賀蘭山東麓‘蛇龍珠’葡萄病毒病種類鑒定及對(duì)采收期的影響

張強(qiáng)強(qiáng)，顧沛雯，張繼豐

(1.寧夏大學(xué) 農(nóng)學(xué)院，銀川 750021；2.寧夏西鴿酒莊有限公司，寧夏青銅峽 751100)

‘蛇龍珠’葡萄(Cabernet gernischt)是‘品麗珠’‘赤霞珠’等品種混合群體中，經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期選育而成的一個(gè)釀酒葡萄品種[1]。其釀造的葡萄酒常帶有獨(dú)特的草本氣息，單寧質(zhì)地柔軟，入口順滑，成為國(guó)內(nèi)獨(dú)具代表性的紅色釀酒葡萄之一。該品種耐干旱，喜沙壤土質(zhì)，在寧夏賀蘭山東麓和甘肅河西走廊種植表現(xiàn)良好，是寧夏主栽的紅色釀酒葡萄品種之一[2]。但是隨著寧夏葡萄種植面積的擴(kuò)大，葡萄苗木引進(jìn)和輸出日益頻繁，造成葡萄病毒病危害猖獗，研究發(fā)現(xiàn)賀蘭山東麓主要葡萄病毒病為卷葉病和扇葉病，‘蛇龍珠’感染病毒率最高，為85.1%[3-4]。

葡萄病毒種類繁多，迄今為止，從世界各地的葡萄上分離的病毒有86種[5]，國(guó)內(nèi)報(bào)道有18種[6-14]，其中對(duì)卷葉伴隨病毒(Grapevine leafrool-associated virus，GLRaV)和葡萄扇葉病毒( Grapevine fanleaf virus，GFLV)研究最多。常用葡萄病毒的鑒定方法主要有指示植物鑒定法、酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法、逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction，RT-PCR)檢測(cè)技術(shù)、分子雜交檢測(cè)方法、逆轉(zhuǎn)錄環(huán)介導(dǎo)恒溫?cái)U(kuò)增檢測(cè)技術(shù)和小RNA測(cè)序技術(shù)，目前我國(guó)己報(bào)道的葡萄病毒多采用RT-PCR方法確定[15]。呂苗苗等[4]利用5種葡萄卷葉伴隨病毒引物對(duì)寧夏賀蘭山東麓‘蛇龍珠’葡萄進(jìn)行RT-PCR檢測(cè)，初步檢出3種卷葉病毒類型，其中GLRaV-3的檢出率最高，為87.5%；劉萬(wàn)好等[16]通過(guò)小RNA測(cè)序鑒定出山東煙臺(tái)地區(qū)葉片反卷的‘蛇龍珠’攜帶有7種已知病毒和4種類病毒?！啐堉椤咸褟?fù)合侵染嚴(yán)重，但對(duì)感染病毒種類與癥狀類型的關(guān)系相關(guān)報(bào)道較少。

葡萄感染病毒后，會(huì)對(duì)葡萄的產(chǎn)量、生理機(jī)能和品質(zhì)產(chǎn)生重大影響[5]。Andret-link等[17]發(fā)現(xiàn)葡萄扇葉病可導(dǎo)致植株節(jié)間縮短，顯著降低產(chǎn)量，癥狀嚴(yán)重時(shí)，損失可達(dá)80%以上。Endeshaw等[18]研究認(rèn)為‘品麗珠’感染GLRaV-3后，降低了每藤新梢數(shù)、新梢生長(zhǎng)和木質(zhì)化程度。韓愛芹等[19]發(fā)現(xiàn)，感染卷葉病后葡萄果實(shí)的葡萄糖和果糖的總量?jī)H為對(duì)照組的69.29%，5種花色苷單體含量顯著降低，總量?jī)H為對(duì)照組總量的26.12%。目前有關(guān)葡萄病毒病的研究表明，病毒病會(huì)降低葡萄葉片中葉綠素含量及光合速率，減少總糖含量，提高酸度[16,19]。鑒于國(guó)內(nèi)有關(guān)病毒病對(duì)‘蛇龍珠’葡萄品質(zhì)和采收期的影響的研究較少。本研究以賀蘭山東麓樹齡超過(guò)20a的‘蛇龍珠’葡萄為材料，利用RT-PCR進(jìn)行15種葡萄病毒的檢測(cè)，明確‘蛇龍珠’葡萄感染病毒的種類及造成危害的主要病毒，在此基礎(chǔ)上，通過(guò)測(cè)定罹病和無(wú)癥狀對(duì)照組‘蛇龍珠’葡萄的光合指標(biāo)和果實(shí)理化指標(biāo)，運(yùn)用主成分分析法，評(píng)價(jià)不同采收時(shí)間對(duì)罹病和對(duì)照組‘蛇龍珠’葡萄果實(shí)成熟度、葡萄品質(zhì)及采收期的影響，以期為該產(chǎn)區(qū)葡萄無(wú)毒化種植提供依據(jù)，也為準(zhǔn)確把握‘蛇龍珠’葡萄最佳采收期提供理論參考。

