尿液錯(cuò)誤折疊蛋白檢測(cè)與子癇前期及小于胎齡兒發(fā)生的關(guān)系研究

許艷　卞桂萍

【摘要】 目的 探討尿液錯(cuò)誤折疊蛋白檢測(cè)與子癇前期及小于胎齡兒發(fā)生的關(guān)系。方法 回顧性分析2021年6月—2022年8月在靖江市人民醫(yī)院產(chǎn)檢的600名正常產(chǎn)檢孕婦的臨床資料，按尿液采集時(shí)間分為妊娠中期（孕13～27周）、妊娠晚期（孕28～37周）。對(duì)比不同孕期子癇前期發(fā)生情況，對(duì)比子癇前期者與正常妊娠者不同孕周尿液錯(cuò)誤折疊蛋白定量差異，記錄尿液錯(cuò)誤折疊蛋白陽(yáng)性檢出率，并對(duì)比尿液錯(cuò)誤折疊蛋白陽(yáng)性者與陰性者小于胎齡兒發(fā)生情況，分析小于胎齡兒發(fā)生相關(guān)影響因素。結(jié)果 600名孕婦中出現(xiàn)子癇前期42例（7.00%），其中妊娠中期出現(xiàn)18例（3.00%），妊娠晚期出現(xiàn)24例（4.00%）。妊娠中期與妊娠晚期早發(fā)型子癇前期者尿液錯(cuò)誤折疊蛋白定量均高于正常妊娠者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。600名孕婦中共檢出尿液錯(cuò)誤折疊蛋白陽(yáng)性48例，陰性552例。陽(yáng)性組中小于胎齡兒發(fā)生率為45.83%（22/48），高于陰性組的21.74%（120/552），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。經(jīng)多因素分析顯示，羊水過(guò)少、吸煙或被動(dòng)吸煙、尿液錯(cuò)誤折疊蛋白陽(yáng)性是小于胎齡兒發(fā)生的獨(dú)立危險(xiǎn)因素（P＜0.05）。結(jié)論 子癇前期發(fā)生率隨著尿液錯(cuò)誤折疊蛋白水平增加相應(yīng)升高，小于胎齡兒發(fā)生可能性明顯增高?？蓪⒛蛞哄e(cuò)誤折疊蛋白水平作為預(yù)測(cè)小于胎齡兒與子癇前期的生物學(xué)標(biāo)志物。

【關(guān)鍵詞】 子癇前期；尿液錯(cuò)誤折疊蛋白檢測(cè)；小于胎齡兒

文章編號(hào)：1672-1721（2024）02-0123-03? ? ?文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A? ? ?中國(guó)圖書(shū)分類(lèi)號(hào)：R722.1

子癇前期發(fā)病機(jī)制與病因尚不明確，可能與胎盤(pán)因素、血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷、氧化因子、全身炎癥反應(yīng)等因素有關(guān)。該病可累及全身多系統(tǒng)，特別是腎臟，導(dǎo)致患者發(fā)生蛋白尿、血壓升高，隨著病情加重可導(dǎo)致患者昏迷或抽搐發(fā)作[1-2]。目前，對(duì)于子癇前期尚無(wú)有效治療手段，適時(shí)終止妊娠是最有效的處理手段，但引起醫(yī)源性早產(chǎn)的風(fēng)險(xiǎn)非常高。子癇前期發(fā)病原因非常復(fù)雜，具有發(fā)病通路多樣化、發(fā)病機(jī)制特異性等特點(diǎn)，導(dǎo)致預(yù)測(cè)與診斷難度比較大。24 h尿蛋白定量檢測(cè)是檢測(cè)子癇前期與判斷病情嚴(yán)重程度的重要方式之一，但存在干擾因素多、患者依從性差、收集過(guò)程復(fù)雜等不足，影響臨床診斷結(jié)果[3]。蛋白質(zhì)的線性氨基酸多聚體轉(zhuǎn)變?yōu)槿S立體結(jié)構(gòu)后才能發(fā)揮相應(yīng)功能，一旦其線性結(jié)構(gòu)發(fā)生錯(cuò)誤折疊，并異常聚集則會(huì)引起相應(yīng)疾病[4]?；诖?，本研究回顧性分析2021年6月—2022年8月在靖江市人民醫(yī)院行產(chǎn)檢的600名正常產(chǎn)檢孕婦臨床資料，分析尿液錯(cuò)誤折疊蛋白檢測(cè)與子癇前期及小于胎齡兒發(fā)生的關(guān)系，報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

