所有指標(biāo)聯(lián)合檢測(cè)診斷早期胃癌的AUC為0.984(P<0.05)。見表3。

表3 各項(xiàng)指標(biāo)診斷早期胃癌的臨床價(jià)值分析

2.4各項(xiàng)指標(biāo)診斷胃癌的臨床價(jià)值分析 PG-Ⅰ、PG-Ⅱ、G-17、DKK-1、TAT-2診斷胃癌的AUC分別為0.726、0.862、0.789、0.870、0.914(P<0.05),新ABC法+DKK-1、新ABC法+TAT-2診斷胃癌的AUC分別為0.979、0.980(P<0.05),所有指標(biāo)聯(lián)合診斷胃癌的AUC為0.993(P<0.05),見表4。

表4 各項(xiàng)指標(biāo)診斷胃癌的臨床價(jià)值分析

3 討 論

PG是起源于胃黏膜消化酶的前體酶,其中有約1%的PG分泌到血液循環(huán)中,故血清PG水平可反映胃黏膜PG分泌水平,血清PG是反映胃黏膜形態(tài)和功能狀態(tài)的可靠生物標(biāo)志物,研究表明胃黏膜環(huán)境發(fā)生變化,PG水平也會(huì)變化,一般呈下降趨勢(shì)[7]。PG由胃底、胃體主細(xì)胞和頸黏液細(xì)胞分泌,PG分為PG-Ⅰ和PG-Ⅱ,PG-Ⅰ是血清PG的主要成分,約占總量的75%[8]。流行病學(xué)研究發(fā)現(xiàn),血清PG水平異常的成年人具有更高的胃黏膜癌前病變(腸上皮化生和上皮異常增生)的發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)[9]。雖然已經(jīng)有研究證明,PG水平降低的受試者胃癌風(fēng)險(xiǎn)增加,但PG單獨(dú)檢測(cè)胃癌的準(zhǔn)確性很低,靈敏度在36.8%～62.3%[10]。血清G-17水平可提示胃竇黏膜萎縮或功能狀況,國(guó)內(nèi)的一項(xiàng)4 064例參與者的研究表明,G-17水平在正常胃黏膜向惡性腫瘤的發(fā)展過程中明顯升高[11]。血清G-17水平升高與其以自分泌的形式參與胃黏膜癌變相關(guān),高水平的G-17是預(yù)測(cè)胃癌發(fā)生的危險(xiǎn)因素。國(guó)外一項(xiàng)觀察性病例對(duì)照研究發(fā)現(xiàn),無(wú)論是胃竇萎縮性胃炎患者還是已切除胃竇部位的患者,血清G-17水平均降低[12]。G-17在胃癌中表現(xiàn)出較高的診斷價(jià)值,但是不管是PG還是G-17,單獨(dú)檢測(cè)都顯示出其局限性。一些研究將二者結(jié)合以提高其診斷率。G-17和PG的組合被證明是比PG-Ⅰ和PG-Ⅰ/Ⅱ組合更有診斷價(jià)值的胃癌標(biāo)志物,并且可能為檢測(cè)胃癌高危人群提供一種更具有優(yōu)勢(shì)的方法[13]。

本研究結(jié)果顯示,PG-Ⅰ水平隨胃黏膜病變程度增加,呈現(xiàn)出逐漸降低趨勢(shì),各組間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),與相關(guān)研究結(jié)果一致[14-15]。PG-Ⅱ、G-17水平呈升高趨勢(shì),且進(jìn)展期胃癌組明顯高于其他各組(P<0.05),與相關(guān)研究結(jié)果一致[16-17]。但是仍有部分研究表明,胃癌患者血清G-17水平明顯降低,且不同部位胃腫瘤表達(dá)水平有差異,故還需要大樣本及多中心研究來(lái)進(jìn)一步論證研究結(jié)果,PG-Ⅰ、PG-Ⅱ及G-17單獨(dú)診斷胃癌并沒有表現(xiàn)出很高的診斷價(jià)值。

DKK-1是具有266個(gè)氨基酸的小片段分泌型糖蛋白,激活Wnt下游信號(hào)通路,使基質(zhì)金屬蛋白酶的表達(dá)上調(diào),降低腫瘤細(xì)胞間的黏附度,對(duì)腫瘤細(xì)胞的侵襲和轉(zhuǎn)移起促進(jìn)作用[18]。GOMCELI等[19]檢測(cè)不同臨床分期的胃癌患者和健康人群血清DKK-1水平并進(jìn)行對(duì)比分析發(fā)現(xiàn),DKK-1可以作為一種良好的胃癌血清標(biāo)志物。有研究發(fā)現(xiàn)胃癌患者DKK-1水平升高,并認(rèn)為血清DKK-1可作為胃癌診斷的血清腫瘤標(biāo)志物之一[20-21]。本研究結(jié)果顯示,進(jìn)展期胃癌組DKK-1水平明顯高于對(duì)照組、癌前病變組及早期胃癌組,血清DKK-1水平與胃癌患者腫瘤最大徑、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、臨床分期及分化程度有關(guān),從對(duì)胃癌的診斷臨床價(jià)值看,DKK-1單獨(dú)檢測(cè)表現(xiàn)出高于PG及G-17的特異度及靈敏度,與新ABC法聯(lián)合檢測(cè)時(shí)表現(xiàn)出較好的診斷價(jià)值。

TAT-2是T-8氨基酸編碼的絲氨酸蛋白酶類,能夠通過激活金屬蛋白酶和尿激酶原,增強(qiáng)腫瘤的侵襲能力,導(dǎo)致細(xì)胞外基質(zhì)降解增加,從而促進(jìn)腫瘤生長(zhǎng),在結(jié)直腸癌、胃癌、前列腺癌等癌癥中TAT-2水平升高[22],張藝等[23]研究表明,與健康者比較,胃癌患者血清TAT-2水平升高,且檢測(cè)靈敏度較CA242、CA50和CEA高。也有研究發(fā)現(xiàn),TAT-2在胃癌中高表達(dá),且在預(yù)測(cè)胃癌患者生存期方面表現(xiàn)出可觀的價(jià)值[24]。本研究結(jié)果顯示,早期胃癌組及進(jìn)展期胃癌組TAT-2水平明顯高于癌前病變組及對(duì)照組,但早期胃癌組與進(jìn)展期胃癌組TAT-2水平無(wú)明顯差異。在胃癌診斷價(jià)值上,TAT-2表現(xiàn)出高于PG及G-17的診斷價(jià)值,尤其聯(lián)合檢測(cè)方面,有顯著的優(yōu)勢(shì),不失為一種可觀的血清學(xué)標(biāo)志物。

綜上所述,PG與G-17作為一種傳統(tǒng)的血清學(xué)標(biāo)志物,診斷價(jià)值比較確切,但與DKK-1、TAT-2聯(lián)合診斷時(shí)可表現(xiàn)出更高的診斷效能,尤其是新ABC法聯(lián)合DKK-1、TAT-2檢測(cè)時(shí)更明顯提高了臨床診斷價(jià)值。