四川山地烏骨雞大腸桿菌病的診斷與防治

汪熙來，王曉云，魯志平*

1.成都農(nóng)業(yè)科技職業(yè)學(xué)院，成都 611130；2.四川省遂寧市大英縣農(nóng)業(yè)農(nóng)村局，四川 遂寧 629300

四川山地烏骨雞，國家地理標(biāo)志產(chǎn)品，四川省優(yōu)良地方品種，是由地方土種烏骨雞閉鎖繁育而成，已有300 年以上歷史，該雞種具有烏皮、烏骨、烏肉等基本特征，是四川省獨具特色的品種資源。山地烏骨雞傳統(tǒng)的飼養(yǎng)方式以放養(yǎng)或半舍飼為主，導(dǎo)致細(xì)菌性疾病對其影響較大，尤以大腸桿菌病危害嚴(yán)重，在山地烏骨雞養(yǎng)殖過程中如何對大腸桿菌病進(jìn)行科學(xué)精準(zhǔn)防治尤為重要。

1 病原特點

大腸桿菌病通常是感染致病血清型的大腸埃希氏菌引起的細(xì)菌性傳染疾病。由于雞品種、階段、抵抗力以及病菌的致病因子等存在差異，臨床上會表現(xiàn)出不同的癥狀。該病四季都能發(fā)生，但多發(fā)于秋季和冬春交替季節(jié)，雛雞極易感。該病主要通過消化道傳播，還可通過交配、種蛋、污染的飼料和飲水進(jìn)行傳播。該病容易混合感染或繼發(fā)感染其他疾病，導(dǎo)致死亡率升高。

2 臨床癥狀

大腸桿菌病分為急性型和慢性型。急性病雞多是無臨床癥狀表現(xiàn)而突然倒地死亡。慢性病雞往往出現(xiàn)呆立，精神不振，羽毛蓬松雜亂，相互擁擠，采食量陡然下降，身體明顯消瘦，個別病雞還發(fā)生呼吸困難、腹瀉、糞便較稀呈黃白色、黃綠色。個別病雞臨死前會伴有神經(jīng)癥狀，頭頸向后仰，關(guān)節(jié)腫大，患病雛雞腹部出現(xiàn)腫大。蛋雞感染大腸桿菌病主要表現(xiàn)為產(chǎn)蛋量明顯下降，蛋殼易破碎，多發(fā)卵黃性腹膜炎，即蛋子瘟，大部分蛋雞停止產(chǎn)蛋，解剖后可發(fā)現(xiàn)腹腔內(nèi)有大量破裂的卵黃液[1]。

3 實驗室診斷

3.1 涂片鏡檢

在超凈工作臺下，取疑似大腸桿菌感染瀕死或病死雞只的血液、心臟、肝臟、脾臟等病料制成待檢涂片，用革蘭氏染色法染色后鏡檢，可發(fā)現(xiàn)大量紅色（即革蘭氏陰性菌）、無芽孢，兩端鈍圓的小桿菌。

3.2 分離培養(yǎng)

在無菌條件下，將經(jīng)酒精燈灼燒的無菌接種針逐一插入上訴病料，用平板劃線法分別接種到無菌的麥康凱培養(yǎng)基中，置于37 ℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)18～24 h，可見麥康凱培養(yǎng)基表面長出光滑的粉紅色菌落。挑取單個菌落，接種到無菌麥康凱培養(yǎng)基中進(jìn)行純培養(yǎng)。

3.3 細(xì)菌鑒定

1）常規(guī)鑒定。用腸桿菌科專用細(xì)菌生化鑒定管對分離培養(yǎng)的細(xì)菌進(jìn)行鑒定。將細(xì)菌接種于細(xì)菌生化鑒定管，在恒溫箱中37 ℃進(jìn)行培養(yǎng)，24 h 后觀察結(jié)果。對所有反應(yīng)結(jié)果均進(jìn)行生化編碼，并根據(jù)編碼結(jié)果與參考表格進(jìn)行檢索即可鑒定。

