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    IRMA及SP免疫組化染色檢測(cè)在結(jié)腸癌診斷中的意義

    2023-01-24 01:51:53陳敬信王小玲
    貴州醫(yī)藥 2022年12期
    關(guān)鍵詞:結(jié)腸癌免疫組化結(jié)腸

    陳敬信 王小玲

    (1.陜西省森林工業(yè)職工醫(yī)院病理科,陜西 西安 710300;2.渭南市第二醫(yī)院病理科,陜西 渭南 714000)

    結(jié)腸癌為結(jié)直腸癌的主要類型之一,其發(fā)生周期比較長(zhǎng),開(kāi)始發(fā)病時(shí)多為結(jié)腸良性腫瘤,然后逐漸發(fā)展到結(jié)腸癌,這個(gè)過(guò)程涉及到多種基因的突變與異常表達(dá)等[1]。生長(zhǎng)抑制因子2(ING2)為一種抑制因子,但是也在多種惡性腫瘤呈現(xiàn)高表達(dá)狀況,可促進(jìn)腫瘤增殖與侵襲[2]。基質(zhì)金屬蛋白酶-13(MMP-13)為一種促癌因子,也屬于基質(zhì)金屬蛋白酶重要家族成員之一,MMP-13表達(dá)升高可參與惡性腫瘤的浸潤(rùn)與轉(zhuǎn)移,導(dǎo)致患者的病情惡化[5]。當(dāng)前診斷結(jié)腸癌的方法比較多,鏈霉菌抗生物素蛋白-過(guò)氧化物酶(SP)免疫組化染色為檢測(cè)ING2與MMP-13表達(dá)的重要方法,但是多為定性分析,定量分析還存在一定的不足[3]。固相免疫放射分析法(IRMA)為當(dāng)前比較新穎的診斷方法,是基于血清學(xué)的診斷方法。本文探討了IRMA及SP免疫組化染色檢測(cè)在結(jié)腸癌診斷中的意義,現(xiàn)報(bào)道如下。

    1 資料與方法

    1.1一般資料 選取2018年8月到2021年6月在我院手術(shù)切除的結(jié)腸良性腫瘤患者(結(jié)腸良性腫瘤組)78例與結(jié)腸癌患者(結(jié)腸癌組)78例。結(jié)腸癌組中男40例,女38例,平均年齡(57.39±3.68)歲,平均體質(zhì)量指數(shù)(20.87±1.57)kg/m2,平均腫瘤直徑(3.58±0.27)cm。納入標(biāo)準(zhǔn):年齡20~75歲;所有病例經(jīng)過(guò)病理診斷為結(jié)腸癌或結(jié)腸良性腫瘤,病理類型:腺癌70例,鱗癌8例;漿膜浸潤(rùn)30例;組織學(xué)分化:高分化18例,中分化29例,低分化31例;臨床分期:Ⅰ期28例,Ⅱ期 22例,Ⅲ期16例,Ⅳ期12例。結(jié)腸良性腫瘤組中男39例,女39例,平均年齡(57.29±5.11)歲,平均體質(zhì)量指數(shù)(20.48±1.11)kg/m2,平均腫瘤直徑(3.56±0.33)cm。納入標(biāo)準(zhǔn):年齡20~75歲;所有病例經(jīng)過(guò)病理診斷為結(jié)腸癌或結(jié)腸良性腫瘤;本研究通過(guò)本院倫理委員會(huì)批準(zhǔn);具有詳細(xì)的一般資料與病理資料;無(wú)結(jié)腸手術(shù)史;手術(shù)與病理檢查前未給予任何治療(包括放療、生物治療、化療等);患者知情同意。排除標(biāo)準(zhǔn):所取得標(biāo)本不全者;臨床資料不全者;樣本無(wú)法進(jìn)行后續(xù)檢測(cè)分析者;妊娠與哺乳期婦女;合并其他部位腫瘤者。兩組患者一般資料對(duì)比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

    1.2SP免疫組化染色檢測(cè) 采用免疫組化SP法檢測(cè)腫瘤組織中腫瘤細(xì)胞ING2和MMP-13表達(dá)情況,統(tǒng)計(jì)陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)和陽(yáng)性強(qiáng)度。腫瘤組織經(jīng)4%甲醛固定、石蠟切片后,行SP法免疫組化染色。加入抗ING2和抗MMP-13,抗體滴度分別為1:50 和1:100,計(jì)算ING2與MMP-13陽(yáng)性表達(dá)率。染色強(qiáng)度評(píng)分:0分-無(wú)色,1分-淺黃色,2分-黃色,3分-深黃色。陽(yáng)性細(xì)胞百分比評(píng)分:0分-≤5%,1分-5%~25%,2分-26%~50%,3分-51%~75%,4分->75%。染色強(qiáng)度*陽(yáng)性細(xì)胞百分比=最終得分,0~4分為陰性表達(dá),5~12分為陽(yáng)性表達(dá)。

    1.3IRMA檢測(cè) 取所有患者的空腹靜脈血1~2 mL,靜置30 min后,1 000 rpm/min離心10 min,取上層血清,采用IRMA法檢測(cè)血清ING2與MMP-13含量,檢測(cè)試劑盒購(gòu)自北京福瑞生物工程公司,陽(yáng)性閾值:ING2≥6.66 pg/mL,MMP-13≥4.45 pg/mL。