1 材料與方法

1.1 材 料

2020 年8月于寧夏西鴿酒莊葡萄園中，從感染病毒病和外觀正常的‘蛇龍珠’葡萄樹上采集葉片和果實(shí)，罹病葡萄選取標(biāo)準(zhǔn)：葉片反卷、發(fā)紅，出現(xiàn)扇葉化癥狀；無(wú)癥狀對(duì)照組葡萄選取標(biāo)準(zhǔn)：葡萄植株正常，葉片無(wú)卷葉、發(fā)紅、扇葉化癥狀，生長(zhǎng)期保持綠色平整狀態(tài)。

1.2 方 法

1.2.1 采樣 在‘蛇龍珠’葡萄完成轉(zhuǎn)色后(2020年8月15日)進(jìn)行采樣，每次采樣分別選取5棵罹病和對(duì)照組葡萄樹，每棵樹按上、中、下部位隨機(jī)采集3穗葡萄和3片葡萄葉，共采樣5次，采樣日期分別為8月15日、8月28日、9月8日、9月20日和9月27日。以同一樹體的3片葡萄葉為1個(gè)樣品，用錫箔紙包好后迅速放入液氮罐中，罹病和對(duì)照組各25份樣品，存于-80 ℃冰箱備用，用于葡萄病毒檢測(cè)；采集的葡萄果穗放入冰盒帶回實(shí)驗(yàn)室，取一部分鮮樣用4 層紗布擠汁待用，用于還原糖、滴定酸、pH和可溶性固形物的測(cè)定；將剩余樣品經(jīng)液氮迅速冷凍，使用研磨打樣機(jī)(SL-200)將果實(shí)樣品粉碎，-80 ℃冰箱貯存?zhèn)溆?，用于總酚、單寧和花青素的測(cè)定。

1.2.2 RT-PCR檢測(cè) 根據(jù)文獻(xiàn)[4,14]設(shè)計(jì)15種葡萄病毒病的特異性引物，引物序列見表1。

將采集的葡萄葉片加入液氮迅速研磨至粉末狀，取100 mg至1.5 mL的離心管中，按照OMEGA 植物RNA提取試劑盒(美國(guó)OMEGA公司)使用說(shuō)明書進(jìn)行總RNA的提取。提取出的總RNA采用反轉(zhuǎn)錄試劑盒(北京全式金生物有限公司)說(shuō)明書反轉(zhuǎn)錄成cDNA，采用設(shè)計(jì)的特異性引物對(duì)樣品中病毒進(jìn)行檢測(cè)，每個(gè)樣品重復(fù)3次。

PCR擴(kuò)增反應(yīng)體系50 μL：cDNA 2 μL，正向、反向引物各2 μL，MaxTaq酶25 μL，RNase-free Water 18 μL；PCR擴(kuò)增條件：94 ℃ 3 min， 94 ℃ 1 min，退火45 s，退火溫度見表1，72 ℃ 1 min，35個(gè)循環(huán)，72 ℃ 10 min。用10 g/L瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)產(chǎn)物。PCR產(chǎn)物由生工生物工程(上海)股份有限公司進(jìn)行測(cè)序。

表1 用于RT-PCR檢測(cè)的15種葡萄病毒引物Table 1 Primers of 15 grapevine viruses for RT-PCR detection

