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    載有卵磷脂的納米纖維膜的制備及其抗細(xì)胞黏附性能評(píng)價(jià)

    2022-12-09 02:20:56曾羽佳
    關(guān)鍵詞:斷裂強(qiáng)度紡絲纖維細(xì)胞

    曾羽佳, 毛 迎,b, 李 彥,b, 王 璐,b

    (東華大學(xué) a.紡織學(xué)院, b.紡織面料技術(shù)教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室, 上海 201620)

    腹腔粘連是腹膜創(chuàng)傷后的常見(jiàn)反應(yīng),是腹部手術(shù)后臟器與腹壁的病理性改變,表現(xiàn)為增生的纖維組織黏附到附近的正常器官,這是長(zhǎng)期困擾外科領(lǐng)域的重要問(wèn)題之一[1-2]。研究[3-4]表明,腹部手術(shù)后腹膜粘連率近80%,會(huì)導(dǎo)致腸梗阻、不孕及盆腔疼痛等嚴(yán)重后果。術(shù)后粘連的形成過(guò)程非常復(fù)雜,目前研究[1,5-6]認(rèn)為,腹腔損傷、炎癥及缺氧會(huì)改變腹腔內(nèi)微環(huán)境,導(dǎo)致纖維蛋白沉積,形成疏松的粘連,進(jìn)而成纖維細(xì)胞增殖,逐漸形成膠原后毛細(xì)血管長(zhǎng)入其中,形成永久粘連。

    目前,物理屏障是較為常見(jiàn)的防粘連方法,通過(guò)物理阻隔作用隔離手術(shù)創(chuàng)面與其他組織,從而預(yù)防腹腔粘連的形成[7-8]。然而材料植入體內(nèi)后與生物組織發(fā)生反應(yīng),蛋白質(zhì)會(huì)迅速沉積在材料上,進(jìn)而使細(xì)胞組織在其表面黏附增殖,影響植入物理屏障的防粘連作用。理想的防粘連膜需要有可降解性,研究[3,9]表明從腹膜損傷到完全修復(fù)至少需要8 d,現(xiàn)有商用防粘連膜降解時(shí)間為1 ~4星期不等。商用防粘連膜多為致密結(jié)構(gòu),而靜電紡膜相比致密膜具有高孔隙率,有利于傷口產(chǎn)生的液體滲出及營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的運(yùn)輸,同時(shí)具有的小孔徑可防止細(xì)胞長(zhǎng)入[10-11]。為提升纖維膜的防粘連性能,有學(xué)者將功能性試劑添加至纖維膜中。Mao等[12]研究表明,負(fù)載布洛芬的聚乳酸-乙酸共聚物/聚己內(nèi)酯電紡膜具有良好的抗細(xì)胞黏附效果;Li等[6]研究表明,加入聚乙二醇的聚乳酸-乙酸共聚物混紡膜具有良好的抗細(xì)胞黏附性。但上述研究中,藥物的使用易產(chǎn)生不良反應(yīng),聚乙二醇易被水解洗脫,存在抗黏附效果不穩(wěn)定等問(wèn)題。因此,制備一種穩(wěn)定可持續(xù)防粘連的物理屏障是防粘連領(lǐng)域的研究重點(diǎn)之一。

    材料表面的蛋白吸附為細(xì)胞黏附提供了條件,兩親性物質(zhì)被證實(shí)可修飾于材料表面,從而形成水化層阻礙蛋白與材料表面的直接接觸,進(jìn)而減少蛋白黏附[13-14]。卵磷脂(phosphatidylcholine, PC)是細(xì)胞膜的主要成分,具有兩親性[15-16]。廖祝勝[17]研究表明,經(jīng)過(guò)PC改性的聚乙烯膜可展現(xiàn)出良好的抗蛋白吸附能力,因而推測(cè)PC有作為抗細(xì)胞黏附的功能試劑的潛力。聚乳酸(polylactic acid,PLA)是一種可降解材料,細(xì)胞親和力較低,有利于防止細(xì)胞黏附[18]。但PLA降解時(shí)間較長(zhǎng),在PLA中添加聚乙醇酸(polyglycolic acid,PGA)可調(diào)節(jié)PLA的降解速率,在保證總體降解量的同時(shí)提供有效時(shí)間內(nèi)必要的力學(xué)性能[19-20]。