回顧性分析2021年6月—2022年8月在靖江市人民醫(yī)院行產(chǎn)檢的600名正常產(chǎn)檢孕婦的臨床資料，按尿液采集時(shí)間分為妊娠中期（孕13～27周）、妊娠晚期（孕28～37周）。

納入標(biāo)準(zhǔn)：符合《妊娠期高血壓疾病血壓管理專(zhuān)家共識(shí)（2019）》[5]內(nèi)子癇前期相關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn)；無(wú)溝通障礙，意識(shí)清晰；知曉研究目的，自愿簽訂知情同意書(shū)；接受錯(cuò)誤折疊蛋白檢測(cè)。

排除標(biāo)準(zhǔn)：肝腎等重要臟器嚴(yán)重病變；精神疾患；合并消化系統(tǒng)、血液系統(tǒng)等疾?。欢嗵ト焉?；臨床資料不全；合并可能造成尿蛋白異常疾病，比如腎病綜合征、急慢性腎炎等。

1.2 方法

采集孕婦清潔中段尿液測(cè)定尿液錯(cuò)誤折疊蛋白水平，以斑點(diǎn)印跡法進(jìn)行檢測(cè)，采用固定量固定濃度的剛果紅染色劑，在樣本內(nèi)加入定量尿液樣，充分混合，將定量混合液滴于濾紙上，待自然干燥后用浙江數(shù)問(wèn)生物技術(shù)有限公司提供試劑盒半定量測(cè)定尿中錯(cuò)構(gòu)蛋白。以剛果紅和亮藍(lán)混合染色，濾紙上藍(lán)圈、紅圈半徑比作為半定量輔助判斷尿錯(cuò)構(gòu)蛋白方法，當(dāng)半徑比≥0.615時(shí)，表示尿錯(cuò)構(gòu)蛋白定性結(jié)果為陽(yáng)性。

1.3 觀察指標(biāo)

（1）對(duì)比不同孕期子癇前期發(fā)生情況。（2）對(duì)比子癇前期者與正常妊娠者不同孕周尿液錯(cuò)誤折疊蛋白定量差異。（3）記錄尿液錯(cuò)誤折疊蛋白陽(yáng)性檢出率，并對(duì)比尿液錯(cuò)誤折疊蛋白陽(yáng)性者與陰性者小于胎齡兒發(fā)生情況。小于胎齡兒判斷標(biāo)準(zhǔn)[6]：與同胎齡新生兒相比，出生體質(zhì)量小于第10百分位數(shù)。（4）收集患者資料，包括年齡、產(chǎn)次、流產(chǎn)史、羊水過(guò)少、飲酒史、吸煙或被動(dòng)吸煙、孕期糖尿病、孕期貧血、服用鐵劑等，分析小于胎齡兒發(fā)生相關(guān)影響因素。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 21.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件分析數(shù)據(jù)，計(jì)量資料以x±s表示，采用t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料以百分比表示，采用χ2檢驗(yàn)，多因素使用Logistic回歸分析，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 不同孕期子癇前期發(fā)生情況

600名孕婦中出現(xiàn)子癇前期42例（7.00%），其中妊娠中期出現(xiàn)18例（3.00%），妊娠晚期出現(xiàn)24例（4.00%）。

2.2 對(duì)比子癇前期者與正常妊娠者不同孕周尿液錯(cuò)誤折疊蛋白定量差異

妊娠中期與妊娠晚期子癇前期者尿液錯(cuò)誤折疊蛋白定量均高于正常妊娠者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見(jiàn)表1。