1.2.3 測(cè)定項(xiàng)目及方法 采用葉綠素計(jì)(SPAD-502型)測(cè)定SPAD值；采用便攜式光合儀(GFS-3000型，德國(guó))測(cè)定凈光合速率、蒸騰速率、葉片氣孔導(dǎo)度、胞間二氧化碳濃度；采用斐林試劑滴定法(GB/T 15038-2006)測(cè)定還原糖；采用酸堿滴定法(GB/T 15038-2006)測(cè)定滴定酸(以酒石酸計(jì))；采用pH 計(jì)(PHS-3C，上海)測(cè)定葡萄汁pH；采用手持糖度計(jì)(ATAGOPAL-1，上海)測(cè)定其可溶性固形物含量；采用Folin-Denis(福林丹尼斯)試劑顯色法[20]測(cè)定單寧含量；采用Folin-Ciocalteu(福林酚)試劑顯色法[21]測(cè)定總酚；采用pH 示差法[22]測(cè)定總花青素；采用稱量法測(cè)定百粒質(zhì)量，每個(gè)樣品測(cè)定3次。

1.2.4 統(tǒng)計(jì)分析樣本間差異 采用Microsoft Excel 2010對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行整理，采用SPSS 21.0鄧肯氏多重比較進(jìn)行顯著性分析，采用Origin 2018進(jìn)行主成分分析及制圖，得出主成分函數(shù)方程式，計(jì)算不同采收時(shí)期綜合得分，確定最佳采收期。

2 結(jié)果與分析

2.1 ‘蛇龍珠’葡萄病毒病田間發(fā)病癥狀

如圖1所示，‘蛇龍珠’葡萄植株感染病毒病后，絕大多數(shù)表現(xiàn)為卷葉癥狀。感染病毒初期，葉片輕微向后翻卷，葉脈黃綠色，葉片保持綠色(圖1-a)；之后葉片逐漸出現(xiàn)紅色或紫紅斑點(diǎn)(圖1-b)；隨著葉片生長(zhǎng)，紅色斑點(diǎn)逐漸變大成為紫紅色不規(guī)則肉斑(圖1-c)，直至整個(gè)葉片變紫紅，透過(guò)陽(yáng)光看呈鮮紅色，葉脈黃綠色，葉片反卷(圖1-d)，后期葡萄中部和底部葉片反卷變紅，變厚變脆(圖1-e)。

在田間‘蛇龍珠’葡萄感染病毒后期表現(xiàn)4種癥狀，Ⅰ型：葉片反卷，葉緣銳呈不規(guī)則鋸齒狀，葉肉紫紅色(圖1-f)；Ⅱ型：葉片發(fā)紅，葉脈黃色，葉片反卷明顯，葉脈間有黑色斑塊(圖1-g)；Ⅲ型：葉片未發(fā)生反卷，葉脈黃綠色，葉脈間有紅色斑塊(圖1-h)；Ⅳ型：葉片反卷，葉脈為黃綠色，正反看葉脈間都有紫黑色肉斑(圖1-i)。

圖1 ‘蛇龍珠’葡萄病毒病田間癥狀Fig.1 Field symptoms of virus disease in ‘Cabernet Gernischt’ grape

此外，前期在‘蛇龍珠’葉片上還發(fā)現(xiàn)兩種類似扇葉病癥狀，如圖2所示。一種為扇形葉或畸形葉：葉片皺縮畸形，葉緣缺刻深，缺口深達(dá)主脈，葉脈不對(duì)稱、扭曲、明脈，葉緣鋸齒銳呈不規(guī)則狀，葉柄洼開角大，主脈聚近，呈扇葉狀(圖2-a)。另一種為花葉形：葉片上分布有許多邊緣不清、形狀不規(guī)則的黃色斑點(diǎn)或斑塊，顏色濃淡不同，呈環(huán)狀線紋、褪綠環(huán)狀圓或不規(guī)則形(圖2-b)。

a.扇形葉癥狀; b.花葉形癥狀a. Symptoms of grapevine fan leaf type; b. Symptoms of grapevine mosaic type

2.2 ‘蛇龍珠’葡萄病毒種類鑒定

利用15種病毒引物，對(duì)采集的罹病和對(duì)照組共50份田間樣品進(jìn)行RT-PCR檢測(cè)，并對(duì)擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行凝膠電泳和測(cè)序分析，結(jié)果如表2和圖3所示，罹病樣品均檢測(cè)到病毒，共有8種葡萄病毒，分別是GLRaV-1、GLRaV-2、GLRaV-3、GFLV、GRSPaV、GVA、GPGV和GINV；對(duì)照組樣品檢測(cè)到3種病毒，分別是GRSPaV、GVA和GINV，其中GLRaV-3的檢出率最高，達(dá) 50.00%，其次為GRSPaV和GINV，檢出率分別為42.00%和46.00%，GFLV的檢出率最少，僅為4.00%。