    1.4調(diào)查內(nèi)容 調(diào)查兩組患者的性別、年齡、體質(zhì)量指數(shù)、腫瘤部位、腫瘤直徑等一般資料,重點(diǎn)記錄結(jié)腸癌患者的組織學(xué)分化、漿膜浸潤(rùn)、臨床分期、病理類型等情況。

    2 結(jié) 果

    2.1ING2與MMP-13 IRMA陽(yáng)性率對(duì)比 結(jié)腸癌組的ING2與MMP-13 IRMA陽(yáng)性率分別為71.8%和76.9%,高于結(jié)腸良性腫瘤組的14.1%和16.7%(χ2=52.977、56.875,P<0.05)。

    2.2ING2與MMP-13 SP陽(yáng)性率對(duì)比 結(jié)腸癌組的ING2與MMP-13 SP陽(yáng)性率分別為74.4%和78.2%,高于結(jié)腸良性腫瘤組的15.4%和19.2%(χ2=54.833、54.292,P<0.05)。

    2.3診斷情況 在156例患者中,IRMA診斷為結(jié)腸癌71例,結(jié)腸良性腫瘤85例;SP診斷為結(jié)腸癌77例,結(jié)腸良性腫瘤79例。

    2.4診斷價(jià)值對(duì)比 IRMA診斷結(jié)腸癌的敏感性與特異性為89.7%(70/78)和98.7%(77/78),SP診斷的敏感性與特異性為98.7%(77/78)和100.0%(78/78),SP診斷的敏感性高于IRMA(χ2=5.778,1.006,P<0.05)。

    3 討 論

    ING2在乳腺癌、胃癌、食管癌、白血病、肺癌等人類多種惡性腫瘤組織中表達(dá)上升,而這種表達(dá)上升的現(xiàn)象是由于mRNA 表達(dá)減少或穩(wěn)定性下降有關(guān),揭示ING2表達(dá)上升很可能參與了這些惡性腫瘤的發(fā)生發(fā)展,初步確定了ING2 促癌基因的地位[4]。MMP-13 蛋白的過(guò)表達(dá)屬于病理狀態(tài),與腫瘤細(xì)胞的增殖與轉(zhuǎn)移密切有關(guān)[5]。

    本文結(jié)果顯示,結(jié)腸癌組的ING2與MMP-13 IRMA陽(yáng)性率分別為71.8%和76.9%,高于結(jié)腸良性腫瘤組的14.1%和16.7%(P<0.05);結(jié)腸癌組的ING2與MMP-13 SP陽(yáng)性率分別為74.4%和78.2%,高于結(jié)腸良性腫瘤組的15.4%和19.2%(P<0.05),表明ING2與MMP-13在結(jié)腸癌患者IRMA及SP免疫組化染色診斷中都呈現(xiàn)高表達(dá)狀況。當(dāng)前也有研究顯示結(jié)直腸癌組織中MMP-13蛋白高于非病灶組織,也高于正常人群,且與結(jié)直腸癌的病理特征具有相關(guān)性,還可預(yù)測(cè)患者的預(yù)后[6]。ING2 在腫瘤組織或正常組織中的表達(dá)情況可能存在對(duì)器官的選擇性或是受不同蛋白的調(diào)控作用,ING2 高表達(dá)可能也參與了對(duì)一些與惡性腫瘤侵襲、浸潤(rùn)、轉(zhuǎn)移相關(guān)的基因的調(diào)控,而基質(zhì)屬蛋白酶家族就是參與腫瘤侵襲、浸潤(rùn)、轉(zhuǎn)移的主要基因家族[7]。

    結(jié)腸癌也是最常見(jiàn)的惡性腫瘤之一,占消化道腫瘤的20.0%以上。早期結(jié)腸癌患者的5年生存率可在50.0%以上,而晚期結(jié)腸癌患者的5年生存率低于20.0%,因此早期診斷結(jié)腸癌具有重要價(jià)值[8]。IRMA檢測(cè)屬于無(wú)創(chuàng)性檢測(cè),還有簡(jiǎn)單、方便快速等特點(diǎn),但是診斷的敏感性有待提高。免疫組化為病理科的常見(jiàn)檢測(cè)方法,診斷的特異性與敏感性都比較高,但是診斷比較費(fèi)時(shí),對(duì)于診斷人員的經(jīng)驗(yàn)要求比較高[9]。本研究顯示,在156例患者中,IRMA診斷為結(jié)腸癌71例,結(jié)腸良性腫瘤85例;SP診斷為結(jié)腸癌77例,結(jié)腸良性腫瘤79例;IRMA診斷結(jié)腸癌的敏感性與特異性為89.7%(70/78)和98.7%(77/78),SP診斷的敏感性與特異性為98.7%(77/78)和100.0%(78/78),SP診斷的敏感性高于IRMA(P<0.05),表明兩者診斷結(jié)直腸癌都有很高的特異性,但是SP診斷的敏感性更好。當(dāng)前有研究顯示顯示ING2與MMP-13 在正常人類成纖維細(xì)胞中穩(wěn)定的表達(dá)對(duì)維持其正常生長(zhǎng)過(guò)程發(fā)揮著極其重要的作用,不過(guò)ING2與MMP-13在不同腫瘤類型中的表達(dá)也存在差異性[10]。

    綜上,ING2與MMP-13在結(jié)腸癌患者IRMA及SP免疫組化染色診斷中都呈現(xiàn)高表達(dá)狀況,IRMA及SP診斷結(jié)直腸癌都有很高的特異性,但是SP診斷的敏感性更好。

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