2.3 尿液錯(cuò)誤折疊蛋白陽(yáng)性與陰性患者小于胎齡兒發(fā)生率對(duì)比

600名孕婦中共檢出尿液錯(cuò)誤折疊蛋白陽(yáng)性48例，陰性552例。陽(yáng)性組中小于胎齡兒發(fā)生率為45.83%（22/48），高于陰性組的21.74%（120/552），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=14.191，P＜0.001）。

2.4 小于胎齡兒發(fā)生相關(guān)影響因素

2.4.1 單因素分析

羊水過(guò)少、吸煙或被動(dòng)吸煙與小于胎齡兒發(fā)生有關(guān)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；年齡、產(chǎn)次、流產(chǎn)史、飲酒史、孕期糖尿病、孕期貧血、服用鐵劑與其發(fā)生無(wú)關(guān)，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），見(jiàn)表2。

2.4.2 多因素分析

以是否發(fā)生小于胎齡兒為因變量（未發(fā)生=0；發(fā)生=1），以單因素中差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的項(xiàng)目作為自變量[羊水過(guò)少（否=0；是=1）、吸煙或被動(dòng)吸煙（否=0；是=1）、尿液錯(cuò)誤折疊蛋白檢測(cè)結(jié)果（陰性=0；陽(yáng)性=1）]，經(jīng)多因素分析顯示，羊水過(guò)少、吸煙或被動(dòng)吸煙、尿液錯(cuò)誤折疊蛋白陽(yáng)性是小于胎齡兒發(fā)生的獨(dú)立危險(xiǎn)因素（P＜0.05），見(jiàn)表3。

3? 討論

子癇前期屬于妊娠期特有的綜合征，主要臨床特征為蛋白尿、高血壓與水腫，病情嚴(yán)重時(shí)可引起HELLP綜合征、器官功能障礙，可增加患者患代謝性疾病、心血管疾病的可能性，還可引起胎兒生長(zhǎng)受限、早產(chǎn)、死亡、胎兒宮內(nèi)窘迫等圍生期不良結(jié)局，嚴(yán)重威脅母嬰健康[7]。子癇前期具有典型的胎盤(pán)病理基礎(chǔ)，有并發(fā)癥多、進(jìn)展快等特點(diǎn)，發(fā)病越早，病情演變?cè)街?、越快，可累及患者多臟器，致使孕婦臟器功能受損，常合并胎兒生長(zhǎng)受限，是圍生兒和孕產(chǎn)婦發(fā)生不良結(jié)局的重要因素[8]。尿蛋白檢測(cè)，尤其是24 h尿蛋白定量是評(píng)估子癇前期發(fā)生及病情嚴(yán)重程度的重要指標(biāo)之一，但樣本采集與保存過(guò)程中會(huì)受到多種因素影響[9-10]，故需要尋找一種無(wú)創(chuàng)、簡(jiǎn)便且快捷的診斷手段。