2）分子生物學(xué)鑒定。將疑似大腸桿菌菌落接種到普通營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基中，于37 ℃振蕩培養(yǎng)24 h得到新鮮菌體培養(yǎng)物，提取DNA。配置好PCR 反應(yīng)液，將反應(yīng)液和提取的大腸桿菌DNA 樣品分別加入96 孔板后進(jìn)行PCR 擴(kuò)增反應(yīng)，取擴(kuò)增后的產(chǎn)物進(jìn)行瓊脂糖凝膠電泳，在凝膠成像系統(tǒng)中讀取分析結(jié)果[2]。

4 治療方案

4.1 抗生素治療

致病性大腸桿菌的耐藥性極其復(fù)雜，1 個養(yǎng)殖場通常有多種血清型，不同地域流行的血清型不同。據(jù)調(diào)查和試驗證明大腸桿菌對青霉素類、大環(huán)內(nèi)酯類、氨基糖苷類大部分藥物有很強的耐藥性，在治療過程中幾乎無效。何晴等[3]對四川山地烏骨雞糞源大腸桿菌的耐藥性分析表明，大腸桿菌對頭孢類藥物、新霉素、米諾環(huán)素高度敏感，可以作為四川山地烏骨雞大腸桿菌病的首選藥物。在臨床使用時應(yīng)用多種藥物聯(lián)合或交替使用。隨著大腸桿菌的耐藥性不斷提高，許多抗生素都面臨淘汰，為了降低大腸桿菌的耐藥性，更好地防控大腸桿菌病，不僅要改進(jìn)傳統(tǒng)用藥方法，還需研究新的逆轉(zhuǎn)耐藥菌藥物。

4.2 中藥治療

五味子、黃連、訶子、小魚眼草、涼粉草、大青葉等單方中草藥加水煎煮，煎煮后濾掉藥渣，待藥湯溫度降至常溫后給雞飲用，連續(xù)使用1 周能有效抑菌。黃連解毒湯、清瘟敗毒散、銀翹散、白頭翁湯、雙黃連口服液等復(fù)方中草藥制劑添加到飼料或飲水中，對大腸桿菌均有一定的防治效果。

5 預(yù)防措施

5.1 合理選址規(guī)劃

建設(shè)養(yǎng)殖場要合理選址，確保養(yǎng)殖場附近水源充足、無污染，交通方便，遠(yuǎn)離村莊集鎮(zhèn)，方圓3 km沒有畜禽養(yǎng)殖場。養(yǎng)殖場內(nèi)要合理布局，如生活區(qū)，生產(chǎn)區(qū)，隔離區(qū)等，不同區(qū)域至少間隔300 m。

5.2 加強飼養(yǎng)管理

養(yǎng)殖員要加強雞群飼養(yǎng)管理，選擇優(yōu)質(zhì)且營養(yǎng)全面的飼料科學(xué)飼養(yǎng)，合理控制室內(nèi)溫濕度和光照。定時清理糞污、散落的飼料等，保證雞群適宜的生長環(huán)境。合理控制飼養(yǎng)密度，舍內(nèi)應(yīng)安裝風(fēng)機(jī)通風(fēng)換氣、降低舍內(nèi)有害氣體濃度。飼養(yǎng)環(huán)境較差的養(yǎng)殖場容易使雞群出現(xiàn)應(yīng)激反應(yīng)，導(dǎo)致雞群抵抗力降低，空氣中的病原菌（如大腸桿菌等）就會趁機(jī)侵入體內(nèi)而引發(fā)各類疫病。

5.3 加強消毒

每個養(yǎng)殖場應(yīng)根據(jù)自身實際情況制定合理的消毒計劃并開展消毒工作，避免大腸桿菌等病原菌大面積滋生和蔓延。在飲水中加入0.1%過硫酸氫鉀粉進(jìn)行消毒，飼喂干凈無污染的全價飼料，同時加強飼料管理，防止飼料發(fā)霉變質(zhì)。養(yǎng)殖人員還應(yīng)驅(qū)除舍內(nèi)的蚊蠅鼠蟲，防止蚊蠅鼠蟲攜帶的有害病原微生物感染雞群。