表2 RT-PCR檢測(cè)結(jié)果Table 2 Sequencing results of RT-PCR products

M.Marker；1.GLRaV-1；2.GLRaV-2；3.GLRaV-3； 4.GFLV；5.GRSPaV；6.GVA；7. GPGV；8.GINV

針對(duì)上述‘蛇龍珠’葡萄感染病毒后的4種后期癥狀類型(圖1-f～i)分別進(jìn)行RT-PCR檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，Ⅰ型癥狀檢測(cè)到GLRaV-3、GFLV、GRSPaV和GPGV；Ⅱ型癥狀檢測(cè)到GLRaV-1、GLRaV-3、GRSPaV、GVA、GPGV和GINV；Ⅲ型癥狀檢測(cè)到GLRaV-3、GRSPaV、GVA、GPGV和GINV；Ⅳ型癥狀檢測(cè)到GLRaV-1、GLRaV-2、GLRaV-3、GFLV、GRSPaV、GVA、GPGV和GINV。說(shuō)明‘蛇龍珠’葡萄病毒病復(fù)合侵染嚴(yán)重，感染的病毒種類不同，其癥狀表現(xiàn)也不同。

2.3 病毒感染對(duì)‘蛇龍珠’葡萄光合指標(biāo)的影響

由表3可知，與對(duì)照相比，罹病葡萄的葉片氣孔導(dǎo)度和光合速率顯著降低(P<0.05)，葉片氣孔導(dǎo)度降幅為37.77%，凈光合速率降幅為 17.21%；罹病葡萄的SPAD值極顯著降低(P< 0.01)，降幅為14.89%。說(shuō)明病毒感染導(dǎo)致葡萄光合作用減弱。

表3 病毒感染的‘蛇龍珠’葡萄光合指標(biāo)Table 3 Photosynthetic index of ’Cabernet Gernischet’ grape under virus infection

2.4 病毒感染對(duì)‘蛇龍珠’葡萄果實(shí)品質(zhì)的影響

如表4所示，罹病葡萄果實(shí)各成分的累積動(dòng)態(tài)與對(duì)照組葡萄基本一致，pH、可溶性固形物、還原糖、百粒質(zhì)量、花青素、總酚、糖酸比、固酸比隨果實(shí)成熟總體呈現(xiàn)增加趨勢(shì)，可滴定酸和單寧隨果實(shí)成熟總體呈現(xiàn)下降趨勢(shì)。

表4 ‘蛇龍珠’葡萄果實(shí)各理化指標(biāo)檢測(cè)結(jié)果Table 4 Testing results of physical and chemical indicators in ‘Cabernet Gernischt’

對(duì)比5次采樣測(cè)定結(jié)果，在8月15日和8月28日罹病葡萄果實(shí)各成分含量與對(duì)照相當(dāng)。自9月8日第3次采樣一直到成熟采收，罹病葡萄果實(shí)各成分含量逐漸與對(duì)照形成差異，其中在9月20日差異最大。與對(duì)照相比，罹病葡萄的可溶性固形物含量呈極顯著下降(P<0.01)，在9月20日降幅最大，為19.36%；罹病葡萄還原糖含量、糖酸比和固酸比在9月20日與對(duì)照差別達(dá)到極顯著水平(P<0.01)，降幅最明顯，還原糖含量降幅為18.09%，糖酸比降幅為25.24%，固酸比降幅為27.44%；罹病葡萄的可滴定酸含量在9月20日與對(duì)照相比呈顯著增加(P<0.05)，增幅為 15.94%；罹病葡萄的pH和百粒質(zhì)量在9月20日采樣測(cè)定結(jié)果，與對(duì)照相比顯著降低(P< 0.05)，pH降低1.83%，百粒質(zhì)量降低9.51%；罹病葡萄的花青素、總酚和單寧含量與對(duì)照相比有所降低，但無(wú)顯著差異。

