刺山柑乳膏劑提取與制備工藝研究

魏 麗，張永帥

（新疆應(yīng)用職業(yè)技術(shù)學(xué)院，新疆奎屯 833200）

刺山柑乳膏劑是用刺山柑樹(shù)的果實(shí)提取得到的藥物，在類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的治療領(lǐng)域效果顯著，本文針對(duì)刺山柑乳膏劑的提取過(guò)程和質(zhì)量檢測(cè)等進(jìn)行論述，通過(guò)數(shù)據(jù)對(duì)比明確最優(yōu)秀的藥物提取和質(zhì)量檢測(cè)方式。論述了煎煮法、滲漉法、回流法、冷浸法這五種刺山柑干燥果實(shí)的處理方法，然后又通過(guò)對(duì)不同處理方式的刺山柑提取物的制備處理方式引出了五種乳膏劑制備工藝，并通過(guò)后續(xù)五種質(zhì)量檢測(cè)方法證明了刺山柑乳膏劑的可用性，全面分析了這種藥物的藥用價(jià)值和成分、工藝等，為其應(yīng)用提供了理論支持。

1 刺山柑的特性及其藥用價(jià)值

刺山柑是一種植物的學(xué)名，是一種白花菜科山柑屬的藤本植物，從藥用價(jià)值來(lái)講，刺山柑樹(shù)上的刺山柑果實(shí)中富含的揮發(fā)油、吲哚類、類黃酮類、谷甾醇類、生物堿等諸多物質(zhì)對(duì)人體很有好處，能夠起到消炎和抗氧化等作用[1]，使用得當(dāng)?shù)那闆r下還能夠降低患者的血壓和血糖，后來(lái)隨著刺山柑在風(fēng)濕和類風(fēng)濕領(lǐng)域的治療作用被發(fā)掘出來(lái)，這種果實(shí)開(kāi)始有更加廣泛的應(yīng)用，從樹(shù)上采摘下來(lái)之后搗碎并敷在患處止痛[2]。

最早的時(shí)候，新疆人選擇將刺山柑果實(shí)搗碎敷在患處緩解風(fēng)濕帶來(lái)的疼痛，但這種做法效果有限且會(huì)刺激皮膚，因而有了隨后的刺山柑乳膏劑的研究與提取。與刺山柑果實(shí)相比較，乳膏劑更加容易存儲(chǔ)和攜帶，能夠長(zhǎng)時(shí)間停留在皮膚上穩(wěn)定發(fā)揮效果，對(duì)患者的類風(fēng)濕癥狀有所緩解的同時(shí)不損傷肌膚。何況從刺山柑提取物的成分來(lái)看，其水溶性良好，在被制備成軟膏之后涂抹在患處更加容易清洗，不會(huì)輕易殘留在肌膚上造成后續(xù)影響[3]。隨著類風(fēng)濕治療的研究，刺山柑乳膏劑有了越來(lái)越多的用法，比如通過(guò)氮酮（A zone，AZ）促透劑促進(jìn)其成型，這種做法也能夠加快人體對(duì)凝膠類膏劑的吸收速度，還有其他提升風(fēng)濕治療效果但不夠穩(wěn)定的刺山柑軟膏類型，這些都是在最早的刺山柑原始應(yīng)用的基礎(chǔ)上逐步提升而來(lái)[4]。

2 刺山柑乳膏劑提取技術(shù)及過(guò)程

2.1 刺山柑乳膏劑提取中的設(shè)備與材料

需要用到包括電熱鼓風(fēng)干燥箱、高速中藥粉碎機(jī)、電子天平、恒溫水浴鍋、臺(tái)式高速冷凍離心機(jī)、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器、循環(huán)水多用真空泵等多種設(shè)備將刺山柑果實(shí)制備為乳膏劑，材料方面大體上只需要刺山柑果實(shí)，這種果實(shí)通常來(lái)自于新疆。在使用設(shè)備處理刺山柑果實(shí)之前需要先進(jìn)行預(yù)處理，具體步驟為：用溫度在50～60℃的干燥箱對(duì)刺山柑果實(shí)進(jìn)行烘干處理，在完成烘干后用粉碎機(jī)進(jìn)行粉碎，將刺山柑果實(shí)完全粉碎后用篩網(wǎng)進(jìn)行篩選，就能夠得到符合使用要求的粗粉，接下來(lái)的加工流程使用的主要材料也就從刺山柑果實(shí)轉(zhuǎn)變?yōu)榇躺礁檀址踇5]。