因子癇前期發(fā)生原因十分復(fù)雜，可根據(jù)致病機(jī)制分為2種類(lèi)型，即母源性子癇前期、胎盤(pán)源性子癇前期，而在子癇前期中胎盤(pán)源性子癇前期起到更重要的致病機(jī)制。在人體細(xì)胞中，線性氨基酸多聚體主要通過(guò)轉(zhuǎn)變?yōu)槿S立體結(jié)構(gòu)功能蛋白發(fā)揮作用。蛋白質(zhì)錯(cuò)誤折疊于細(xì)胞內(nèi)外基質(zhì)積聚可誘發(fā)特定異常折疊蛋白，引起神經(jīng)細(xì)胞死亡，誘發(fā)帕金森等疾病[11]。妊娠子宮胎盤(pán)血管系統(tǒng)的重鑄障礙，可引起胎盤(pán)血流灌注不足、血管生成失衡、氧化應(yīng)激、缺血缺氧、內(nèi)皮功能障礙、炎癥以及內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激，這些均參與了子癇前期的致病機(jī)制。而內(nèi)質(zhì)網(wǎng)在蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)、合成、折疊、降解中起到關(guān)鍵作用，當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)合成受到影響時(shí)，就會(huì)改變內(nèi)質(zhì)網(wǎng)穩(wěn)態(tài)，使得蛋白質(zhì)錯(cuò)誤折疊或者不折疊，在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)管腔中積聚，從而引起病變[12]。子癇前期孕婦尿液中可檢測(cè)到錯(cuò)誤折疊蛋白，且尿液錯(cuò)誤折疊蛋白的檢出情況要早于子癇前期癥狀，對(duì)預(yù)測(cè)子癇前期有著十分積極的作用。本研究中，600名孕婦中出現(xiàn)子癇前期42例（7.00%），其中妊娠中期出現(xiàn)18例（3.00%），妊娠晚期出現(xiàn)24例（4.00%）；妊娠中期與妊娠后期早發(fā)型子癇前期者尿液錯(cuò)誤折疊蛋白定量均高于正常妊娠者，提示子癇前期發(fā)生率隨著孕周增長(zhǎng)而逐漸增高，其尿液錯(cuò)誤折疊蛋白水平隨著孕周增長(zhǎng)相應(yīng)增高。分娩小于胎齡兒是子癇前期孕婦產(chǎn)檢的不良妊娠結(jié)局之一，是孕婦腎小球毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞彌漫性腫脹，減少腎血流量，增加血管壁通透性，而出現(xiàn)大量蛋白尿，減低胎盤(pán)血流灌注，影響胎兒生長(zhǎng)受限所致。小于胎齡兒會(huì)增加壞死性結(jié)腸炎、呼吸窘迫綜合征等并發(fā)癥發(fā)生可能性，也是造成新生兒死亡的重要因素之一。因此，預(yù)防小于胎齡兒發(fā)生對(duì)提高出生人口質(zhì)量意義重大。本研究中，陽(yáng)性組小于胎齡兒發(fā)生率均高于陰性組，且尿液錯(cuò)誤折疊蛋白陽(yáng)性是小于胎齡兒發(fā)生的獨(dú)立危險(xiǎn)因素，提示尿液錯(cuò)誤折疊蛋白檢測(cè)陽(yáng)性與小于胎齡兒發(fā)生密切相關(guān)。子癇前期發(fā)病時(shí)，子宮螺旋動(dòng)脈重鑄障礙可造成“胎盤(pán)淺著床”，減少胎盤(pán)灌注量，使胎盤(pán)發(fā)生缺血、缺氧性改變，與炎癥反應(yīng)、氧化應(yīng)激等因素共同作用，導(dǎo)致患者出現(xiàn)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激，子宮螺旋動(dòng)脈重鑄障礙加重，加劇胎盤(pán)灌注減少，相應(yīng)增加內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激引起的錯(cuò)誤折疊蛋白，若未及時(shí)降解或自噬，會(huì)加劇內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激改變，可間接或直接影響胎兒生長(zhǎng)發(fā)育與胎盤(pán)功能，增加小于胎齡兒與早發(fā)型子癇前期發(fā)生率。在胎盤(pán)滋養(yǎng)細(xì)胞中聚集的錯(cuò)誤折疊蛋白可對(duì)滋養(yǎng)細(xì)胞的正常侵襲形成阻礙作用，引起內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激反應(yīng)，造成胎盤(pán)缺血缺氧，輕則可增加蛋白質(zhì)錯(cuò)誤折疊頻率，引起蛋白質(zhì)淀粉樣變與自發(fā)聚集，重則可引起氧化應(yīng)激、釋放炎癥因子、螺旋動(dòng)脈重鑄不足、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激等，蛋白質(zhì)會(huì)發(fā)生淀粉樣聚集，進(jìn)一步加劇胎盤(pán)缺血，增大胎兒循環(huán)阻力，一定程度上會(huì)影響胎兒生長(zhǎng)發(fā)育，降低新生兒體質(zhì)量，增加小于胎齡兒發(fā)生可能性。

本研究中，羊水過(guò)少、吸煙或被動(dòng)吸煙是小于胎齡兒發(fā)生的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。羊水過(guò)少會(huì)增加小于胎齡兒發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)，可能是與羊水過(guò)少可致胎盤(pán)灌注不足，造成胎盤(pán)缺血缺氧有關(guān)；吸煙產(chǎn)生的煙霧可分為測(cè)流與主流，測(cè)流煙霧中含有的一氧化碳、焦油與尼古丁成分明顯高于主流煙霧，孕婦吸入后會(huì)進(jìn)入血液循環(huán)，刺激神經(jīng)末梢大量釋放兒茶酚胺，導(dǎo)致子宮缺血、缺氧，對(duì)胎兒生長(zhǎng)造成不良影響，增加小于胎齡兒發(fā)生概率。

