O型血孕產(chǎn)婦產(chǎn)前血清免疫球蛋白G抗體效價 與新生兒溶血病的關(guān)系研究

華月琴，丁小花

（1.常州市第七人民醫(yī)院輸血科；2.常州市第七人民醫(yī)院婦產(chǎn)科，江蘇 常州 213011）

新生兒溶血?。╤emolytic disease of newborns, HDN）是指由于母嬰血型不合，母體產(chǎn)生和胎兒血型抗原不匹配的血型抗體，這種抗體通過胎盤進(jìn)入到胎兒體內(nèi)，抗體會對胎兒血紅細(xì)胞進(jìn)行攻擊，使血紅細(xì)胞受到破壞，產(chǎn)生同族免疫性溶血。HDN主要有ABO血型系統(tǒng)、Rh血型系統(tǒng)血型不合兩種類型。HDN臨床上常表現(xiàn)為黃疸、貧血等癥狀，病情嚴(yán)重者可出現(xiàn)心力衰竭、全身水腫、皮膚瘀斑等，對患兒生命安全造成嚴(yán)重威脅[1]。因此，HDN的早期診斷、治療至關(guān)重要。有研究表明，血型抗體免疫球蛋白（IgG）抗A（B）效價升高的孕產(chǎn)婦，發(fā)生ABO型HDN的概率較高[2]，因此對孕產(chǎn)婦進(jìn)行產(chǎn)前夫妻血型檢查及定期監(jiān)測O型血孕產(chǎn)婦血清中IgG抗A（B）效價對預(yù)測ABO型HDN的發(fā)生具有一定的臨床價值。基于此，本研究旨在探討O型血孕產(chǎn)婦產(chǎn)前血清IgG抗體效價分布情況及其與HDN的相關(guān)性，以期為臨床預(yù)防與治療新生兒溶血病提供參考，現(xiàn)報道 如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料回顧性分析2018年3月至2022年3月于常州市第七人民醫(yī)院進(jìn)行產(chǎn)檢并正常分娩302例適齡O型血孕產(chǎn)婦的臨床資料，孕產(chǎn)婦年齡22～40歲，平均（29.67±6.51）歲；孕周31～42周，平均（36.24±2.12）周；妊娠次數(shù)：妊娠1次115例，妊娠2次156例，妊娠＞2次31例。診斷標(biāo)準(zhǔn)：參照《婦產(chǎn)科學(xué)》[3]中孕產(chǎn)婦妊娠的診斷標(biāo)準(zhǔn)，超聲波顯示子宮腔增大，羊膜囊圓形光環(huán)，且可見胚芽及胎心搏動。納入標(biāo)準(zhǔn)：符合上述診斷標(biāo)準(zhǔn)者；孕周30～42周者；孕產(chǎn)婦血型O型，丈夫血型不是O型者；羊水、胎盤正常者；母嬰ABO血型不合，且Rh血型均為Rh（D）陽性等。排除標(biāo)準(zhǔn)：患有其他血液疾病者；患有原發(fā)性腎、心、肝疾病者；近3個月有輸血史者；合并惡性腫瘤者等。研究經(jīng)常州市第七人民醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會審核批準(zhǔn)。

1.2 檢測方法①父系血型測定。采集所有父系空腹靜脈血5 mL，離心（3 000 r/min，10 min）取血清，使用全自動血型分析儀（上海涵飛醫(yī)療器械有限公司，型號： Metis 200-8）檢測父系血型。②產(chǎn)前血清IgG抗A（B）抗體效價的測定。所有孕產(chǎn)婦均于孕20、24、28、32、36周及產(chǎn)前檢測血清IgG抗A（B）抗體效價。采集所有孕產(chǎn)婦空腹靜脈血5 mL進(jìn)行抗凝處理，采用微柱凝膠法進(jìn)行ABO血型做正反定型、Rh（D）血型，以及不規(guī)則抗體篩查；使用二巰基乙醇（2-Me）、微柱凝膠法測定孕產(chǎn)婦血清IgG抗A（B）效價，取50 μL血清加入150 μL的2-Me中，37 °C水浴10 min后用0.9%氯化鈉溶液稀釋，血清稀釋度分別為1∶32、1∶64、1∶128、1∶256、1∶512，吸取不同稀釋度的血清于抗人球蛋白卡檢測卡中，然后再加入與丈夫同型的0.8%紅細(xì)胞懸液，37 °C離心15 min（轉(zhuǎn)速：3 000 r/min），出現(xiàn)凝集的最高稀釋度為IgG抗A（B）抗體效價。③HDN發(fā)生情況統(tǒng)計。新生兒出生后3～7 d采集足底靜脈血3 mL，進(jìn)行新生兒ABO血型、Rh血型及HDN 3項檢測，改良直接抗人體球蛋白、抗體釋放試驗、游離抗體試驗均呈陽性，母嬰ABO血型不合，判定 為HDN[4]。