    綜上,考慮到具有兩親性的PC可在共混材料中均勻分布,有望在防粘連膜植入人體后PC仍保持穩(wěn)定的親水性。因此,本文選用PC作為添加劑,以PGA/PLA為基材,利用靜電紡絲法制備纖維膜,以期該纖維膜在防粘連方面獲得應(yīng)用。通過(guò)調(diào)整PC在PGA/PLA紡絲液中的比例,制備4種具有不同PC含量的纖維膜,研究分析添加PC對(duì)復(fù)合纖維膜的力學(xué)性能、潤(rùn)濕性、降解性能及抗細(xì)胞黏附性的影響。

    1 試驗(yàn)部分

    1.1 試驗(yàn)材料與儀器

    PLA(相對(duì)分子質(zhì)量Mw=8萬(wàn),羅恩試劑),PGA(Mw=15萬(wàn),上海麥克林),六氟異丙醇(HFIP,純度≥99.8%,上海阿拉丁),PC(純度>90%,上海麥克林),氯化鈉(NaCl,優(yōu)級(jí)純,國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司),氯化鉀(KCl,優(yōu)級(jí)純,國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司),磷酸氫二鈉(Na2HPO4,分析純,國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司),磷酸二氫鉀(KH2PO4,分析純,國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司),小鼠成纖維細(xì)胞(L-929,中國(guó)科學(xué)院上海細(xì)胞庫(kù)),細(xì)胞計(jì)數(shù)試劑盒(CCK-8試劑盒,上海翊圣生物科技有限公司),DMEM培養(yǎng)基(Gibco),胰酶(Trypsin-EDTA,0.25%,Gibco),胎牛血清(FBS,Gibco),DAPI染液(上海翊圣生物科技有限公司),青霉素-鏈霉素(美國(guó)Thermo),4%多聚甲醛(上海翊圣生物科技有限公司)。

    靜電紡絲機(jī)(ET-2535H型,北京永康樂(lè)科技發(fā)展有限公司),電子天平(FA2204C型,上海賽德利思精密儀器儀表有限公司),恒溫磁力攪拌器(524G型,上海梅穎儀器儀表制造有限公司),場(chǎng)發(fā)射掃描電鏡(SU8010型,日本日立),醫(yī)用紡織品多功能強(qiáng)力儀(YG(B)026G-500型,大榮儀器),臺(tái)式乳膠測(cè)厚儀(CH-12.7-BTSX型,上海添時(shí)科學(xué)儀器有限公司),接觸角測(cè)試儀(OCA20型,德國(guó)DATAPHYSICS公司),傅里葉變換紅外光譜儀(Spectrum Two型,珀金埃爾默企業(yè)管理(上海)有限公司),酶標(biāo)儀(M200型,瑞士Tecan),熒光倒置顯微鏡(Nikon Ti-s型,日本日立)。

    1.2 試驗(yàn)方法

    1.2.1 紡絲原液的配制

    稱取不同質(zhì)量的PGA、PLA、PC溶解于HFIP中,室溫下置于磁力攪拌器攪拌12 h至溶解并完全混合均勻。PGA、PLA、PC混合溶液中各成分含量如表1所示。

    表1 PGA/PLA/PC混合溶液中各成分的含量

    1.2.2 混紡膜的制備

    將配制的紡絲原液注入10 mL的注射器中進(jìn)行靜電紡絲,用鋁箔紙接收納米纖維。紡絲參數(shù):紡絲速率為1 mL/h、紡絲電壓為15 kV、接收距離為15 cm、紡絲溫度為30 ℃、紡絲相對(duì)濕度為50% ~65%、針頭型號(hào)為20 G。紡絲結(jié)束后,取下接收板上的鋁箔紙,在真空干燥箱中于40 ℃下烘干12 h以去除殘留的溶劑。

    1.3 結(jié)構(gòu)與性能測(cè)試

    1.3.1 表面形貌

    將復(fù)合纖維膜裁剪合適大小后用導(dǎo)電膠貼在電鏡臺(tái)上并噴金,使用場(chǎng)發(fā)射掃描電子顯微鏡觀察纖維形貌。使用圖像分析軟件Image J測(cè)量100根不同纖維直徑并進(jìn)行分析,以獲得纖維平均直徑及其分布。

