趙夢然,呂 航,王 騰
(中檢科(北京)測試技術(shù)有限公司,北京 100000)
自我國第一個專業(yè)酶制劑生產(chǎn)廠投入使用以來,我國酶制劑應(yīng)用領(lǐng)域進一步擴展,目前已涉及食品、化工、農(nóng)業(yè)等多個領(lǐng)域。其中在食品領(lǐng)域中的應(yīng)用主要體現(xiàn)在食品加工、食品保鮮與食品檢測等環(huán)節(jié)。區(qū)別于傳統(tǒng)食品添加劑,酶制劑具有高效性與專一性,可有效提高食品安全性。目前我國已批準(zhǔn)使用的酶制劑有6 大類,包括α-淀粉酶制劑、β-葡萄糖酶等,將其適量添加于食品加工與保鮮過程中可提高食品加工與保鮮效果,降低使用化學(xué)添加劑可能產(chǎn)生的危害。
酶制劑是一類具有酶特性的活性物質(zhì),主要用于催化食品生產(chǎn)加工各環(huán)節(jié)的化學(xué)反應(yīng),改良食品加工方式,改善食品口感與風(fēng)味,延長食品保質(zhì)期,以提高食品生產(chǎn)效率與食品質(zhì)量,保障食品安全。目前我國已批準(zhǔn)使用的酶制劑包含6 類,在使用時需符合相關(guān)標(biāo)準(zhǔn),適量添加,避免因過量或不規(guī)范使用出現(xiàn)食品安全問題。
酶制劑主要作用于食品加工保鮮與檢測,是利用酶的專一性、高效性催化食品生產(chǎn)加工環(huán)節(jié)的特異性化學(xué)物質(zhì),可改善食品的口感、外觀等,進而滿足人們對食物的更高需求。同時,酶制劑可延長食品保質(zhì)期,降低食品的氧化變質(zhì)、腐敗,也可利用酶制劑進行食品檢測,提高食品檢測效率。酶制劑的特征包括專一性、高效性與作用條件較溫和。專一性指利用酶制劑參與食品生產(chǎn)加工過程時,同一屬性的酶能且只能對同一類物質(zhì)發(fā)生催化反應(yīng);高效性指酶制劑可降低反應(yīng)活化能,提高反應(yīng)速率,研究表明酶制劑催化效率約高出無機催化劑的107倍。大多數(shù)酶為蛋白質(zhì),高溫、強堿強酸可能破壞酶活性,因此酶的作用條件一般較溫和,應(yīng)用于食品加工保鮮時可避免對食品結(jié)構(gòu)造成損傷,破壞食品口感。
酶制劑在食品領(lǐng)域中的應(yīng)用主要體現(xiàn)在食品生產(chǎn)加工、食品保鮮與食品檢測等多個方面。在食品加工與保鮮方面,酶制劑區(qū)別于化學(xué)食品添加劑,從生物體中提取,相對安全無毒,是基于原有酸堿法形成的新型技術(shù),具有高效性與專一性等優(yōu)勢。同時,酶制劑的應(yīng)用可結(jié)合食品生產(chǎn)加工與保鮮需求進行再研發(fā),并在食品生產(chǎn)加工中投入使用,降低生產(chǎn)成本,提高食品生產(chǎn)加工效率,改善食品風(fēng)味與外觀;也可在一定程度上提高食品質(zhì)量,推動食品種類的研發(fā),促進我國食品行業(yè)迅猛發(fā)展[1]。在食品檢測中,目前已廣泛應(yīng)用的PCR 技術(shù)、ELISA 技術(shù)均有各自優(yōu)勢,結(jié)合了酶的特異性、高效性、專一性,可實現(xiàn)對食品的大批量檢測,包括農(nóng)藥殘留、獸藥殘留、重金屬、生物毒素、致病菌、過敏原以及真?zhèn)舞b別等檢測,降低食品檢測成本,提高食品檢驗檢測效率,減少食源性疾病的發(fā)生率,切實保障我國食品安全。
隨著現(xiàn)代化工業(yè)發(fā)展,酶制劑在食品加工中的應(yīng)用愈發(fā)廣泛,包括啤酒生產(chǎn)、果蔬加工與烘焙食品等。利用酶制劑可實現(xiàn)對食品加工過程的有效控制,提高食品生產(chǎn)速率,改善加工制品的風(fēng)味與品質(zhì)。