1.3 觀察指標(biāo)①夫妻血型及產(chǎn)前血清IgG抗A（B）抗體效價分布情況。效價分為＜1∶64、1∶64、1∶128、1∶256、＞1∶256。②不同妊娠次數(shù)O型血孕產(chǎn)婦的IgG抗A（B）效價比較。③比較O型血孕產(chǎn)婦不同IgG抗A（B）效價的HDN發(fā)生率。④分析O型血孕產(chǎn)婦IgG抗A（B）效價與HDN發(fā)生的相關(guān)性。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法采用SPSS 21.0統(tǒng)計學(xué)軟件處理數(shù)據(jù)，計數(shù)資料以[ 例(%)]表示，兩組間比較行χ2檢驗，多組間比較采用χ2趨勢分析；采用Pearson相關(guān)系數(shù)法分析O型血孕產(chǎn)婦IgG抗A（B）效價與HDN發(fā)生的相關(guān)性。以P＜0.05表示差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 夫妻血型及產(chǎn)前血清IgG抗A（B）抗體效價分布302例孕產(chǎn)婦中，夫妻血型為O-A、O-B、O-AB的孕產(chǎn)婦中，血清IgG抗A（B）效價＜1∶64的孕產(chǎn)婦占比顯著高于1∶128、1∶256及＞1∶256，且夫妻血型為O-AB的孕產(chǎn)婦血清IgG抗A（B）效價＜1∶64的孕產(chǎn)婦占比顯著高于1∶64；夫妻血型為O-AB的孕產(chǎn)婦血清IgG抗A（B）效價＜1∶64的占比顯著高于O-A血型，夫妻血型為O-B的孕產(chǎn)婦血清IgG抗A（B）效價＞1∶256的占比顯著低于O-A血型，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（均P＜0.05），見表1。

表1 夫妻血型及產(chǎn)前血清IgG抗A（B）抗體效價分布[ 例(%)]

2.2 不同妊娠次數(shù)O型血孕產(chǎn)婦的IgG抗A（B）效價比較隨著妊娠次數(shù)增多，血清IgG抗A（B）效價＜1∶64的孕產(chǎn)婦占比逐漸降低，1∶128和＞1∶256的孕產(chǎn)婦占比逐漸升高，且＜1∶64的孕產(chǎn)婦中，妊娠≥2次占比顯著低于妊娠1次；1∶128的孕產(chǎn)婦中妊娠≥2次與妊娠2次占比均顯著高于妊娠1次；＞1∶256的孕產(chǎn)婦中妊娠＞2次占比顯著高于妊娠1、2次，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（均P＜0.05），見表2。

表2 不同妊娠次數(shù)O型血孕產(chǎn)婦的IgG抗A（B）效價比較[ 例(%)]

2.3 O型血孕產(chǎn)婦不同IgG抗A（B）效價的HDN發(fā)生率比較及相關(guān)性分析302例孕產(chǎn)婦中發(fā)生HDN有41例（13.58%），且隨血清IgG抗A（B）效價的升高，HDN發(fā)生率逐漸升高，見表3。經(jīng)Pearson相關(guān)系數(shù)分析，O型孕產(chǎn)婦IgG抗A（B）效價與HDN發(fā)生率呈正相關(guān)，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（r= 0.428，P＜0.05）。

表3 O型孕產(chǎn)婦不同IgG抗A（B）效價的HDN發(fā)生率比較

3 討論

臨床研究顯示，HDN一般發(fā)生于O型血母親，A（B）型父親，新生兒為A（B）型，其原因在于，O型血孕產(chǎn)婦體內(nèi)存在天然的抗A（B）IgG，該抗體可通過胎盤進(jìn)入胎兒體內(nèi)，作用于胎兒紅細(xì)胞表面A抗原或B抗原，使紅細(xì)胞被破壞，從而產(chǎn)生HDN[5-6]。HDN會破壞新生兒紅細(xì)胞，使間接膽紅素水平上升，引發(fā)溶血性黃疸，嚴(yán)重者甚至可影響新生兒智力發(fā)育。因此，對于HDN應(yīng)及早發(fā)現(xiàn)，采取相應(yīng)的預(yù)防和治療措施，以減輕對新生兒的危害。