    1.3.2 紅外測(cè)試

    采用紅外光譜儀對(duì)各復(fù)合纖維膜表面的化學(xué)鍵類別與分布進(jìn)行測(cè)試分析,掃描波數(shù)為4 000~400 cm-1。

    1.3.3 力學(xué)性能

    將復(fù)合纖維膜裁剪成30 mm×10 mm的矩形,室溫下用多功能強(qiáng)力儀測(cè)量各復(fù)合纖維膜的斷裂強(qiáng)度和斷裂伸長(zhǎng)率。設(shè)置初始隔距為20 mm,拉伸速度為10 mm/min,預(yù)加張力為0.1 N,每個(gè)試樣測(cè)量3次。采用臺(tái)式乳膠測(cè)厚儀測(cè)量復(fù)合纖維膜的厚度,測(cè)量3次求取平均值,并繪制應(yīng)力-應(yīng)變曲線。

    1.3.4 水接觸角

    對(duì)各復(fù)合纖維膜進(jìn)行靜態(tài)水接觸角測(cè)試。使用去離子水,體積為2 μL,滴加速率為2 μL/s,水滴接觸纖維膜后靜置30 s,分別測(cè)量水滴接觸纖維膜1、5、10、30 s后的接觸角,每種試樣隨機(jī)取3個(gè)點(diǎn)測(cè)量并取平均值。

    1.3.5 降解性能

    使用磷酸緩沖鹽(PBS)溶液模擬人體內(nèi)降解環(huán)境,稱取8.0 g NaCl、0.24 g KH2PO4、1.44 g Na2HPO4、0.2 g KCl溶解于800 mL去離子水中,充分?jǐn)嚢韬笳{(diào)節(jié)pH值至7.4,定容為1 000 mL,以備使用。

    將復(fù)合纖維膜裁剪成20 mm×80 mm的矩形,烘干稱量后放入離心管中,每個(gè)離心管加入30 mL PBS溶液,置于37 ℃恒溫?fù)u床中,隔天換液,第4、7、14、21、28 d取出,冷凍干燥后計(jì)算復(fù)合纖維膜剩余質(zhì)量分?jǐn)?shù)(w),計(jì)算式如式(1)所示。

    (1)

    式中:m0為復(fù)合纖維膜的初始質(zhì)量;m1為復(fù)合纖維膜降解后質(zhì)量。

    對(duì)部分樣品拍攝電鏡照片以觀察其形貌以及測(cè)量降解后纖維膜的力學(xué)性能,操作步驟及參數(shù)同第1.3.1、1.3.3節(jié)。

    1.3.6 抗細(xì)胞黏附試驗(yàn)

    (1)材料準(zhǔn)備。將纖維膜裁剪成直徑為14 mm的圓片,每種試樣準(zhǔn)備3個(gè)平行樣放置于24孔板內(nèi),用滅菌后的不銹鋼鋼環(huán)固定,放入酒精蒸缸內(nèi)24 h,然后轉(zhuǎn)移至超凈臺(tái)內(nèi)放置,用PBS溶液清洗3次。

    (2)細(xì)胞培養(yǎng)與種植。將L-929細(xì)胞置于含89%DMEM、10%胎牛血清和1%雙抗的完全培養(yǎng)基中,在37 ℃、5%CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。當(dāng)培養(yǎng)至所需數(shù)量后種植在樣品上,細(xì)胞種植密度為每孔2×104個(gè),在培養(yǎng)箱中分別培養(yǎng)1、3、5 d,隔天換液。

    (3)細(xì)胞增殖定量測(cè)試。采用CCK-8法檢測(cè)細(xì)胞增殖。避光配制含90%DMEM、10%CCK-8的CCK-8工作液,細(xì)胞培養(yǎng)到預(yù)定時(shí)間后去除培養(yǎng)基,添加PBS溶液清洗細(xì)胞3次以除去未貼壁的游離細(xì)胞,然后每孔避光加入500 μL CCK-8工作液,放入37 ℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)3 h后吸取上清液至96孔板中,每孔容量為100 μL。然后使用酶標(biāo)儀測(cè)定上清液在450 nm處的吸光度值,并且按式(2)計(jì)算細(xì)胞增殖率。

    (2)

    式中:R為細(xì)胞增殖率;a為不同時(shí)間點(diǎn)試驗(yàn)組的吸光度值;b為培養(yǎng)時(shí)間最長(zhǎng)的空白對(duì)照組的吸光度值。

    (4)DAPI熒光染色。為了更好地直接觀察細(xì)胞黏附情況,采用DAPI染液對(duì)細(xì)胞核染色,對(duì)細(xì)胞進(jìn)行染色觀察。將培養(yǎng)細(xì)胞的培養(yǎng)基吸出,經(jīng)PBS溶液漂洗3次后,加入500 μL質(zhì)量分?jǐn)?shù)為4%的多聚甲醛將細(xì)胞固定1 h,吸除多聚甲醛后用PBS溶液浸洗3次,使用0.5%Triton X-100通透5 min,然后用PBS溶液再浸洗3次,每孔避光加入200 μL的DAPI,孵育5 min,用PBS溶液浸洗3次洗去多余的DAPI。選用潔凈的蓋玻片,將有細(xì)胞的一面貼于蓋玻片表面置于熒光顯微鏡下觀察,以合適倍數(shù)拍攝。