2.2 刺山柑乳膏劑提取中的方法選擇

煎煮法、滲漉法、回流法以及冷浸法都是用來(lái)提取刺山柑果實(shí)中有效成分的方式，四種方法的具體提取過(guò)程分別如下所示。

煎煮法先準(zhǔn)確稱取50g 刺山柑果實(shí)粗粉，隨后用1kg 水對(duì)其進(jìn)行三次煎煮，每次煎煮至沸騰為止，最終將每次煎煮得到的藥液聚合在一起，通過(guò)離心機(jī)進(jìn)行離心處理后獲取上清液，再將清液濃縮到50mL 為止，初步提取工藝完成，藥液留作備用。

滲漉法：先準(zhǔn)確稱取50g 刺山柑果實(shí)粗粉，隨后用0.5kg 純度為65%的乙醇對(duì)其進(jìn)行為期24h 的浸漬，在完成浸漬后將酒精中的殘?jiān)^(guò)濾干凈并將酒精溶液濃縮至50mL，初步提取工藝完成，酒精溶液留作備用。

回流法：先準(zhǔn)確稱取50g 刺山柑果實(shí)粗粉，隨后用0.3kg 純度為65%的乙醇對(duì)其進(jìn)行三次為期1.5h 的回流提取，在第三次提取工作結(jié)束后，將酒精中的殘?jiān)^(guò)濾干凈并將酒精溶液濃縮至50mL，初步提取工藝完成，酒精溶液留作備用[6]。

冷浸法：先準(zhǔn)確稱取50g 刺山柑果實(shí)粗粉，隨后用0.5kg 純度為65的乙醇對(duì)其進(jìn)行為期36h 的浸漬，在完成浸漬后不需要其他處理，只需要將酒精中的殘?jiān)^(guò)濾干凈并將酒精溶液濃縮至50ml，初步提取工藝完成，酒精溶液留作備用。

2.3 刺山柑乳膏劑提取中的膏劑成型

2.3.1 實(shí)驗(yàn)儀器和材料

在將初步提取得到的藥液轉(zhuǎn)化成膏劑的過(guò)程中，需要用到的設(shè)備通常包括電子天平、恒溫水浴鍋、實(shí)驗(yàn)室乳化劑、電熱恒溫干燥箱、電冰箱、臺(tái)式電動(dòng)離心機(jī)等，需要準(zhǔn)備的材料除了刺山柑提取液之外，還有礦油（分析純）、聚二甲基硅氧烷、白池花籽油、辛酸/癸酸甘油三脂、鯨蠟硬脂醇、甘油硬脂酸酯、硬脂酸酯司、甘油硬脂酸酯、甘油、丁二醇、月桂醇硫酸酯鈉、尼泊金甲酯、尼泊金丙酯等化合物[7]。

2.3.2 刺山柑乳膏劑提取方法

要想將刺山柑提取液進(jìn)一步加工為刺山柑乳膏劑可以通過(guò)這樣幾種方式：

方法一：使用的材料包括礦油20.0g、凡士林31.0g、地蠟5.0g、羊毛脂5.0g、失水山梨酸倍半油酸酯4.0g、甘油5.0g，最后用蒸餾水將混合物整體體量增加至100g。

方法二：使用的材料包括礦油3.5g、羊毛酸異丙酯1.5g、蜂蠟2.5g、硬脂酸3.0g、甘油硬脂酸酯、PEG-100 硬脂酸酯6.0g、鯨蠟硬脂醇3.0g、凡士林、羊毛脂羊毛醇40.0g、三乙醇胺1.0g、甘油2.5g，最后用蒸餾水將混合物整體體量增加至100g。

