近十年中藥蒸制的研究進展

沈 靈，曾琳琳，劉 翠，賀 倩，陳文文，萬 軍*

（1.西南交通大學生命科學與工程學院，成都 610031；2.成都市婦女兒童中心醫(yī)院，成都 610073）

蒸制為常用中藥炮制方法之一，是指將凈制或切制后的藥物加液體輔料或不加輔料置于蒸制容器內(nèi)，隔水加熱至一定程度的方法，其中不加輔料者為清蒸，加輔料者為加輔料蒸（根據(jù)所加輔料不同，又分為醋蒸、酒蒸、黑豆汁蒸等）[1]。蒸制起源于春秋戰(zhàn)國時期，于唐、宋朝得到發(fā)展，明、清時代達到頂峰，一直延續(xù)至今。本文對近十年中藥蒸制研究的文獻進行查閱與分析，為規(guī)范中藥蒸制工藝提供參考。

1 蒸制工藝研究

1.1 清蒸工藝 清蒸是一種傳統(tǒng)的炮制方法，至今已有2 000 多年歷史。其目的是為了軟化藥材，便于切制，常見的清蒸中藥有黃芩、人參、木瓜、天麻等。鄭蕾等[2]以五味子醇甲含量為指標，采用響應曲面法優(yōu)選南五味子最佳清蒸工藝，結(jié)果為每10 g 南五味子加水1.71 mL、在pH 7.66 條件下蒸制5.37 h。張英等[3]以黃精多糖及醇、水浸出物含量為指標，采用均勻設計法優(yōu)化清蒸黃精的炮制工藝，得出最佳工藝為清蒸6 h、燜潤12 h，干燥溫度70 ℃。羅旭蔚等[4]以何首烏多糖、還原性糖及水溶性糖含量為指標,得出炮制品較生品含糖量升高，與制首烏補益理論吻合，且最佳工藝條件為蒸制35 h，100 ℃干燥。

目前大部分清蒸工藝中，蒸制時間、溫度及加水量等因素都會影響清蒸工藝，常采用的方法有響應曲面法、均勻設計法、正交試驗法等。

1.2 加輔料蒸工藝 加輔料蒸工藝最早源于張仲景提出的加醋蒸制，至南北朝時期得到較大發(fā)展，明清時期達到巔峰。李培培等[5]利用響應面法優(yōu)化女貞子最佳酒蒸炮制工藝，對黃酒用量、悶潤及蒸制時間三項指標進行考察，發(fā)現(xiàn)紅景天苷隨著蒸制時間的延長含量逐漸升高，與特女貞苷、女貞苷G-13 水解有關，黃酒用量15.14%，悶潤、蒸制時間分別為2.95 h、9.97 h最佳。宋藝君等[6]用總評歸一化法優(yōu)選山茱萸酒蒸炮制工藝，篩選得到黃酒使用量25%，悶潤、蒸制時間分別為2 h、4 h 最佳。李秀芹等[7]利用正交實驗法篩選沙苑子酒蒸最佳炮制工藝，結(jié)果為加酒量30%，悶潤1 h，蒸制3 h 最佳。王冬梅等[8]以總黃酮、皂苷、多糖、醇、水溶物等指標為考察條件，采用多指標綜合評分法、層次分析法和正交試驗法優(yōu)化了玉竹酒蒸炮制工藝為酒潤2 h，酒蒸溫度60 ℃，酒蒸1 h，料液比黃酒:玉竹=20:100。李春等[9]發(fā)現(xiàn)延胡索經(jīng)醋制后延胡索乙素含量提高，可能與炮制過程溶出率增加有關，且工藝為加醋量30%，悶潤及蒸制各2 h 最佳。陳華師等[10]對輔料米醋影響醋香附質(zhì)量進行考察，通過比較樣品外觀及指標成分，得到最佳工藝條件為藥用米醋質(zhì)量20%的水進行稀釋攪勻，悶潤70 h，蒸制壓力及溫度條件為0.10 MPa、110 ℃，蒸制時間大檔4.5 h 或小檔4 h，為提高香附質(zhì)量提供了參考。

由上可見，加輔料蒸工藝相較于清蒸工藝影響因素更多，工藝較復雜。輔料種類依據(jù)藥材性質(zhì)而不同，以黃酒、米醋居多。

1.3 九蒸九曬工藝“九蒸九曬”又稱“九蒸九曝”“九制”，首載于《本草經(jīng)集注》。是一種以中醫(yī)理論為指導，根據(jù)藥材自身性質(zhì)而需要采取的一系列加工處理技術(shù)，屬蒸制工藝的發(fā)展。有研究表明，藥材經(jīng)過九蒸九曬炮制后，不僅有助于藥材干燥，便于儲存，還可以改變藥性，擴大用途，減少不良反應，具有更好的臨床效果[11-12]。常見的九蒸九曬中藥有地黃、何首烏、黃精、山茱萸等[13-16]?！熬耪艟艜瘛惫に囅噍^于前兩種蒸制工藝，操作更加繁瑣復雜，且耗時長，如何簡化“九蒸九曬”工藝，在保證藥材質(zhì)量的前提下，使其適用于工業(yè)化大生產(chǎn)是亟需解決的問題。