    2 結(jié)果與討論

    2.1 形貌分析

    混合不同質(zhì)量濃度PC的PGA/PLA纖維膜SEM圖及纖維直徑分布圖如圖1所示。由圖1可知,添加不同質(zhì)量濃度PC的PGA/PLA混合紡絲液均能形成均勻完整、表面無(wú)串珠、無(wú)規(guī)律分布的纖維膜,纖維直徑隨PC質(zhì)量濃度的增加而增加,0PC、2.5PC、5PC、10PC樣品的纖維平均直徑分別為300、310、350、410 nm,且10PC樣品中出現(xiàn)了纖維輕微黏結(jié)現(xiàn)象。該現(xiàn)象主要?dú)w因于PC含有親水的磷酸基,易吸收空氣中的水分,當(dāng)PC在纖維膜中的占比增大時(shí),紡絲過(guò)程中溶劑的揮發(fā)受到了抑制,因此造成纖維因溶劑殘留而發(fā)生黏結(jié)。

    圖1 PGA/PLA與不同質(zhì)量濃度PC復(fù)合的纖維膜的SEM圖及纖維直徑分布Fig.1 SEM images and fiber diameter distribution of PGA/PLA composite fiber membranes with different mass concentrations of PC

    2.2 紅外分析

    圖2 PGA/PLA與不同質(zhì)量濃度PC復(fù)合的纖維膜的傅里葉變換紅外光譜Fig.2 Fourier transform infrared spectra of PGA/PLA composite fiber membranes with different mass concentrations of PC

    2.3 力學(xué)性能分析

    作為防粘連膜使用時(shí),纖維膜需要具備一定的力學(xué)性能,因此對(duì)含不同質(zhì)量濃度PC的PGA/PLA復(fù)合纖維膜力學(xué)性能進(jìn)行研究。圖3(a)為含不同質(zhì)量濃度PC的PGA/PLA復(fù)合纖維膜應(yīng)力-應(yīng)變曲線,圖3(b)為各纖維膜的斷裂強(qiáng)度與斷裂伸長(zhǎng)率。由圖3可知,PC的加入顯著影響復(fù)合纖維膜的斷裂強(qiáng)度和斷裂伸長(zhǎng)率,0PC和2.5PC樣品的斷裂強(qiáng)度分別為4.97和3.52 MPa,但隨著PC質(zhì)量濃度的增加,纖維膜的斷裂強(qiáng)度逐漸提高。這可能是由于纖維的直徑有所增大,纖維膜中存在的黏結(jié)有效提高了纖維間的相互作用。同時(shí)加入PC越多,復(fù)合纖維膜的斷裂伸長(zhǎng)率越小。力學(xué)測(cè)試結(jié)果表明,PC的加入降低了PGA/PLA復(fù)合纖維膜的力學(xué)性能。這可能與PGA/PLA聚合物的含量下降有關(guān),但斷裂強(qiáng)度最低的2.5PC樣品纖維膜所能承受的斷裂強(qiáng)度也高于人體在運(yùn)動(dòng)時(shí)33.6 kPa的腹內(nèi)壓強(qiáng)[21-22]。

    圖3 PGA/PLA與不同質(zhì)量濃度PC復(fù)合的纖維膜應(yīng)力-應(yīng)變曲線圖及斷裂強(qiáng)度與斷裂伸長(zhǎng)率Fig.3 Stress-strain curves, breaking strength and elongation rate at break of PGA/PLA composite fiber membranes with different mass concentrations of PC

    2.4 水接觸角分析

    水接觸角是表征材料潤(rùn)濕性的常用方法。為了驗(yàn)證PC加入后對(duì)PGA/PLA復(fù)合纖維膜親水性的影響,對(duì)加入不同質(zhì)量濃度PC的復(fù)合纖維膜進(jìn)行水接觸角測(cè)試,結(jié)果如圖4所示。

    圖4 PGA/PLA與不同質(zhì)量濃度PC復(fù)合的纖維膜水接觸角Fig.4 Water contact angle of PGA/PLA composite fiber membrane with different mass concentrations of PC