表5 主成分方差分析Table 5 Analysis of variance of principal components

2.5 ‘蛇龍珠’葡萄適宜采收期的主成分分析

針對(duì)罹病和對(duì)照組葡萄的10 個(gè)果實(shí)品質(zhì)指標(biāo)5 批樣品分別進(jìn)行主成分分析，由表5可知，按主成分提取特征值需大于1的原則，罹病和對(duì)照組葡萄各提取2個(gè)有效主成分，其累計(jì)方差貢獻(xiàn)率分別為74.028%和72.833%，具有一定的代表性，可進(jìn)行進(jìn)一步分析。

如圖4主成分載荷圖所示，罹病和對(duì)照組葡萄的PC1 都與pH、可溶性固形物、還原糖、百粒質(zhì)量、糖酸比、固酸比具有較好的相關(guān)性，解釋了這6 個(gè)變量在確定最佳采收期時(shí)所起到的作用，且主要都是反映葡萄漿果本身品質(zhì)的指標(biāo)；PC2 與總酚、單寧具有較好的相關(guān)性，解釋了這2個(gè)變量在確定最佳采收期時(shí)所起到的作用，且主要都是反映葡萄漿果在釀造過(guò)程中較為重要的品質(zhì)指標(biāo)。

a.罹病葡萄的載荷圖;b.對(duì)照組葡萄的載荷圖a.Load diagram of infected grapes;b.Load diagram of CK

根據(jù)主成分分析得到的成分矩陣，計(jì)算特征向量矩陣，將所提取出的主成分分別表示為各變量的線性組合，得到主成分的函數(shù)方程式(1)～(4)。方程式(1)和方程式(2)為罹病葡萄兩個(gè)主成分的函數(shù)方程，方程式(3)和方程式(4)為對(duì)照組葡萄兩個(gè)主成分的函數(shù)方程。方程式中X1～X10分別代表pH、可溶性固形物、還原糖、可滴定酸、百粒質(zhì)量、花青素、總酚、單寧、糖酸比、固 酸比。

F1=0.343X1+0.343X2+0.334X3- 0.340X4+0.335X5+0.230X6+0.240X7- 0.177X8+0.377X9+0.376X10

(1)

F2=-0.101X1-0.114X2+0.212X3- 0.056X4-0.158X5-0.159X6+0.558X7+ 0.715X8+0.161X9+0.059X10

(2)

F1=0.356X1+0.363X2+0.360X3- 0.336X4+0.273X5+0.214X6+0.218X7- 0.212X8+0.380X9+0.378X10

(3)

F2=-0.031X1-0.068X2+0.010X3- 0.148X4-0.094X5-0.383X6+0.650X7+ 0.612X8+0.110X9+0.095X10

(4)

F=0.838F1+0.162F2

(5)

F=0.861F1+0.139F2

(6)

對(duì)所有變量進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化處理，計(jì)算各個(gè)采收期所對(duì)應(yīng)的F1和F2的得分，以F1和F2各自的特征值作為權(quán)重，進(jìn)行加權(quán)處理，得到各個(gè)采收期的綜合得分方程F，方程(5)和方程(6)分別為罹病和對(duì)照組葡萄不同采收期綜合值F函數(shù)方程，并根據(jù)F值的大小對(duì)不同采收期‘蛇龍珠’葡萄的整體品質(zhì)情況進(jìn)行排名。綜合得分越高，排名越靠前，說(shuō)明該時(shí)期的葡萄品質(zhì)越好，從而確定最佳采收期[23]。

從表6 可以看出，罹病葡萄品質(zhì)綜合排名在2020-09-27最高，對(duì)照組葡萄在2020-09-20最高，因此得出該年度該地區(qū)罹病‘蛇龍珠’葡萄的最佳采收期為9月27日，對(duì)照組的最佳采收期為9月20日，對(duì)比發(fā)現(xiàn)感染病毒后，葡萄的最佳采收期比健康植株晚了1周。

表6 在病毒感染下對(duì)‘蛇龍珠’葡萄不同采收期品質(zhì)綜合評(píng)價(jià)Table 6 Comprehensive evaluation of grape quality at different harvest time of ‘Cabernet Gernischet’ grape under virus infection