方法三：使用的材料包括礦油8.0g、羊毛脂0.5g、硬脂酸3.0g、甘油硬脂酸酯與PEG-100硬脂酸酯3.0g、乙?；蛎?.5g、棕櫚酸異丙酯2.0g、三乙醇胺0.2g、甘油3.5g、丙二醇2.5g，最后用蒸餾水將混合物整體體量增加至100g。

方法四：使用的材料包括礦油7.5g、羊毛脂0.5g、硬脂酸3.0g、礦油甘油硬脂酸酯、硬脂酸醋鯨蠟硬脂醇、單硬脂酸酯甘油丙二醇月桂醇硫酸酯鈉，最后用蒸餾水將混合物整體體量增加至100g。

方法五：使用的材料包括礦油3.0g、羊毛脂0.5g、硬脂酸3.0g、礦油聚二甲基娃氧院白池花籽油辛酸癸酸，最后用甘油三醋鯨蠟硬脂醇甘油硬脂酸酯與脂酸酯甘油硬脂酸脂甘油將混合物整體體量增加至100g。

以上提到的五種加工方式都可以對(duì)刺山柑提取液進(jìn)行二次加工，但是經(jīng)過(guò)二次加工后溶液并沒(méi)有完全變成膏劑，還需要將經(jīng)過(guò)不同處理后呈現(xiàn)水相和油相的不同提取液分別放置在不同的燒杯中，然后加熱燒杯并保證燒杯內(nèi)部溫度在75～85℃且受熱均勻，通過(guò)攪拌確保每個(gè)燒杯中的液體都是均勻的，最終將水相和油相混合在一起，待冷凝后即可得到需要的乳膏劑[8]。

3 刺山柑乳膏劑提取質(zhì)量檢測(cè)

3.1 生物堿鑒別實(shí)驗(yàn)

在生物堿鑒別實(shí)驗(yàn)中，精準(zhǔn)獲取1g 刺山柑軟膏劑樣品放入錐形瓶中并震蕩搖勻，經(jīng)過(guò)30min 的超聲波處理后等待其冷卻，隨后進(jìn)行2h 的冰凍處理，取出后快速過(guò)濾去除殘?jiān)⑼ㄟ^(guò)水浴蒸干的方式處理容器中的濾液，處理完成后加入鹽酸溶液和活性炭，重新水浴加熱后重復(fù)攪拌和過(guò)濾的流程，完成后將溶液分別加入三支試管，在三支試管中分別加入2滴碘化鉍鉀試液、2滴碘化汞鉀試液、2滴磷鉬酸試液，三種情況下分別應(yīng)該生成棕色沉淀、白色沉淀和淡黃色沉淀，淡黃色沉淀遇氨水消失，則為正?，F(xiàn)象[9]。

3.2 刺山柑乳膏劑有效成分質(zhì)量測(cè)定

3.2.1 質(zhì)量檢測(cè)溶液制備過(guò)程

對(duì)刺山柑乳膏劑進(jìn)行質(zhì)量檢測(cè)的方式有多種，主要介紹以下幾種方式。

方式一：精準(zhǔn)定量取得1.0g 刺山柑乳膏劑樣品并放入錐形瓶中，準(zhǔn)確加入50mL 乙醇并密封搖勻后稱重，經(jīng)過(guò)30min 的超聲波處理后等待其冷卻，隨后進(jìn)行2h 的冰凍處理，取出后快速過(guò)濾去除殘?jiān)⑼ㄟ^(guò)水浴蒸干的方式處理容器中的濾液，處理完成后加入鹽酸溶液和活性炭，重新水浴加熱后重復(fù)攪拌和過(guò)濾的流程，用鹽酸溶液分批次洗滌得到溶液。

方式二：精準(zhǔn)定量取得1.0g 刺山柑乳膏劑樣品并放入錐形瓶中，準(zhǔn)確加入50mL 乙醇并密封搖勻后稱重，經(jīng)45min 的超聲處理后操作同方法一。

方式三：精準(zhǔn)定量取得1.0g 刺山柑乳膏劑樣品并放入錐形瓶中，準(zhǔn)確加入50mL 乙醇并密封搖勻后稱重，經(jīng)1h 的超聲處理后操作同方法一。