    由圖4可知,不添加PC的PGA/PLA為疏水纖維膜,水接觸角大于130°且在30 s內(nèi)比較穩(wěn)定。0PC、2.5PC、5PC、10PC樣品在1 s的水接觸角分別為130.33°±1.46°、13.97°±1.31°、19.60°±0.95°、24.33°±0.70°,在30 s的接觸角分別為130.80°±0.53°、0、8.23°±0.32°、11.73°±0.83°,由此可見(jiàn)加入PC后纖維膜由疏水變?yōu)橛H水。隨PC質(zhì)量濃度增大,去離子水在纖維膜上的浸潤(rùn)速度減慢,說(shuō)明PC質(zhì)量濃度會(huì)影響去離子水在纖維膜上的浸潤(rùn)性,這可能是因?yàn)樘砑覲C使得纖維直徑增大,從而使纖維膜的孔徑減小,導(dǎo)致去離子水更不容易滲入[23]。以上結(jié)果表明,PC的加入可以增加纖維膜的親水性,這對(duì)抗細(xì)胞黏附有一定的積極作用。

    2.5 降解性能

    對(duì)所制備的復(fù)合纖維膜進(jìn)行28 d降解性能評(píng)價(jià),降解后剩余質(zhì)量、剩余強(qiáng)度與降解時(shí)間的關(guān)系如圖5所示,降解0、7、21、28 d的復(fù)合纖維膜SEM圖如圖6所示。所有降解樣品均在28 d內(nèi)保持原有形狀且未解體。由圖5(a)可知:隨著PC質(zhì)量濃度的增加,樣品在28 d內(nèi)的失重率增加;0PC樣品失重最低,在PBS溶液中培養(yǎng)28 d后剩余質(zhì)量分?jǐn)?shù)為67.26%,失重主要源于PGA降解;10PC樣品降解28 d后剩余質(zhì)量分?jǐn)?shù)為29.70%,質(zhì)量損失主要源于PGA的降解和PC溶解??梢杂^察到7 d內(nèi)添加PC的復(fù)合纖維膜質(zhì)量快速下降,主要原因是PC從纖維膜表面溶解,說(shuō)明在5~7 d的粘連形成關(guān)鍵時(shí)期PC持續(xù)存在,7~21 d降解速率比較穩(wěn)定,21~28 d降解速率略有提高。由圖5(b)可知:添加PC的復(fù)合纖維膜在降解后,強(qiáng)度損失會(huì)減??;PC加入越多,剩余強(qiáng)度百分?jǐn)?shù)越大,這可能是因?yàn)榧尤隤C后改善了PLA材料的脆性。10PC樣品在降解21 d后的剩余強(qiáng)度百分?jǐn)?shù)為73.99%,即斷裂強(qiáng)度為3.25 MPa,證明降解21 d后10PC樣品依然可以保持一定的力學(xué)性能。

    圖5 PGA/PLA與不同質(zhì)量濃度PC復(fù)合的纖維膜體外降解剩余質(zhì)量、剩余強(qiáng)度與降解時(shí)間的關(guān)系Fig.5 Relationships between residual mass, residual strength and degradation time of PGA/PLA composite fiber membranes with different mass concentrations of PC in vitro

    由圖6可知,0PC樣品在降解21、28 d出現(xiàn)了較多纖維斷裂,10PC樣品未出現(xiàn)纖維斷裂,但單根纖維變細(xì)。這可能是由于添加PC后復(fù)合纖維膜由疏水變?yōu)橛H水,研究[21]表明疏水材料通常發(fā)生表面降解,親水材料可以改善水的擴(kuò)散,降解時(shí)水可以進(jìn)入材料內(nèi)部,從而發(fā)生本體降解。

    圖6 PGA/PLA與不同質(zhì)量濃度PC復(fù)合的纖維膜降解0、7、21、28 d后的SEM圖Fig.6 SEM images of PGA/PLA composite fiber membranes with different mass concentrations of PC after 0, 7, 21 and 28 days degradation

    2.6 細(xì)胞黏附行為研究

    研究[12]證明,靜電紡纖維膜因獨(dú)特的微納孔結(jié)構(gòu),具有阻止成纖維細(xì)胞入侵和穿透的能力,但成纖維細(xì)胞仍可在纖維膜上黏附和增殖。將PC加入PGA/PLA復(fù)合纖維膜的最終目的是提高纖維膜親水抗污性,從而抑制成纖維細(xì)胞的黏附,為了評(píng)價(jià)所制備的復(fù)合纖維膜是否有抗粘連應(yīng)用潛力,采用CCK-8及熒光染色法對(duì)含有不同質(zhì)量濃度PC的PGA/PLA復(fù)合纖維膜進(jìn)行細(xì)胞黏附和增殖分析,測(cè)試結(jié)果如圖7和8所示。