綜上，子癇前期發(fā)生率隨著尿液錯(cuò)誤折疊蛋白水平定量的增加而升高，小于胎齡兒發(fā)生可能性明顯增高，可將此作為預(yù)測(cè)小于胎齡兒與子癇前期的生物學(xué)標(biāo)志物。

參考文獻(xiàn)

[1] 王娜，張小環(huán)，陳麗珍，等.血清低氧誘導(dǎo)因子-1α、胎盤(pán)生長(zhǎng)因子及妊娠相關(guān)血漿蛋白A檢測(cè)對(duì)子癇前期的預(yù)測(cè)價(jià)值[J].中國(guó)臨床醫(yī)生雜志，2021，49（1）：108-111.

[2] CERDEIRA A S，RANA S，KARUMANCHI S A.Is prolonging gestation in preeclampsia for better or worse in preventing cardiovascular disease？[J].Hypertension，2021，78（5）：1395-1397.

[3] 莊旭，馮蜀歡，陳漪，等.子癇前期蛋白尿孕婦尿微量白蛋白、轉(zhuǎn)鐵蛋白及α1-微球蛋白妊娠期界值的研究[J].中華婦產(chǎn)科雜志，2021，56（10）：665-670.

[4] LEAL-LASARTE M，MANNINI B，CHITI F.Distinct responses of human peripheral blood cells to different misfolded protein oligomers[J].Immunology，2021，164（2）：358-371.

[5] 中華醫(yī)學(xué)會(huì)心血管病學(xué)分會(huì)女性心臟健康學(xué)組，中華醫(yī)學(xué)會(huì)心血管病學(xué)分會(huì)高血壓學(xué)組.妊娠期高血壓疾病血壓管理專(zhuān)家共識(shí)（2019）[J].中華心血管病雜志，2020，48（3）：195-204.

[6] 朱麗，張蓉，張淑蓮，等.中國(guó)不同胎齡新生兒出生體重曲線研制[J].中華兒科雜志，2015，53（2）：97-103.

[7] ZHANG Y，LIANG B，MENG F，et al.Effects of Nrf-2 expression in trophoblast cells and vascular endothelial cells in preeclampsia[J].Am J Transl Res，2021，13（3）：1006-1021.

[8] 張優(yōu)揚(yáng).早發(fā)型重度子癇前期患者血漿Ghrelin和SP1表達(dá)與胎兒生長(zhǎng)受限的關(guān)系及二者聯(lián)合檢測(cè)對(duì)早發(fā)型重度子癇前期的診斷價(jià)值[J].中國(guó)婦幼保健，2021，36（5）：1014-1017.

[9] 陳艷，楊柳，張?jiān)浦?，?血清IFIP-16、tTG水平與子癇前期孕婦血壓和尿蛋白的關(guān)系及其診斷價(jià)值[J].海南醫(yī)學(xué)，2020，31（5）：593-596.

[10] 蔡江美.24 h尿蛋白定量對(duì)子癇前期孕婦發(fā)生不良妊娠結(jié)局的臨床價(jià)值研究[J].中國(guó)婦幼保健，2019，34（15）：3460-3462.

[11] NAGARAJAPPA C，RANGAPPA S S，SURYANARAYANA R，et al.Urinary protein carbonyl levels and its correlation with protein misfolding in preeclampsia[J].Hypertens Pregnancy，2019，38（2）：124-128.

[12] YADAV K，YADAV A，VASHISTHA P，et al.Protein misfolding diseases and therapeutic approaches[J].Curr Protein Pept Sci，2019，20（12）：1226-1245.

（編輯：張興亞）

作者簡(jiǎn)介：許 艷，女，碩士，主治醫(yī)師。

通信作者：卞桂萍