有研究發(fā)現(xiàn)，發(fā)生HDN的新生兒，其母體在妊娠期間血清IgG抗A（B）效價會升高，而當(dāng)效價＜1∶64時，HDN的發(fā)生概率較低[7]，分析其原因可能是，O型血孕產(chǎn)婦孕早期胎兒紅細(xì)胞由胎盤的絨毛間隙進(jìn)入到母體血液循環(huán)較少，孕產(chǎn)婦產(chǎn)生的抗體數(shù)量相應(yīng)也較少，因此抗體效價較低，但是隨著孕期不斷延長，胎盤絨毛膜損壞、分娩等各種原因會導(dǎo)致胎兒血液進(jìn)入母體血液循環(huán)增多，分泌大量抗體，因而抗體效價也不斷升高，當(dāng)抗體效價超過機(jī)體的保護(hù)機(jī)制時，可導(dǎo)致HDN 的發(fā)生[8]。本研究中，302例孕產(chǎn)婦中，夫妻血型為O-A、O-B、O-AB的孕產(chǎn)婦中，血清IgG抗A（B）效價＜1∶64的占比顯著高于1∶128、1∶256及＞1∶256；夫妻血型為O-AB的孕產(chǎn)婦血清IgG抗A（B）效價＜1∶64的占比顯著高于O-A血型，夫妻血型為O-B的孕產(chǎn)婦血清IgG抗A（B）效價＞1∶256的占比顯著低于O-A血型，分析其原因可能為，A型紅細(xì)胞上抗原決定簇多于B型，且其免疫能力較強(qiáng)，因此，臨床針對抗體效價＞1∶256應(yīng)定期復(fù)查，監(jiān)測血清IgG抗A（B）抗體效價水平，并對新生兒狀況進(jìn)行密切觀察。

對不同妊娠次數(shù)O型血孕產(chǎn)婦的IgG抗A（B）效價進(jìn)行分析發(fā)現(xiàn)，O型血孕產(chǎn)婦因其本身就含有IgG抗A（B），隨著妊娠進(jìn)展胎盤絨毛屏障受損，使胎兒紅細(xì)胞進(jìn)入母體，并刺激母體產(chǎn)生更多抗體，隨著孕次的增加受到相同抗原刺激，會快速產(chǎn)生大量抗體，進(jìn)而導(dǎo)致血清IgG抗A（B）效價越來越高。鄧虹艷等[9]研究表明，HDN的發(fā)生率隨著O型血孕產(chǎn)婦血清IgG抗A（B）效價升高而增加，且孕產(chǎn)婦妊娠次數(shù)和年齡均是影響該結(jié)果的關(guān)鍵因素。本研究中，隨著妊娠次數(shù)增多，血清IgG抗A（B）效價＜1∶64的孕產(chǎn)婦占比逐漸降低，1∶128和＞1∶256的孕產(chǎn)婦占比逐漸升高，提示隨著孕次的增加，孕產(chǎn)婦血清IgG抗A（B）效價逐漸增高。因此對O型血抗體效價大于或等于1∶64的孕產(chǎn)婦，尤其是多次妊娠的孕產(chǎn)婦定期檢查，監(jiān)測其血清IgG抗A（B）效價水平，并進(jìn)行針對性干預(yù)十分必要。

相關(guān)研究顯示，母親血清IgG抗A（B）效價越高，HDN發(fā)生的概率越大[10]，因此，孕期時一旦發(fā)現(xiàn)母嬰血型不合，應(yīng)對母親血清IgG抗A（B）效價進(jìn)行持續(xù)性監(jiān)測，若發(fā)現(xiàn)持續(xù)性上升，表明HDN發(fā)生的概率越高，需盡早采取干預(yù)治療措施[11]。本研究中，302例O型血孕產(chǎn)婦中發(fā)生HDN有41例（13.58%），且隨血清IgG抗A（B）效價的升高，HDN發(fā)生率逐漸升高，提示O型孕產(chǎn)婦產(chǎn)前IgG血型抗體效價可以預(yù)測HDN的風(fēng)險。同時經(jīng)Pearson相關(guān)系數(shù)分析，O型孕產(chǎn)婦IgG抗A（B）效價與HDN發(fā)生率呈正相關(guān)關(guān)系。母嬰血型不合胎兒紅細(xì)胞進(jìn)入母體血液循環(huán)刺激母體產(chǎn)生相應(yīng)抗體，抗體通過胎盤進(jìn)入胎兒血液循環(huán)，與紅細(xì)胞結(jié)合破壞紅細(xì)胞發(fā)生溶血現(xiàn)象，孕產(chǎn)婦血清IgG抗A（B）效價越高對胎兒造成的損傷越大，越容易出現(xiàn)HDN[12]。因此臨床上可以通過對O型血孕產(chǎn)婦血清IgG抗A（B）效價進(jìn)行定期監(jiān)測，在產(chǎn)前積極預(yù)防，若存在HDN的風(fēng)險，在孕期應(yīng)定期隨診，方便醫(yī)師預(yù)測發(fā)病程度，并做好相應(yīng)干預(yù)治療措施，產(chǎn)時留好臍帶血進(jìn)行檢測，做好HDN的相關(guān)治療準(zhǔn)備，從而改善新生兒 預(yù)后。

綜上，O型孕產(chǎn)婦IgG抗A（B）效價與HDN呈正相關(guān)，通過對孕產(chǎn)婦IgG抗A（B）效價指標(biāo)變化情況進(jìn)行定期監(jiān)測有助于預(yù)測HDN的發(fā)病情況，以制定針對性預(yù)防及干預(yù)措施，改善預(yù)后，在臨床上有一定指導(dǎo)意義。