孕晚期GBS感染孕婦蛻膜間質(zhì)細胞死亡值、血清炎性因子對妊娠結(jié)局的預(yù)測價值

張聰穎,喬金鳳,金 爽,陳 丹,劉寶娟

B族鏈球菌(GBS)是一種常寄生于人體下消化道及泌尿生殖道的典型條件致病菌，具有較高的侵襲性[1]。孕晚期GBS感染風(fēng)險較高，可導(dǎo)致宮內(nèi)感染、早產(chǎn)、胎膜早破、產(chǎn)褥感染等不良妊娠結(jié)局，對圍生期母嬰健康危害極大，已成為臨床關(guān)注的焦點[2-3]。大量研究顯示，GBS感染可導(dǎo)致機體釋放大量炎性因子，如白細胞介素-6(IL-6)、腫瘤壞死因子-α(TNF-α)等，炎性因子水平升高可直接影響母嬰健康，增加不良妊娠結(jié)局發(fā)生率[4-5]。IL-1β也是一種重要的炎性因子，其水平升高與妊娠期炎癥反應(yīng)密切相關(guān)，可導(dǎo)致不良妊娠結(jié)局[6]。但IL-1β在孕晚期GBS感染中的變化及作用尚未明確。此外，筆者在前期工作中發(fā)現(xiàn)，GBS暴露后蛻膜間質(zhì)細胞死亡增多，且與炎癥信號通路有關(guān)，尤其是蛻膜間質(zhì)細胞死亡后會引起炎性因子水平升高?；诖?，本研究探究蛻膜間質(zhì)細胞、炎癥信號通路相關(guān)因子在孕晚期GBS感染中的變化及對妊娠結(jié)局的預(yù)測價值，旨在為臨床采取有效防治措施提供參考依據(jù)。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2020年1月—2022年1月我院收治的85例孕晚期GBS感染孕婦作為研究組，根據(jù)1∶1匹配(匹配指標(biāo)包括年齡、經(jīng)產(chǎn)情況、孕周)病例對照原則選取同期85例孕晚期無GBS感染孕婦作為對照組。納入標(biāo)準(zhǔn)：①研究組符合GBS感染診斷標(biāo)準(zhǔn)[7]，對照組均無GBS感染；②孕周28～33周；③自然受孕、單胎妊娠；④已簽署本研究知情同意書。排除標(biāo)準(zhǔn)：①妊娠期并發(fā)癥未得到有效控制；②伴有宮頸炎、輸卵管囊腫等其他生殖系統(tǒng)疾??；③合并其他感染性疾病者，如乙型肝炎、肺炎等；④習(xí)慣性流產(chǎn)患者；⑤胎兒宮內(nèi)發(fā)育遲緩者。

1.2觀察指標(biāo) ①比較2組一般資料(年齡、孕周、體質(zhì)量指數(shù)、經(jīng)產(chǎn)情況、流產(chǎn)史、孕期上呼吸道感染史、孕期吸煙史、文化水平、妊娠期合并癥)，蛻膜間質(zhì)細胞死亡值，血清炎性因子(IL-6、IL-1β、TNF-α)水平等，分析研究組蛻膜間質(zhì)細胞死亡值與血清炎性因子間的相關(guān)性。②統(tǒng)計研究組不良妊娠結(jié)局發(fā)生情況，比較不同妊娠結(jié)局患者蛻膜間質(zhì)細胞死亡值與血清炎性因子水平。③分析蛻膜間質(zhì)細胞死亡值、血清炎性因子水平預(yù)測孕晚期GBS感染孕婦不良妊娠結(jié)局的價值。

1.3檢測方法

1.3.1蛻膜間質(zhì)細胞死亡值檢測：入組當(dāng)日采用陰道拭子收集孕婦陰道宮頸外口脫落細胞，將收集的細胞置于流式管中，加入Binding Buffer工作液500 μl重懸細胞，加入Annexin V-FITC 5 μl和PI 5 μl，混勻后室溫避光反應(yīng)5～15 min，1 h內(nèi)采用流式細胞儀檢測蛻膜間質(zhì)細胞死亡值。

1.3.2血清炎性因子檢測：入組當(dāng)日采集孕婦空腹靜脈血2 ml，于4 ℃條件下以3000 r/min離心處理15 min后取血清，采用酶聯(lián)免疫吸附試驗檢測血清IL-6、IL-1β、TNF-α水平，試劑盒購自上海酶聯(lián)生物科技有限公司。

