張 宸, 雒秋江*, 潘 榕, 胡尋江, 臧長江
(1.新疆農(nóng)業(yè)大學動物科學學院動物營養(yǎng)實驗室,新疆 烏魯木齊 830052;2.新疆烏蘇市祥盛通牧業(yè)有限公司,新疆 奎屯 833200)
研究表明,添喂適量的多庫酯(DOC)可提高綿羊和牛的自由采食量、增加氮保留(Zhen等,2021;李昊等,2014a),提高綿羊的屠宰性能(李昊等,2014b)。而添喂適量的聚丙烯酰胺(PAM)也可以提高綿羊和牛的自由采食量(陳沫,2018),增加綿羊氮保留和提高屠宰性能(翟志祥,2019)。然而,目前鮮見關(guān)于DOC或PAM對乳牛采食、消化和產(chǎn)乳性能的報道。乳牛是專門化的產(chǎn)乳畜種,在泌乳期本身自由采食量就較大,其采食和消化特點可能會異于其他畜種,因此添喂DOC或PAM的作用或效果可能會有一定差異,而乳牛生產(chǎn)又是反芻動物營養(yǎng)的重要研究領(lǐng)域。因此,本試驗研究添喂DOC和PAM對乳牛自由采食量、日糧消化率和產(chǎn)乳性能等的影響。
1.1試驗設計 本試驗包括兩個獨立的試驗,即添喂DOC(試驗1)和PAM(試驗2),均在新疆奎屯乳牛場進行。在兩個試驗每期均飼喂相同的飼糧,均選取平均體重約600 kg、約2.3歲、處于泌乳后期[(200~300)d]的一胎次泌乳牛作為試驗動物。每個試驗包括兩期(對照期和試驗期),每期24 d,其中適應期16 d、采樣期8 d。
試驗1于2020年9月21日至11月6日進行,選取56頭乳牛,平均產(chǎn)奶量約22 kg/d。在試驗期添喂DOC 1.2 g/kg飼糧干物質(zhì)。在對照期和試驗期牛舍外的平均氣溫分別為3℃和1℃,牛舍內(nèi)分別為6℃和4℃。
試驗2于2021年3月28日至5月14日進行,選取93頭乳牛,平均產(chǎn)奶量約23 kg/d。在試驗期添喂PAM 2.0 g/kg飼糧干物質(zhì)。在對照期和試驗期牛舍外的平均氣溫分別為12℃和15℃,牛舍內(nèi)分別為10℃和9℃。
在每個試驗的采樣期,采取飼糧樣品、乳樣、牛群糞便和剩料樣品,記錄飼喂量、剩料量、各牛產(chǎn)乳量,測定飼糧、乳樣、糞和剩料樣品的營養(yǎng)素含量,計算牛群自由采食量、(表觀)消化率、乳產(chǎn)量等,以確定添喂DOC和PAM對乳牛營養(yǎng)和泌乳性能的影響。
1.2動物的日糧與飼養(yǎng)管理 依據(jù)奶牛營養(yǎng)和飼養(yǎng)標準(馮仰廉,2000)配制日糧,日糧組成及營養(yǎng)水平見表1。每天飼喂前將原料按比例加入TMR飼料車,邊混合邊加入適量水(使飼糧含水量50%),加水后攪拌10 min,再行投喂。
在兩個試驗中,牛群均在每日9:00和17:00用TMR車投喂飼糧,每次的投喂量約為當日飼喂量的一半。并且每天根據(jù)前一天牛群的采食量調(diào)整當日的飼喂量,使每日的剩料量為總量的3%~5%,以保證自由采食,自由飲水。
試驗添喂的DOC購自江蘇省海安石油化工廠,有效成分含量70%(W/mL),比重1.1。DOC的添加量參照Zhen等(2021),即1.71 g/kg飼糧干物質(zhì)(含有效成分1.2 g)。在試驗期,每次稱取1.08 kg DOC原料,加水8.92 kg稀釋,攪勻后備用。在每天早上和中午用噴壺將稀釋后的DOC均勻噴灑在混合飼糧上,即DOC 1.2 g/kg日糧干物質(zhì)(按有效成分計),再由牛只采食。在試驗期的第1、2天,DOC分別按照35%和70%的量添喂。對照期在飼糧上灑等量的水。