可選擇0.3%過硫酸氫鉀溶液或0.2%戊二醛癸甲溴銨溶液帶雞消毒，雞舍墻面用石灰水消毒，養(yǎng)殖場地面可用2%氫氧化鈉溶液噴灑消毒。進(jìn)出養(yǎng)殖區(qū)的所有工作人員應(yīng)進(jìn)行徹底消毒，不得將生產(chǎn)區(qū)的衣物帶離生產(chǎn)區(qū)。外來車輛人員必須進(jìn)行徹底消毒后方可進(jìn)場，一般情況禁止外來人員入場。

5.4 微生態(tài)制劑預(yù)防

大腸桿菌是一種消化道的共生寄生菌，也是一種條件致病菌?？梢栽陲暳现醒a充微生態(tài)制劑（如枯草芽孢桿菌、乳酸球桿菌等）來保護(hù)腸道內(nèi)的有益菌群，維持腸道內(nèi)微生物含量動態(tài)平衡，也可避免抗生素殘留等不良問題。據(jù)調(diào)查，飼料中添加微生態(tài)制劑的養(yǎng)殖場大腸桿菌發(fā)病幾率普遍降低，對大腸桿菌病有很好的抑制作用[4]。

5.5 科學(xué)免疫接種

科學(xué)地免疫接種能有效預(yù)防各類動物疫病的發(fā)生和蔓延，接種疫苗可以提高機(jī)體對特定病原微生物的抵抗力，畜禽養(yǎng)殖從業(yè)者應(yīng)高度重視疫苗接種工作。目前，大腸桿菌病常見的血清型有數(shù)百種，根據(jù)菌體抗原、表面抗原和鞭毛抗原的不同，隨機(jī)組合會產(chǎn)生多種血清型的大腸桿菌，每個地區(qū)流行的大腸桿菌血清型都不一致，甚至1 個養(yǎng)殖場有多種血清型流行。選擇疫苗時應(yīng)與所在地區(qū)流行血清型匹配的疫苗進(jìn)行接種。在預(yù)防大腸桿菌的同時還應(yīng)預(yù)防其他疫病繼發(fā)感染和混合感染。

5.6 禁止濫用抗生素

為了預(yù)防大腸桿菌病，養(yǎng)殖戶長期違規(guī)使用大量抗生素藥物，導(dǎo)致大腸桿菌產(chǎn)生耐藥性，同時造成雞腸道內(nèi)的正常菌群失衡，致使雞群抵抗力明顯下降，終而誘發(fā)該病。同時，大量使用抗生素會造成畜產(chǎn)品藥殘超標(biāo)，影響畜產(chǎn)品質(zhì)量。

6 結(jié) 語

大腸桿菌病是家禽養(yǎng)殖業(yè)中常見易發(fā)的細(xì)菌性傳染病，禽大腸桿菌病是機(jī)體免疫力下降或環(huán)境中細(xì)菌負(fù)荷高引起的一種發(fā)生在弱體動物身上的疾病，主要誘因有疾病、飼養(yǎng)條件、免疫反應(yīng)等[5]。發(fā)生大腸桿菌病時應(yīng)及時將發(fā)病雞與正常雞隔離，并對雞舍徹底消毒，防止大腸桿菌病蔓延擴(kuò)散；診斷大腸桿菌病時，應(yīng)根據(jù)地區(qū)流行情況及臨床癥狀進(jìn)行精確診斷。在獸醫(yī)指導(dǎo)下，選擇合理的治療方案。治療大腸桿菌病應(yīng)選擇多種藥物輪換使用，避免使用單一抗生素，防止細(xì)菌產(chǎn)生耐藥性。在日常養(yǎng)殖生產(chǎn)中，應(yīng)采取科學(xué)的飼養(yǎng)管理、免疫接種、消毒預(yù)防等防控方法，給雞群提供適宜的生長環(huán)境，降低疾病發(fā)生幾率及養(yǎng)殖成本，確保養(yǎng)殖戶獲得更高的收益。