2 結(jié)果

2.1一般資料、蛻膜間質(zhì)細胞死亡值、血清炎性因子水平 2組年齡、孕周、體質(zhì)量指數(shù)、經(jīng)產(chǎn)情況、流產(chǎn)史、孕期上呼吸道感染史、孕期吸煙史、文化水平、妊娠期合并癥比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)；研究組蛻膜間質(zhì)細胞死亡值及血清IL-6、IL-1β、TNF-α水平均較對照組高(P<0.01)。見表1。

2.2研究組蛻膜間質(zhì)細胞死亡值與血清炎性因子的相關(guān)性 Pearson相關(guān)性分析顯示，研究組蛻膜間質(zhì)細胞死亡值與血清IL-6、IL-1β、TNF-α水平呈正相關(guān)(r=0.762、0.772、0.721，P<0.01)。見圖1。

表1 孕晚期有無B族鏈球菌感染孕婦一般資料及相關(guān)指標(biāo)比較

圖1 孕晚期B族鏈球菌感染孕婦蛻膜間質(zhì)細胞死亡值與血清炎性因子的相關(guān)性IL-6為白細胞介素-6，IL-1β為白細胞介素-1β，TNF-α為腫瘤壞死因子-α

2.3不同妊娠結(jié)局孕婦蛻膜間質(zhì)細胞死亡值、血清炎性因子水平比較 研究組發(fā)生早產(chǎn)6例，宮內(nèi)感染5例，胎膜早破6例，產(chǎn)褥感染4例，總發(fā)生率為24.71%(21/85)。妊娠結(jié)局不良孕婦蛻膜間質(zhì)細胞死亡值及血清IL-6、IL-1β、TNF-α水平均較妊娠結(jié)局良好孕婦高(P<0.01)。見表2。

表2 不同妊娠結(jié)局孕婦蛻膜間質(zhì)細胞死亡值、血清炎性因子水平比較

2.4蛻膜間質(zhì)細胞死亡值、血清炎性因子水平預(yù)測不良妊娠結(jié)局的價值 以研究組妊娠結(jié)局不良孕婦作為陽性樣本、妊娠結(jié)局良好孕婦作為陰性樣本，繪制蛻膜間質(zhì)細胞死亡值及血清IL-6、IL-1β、TNF-α水平預(yù)測孕晚期GBS感染孕婦不良妊娠結(jié)局的ROC曲線，結(jié)果顯示，各指標(biāo)單獨預(yù)測的曲線下面積(AUC)分別為0.752、0.758、0.784、0.779，聯(lián)合預(yù)測的AUC最大，為0.903。見表3、圖2。

圖2 蛻膜間質(zhì)細胞死亡值、血清炎性因子水平預(yù)測孕晚期GBS感染孕婦不良妊娠結(jié)局的ROC曲線GBS為B族鏈球菌，ROC為受試者工作特征，IL-6為白細胞介素-6，IL-1β為白細胞介素-1β，TNF-α為腫瘤壞死因子-α

3 討論

GBS具有較強致病性和穿透力，孕晚期女性體內(nèi)激素水平發(fā)生明顯變化，致陰道微生態(tài)失調(diào)，易造成GBS感染，是孕婦病死率較高的主要原因，且可導(dǎo)致不良妊娠結(jié)局[8-11]。因此，加強孕晚期GBS感染的防治，對改善妊娠結(jié)局、保障母嬰健康具有重要意義。

