糖尿病合并胰腺癌患者血清中miR-19a表達(dá)水平及其與預(yù)后的關(guān)系

陳素華 朱瑞霞 齊 林

胰腺癌(pancreatic cancer)是美國癌癥死亡的第四大原因，估計(jì)每年導(dǎo)致全球 227 000 人死亡[1]。糖尿病是導(dǎo)致這一惡性疾病的危險(xiǎn)因素之一[2]。胰腺癌常見臨床特征可能包括體重減輕、黃疸、吸收不良、疼痛、消化不良和惡心；然而，大多數(shù)患者沒有明顯癥狀[3-4]。糖尿病(diabetes)的特征是血管系統(tǒng)處于慢性炎癥狀態(tài)，導(dǎo)致心血管并發(fā)癥和死亡風(fēng)險(xiǎn)增加。內(nèi)皮功能障礙維持促凝狀態(tài)，易發(fā)生血栓栓塞事件[5-6]。有研究顯示糖尿病與胰腺癌的發(fā)生密切相關(guān)，但是合并糖尿病對(duì)胰腺癌患者臨床預(yù)后的影響目前尚無明確結(jié)論[7-8]。microRNA與糖尿病及其心血管并發(fā)癥有關(guān)，不同的miR表達(dá)模式似乎可以預(yù)測疾病的發(fā)作，并可能有助于對(duì)血栓栓塞事件的風(fēng)險(xiǎn)進(jìn)行分層[9]。然而，缺乏關(guān)于這些miR如何影響糖尿病血管并發(fā)癥的機(jī)制見解。miR-19a在內(nèi)皮細(xì)胞 (ECs) 中的高表達(dá)表明在內(nèi)皮穩(wěn)態(tài)中的核心作用。miR-19a參與血管功能，包括血管生成、EC細(xì)胞凋亡過程[10]。本研究旨在探討糖尿病合并胰腺癌患者血清中miR-19a表達(dá)水平及其與預(yù)后的關(guān)系。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2018年1月至2019年1月本院收治的胰腺癌患者60例，年齡38～79歲，平均(58.65 ±8.43)歲。納入標(biāo)準(zhǔn)：①符合《胰腺癌綜合診治指南》[11]，經(jīng)病理學(xué)確診為胰腺癌；②臨床資料完整；③未行放化療治療；④患者簽署自愿受試同意書。排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并其他惡性腫瘤患者；②合并精神疾病患者；③合并其他器官嚴(yán)重性病變患者。60例胰腺癌患者根據(jù)是否患有糖尿病分為糖尿病合并胰腺癌(n=23)和非糖尿病合并胰腺癌(n=37)2組，糖尿病診斷標(biāo)準(zhǔn)為有糖尿病病史和用藥史；空腹血漿葡萄糖≥7.0 mmol/L，或OGTT試驗(yàn)后2 h血糖≥11.1 mmol/L，或隨機(jī)血糖≥11.1 mmol/L。

1.2 血清miR-19a水平檢測

抽取入組對(duì)象5 mL外周靜脈血，離心取上清，作為樣本于-20 ℃保存待檢。使用TRIZOL試劑(購自美國Invitrogen 公司)提取樣本RNA，逆轉(zhuǎn)錄為cDNA，以U6作為內(nèi)參，qPCR系統(tǒng)檢測miR-19a表達(dá)水平，反應(yīng)條件如下：95 ℃預(yù)變性10 min； 95 ℃變性10 s、60 ℃退火60 s、95 ℃延伸15 s，重復(fù)40個(gè)循環(huán)。采用2-ΔΔCt法計(jì)算相對(duì)表達(dá)水平。

1.3 隨訪

采用電話及門診隨訪的方式收集數(shù)據(jù)，隨訪起點(diǎn)為病理活檢或者手術(shù)日期，隨訪間隔3個(gè)月，隨訪終點(diǎn)為患者死亡，隨訪終點(diǎn)時(shí)間為2021年5月1日。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

2 結(jié)果

2.1 2組臨床資料比較

2組患者的年齡、性別、腫瘤大小、KPS評(píng)分等方面的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。見表1。

