飼糧添加膽汁酸對16～23周齡日本鵪鶉生產(chǎn)性能、蛋殼品質(zhì)和鈣磷表觀代謝率的影響

肖圓圓 袁 琪 袁劍華 楊凱麗 郝雋毅 卿一青 宋雅婷 方熱軍*

(1.湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)動物科學(xué)技術(shù)學(xué)院，長沙 410128；2.長沙湘金飼料有限公司，長沙 410000)

目前，我國是世界上最大的鵪鶉蛋生產(chǎn)和消費大國，鵪鶉存欄超5億只，年產(chǎn)蛋量約占世界總產(chǎn)量的60%。2020年，鵪鶉被《國家畜禽遺傳資源目錄》列為傳統(tǒng)畜禽。鵪鶉肉、蛋富含各種人體必需氨基酸和脂肪酸[1]。但隨著日齡的增加，蛋禽腸道對養(yǎng)分和礦物質(zhì)的消化吸收能力下降，由此導(dǎo)致的生產(chǎn)性能降低[2]、蛋殼品質(zhì)下降[3]問題在生產(chǎn)中較為常見，這不利于鵪鶉蛋的生產(chǎn)、收集、儲存和運輸過程，直接影響經(jīng)濟效益，嚴重影響蛋鵪鵪行業(yè)的健康發(fā)展。因此，尋求提升生產(chǎn)性能、改善蛋殼品質(zhì)的有效措施具有重要的實際意義。

生產(chǎn)性能和蛋殼品質(zhì)通常受蛋禽品種、日齡、飼養(yǎng)方式和營養(yǎng)水平等因素的影響[4]。有研究表明，隨蛋雞日齡的增長，雞蛋重量和體積增加，蛋殼重量波動不大[5]，而厚度隨日齡增加而逐漸減低[6]。通過飼糧營養(yǎng)調(diào)控提升蛋鵪鶉生產(chǎn)性能，促進其腸道對鈣的消化吸收，改善蛋殼品質(zhì)成為了當(dāng)前研究熱點之一。膽汁酸(bile acid，BA)是膽汁的主要成分，是膽固醇經(jīng)肝臟分解代謝形成的水溶性膽烷酸的總稱。BA可提高腸道抗炎菌的相對豐度[7]，調(diào)節(jié)腸道內(nèi)pH，加速菌體自溶，抑制有害菌的繁殖[8]。有研究表明，BA可顯著改善肉雛雞腸道黏膜結(jié)構(gòu)[9]，提高腸道胰蛋白酶活性[10]，提高烏鱧生長性能，改善其糖脂代謝[11]；飼糧添加250、500和750 g/t BA可提高產(chǎn)蛋后期海蘭褐蛋雞產(chǎn)蛋率，降低壞蛋率，顯著改善蛋品質(zhì)[12]。以上結(jié)果提示，飼糧添加適宜水平BA可改善腸道健康，有助于腸道對養(yǎng)分的消化吸收，從而促進動物生長發(fā)育。目前BA在肉雞和水產(chǎn)動物生產(chǎn)上的應(yīng)用多有研究，但其對蛋鵪鶉的影響研究鮮有報道，因此，本試驗旨在研究飼糧中添加BA對蛋鵪鶉生產(chǎn)性能、蛋殼品質(zhì)和鈣磷表觀代謝率的影響，為BA在蛋鵪鶉生產(chǎn)中的應(yīng)用提供理論依據(jù)，促進鵪鶉產(chǎn)業(yè)提質(zhì)增效。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

試驗動物日本蛋用鵪鶉由湖南省某公司提供；BA由山東某公司提供，純度為20%。

1.2 試驗設(shè)計

采用單因素試驗設(shè)計，選取產(chǎn)蛋率和體重相近的16周齡日本鵪鶉960只，隨機分為4個組，每組6個重復(fù)，每個重復(fù)40只。對照組飼喂基礎(chǔ)飼糧，試驗組則在基礎(chǔ)飼糧中分別添加40(BA1組)、80(BA2組)和120 mg/kg(BA3組)BA。預(yù)試期1周，正試期6周?；A(chǔ)飼糧參照NRC(1994)及《中國飼料成分及營養(yǎng)價值表(2020)》配制而成，其組成及營養(yǎng)水平見表1。

表1 基礎(chǔ)飼糧組成及營養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ))

續(xù)表1項目 Items含量 Content色氨酸 Try0.22鈣 Ca3.57非植酸磷 NPP0.32

1.3 飼養(yǎng)管理

試驗在湖南省岳陽市鵪鶉試驗基地進行，采用6層立體籠養(yǎng)，縱向負壓通風(fēng)，環(huán)境溫度控制在20～25 ℃，人工控光為16 h/d，顆粒料飼喂。日本鵪鶉自由采食，充足飲水，按正常免疫程序進行免疫接種。