添喂的PAM為市售食品級產(chǎn)品,平均分子質(zhì)量1600萬,固體含量≥90%,執(zhí)行標準為GB 31629-2014。PAM的添加量參照陳沫(2018),即2.0 g/kg飼糧干物質(zhì)。在試驗期,每次添喂前先將PAM粉末(8.00 kg)與4倍重量的麩皮(32.00 kg)混合均勻后備用。在每天早上、中午將混合后的PAM均勻灑撒在飼糧上(即2.0 g PAM/kg日糧干物質(zhì)),再由牛只采食。在試驗期的第1、2天,PAM分別按照50%和75%的量添喂。對照期在飼糧中加入等量的麩皮。
牛群每日在11∶00、17∶00和23∶00擠乳三次。每次擠乳前均用0.02%高錳酸鉀溫水溶液給乳頭浸泡消毒,然后用熱毛巾擦干。擠去頭乳后,進行機器擠乳,最后用新潔爾滅藥浴乳頭。
1.3樣品的收集、處理與保存
1.3.1 飼料和剩料的收集、處理與保存 在每個采樣期前1天,每天取8種原料(即苜蓿干草、玉米秸稈、玉米青貯、玉米、小麥麩、豆粕、棉籽粕和預混料)樣品各1000 g,石粉、磷酸氫鈣各250 g,連續(xù)8 d,陰干。待本期試驗結(jié)束后,將各種樣品分別混合均勻,稱重記錄,再用四分法各取1000 g,全部粉碎后過40目篩,于避光干燥陰涼處密封保存?zhèn)溆谩?/p>
在各采樣期,每天8:00收集全部剩料并陰干,連續(xù)8 d。待該期試驗結(jié)束后,將每天的剩料混合均勻,稱重記錄,再采用四分法留取1000 g,全部粉碎后過40目篩,于避光干燥陰涼處密封保存?zhèn)溆谩?/p>
1.3.2 大群糞的收集、處理與保存 在試驗1、試驗2的各采樣期,每天從牛圈地面隨機分別收集4個新鮮糞樣作為大群糞樣。每個糞樣均取自四個不同的糞堆,每個糞堆收取約450 g,即每個糞樣約重1800 g,稱重后于敞口塑料袋內(nèi)陰干。連續(xù)收糞8 d,即每期有32個糞樣。糞樣在陰干期間每天翻晾,以防發(fā)霉。將糞樣帶回實驗室,分別稱重后全部粉碎過40目篩,于避光干燥陰涼處密封保存?zhèn)溆谩?/p>
1.3.3 乳樣的收集、處理與保存 在各采樣期,每天第一次擠乳時隨機選取4頭牛(記錄牛號),在擠去頭乳后各取乳約50 mL,并在后兩次擠乳時也同樣取乳樣,最后將早、中、晚三次乳樣按4:3:3混合(共100 mL),再加入1 mL重鉻酸鉀防腐劑混合均勻,作為當日乳樣品于4℃冷藏保存,24 h內(nèi)送回實驗室測定。每期連續(xù)采乳樣8 d,共32個樣品。
1.4樣品的分析測定 飼料原料、剩料、糞樣的干物質(zhì)、有機物、粗蛋白質(zhì)、磷和能量的測定均參照楊勝(1993)方法;鈣測定用鄰甲酚酞比色法(傅啟高等,1996);纖維素、半纖維素、酸洗木質(zhì)素采用Van Soest法測定(Van Soes等,1991),其中,半纖維素=NDF-ADF;纖維素=72%H2SO4處理ADF樣品前后差值;酸洗木質(zhì)素=72%H2SO4處理樣品灼燒前后差值。
乳樣中的非脂固形物、乳糖、乳蛋白、乳脂含量用UL80BC型優(yōu)創(chuàng)乳成分分析儀測定;乳中鈣和磷含量的測定方法與飼料原料等的相同,每個測定用量10 g。以上測定均為雙樣,最后取平均值。
1.5結(jié)果計算與統(tǒng)計分析
1.5.1 牛群自由采食量和表觀消化率的計算 每日牛群自由采食量(VFI)(kg/牛)等于每天牛群的日糧飼喂量減去剩料量,再除以牛頭數(shù)。
每日牛群的糞量(AF)(kg/牛)以木質(zhì)素為標記物進行計算,即等于每天牛群采食的木質(zhì)素量除以每千克糞的木質(zhì)素含量,再除以牛頭數(shù)。
每日牛群的日糧消化量(DAD)/(kg/牛)=VFI-AF;
每日牛群的日糧表觀消化率/%=DAD÷VFI×100。