2 蒸制對化學成分的影響

2.1 蒽醌類 蒽醌類成分包括蒽醌衍生物及其不同程度的還原產(chǎn)物，具有抗菌、抗氧化、瀉下、抗腫瘤等藥理作用[17-18]，蒽醌類化合物常常在炮制過程中會發(fā)生變化，通過檢測粉末色度值可分析含量。韓慧芬[19]對炮制前后大黃蒽醌類成分進行比較，結(jié)果顯示除大黃酸外，大黃素、蘆薈大黃素、大黃酚、大黃素甲醚含量較生品均有不同程度的增加，抑菌能力較生品無明顯變化。周楊靜等[20]發(fā)現(xiàn)九蒸九曬何首烏較生品游離蒽醌成分含量上升，結(jié)合蒽醌成分和總蒽醌含量下降，可能與生品在炮制過程中結(jié)合蒽醌水解有關。盧吉燕等[21]以二苯乙烯苷類為指標，對比黑豆汁蒸和清蒸何首烏兩種炮制工藝對其含量的影響，發(fā)現(xiàn)隨著炮制時間的延長，二苯乙烯苷類均呈下降趨勢，以黑豆汁蒸4 h 含量最高。另外，壓力的變化也可改變蒽醌類化合物變化臨界點[22]。

2.2 多糖類 植物多糖是由單糖通過α 或β 糖苷鍵組成的化合物?，F(xiàn)代研究表明多糖類化合物具有降脂降糖、抗腫瘤、提高免疫力、抗病毒等多種藥理作用[23]。鄭曉倩等[24]采用高效液相色譜-電噴霧檢測（HPLCCAD）法就黃精九蒸九曬炮制過程中糖類動態(tài)變化分析發(fā)現(xiàn)隨著蒸曬次數(shù)的增加，多糖含量表現(xiàn)為先下降后穩(wěn)定，從生品到五蒸五曬品下降趨勢更明顯，與多糖炮制過程中水解成單糖和低聚糖有關。胡葉青等[25]對比九華黃精野生和栽培種在九蒸九曬炮制過程中的總多糖含量發(fā)現(xiàn)，隨著蒸制次數(shù)的增加，總多糖含量均是先增加后減少，栽培種多糖含量在四蒸四曬達到最高，為31.51%；野生種在五蒸五曬時達到最高，為32.81%。劉明研等[26]考察蒸制時間對滇黃精多糖含量影響發(fā)現(xiàn)蒸制12 h 粗多糖含量達到最高，而繼續(xù)蒸制至24 h 含量下降到4.26%，建議通過控制蒸制時間以獲得不同黃精炮制品。呂立銘等[27]研究發(fā)現(xiàn)黨參清蒸后多糖含量由23.1%降至14.6%，與多糖在炮制過程中發(fā)生水解有關。曹瑞等[28]對比女貞子隔塑料紙蒸和隔紗布蒸兩種方法對多糖含量影響發(fā)現(xiàn)炮制品較生品多糖含量均有提高。方學敏等[29]采用苯酚-硫酸法測定玄參炮制前后多糖的含量，發(fā)現(xiàn)玄參蒸制品較生品多糖得率下降了19.02%，可能與炮制過程中部分多糖溶于水或結(jié)構(gòu)和分布變化有關。

2.3 皂苷類 皂苷類化合物其具有降脂降糖，抗炎，抗氧化，抗衰老，以及調(diào)節(jié)免疫等功能[30]。馬敏敏等[31]考察不同蒸制時間對三七總皂苷影響發(fā)現(xiàn)，隨著蒸制時間的延長，總皂苷含量先升高后下降，以1 h為最佳。孟祥龍等[32]比較清蒸法及綠豆蒸法在不同蒸制時間下對商陸中商陸皂苷甲含量的影響，發(fā)現(xiàn)清蒸、綠豆蒸1 h 后商陸皂苷甲的含量上升，之后隨著炮制時間延長含量逐漸下降；上升原因為加熱初期商陸皂苷庚等成分17 位酯鍵斷裂可生成商陸皂苷甲；繼續(xù)加熱，17 位酯鍵斷裂的同時，還伴隨著部分商陸皂苷甲20 位酯鍵斷裂，導致含量下降。安琪等[33]通過對比蒸制前后西洋參藥材的指紋圖譜表明，人參皂苷Rc，Rg2，Rb2，Rb3，Rd 較生品含量上升，抗氧化和抗結(jié)腸癌細胞活性增強。