3 討 論

目前國(guó)內(nèi)各葡萄產(chǎn)區(qū)葡萄病毒復(fù)合侵染嚴(yán)重。范旭東等[14]采用小RNA測(cè)序技術(shù)從 ‘陽(yáng)光玫瑰’葡萄樣品測(cè)定到8 種病毒，其葉片呈現(xiàn)褪綠斑駁、畸形、小葉、反卷等癥狀；李晨等[24]研究發(fā)現(xiàn)在‘陽(yáng)光玫瑰’‘巨峰’和‘玫瑰香’上存在2 種及以上葡萄病毒復(fù)合侵染的現(xiàn)象。本研究通過(guò)RT-PCR方法檢測(cè)出賀蘭山東麓地區(qū)‘蛇龍珠’感染了8種葡萄病毒，分別是GLRaV-1、GLRaV-2、GLRaV-3、GFLV、GRSPaV、GVA、GPGV、GINV，其中GINV在‘蛇龍珠’葡萄上為首次報(bào)道。此外，通過(guò)田間觀察與RT-PCR檢測(cè)發(fā)現(xiàn)‘蛇龍珠’葡萄感染病毒種類不同，所表現(xiàn)出的癥狀也不同，有些病毒在田間并不顯示癥狀，存在潛伏侵染，應(yīng)該引起相關(guān)部門對(duì)葡萄苗木繁育安全性的重視。

徐美隆等[25]研究發(fā)現(xiàn)葡萄感染病毒后，其SPAD值、葉片氣孔導(dǎo)度和光合速率顯著降低，本研究與其結(jié)果一致。對(duì)品質(zhì)來(lái)說(shuō)，同一采收時(shí)間，罹病葡萄的pH、可溶性固形物、還原糖、花青素、總酚、單寧含量與對(duì)照相比顯著減少，可滴定酸含量增加，這與劉萬(wàn)好等[16]、于素珍等[26]有關(guān)葡萄卷葉病對(duì)果實(shí)品質(zhì)影響的結(jié)果一致。葡萄酒釀造的最佳糖酸比為35～45，糖酸比太高或太低都會(huì)影響葡萄酒的口感[27]。賀蘭山東麓產(chǎn)區(qū)由于晝夜溫差大，健康的‘蛇龍珠’葡萄的糖度太高，酸度不足，釀造的葡萄酒結(jié)構(gòu)性較差，表現(xiàn)出口感寡淡，而‘蛇龍珠’葡萄感染病毒病后，其酸度會(huì)增加，反而有利于釀酒葡萄達(dá)到最佳糖酸比。但考慮到葡萄一旦感染葡萄病毒，即終身帶毒，病毒會(huì)逐年積累且通過(guò)苗木、接穗傳播，對(duì)葡萄產(chǎn)業(yè)長(zhǎng)久發(fā)展不利。因此，生產(chǎn)上必須加強(qiáng)葡萄苗木脫毒，促進(jìn)產(chǎn)業(yè)健康發(fā)展。

傳統(tǒng)的葡萄最佳采收期僅通過(guò)測(cè)量果實(shí)含糖量、含酸量和果粒質(zhì)量等指標(biāo)來(lái)確定，忽略了酚類物質(zhì)等其他重要參數(shù)對(duì)葡萄品質(zhì)的影響，而利用主成分分析則能全面客觀地確定葡萄最佳采收期[28]。本研究利用主成分分析發(fā)現(xiàn)罹病葡萄的最佳采收期比對(duì)照組葡萄晚了1周，這與Montero等[29]研究發(fā)現(xiàn)葡萄感染GLRaV-3延緩了葡萄的成熟結(jié)果一致，進(jìn)一步驗(yàn)證了葡萄病毒感染會(huì)延遲葡萄漿果成熟。

寧夏賀蘭山東麓‘蛇龍珠’葡萄感染8種葡萄病毒，復(fù)合侵染嚴(yán)重，葡萄感染病毒病后，降低光合作用，影響果實(shí)成熟，造成葡萄采收時(shí)間的推遲。對(duì)于光熱充足、栽培規(guī)模較大的葡萄產(chǎn)地，可通過(guò)延后采收，降低葡萄病毒病的影響。鑒于葡萄病毒病尚無(wú)有效藥劑進(jìn)行防治，生產(chǎn)中還應(yīng)選用脫毒苗木，避免葡萄病毒病大肆傳播。