1.5.2 標準乳的計算 在各采樣期,每日隨機測定4頭牛乳樣品的乳脂率,取平均值,作為當日牛群的平均乳脂率,再根據(jù)各牛的當日乳產(chǎn)量計算標準乳產(chǎn)量,即標準乳產(chǎn)量=生鮮乳產(chǎn)量×(0.4+15×乳脂率)(馮仰廉,2000)。
1.5.3 牛群自身營養(yǎng)供應量的估算 將每期牛群采食的可消化能、粗蛋白質(zhì)、鈣和磷的平均值減去乳中的含量(其中能量折算成可消化能計,即乳中消化能=產(chǎn)乳凈能÷0.64÷0.82;乳中蛋白折算成可消化蛋白,即乳中可消化蛋白=乳中蛋白量÷0.60),作為每期牛群可用于自身的營養(yǎng)物質(zhì)供應量(MJ或g/?!),以估算添喂DOC和PAM對乳牛自身營養(yǎng)的影響。
1.5.4 統(tǒng)計分析方法 試驗數(shù)據(jù)以“平均數(shù)±標準差”表示。在每個試驗中利用SPSS 19.0軟件對自由采食量、乳成分、糞成分指標進行單因素方差分析,對產(chǎn)乳量和標準乳產(chǎn)量進行自身配對T檢驗分析。以P<0.05和P<0.01分別作為差異顯著和極顯著的判斷標準。
2.1添喂DOC和PAM對乳牛自由采食量的影響 如表2所示,在試驗1,添喂DOC時,乳牛每日干物質(zhì)、有機物、粗蛋白質(zhì)、鈣、磷和能量的自由采食量比對照期分別增加了17.0%、17.0%、17.1%、16.6%、16.6%和17.0%(P<0.01);在試驗2,添喂PAM時,分別增加了15.2%、15.4%、16.2%、14.8%、14.8%和17.4%(P<0.01);表明添喂DOC和PAM均可顯著提高乳牛的自由采食量,而且二者的效果基本相似。
表2 添喂多庫酯和聚丙烯酰胺對乳牛日均自由采食量的影響
2.2添喂DOC和PAM對乳牛消化的影響 如表3所示,在試驗1,添喂DOC 1.2 g/kg日糧時,乳牛干物質(zhì)、有機物、粗蛋白質(zhì)、纖維素、能量、鈣和磷的表觀消化率分別提高8.1%、5.2%、5.9%、5.3%、4.8%、10.5%(P<0.01)和8.6%(P<0.05);消化量分別增加26.5%、23.1%、24.4%、23.2%、22.7%、29.2%和26.6%(P<0.01)。在試驗2,添喂PAM 2.0 g/kg日糧時,乳牛干物質(zhì)、有機物、粗蛋白質(zhì)、纖維素、能量、鈣和磷的表觀消化率分別提高11.6%、9.0%、10.6%、11.9%、10.9%、32.6%和22.9%(以上均P<0.01);消化量分別增加了28.8%、25.9%、28.9%、29.9%、30.2%、52.3%和41.1%(以上均P<0.01)。表明添喂DOC和PAM都能顯著地提高乳牛的日糧消化率和消化量。
表3 添喂多庫酯和聚丙烯酰胺對乳牛飼糧表觀消化率和消化量的影響
2.3添喂DOC和PAM對乳成分和乳產(chǎn)量的影響 如表4所示,在試驗1,添喂DOC 1.2 g/kg日糧時,牛乳的非脂固形物、乳脂和乳蛋白含量分別增加6.1%、7.9%(P<0.01)和7.9%(P<0.05);在試驗2,添喂PAM 2.0 g/kg日糧時,則分別增加6.0%、6.8%和6.8%(P<0.05);但添喂DOC和PAM對乳的乳糖、鈣和磷含量沒有顯著影響(P>0.05)。
表4 添喂多庫酯和聚丙烯酰胺對生鮮乳成分的影響g/100 g鮮奶
如表5所示,在試驗1,添喂DOC 1.2 g/kg日糧時生鮮乳產(chǎn)量增加8.3%(P<0.01),折成標準乳增加12.8%(P<0.01)。在試驗2,添喂PAM 2.0 g/kg日糧時生鮮乳產(chǎn)量增加5.0%(P<0.01),折成標準乳增加9.0%(P<0.01);表明添喂DOC和PAM時乳牛的產(chǎn)乳性能均顯著提高。
表5 添喂多庫酯和聚丙烯酰胺對乳牛乳產(chǎn)量的影響kg/?!