方式四：精準(zhǔn)定量取得1.0g 刺山柑乳膏劑樣品并放入錐形瓶中，準(zhǔn)確加入50mL 乙醇并密封搖勻后稱重，經(jīng)1h 的水浴加熱回流并冷卻后操作同方法一。

方式五：精準(zhǔn)定量取得1.0g 刺山柑乳膏劑樣品并放入錐形瓶中，準(zhǔn)確加入50mL 乙醇并密封搖勻后稱重，經(jīng)1h 的水浴加熱回流并冷卻后操作同方法一。

在通過(guò)上述五種方式得到經(jīng)過(guò)處理的溶液后，在每個(gè)鹽酸溶液中加入全新的2%雷氏鹽5mL，隨后將其稀釋至刻度并搖勻，最終通過(guò)分光光度法測(cè)定吸光度，計(jì)算總生物堿含量（mg/g）。

3.2.2 質(zhì)量檢測(cè)結(jié)果的專屬性對(duì)照實(shí)驗(yàn)

為了確定除雷氏鹽之外的成分對(duì)質(zhì)量檢測(cè)實(shí)驗(yàn)結(jié)果無(wú)影響，需要根據(jù)測(cè)量方法分別獲取對(duì)照品溶液、供試品溶液以及陰性對(duì)照品溶液，通過(guò)波長(zhǎng)掃描的方式觀測(cè)到前兩者有波長(zhǎng)吸收而陰性對(duì)照溶液則沒(méi)有，因此猜想得以驗(yàn)證。

3.2.3 方法學(xué)考察

為了對(duì)鹽酸水蘇堿與溶液的吸光度之間的線性關(guān)系進(jìn)行考察，將21mg 鹽酸水蘇堿對(duì)照品放入量杯中，并在量杯中加入0.1mol/L 鹽酸溶液，稀釋至刻度后將其搖勻作為對(duì)比樣本（0.84g/L）。隨后從對(duì)比樣本中分別精準(zhǔn)獲取1.0mL、2.0mL、3.0mL、4.0mL、10.0mL，分別加入新制的2%雷氏鹽2mL，加0.1mol/L 鹽酸溶液稀釋至刻度并搖勻，隨后通過(guò)冰浴法降溫并用干燥濾紙過(guò)濾，取續(xù)濾液，以0.1mol/L 鹽酸溶液為空白，照紫外分光光度法。對(duì)全部樣本進(jìn)行同樣處理后經(jīng)過(guò)對(duì)比得到的數(shù)據(jù)差異可以得知，質(zhì)量濃度在0.084～0.84g/L 時(shí)與吸光度具有良好線性關(guān)系[10]。

3.2.4 樣品含量測(cè)定

在經(jīng)過(guò)前面的提取制作與測(cè)量工藝后，還要最后檢測(cè)一次提取物中的有效成分含量，按照一般的測(cè)量方式，需要依次選擇三批藥材，然后通過(guò)測(cè)量每批藥材中的生物堿含量的方式確定其質(zhì)量，為了保證準(zhǔn)確性，每組的測(cè)量都應(yīng)該分多次進(jìn)行，最終取平均值作為參考數(shù)據(jù)。

4 結(jié)束語(yǔ)

在刺山柑果實(shí)中提取得到的刺山柑乳膏劑對(duì)風(fēng)濕和類風(fēng)濕治療有著良好效果。論述了其常見(jiàn)提取方式以及相應(yīng)的后續(xù)加工方法。從文中數(shù)據(jù)分析中可以得知，通過(guò)紫外分光光度法對(duì)刺山柑乳膏中的治療成分含量的測(cè)定是比較可靠的，接下來(lái)通過(guò)鹽酸水蘇堿還可以對(duì)刺山柑乳膏進(jìn)樣質(zhì)量濃度與吸光度之間的線性關(guān)系進(jìn)行測(cè)量處理，同樣能夠得到最好的效果。由此可見(jiàn)，目前在刺山柑膏劑提取后進(jìn)行質(zhì)量檢測(cè)的最佳方式就是紫外分光光度法和鹽酸水蘇堿檢測(cè)法的銜接使用，這樣就能夠?qū)ζ滟|(zhì)量進(jìn)行嚴(yán)格控制。