    圖7 L-929細(xì)胞在PGA/PLA與不同質(zhì)量濃度PC復(fù)合的纖維膜上的吸光度及增殖率Fig.7 Absorbance and growth rate of L-929 cells in PGA/PLA composite fiber membranes with different mass concentrations of PC

    圖8 L-929細(xì)胞在樣品表面黏附的熒光顯微鏡照片F(xiàn)ig.8 Fluorescence microscope images of L-929 cells adhering to the sample surface

    由圖7(a)可知,L-929成纖維細(xì)胞在每種纖維膜上的數(shù)量隨時(shí)間延長(zhǎng)而逐漸增加。經(jīng)計(jì)算可知,培養(yǎng)1、3、5 d后0PC樣品上的細(xì)胞數(shù)量分別為空白對(duì)照組(TCP)的95.59%、106.86%、98.44%,始終保持較高的細(xì)胞活力。在培養(yǎng)1、3、5 d后,L-929成纖維細(xì)胞在含有PC的復(fù)合纖維膜上的數(shù)量明顯少于純PGA/PLA纖維膜及空白對(duì)照組,且PC質(zhì)量濃度越大則細(xì)胞數(shù)量越少。由圖7(b)可知,空白對(duì)照組及0PC、2.5PC樣品上的細(xì)胞數(shù)量隨時(shí)間增加而增多,5PC、10PC樣品上的細(xì)胞在第5 d增殖率有所下降,表明添加質(zhì)量濃度為0.05 g/mL以上PC的樣品對(duì)細(xì)胞增殖有較好的抑制作用。綜上所述,添加PC的復(fù)合纖維膜可以有效抑制成纖維細(xì)胞在纖維膜上的黏附和增殖,且含PC越多則抗黏附效果越好。雖然10PC樣品水接觸角略大于5PC及2.5PC樣品,但也具有良好的親水性,僅由于纖維形貌影響了去離子水的浸潤(rùn)速度,細(xì)胞試驗(yàn)及防粘連膜植入人體時(shí),纖維膜處在液體環(huán)境下已被完全浸潤(rùn)形成水化層,因此10PC樣品的抗細(xì)胞黏附效果最好,可能是由于PC質(zhì)量濃度增加使纖維膜表面的水化層效果增強(qiáng)。

    從圖8可以看出:L-929成纖維細(xì)胞在空白對(duì)照組及0PC樣品上生長(zhǎng)得較為密集,隨培養(yǎng)時(shí)間的增加,黏附細(xì)胞增多;加入PC后對(duì)細(xì)胞增殖有一定的抑制作用,10PC樣品黏附的細(xì)胞數(shù)量最少,具有良好的抗黏附效果,可以起到防黏附屏障作用。

    3 結(jié) 論

    (1)PGA/PLA與PC共混后進(jìn)行靜電紡絲,制備了纖維形貌良好的納米纖維膜,纖維直徑隨PC質(zhì)量濃度升高而增大,紅外光譜證實(shí)PC已被成功負(fù)載在纖維膜中。

    (2)通過(guò)在PGA/PLA纖維膜中添加PC,纖維膜由疏水轉(zhuǎn)變?yōu)橛H水,證實(shí)添加PC可顯著改善纖維膜的親水性。

    (3)在PGA/PLA纖維膜中添加PC對(duì)纖維膜的力學(xué)性能影響較大,斷裂強(qiáng)度和斷裂伸長(zhǎng)率均會(huì)降低,但纖維膜斷裂強(qiáng)度隨著PC質(zhì)量濃度的增加而增大,且斷裂強(qiáng)度最低的2.5PC纖維膜也有較好的力學(xué)性能。

    (4)添加PC后纖維膜在28 d內(nèi)質(zhì)量損失較0PC纖維膜顯著增大,但28 d內(nèi)仍可保持原有形狀且未解體,添加PC可改善PGA/PLA纖維膜降解后的力學(xué)性能。

    (5)由細(xì)胞增殖及熒光染色試驗(yàn)表明,含PC的PGA/PLA纖維膜具有良好的抗L-929成纖維細(xì)胞增殖和黏附效果,其中10PC纖維膜的抗黏附效果最好。

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