2.4添喂DOC和PAM對乳牛自身營養(yǎng)物質(zhì)供應量的影響 如表6所示,添喂DOC可使用于乳牛自身營養(yǎng)的能量、粗蛋白質(zhì)、鈣和磷量(以可消化量計)分別增加40.5%、35.7%、45.7%和50.8%;而添喂PAM時分別增加73.6%、56.1%、107.3%和181.1%;提示添喂DOC和PAM不僅提高了乳產(chǎn)量,而且還增加了給乳牛自身的營養(yǎng)物質(zhì)供應量。
表6 添喂多庫酯和聚丙烯酰胺對乳牛自身營養(yǎng)供應量(以可消化量計)的影響
3.1添喂DOC和PAM對乳牛自由采食量的影響 給綿羊添喂DOC 0.4、0.8、1.2、1.6 g/kg日糧,綿羊的干物質(zhì)自由采食量分別提高7.1%、15.1%、1.1%和降低1.0%,表明DOC的作用與添喂劑量有關(guān),并且在0.8 g/kg日糧時添喂DOC提高自由采食量的作用最好(李昊等,2014b)。給綿羊添喂DOC 0.8 g/kg日糧,可提高干物質(zhì)自由采食量30.7%(粗料型日糧)和23.7%(精料型日糧)(李昊等,2014a)。而給新疆雜交褐牛添喂DOC 0.8、1.2和1.6 g/kg日糧,干物質(zhì)自由采食量分別提高12.7%、39.5%和26.6%(Zhen等,2021)。然而,在本試驗添喂DOC(1.2 g/kg日糧)時,乳牛的自由采食量增加17.0%(P<0.01),表明給乳牛添喂DOC的效果與在其他牛和綿羊上的相似,但增加程度低于新疆雜交褐牛,可能與本試驗日糧消化率沒有降低,而且還有提高有關(guān)。
給綿羊添喂PAM 1.0、2.0、3.0和6.0 g/kg日糧,綿羊的干物質(zhì)自由采食量分別提高8.9%、17.9%、8.2%和降低5.5%(陳沫,2018);給新疆雜交褐牛添喂PAM 1.0、2.0、6.0 g/kg日糧,干物質(zhì)自由采食量分別提高5.1%、13.7%和-2.2%(陳燕勤,2022);均表明添喂PAM的作用與添喂劑量有關(guān),而2.0 g/kg日糧比較合適。在本試驗中,添喂PAM(2.0 g/kg日糧),乳牛干物質(zhì)自由采食量提高15.2%(P<0.01),表明就自由采食量而言,給乳牛添喂PAM的作用與在其他牛和綿羊的相似。
3.2添喂DOC和PAM對乳牛消化的影響 添喂DOC 0.8 g/kg日糧時綿羊的干物質(zhì)(表觀)消化率分別提高6.8%(粗料型日糧)或3.4%(精料型日糧),消化量分別增加38.8%(粗料型日糧)或29.1%(精料型日糧)(李昊等,2014b);而給新疆雜交褐牛添喂DOC時消化率降低(Zhen等,2021),在1.2 g/kg日糧時,干物質(zhì)的表觀消化率降低了7.8%,但是由于自由采食量的提高,消化量還是增加了31.4%;表明添喂DOC時不管對日糧的消化率影響怎樣,但消化量都是增加的,而消化率降低可能與自由采食量增加太多有關(guān)。在本試驗添喂DOC時乳牛的干物質(zhì)表觀消化率和消化量分別提高8.1%和26.5%(P<0.01),表明添喂DOC時乳牛日糧的消化率和消化量都會顯著提高。
給綿羊添喂PAM 2.0 g/kg日糧,羔羊的干物質(zhì)(表觀)消化率提高7.3%(95~110日齡)或8.7%(215~230日齡)(翟志祥,2019)。給新疆雜交褐牛添喂2.0 g/kg日糧PAM,干物質(zhì)(表觀)消化率提高12.6%(陳燕勤,2022)。在本試驗,給乳牛添喂PAM時,乳牛的干物質(zhì)(表觀)消化率提高11.6%(P<0.01),表明給乳牛添喂PAM時對日糧消化率的影響與其他牛和綿羊基本相似。