表1 2組患者的臨床資料比較

2.2 2組患者中 miR-19a表達(dá)及血生化指標(biāo)比較

糖尿病合并胰腺癌患者miR-19a表達(dá)水平、空腹血糖、總膽固醇、甘油三酯、糖化血紅蛋白明顯高于非糖尿病合并胰腺癌(P<0.05)，見表2。

表2 2組患者血清中 miR-19a表達(dá)及血生化指標(biāo)分析

2.3 糖尿病合并胰腺癌患者死亡組和生存組比較

糖尿病合并胰腺癌患者死亡組miR-19a表達(dá)水平、空腹血糖、總膽固醇、甘油三酯、糖化血紅蛋白明顯高于生存組(P<0.05)，見表3。

表3 糖尿病合并胰腺癌患者死亡組和生存組比較

3 討論

胰腺癌是一種消化道惡性腫瘤，約90%為起源于腺管上皮的導(dǎo)管腺癌，其惡性程度很高[12]。目前臨床上關(guān)于胰腺癌的治療主要以手術(shù)為主[13]。胰腺癌早期的確診率不高，手術(shù)死亡率較高，而治愈率很低[14]。胰腺癌發(fā)病率和死亡率近年來明顯上升。胰腺導(dǎo)管腺癌(PDAC)是最常見和最致命的胰腺癌形式，與糖尿病關(guān)系密切，68%的PDAC患者同時(shí)患有糖尿病[15]。有研究稱長期存在的2型糖尿病(T2DM)是PDAC發(fā)展的危險(xiǎn)因素[16]。有研究學(xué)者認(rèn)為糖尿病是胰腺癌的易感因素之一，特別是具有5年以上慢性糖尿病病史的患者[17]。糖尿病是一種慢性病，持續(xù)的高血糖狀態(tài)和長期代謝紊亂等可導(dǎo)致多系統(tǒng)器官功能損害，其中以2型DM多發(fā)[18]。近年來患病率逐年上升，2017年國際糖尿病聯(lián)盟數(shù)據(jù)顯示：全球糖尿病患者人數(shù)達(dá)4.25億，而我國糖尿病患者就達(dá)1.14億，患病人數(shù)居世界第一[19]。糖尿病是一種多因素/多基因疾病，具有遺傳異質(zhì)性[20]。T2DM通常與肥胖有關(guān)，肥胖本身也會(huì)增加患PDAC的風(fēng)險(xiǎn)[21]。另外，流行病學(xué)研究發(fā)現(xiàn)，使用胰島素與PDAC風(fēng)險(xiǎn)增加有關(guān)[22]?；酋ｋ孱?胰島素促泌劑)通過抑制胰腺β細(xì)胞的K-ATP通道來刺激胰島素的內(nèi)源性釋放?；请孱愃幬锏氖褂门c胰腺癌風(fēng)險(xiǎn)增加有關(guān)。對(duì)于合并糖尿病的胰腺癌患者，手術(shù)治療其血糖控制水平是否與未合并糖尿病的患者存在差異，其臨床預(yù)后如何，是目前臨床研究的重點(diǎn)。

miR-19a是 miR-17-92簇的成員，在體外顯示出影響癌細(xì)胞的轉(zhuǎn)錄后TF調(diào)節(jié)[23]。然而，除了作為onco-miR的作用之外，miR-19a在內(nèi)皮細(xì)胞(ECs)中的高表達(dá)表明在內(nèi)皮穩(wěn)態(tài)中的核心作用[24]。有研究表明，miR-19a參與血管功能，包括血管生成、EC細(xì)胞凋亡或通過內(nèi)皮增殖的流量調(diào)節(jié)控制來參與動(dòng)脈粥樣硬化作用[25]。一方面，患有糖尿病相關(guān)并發(fā)癥(例如缺血性中風(fēng))的患者體內(nèi)循環(huán) miR-19a異常表達(dá)，表明其在血栓栓塞的發(fā)病機(jī)制中具有潛在作用[26-27]。另一方面，miR-19a調(diào)節(jié)糖原合成并在瘦素受體缺陷小鼠中下調(diào)，表明在糖尿病中具有調(diào)節(jié)作用[28]。但是尚未研究miR-19a的表達(dá)與糖尿病之間的具體機(jī)制關(guān)系。 本研究中糖尿病合并胰腺癌患者miR-19a表達(dá)水平、空腹血糖、總膽固醇、甘油三酯、糖化血紅蛋白明顯高于非糖尿病合并胰腺癌患者。糖尿病合并胰腺癌患者死亡組miR-19a表達(dá)水平、空腹血糖、總膽固醇、甘油三酯、糖化血紅蛋白明顯高于生存組，與目前的研究結(jié)果一致。

綜上所述，糖尿病合并胰腺癌患者血清中miR-19a表達(dá)水平較高，對(duì)糖尿病合并胰腺癌的預(yù)后預(yù)測具有重要臨床意義。但是本研究存在一定的局限性，例如納入的樣本量較少，中心單一，未涉及miRNA表達(dá)對(duì)胰腺癌病情影響的分子機(jī)制研究，因此還需要進(jìn)一步擴(kuò)大樣本量以及多中心的臨床研究、基礎(chǔ)研究。