2.4 生物堿與黃酮類 蒸制工藝對生物堿和黃酮類化合物也會產(chǎn)生影響。胡靜遠[34]研究表明雙酯型烏頭堿占生附片總酯型烏頭堿的88.12%，而炮制品占比不超過11%。炮制品總酯型烏頭堿含量順序為炒附片>蒸附片＞黑順片，這與附子需經(jīng)炮制方能入藥理論吻合。黎珊等[35]考察不同蒸制時間對佛手化學成分影響發(fā)現(xiàn)，佛手總黃酮含量在5 h 出現(xiàn)峰值，而蒸制2.5 h 時抗氧化能力最強，且蒸制時間對總黃酮含量有顯著性影響。

由此可見，蒸制前后對藥材化學成分影響較大，蒸制過程伴隨化學成分變化。藥物經(jīng)蒸制后，臨床療效及適應證發(fā)生變化與其化學成分的改變有密切關系。

3 蒸制對藥理的影響

蒸制對中藥藥理的影響主要體現(xiàn)在蒸制前、后藥效變化和不良反應。TOH D F 等[36]通過人肝癌細胞系SNU449、HepG2 及SNU182 細胞為模型研究蒸制三七的抗腫瘤作用，發(fā)現(xiàn)蒸制品較生品抗肝癌細胞的活性高。鐘凌云等[37]研究發(fā)現(xiàn)黃精炮制后小鼠免疫作用增強可能與炮制后5-羥甲基糠醛含量顯著增加相關。劉銘超[38]研究發(fā)現(xiàn)制何首烏含藥血清增殖效應優(yōu)于生何首烏，且促使TPO、Kit1g、IL-6 基因的表達優(yōu)于生品，從分子水平解釋了何首烏炮制前后補血功能的差異。馬慕秾等[39]探究黃精不同炮制品對氣陰兩虛模型大鼠的藥效學差異得出，不同炮制品一定程度均能改善模型大鼠癥狀，且四制黃精＞九制黃精。有研究發(fā)現(xiàn)，黃精生品具有“刺人咽喉”不良反應可能與黏液質(zhì)有關，通過酒蒸或者九蒸九曬，可使黏液質(zhì)破壞，從而達到炮制減毒的目的，但其作用機制有待進一步研究。

4 蒸制原理研究

目前，單味藥側(cè)重于炮制增效、減毒原理研究，取得了眾多的研究成果[40]。蒸制減毒原理主要包括加熱使毒副成分分解破壞、凝固變性、揮發(fā)升華；增效原理主要包括改變有效成分結(jié)構(gòu)增大溶解度、消除分解有效成分的有害物質(zhì)、破壞反效成分,突出所需作用、產(chǎn)生新的有效成分等。其中黃精、何首烏、地黃等藥材的蒸制研究報道較多。郜丹等[41]采用超高效液相色譜-四極桿飛行時間串聯(lián)質(zhì)譜（UPLC-Q/TOF-MS）技術(shù)表征何首烏生品及黑豆汁蒸制品化學成分，篩選出順式二苯乙烯苷及大黃素甲醚（兩者可能是何首烏的主要毒性成分），且高壓蒸至36 h后該兩種物質(zhì)才分解。CHEN Q L 等[42]對不同炮制方法三七的抗腫瘤活性進行研究，發(fā)現(xiàn)蒸制三七具有較好的抗癌活性，且三七總皂苷為發(fā)揮藥理作用的有效成分。張穎等[43]采用電感耦合等離子體發(fā)射光譜（ICP-OES）法對地黃不同炮制品無機元素含量進行檢測，發(fā)現(xiàn)在不同炮制品中元素K，Ca，Na，Mg 含量較高，K 含量最高，且生地黃＞鮮地黃＞熟地黃，元素Fe，Mn，Zn，Cu 含量較低，其中Zn 的含量順序為：鮮地黃＞熟地黃＞生地黃；Fe，Mn，Cu 的含量順序為：熟地黃＞生地黃＞鮮地黃，無機元素含量在地黃不同炮制品中差異較大，可作為區(qū)別不同炮制品物質(zhì)基礎之一。

5 小結(jié)

中藥蒸制歷史悠久，品種繁多，積累了歷代醫(yī)家豐富的炮制經(jīng)驗，但也仍存在一些問題，如蒸制工藝終點的判斷多根據(jù)飲片外觀性狀（如顏色、氣味），具有較大的主觀經(jīng)驗，難客觀化；有些復雜的炮制方法在漸漸消失；古醫(yī)籍對劑量單位、蒸制時間及次數(shù)的記載是否需要重新考量與優(yōu)化；各級標準收載的中藥飲片炮制工藝尚無統(tǒng)一標準，主觀性較大，可能會帶來炮制品質(zhì)量參差不齊。筆者認為，建立客觀、可控的中藥蒸制工藝，根據(jù)藥材特性制訂規(guī)范的蒸制技術(shù)，并優(yōu)化設備的型號等可進一步提高其炮制品的品質(zhì)，最大程度確保臨床用藥質(zhì)量。