3.3添喂DOC和PAM對乳牛生產(chǎn)性能的影響及機理 在本試驗添喂DOC和PAM均可提高乳產(chǎn)量,而且乳中的非脂固形物、乳脂、乳蛋白含量也顯著增加,可能與乳牛獲得了更多的營養(yǎng)供應有關(guān)。增加營養(yǎng)物質(zhì)的供應,乳脂和乳蛋白的前體物質(zhì)含量會在一定范圍內(nèi)相應增加,進而乳中各營養(yǎng)成分非脂固形物、乳脂、乳蛋白也顯著增加(Xue等,2018;Oelberg等,2014),最終導致乳產(chǎn)量提高。而乳糖對日糧營養(yǎng)調(diào)節(jié)的敏感性較低,日糧營養(yǎng)變化對乳糖含量的影響不顯著(Osorio等,2016)。
乳牛的泌乳量都是以減輕體重來維持的(解湉等,2022),因此維持甚至增加體重是乳牛營養(yǎng)的重要方面。在本試驗,添喂DOC時乳牛的可消化能增加26.1 MJ/牛·d,添喂PAM時增加42.8 MJ/?!,換算為泌乳凈能(=可消化能×0.82×0.64)分別為13.7、22.5 MJ/牛·d,根據(jù)乳牛體況評分(BCS)為3.5,再根據(jù)此時乳牛每千克體增重需泌乳凈能24.43 MJ(NRC,2001),可推測添喂DOC或PAM時乳牛的日增重分別增加561 g和921 g(假定在兩個試驗中試驗期的維持能量需要與對照期的相同),這對改善乳牛營養(yǎng)具有積極作用。
乳牛營養(yǎng)供應的增加可能與瘤胃消化性能的提高有關(guān)。添喂一定劑量的DOC或PAM可減少牛羊瘤胃原蟲數(shù)量,增加細菌數(shù)量,從而提高瘤胃液纖維素消化酶類的活性(黃振,2018;陳沫,2018),進而提高瘤胃消化性能,增加自由采食量和日糧消化量(Zhen等,2021;Hao等,2019;雒秋江等,2014),使牛、羊的營養(yǎng)得到改善,增加氮保留(Zhen等,2021;翟志祥,2019;李昊等,2014a),提高生長性能(翟志祥,2019;李昊等,2014b)。本試驗所添喂的DOC和PAM劑量,是參照以上研究結(jié)果進行選定的,故對瘤胃微生物和消化代謝會有相似的作用,并且本試驗的自采食量和日糧消化率(或消化量)數(shù)據(jù),也與以上研究結(jié)果相似,提示本研究添喂DOC和PAM的作用也應歸功于瘤胃消化性能的提高。
3.4 DOC和PAM的安全性DOC和PAM均為陰離子表面活性劑。DOC又稱為氣溶膠OT,不被腸道吸收,在人醫(yī)上通常用作藥物治療便秘(Poordad等,2008)。研究表明,小鼠DOC經(jīng)口的LD50為1900 mg/kg或1729 mg/kg(李昊等,2014b),而碳酸氫鈉(小蘇打)與醋酸的LD50分別為4220、3300 mg/kg,因此從LD50看DOC的毒性與小蘇打或醋酸的相似。食品級PAM(GB 31629-2014,2014)常用于自來水廠水質(zhì)的凈化(常華,2016),或作為食品添加劑用于甜點、法蘭克福香腸等,在國外(Junhua等,2005;國家食品安全風險評估中心,2021),或作為果汁澄清劑(闕小峰等,2014)和藥片賦型黏接劑(Shengjie等,2015)等。
給乳牛添喂DOC(1.7 g/kg日糧干物質(zhì))或PAM(2.0 g/kg日糧干物質(zhì)),均可顯著提高乳牛的自由采食量、日糧消化率和產(chǎn)乳量,并且能增加給乳牛自身的營養(yǎng)供應量,因而可有效地提高乳牛的生產(chǎn)性能。