隨著人們生活水平的提升,在解決基本溫飽問題后,人們逐漸重視食品安全、食品品質(zhì)與食品風(fēng)味。啤酒作為人們生活中的飲品,發(fā)展前景良好。為進一步滿足人們對啤酒的需求,如新鮮、低熱量、口感豐富、泡沫細(xì)膩等,相關(guān)企業(yè)認(rèn)識到酶制劑在啤酒生產(chǎn)加工中的優(yōu)勢,進而投入適量酶制劑以提高啤酒質(zhì)量,降低生產(chǎn)成本。一般用于啤酒生產(chǎn)加工的酶制劑包括淀粉酶、葡萄糖氧化酶、α-乙酰乳酸脫羧酶、葡聚糖酶與葡萄糖苷酶等。淀粉酶主要催化原輔料中的淀粉物質(zhì),保證收率,促進啤酒加工過程中糖化過程的順利進行;葡萄糖氧化酶可減少啤酒中殘留的溶解氧,達(dá)到延長啤酒保質(zhì)期的作用;α-乙酰乳酸脫羧酶可加快啤酒釀造效率,縮短啤酒成熟周期;葡聚糖酶與葡萄糖苷酶均用于降低啤酒中麥芽汁的黏度,保證啤酒清澈,品相良好[2]。
果蔬加工制品種類繁多,包括果蔬汁、果蔬干、果脯、罐頭以及各種果蔬提取物等?;诿傅膶R恍砸约懊复呋磻?yīng)過程較溫和,在果蔬加工中酶制劑除了可提取果蔬中的果膠外,也常用于生產(chǎn)加工果汁,或進行果蔬的軟化與硬化。
提取果膠一般添加原果膠酶。水果中存在不溶性果膠與可溶性果膠,其中未成熟果實中的不可溶果膠隨果實成熟可逐漸轉(zhuǎn)化為可溶性果膠。基于原果膠酶可直接與水果中的果膠發(fā)生反應(yīng),因此利用酶制劑提取果膠方法簡單,同時可減少生產(chǎn)污染,降低生產(chǎn)成本。目前,一般利用黑曲霉、枯草桿菌等生產(chǎn)原果膠酶,用于蘋果、胡蘿卜、葡萄皮中的果膠提取。
果蔬汁制品因其豐富的營養(yǎng)價值與美妙口感深受人們喜愛。為滿足人們對果蔬汁的要求,如色澤瑩潤、口感細(xì)膩等,企業(yè)一般在生產(chǎn)加工過程中添加粥化酶,提高果蔬粉碎率、果汁產(chǎn)生率,進而促進果汁殘渣的過濾等。粥化酶屬果膠酶、淀粉酶、(半)纖維素酶等混合物,主要用以催化果蔬中果膠、淀粉、纖維素、半纖維素物質(zhì),提高果蔬汁生產(chǎn)效率,降低生產(chǎn)成本[3]。此外,其也可進行酶法脫苦。在生產(chǎn)加工橙汁時添加橙皮苷酶、檸檬酸A-環(huán)內(nèi)酯脫氫酶等,可去除橙汁中苦味物質(zhì),包括檸檬苦素類似物與橙皮苷等,給人以豐富口感。
果蔬中的軟化與硬化處理需利用加壓滲酶促使果膠酶穿過植物細(xì)胞壁或在細(xì)胞空隙間起催化作用,實現(xiàn)對果蔬的軟化與硬化。例如,在加工橘子、桃子罐頭時添加酶制劑,可提高水果罐頭的口感。同時,在腌制蔬菜時添加酶制劑可防止蔬菜軟化,提高蔬菜脆性,如腌蘿卜、腌黃瓜等。
烘焙食品生產(chǎn)加工中為提高成品外觀與口感效果,一般須在加工過程中添加食品添加劑。例如,面粉強筋劑、增白劑等屬于化學(xué)添加劑,長期食用含有此類化學(xué)添加劑的食品可能對人體健康造成損傷。而真菌淀粉酶、脂肪酶、葡萄糖酶等酶制劑可代替這一類物質(zhì),利用酶制劑獨特的分子結(jié)構(gòu),改善面團內(nèi)部結(jié)構(gòu),提高面團蓬松度與筋度;也可實現(xiàn)對面粉的增白[4]。同時,酶制劑的應(yīng)用可延長烘焙食品保質(zhì)期,緩解食品的氧化變質(zhì)與腐爛。
區(qū)別于傳統(tǒng)食品保鮮劑,如苯甲酸、丁基羥基茴香醚等,酶制劑主要從動物、植物、微生物中提取,相對安全無毒。同時,基于酶制劑的專一性,可實現(xiàn)對食品的保鮮,常用于乳制品、肉制品、釀造酒、水產(chǎn)品等保鮮貯存。酶制劑的應(yīng)用可抑制食品氧化、曼拉德褐變反應(yīng)、降解蛋白質(zhì)、滅菌保鮮,以延長食品貨架期[5]。
溶菌酶屬水解酶,也稱為胞壁質(zhì)酶,顧名思義其主要作用于細(xì)胞壁、細(xì)胞質(zhì),通過對細(xì)胞壁中糖苷鍵、肽聚糖β-1,4 糖苷鍵的水解作用,促進細(xì)菌死亡。溶菌酶本身具備一定的穩(wěn)定性,特指在鹽水、糖水等環(huán)境中,可呈現(xiàn)較穩(wěn)定的結(jié)構(gòu),且耐熱、耐酸,可加強食品保鮮效果。區(qū)別于傳統(tǒng)食品添加劑中的防腐劑,溶菌酶可在蛋清、蘿卜等生物中提取,安全無毒,且無副作用,常用于水產(chǎn)品、肉制品、烘焙制品等的防腐,同時溶菌酶作用時無需加熱,避免了高溫殺菌過程可能對食品風(fēng)味的破壞。此外,溶菌酶可直接作用于人體腸道中的腐敗菌,增強人體抵抗力,促進嬰幼兒腸道中的雙歧乳酸桿菌繁殖,減少嬰幼兒積食[6]。