研究顯示，孕晚期血清炎性因子水平可預(yù)測不良妊娠結(jié)局發(fā)生的危險性，且GBS感染孕婦IL-6、TNF-α等炎性因子水平異常升高[12]。本研究結(jié)果顯示，孕晚期GBS感染可導(dǎo)致孕婦血清IL-6、TNF-α水平明顯升高，與上述研究結(jié)果基本一致，提示血清IL-6、TNF-α水平升高與孕晚期GBS感染有關(guān)。IL-6、TNF-α均為臨床常見促炎因子，妊娠期胎盤滋養(yǎng)層、子宮蛻膜細胞等均具有合成、分泌IL-6的能力，正常妊娠狀態(tài)下孕婦血清中IL-6水平很低，當(dāng)發(fā)生GBS感染時可刺激胎盤滋養(yǎng)層、子宮蛻膜細胞大量合成IL-6，并釋放至羊水及母血中，引起血清IL-6水平升高[13-14]。TNF-α是一種小分子蛋白炎性因子，正常狀態(tài)下其表達水平較低，GBS感染時在GBS釋放內(nèi)毒素的刺激下，TNF-α表達水平逐漸升高[15-16]。本研究還發(fā)現(xiàn)，孕晚期GBS感染孕婦血清IL-1β水平高于孕晚期無GBS感染孕婦，說明血清IL-1β水平升高也與孕晚期GBS感染有關(guān)。漆小霞等[17]研究顯示，GBS感染可促進胎膜組織IL-1β表達增加，從而加重炎癥反應(yīng)，影響母嬰健康。國外相關(guān)研究顯示，GBS感染的人蛻膜基質(zhì)細胞中IL-1β分泌量明顯增加，是促進炎癥反應(yīng)的關(guān)鍵因子[18]。

此外，GBS感染后蛻膜間質(zhì)細胞死亡是常見現(xiàn)象。本研究發(fā)現(xiàn)，孕晚期GBS感染孕婦蛻膜間質(zhì)細胞死亡值明顯增大，說明GBS感染可促進蛻膜間質(zhì)細胞死亡。本研究還發(fā)現(xiàn)，孕晚期GBS感染孕婦蛻膜間質(zhì)細胞死亡值與血清IL-6、IL-1β、TNF-α水平呈正相關(guān)，提示孕晚期GBS感染孕婦蛻膜間質(zhì)細胞死亡和炎性因子水平升高存在一定相關(guān)性。分析其原因在于，孕晚期GBS感染可引起血清IL-6、IL-1β、TNF-α水平升高，其中IL-1β具有調(diào)節(jié)Th17細胞早期分化的作用，同時能激活I(lǐng)L-6、TNF-α等炎性因子的表達增加，并與其他炎性因子協(xié)同調(diào)節(jié)Th17細胞的增殖，從而加重炎癥反應(yīng)，促進蛻膜間質(zhì)細胞死亡[19-20]。而即將死亡的蛻膜間質(zhì)細胞會自發(fā)形成諸多生物分子，如細胞質(zhì)、細胞核、線粒體等及部分化學(xué)成分，諸多變化易引起炎癥反應(yīng)加重，蛻膜間質(zhì)細胞死亡與炎性因子水平升高形成惡性循環(huán)，共同影響母嬰健康。本研究結(jié)果顯示，孕晚期GBS感染孕婦不良妊娠結(jié)局發(fā)生率高于孕晚期無GBS感染孕婦，且妊娠結(jié)局不良孕婦蛻膜間質(zhì)細胞死亡值及血清IL-6、IL-1β、TNF-α水平更高，進一步說明孕晚期上述指標(biāo)異常升高可增加不良妊娠結(jié)局的發(fā)生風(fēng)險。

表3 蛻膜間質(zhì)細胞死亡值、血清炎性因子水平預(yù)測孕晚期GBS感染孕婦不良妊娠結(jié)局的價值

據(jù)此本研究推測孕晚期檢測GBS感染孕婦蛻膜間質(zhì)細胞死亡值及血清IL-6、IL-1β、TNF-α水平有助于預(yù)測不良妊娠結(jié)局的發(fā)生風(fēng)險。進一步通過ROC曲線分析發(fā)現(xiàn)，蛻膜間質(zhì)細胞死亡值及血清IL-6、IL-1β、TNF-α水平單獨預(yù)測孕晚期GBS感染孕婦不良妊娠結(jié)局的AUC均在0.7以上，說明各指標(biāo)均具有一定預(yù)測價值；但聯(lián)合預(yù)測的AUC為0.903，預(yù)測價值更高，可為臨床預(yù)測孕晚期GBS感染孕婦妊娠結(jié)局提供更準(zhǔn)確的參考依據(jù)，從而指導(dǎo)臨床采取合理有效的防范措施。

綜上，孕晚期GBS感染可導(dǎo)致孕婦蛻膜間質(zhì)細胞死亡值及血清IL-6、IL-1β、TNF-α水平升高，且蛻膜間質(zhì)細胞死亡值與炎性因子水平升高存在正相關(guān)關(guān)系，檢測各指標(biāo)水平有助于預(yù)測孕晚期GBS感染孕婦不良妊娠結(jié)局的發(fā)生風(fēng)險。