葡萄糖氧化酶主要作用于食品中的葡萄糖,通過對食品中氧的去除達(dá)到延長食品保質(zhì)期的目的?;谄咸烟擒彰傅膶R恍裕勺鳛槭称繁ur中的良好抗氧化劑,防止食物氧化變質(zhì),延長食品保質(zhì)期?,F(xiàn)階段葡萄糖氧化酶在食品保鮮中的應(yīng)用主要體現(xiàn)在蛋制品、果汁制品、奶制品、咖啡及肉制品中,具體包括去除蛋中的葡萄糖,避免蛋制品在儲存期間變質(zhì);柑橘類果汁制品的脫氧,避免儲存中色澤變化,影響食物外觀特性;奶粉、咖啡、肉制品等中,葡萄糖氧化酶可直接作用于葡萄糖,避免食物褐變。此外,由于酶制劑的專一性,在啤酒加工保鮮過程可避免與其他物質(zhì)發(fā)生反應(yīng),也常用葡萄糖氧化酶延長啤酒貨架期。
受酶的高效性與專一性影響,酶制劑在食品檢測中的應(yīng)用具有高靈敏性與快速性,可實現(xiàn)對特定物質(zhì)的快速、高效檢測。同時可進行多次檢測,降低食品檢測成本,一般用以對食品中特殊酶活性成分進行測定,檢測食品安全與品質(zhì)。酶制劑用于食品檢測時無需顯示劑,檢測方法相對簡單,一般在適宜溫度下即可發(fā)生催化反應(yīng),可有效縮短檢測時間,提高檢測效率。目前應(yīng)用酶制劑進行食品檢測的方法主要包括PCR 技術(shù)與ELISA 技術(shù)。
聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)指在DNA 聚合酶催化下,通過變性、退火、延伸等步驟,體外復(fù)制出與母鏈模板DNA 互補的子鏈,具有特異性、快速性、重復(fù)性好等優(yōu)點。但由于DNA 聚合酶不耐高溫,已經(jīng)研究出耐熱DNA 聚合酶,且可在90 ℃以上高溫存活。PCR技術(shù)在食品檢測中最早用于轉(zhuǎn)基因食品的檢測,如外源基因、外源蛋白檢測等,目前已經(jīng)延伸至食源性致病菌檢測(如沙門氏菌、單核細(xì)胞增生李斯特氏菌、大腸桿菌等)與真?zhèn)舞b別檢測中。
ELISA 技術(shù)屬生物酶檢測技術(shù)的一種,利用酶的特異性與專一性,實現(xiàn)酶學(xué)與免疫學(xué)相結(jié)合[7]。ELISA 技術(shù)主要通過抗原與抗體的結(jié)合,使抗原或抗體與酶連接形成酶標(biāo)抗原或抗體,并與底物(顯色劑)產(chǎn)生顏色反應(yīng),實現(xiàn)對抗原與抗體的定性分析,具有準(zhǔn)確性高、檢測效率快、判斷結(jié)果具有客觀標(biāo)準(zhǔn)、可進行大批量檢測等優(yōu)點。目前ELISA 技術(shù)常用于食品中的農(nóng)藥殘留、獸藥殘留、生物毒素、轉(zhuǎn)基因、過敏原、重金屬、(非)食品添加劑及其活性物質(zhì)檢測以及真?zhèn)舞b別等多個方面。
隨著我國社會經(jīng)濟發(fā)展,人均消費水平不斷上升,人們在重視食品安全的同時,提出了對食品的種類、外觀、口感等的要求,強調(diào)在保障食品安全的基礎(chǔ)上,加快食品生產(chǎn)加工研究,滿足現(xiàn)階段人們對食品的需求。相較于化學(xué)食品添加劑,酶制劑具有安全無毒,且具有酶的一般特性的特點,被廣泛用于食品生產(chǎn)加工、食品保鮮與食品檢測等環(huán)節(jié),可進一步提高生產(chǎn)與檢測效率,延長食品貨架期。但目前我國酶制劑在食品領(lǐng)域的應(yīng)用尚未完善,仍需加強對酶制劑的生產(chǎn)與應(yīng)用研究,促進酶制劑在食品加工保鮮與檢測中的技術(shù)發(fā)展,減少食源性疾病的發(fā)生率,提高我國食品安全,保障人們身體健康。