1.4 測定指標(biāo)及方法

1.4.1 生產(chǎn)性能

以重復(fù)為單位，記錄正試期每日產(chǎn)蛋數(shù)、蛋重和不合格蛋數(shù)，及時記錄鵪鶉死淘數(shù)；每周結(jié)料1次并記錄余料量。計算產(chǎn)蛋率、平均蛋重、平均日采食量和料蛋比，計算公式如下：

產(chǎn)蛋率(%)=100×(日產(chǎn)蛋總數(shù)/存欄鵪鶉總數(shù))；
平均蛋重(g)=總蛋重/產(chǎn)蛋數(shù)；
平均日采食量(g/d)=總采食量/存欄鵪鶉數(shù)；
料蛋比=總采食量/總蛋重。

1.4.2 鈣、磷和粗脂肪表觀代謝率

正試期第39～42天，以重復(fù)為單位，每日按五點法收集鮮糞150 g，清理非糞雜物后用10%硫酸固氮，再置于-20 ℃冰箱待測；按四分法采集飼糧樣品150 g，置于4 ℃冰箱以供試驗分析。飼糧和鵪鶉糞樣中鈣、磷含量采用紫外可見分光光度計(UV752型，上海佑科儀器儀表有限公司)測定，粗脂肪含量參照《飼料分析與檢測》[13]方法測定；采用酸不溶灰分法計算表觀代謝率，具體步驟與計算公式參照《飼料中鹽酸不溶灰分的測定》(GB/T 23742—2009)。計算公式如下：

某營養(yǎng)物質(zhì)表觀代謝率(%)=100-[100×
(糞中該營養(yǎng)物質(zhì)含量×飼糧中酸不溶灰分含量/
飼糧中該營養(yǎng)物質(zhì)含量×糞中酸不溶灰分含量)]。

1.4.3 蛋殼表觀品質(zhì)

正試期第6周，對23周齡日本鵪鶉蛋進行取樣，每重復(fù)隨機選取4枚接近重復(fù)平均蛋重的鵪鶉蛋(不含破、軟、沙殼蛋和畸形蛋)，測定蛋殼表觀質(zhì)量，并保留完整蛋殼用于測定蛋殼中鈣、磷含量。

蛋殼表觀品質(zhì)的測定：蛋殼強度用ESTG-01型蛋殼強度分析儀(ORKO，以色列)測定；蛋殼厚度用NFN-380型蛋殼厚度測定儀(FHK，日本)測定。

蛋殼中鈣、磷含量的測定：將完整蛋殼去除殼膜，用溫?zé)嵴麴s水沖洗，使其內(nèi)外表面無污染物黏后60 ℃烘干、粉碎，蛋殼中鈣、磷含量參照《飼料分析與檢測》[13]方法測定。

1.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計與分析

采用SPSS 26.0軟件進行單因素方差分析(one-way ANOVA)，采用Duncan氏法進行多重比較，P<0.05為差異顯著，P<0.01為差異極顯著，0.05

2 結(jié) 果

2.1 飼糧添加BA對16～23周齡日本鵪鶉生產(chǎn)性能的影響

由表2可知，與對照組相比，各試驗組日本鵪鶉產(chǎn)蛋率均有上升趨勢，其中BA2組產(chǎn)蛋率有顯著高于其余各組的趨勢(0.050.05)。

表2 飼糧添加BA對16～23周齡日本鵪鶉生產(chǎn)性能的影響

2.2 飼糧添加BA對日本鵪鶉鈣、磷和粗脂肪表觀代謝率的影響

由表3可知，與對照組相比，各試驗組日本鵪鶉鈣表觀代謝率均極顯著升高(P<0.01)；BA2組磷表觀代謝率極顯著低于其余各組(P<0.01)；與對照組相比，各試驗組粗脂肪表觀代謝率均提高，其中BA1組和BA3組差異極顯著(P<0.01)。

2.3 飼糧添加BA對23周齡日本鵪鶉蛋殼品質(zhì)的影響

由表4可知，試驗組日本鵪鶉蛋殼強度均高于對照組，且BA1組和BA2組蛋殼強度顯著高于對照組(P<0.05)；試驗組蛋殼鈣含量均高于對照組，其中BA1組和BA3組極顯著提高(P<0.01)；試驗組蛋殼磷含量均極顯著低于對照組(P<0.01)，同時BA2組和BA3組極顯著低于BA1組(P<0.01)；飼糧添加BA對蛋殼厚度無顯著影響(P>0.05)。

3 討 論

3.1 飼糧添加BA對16～23周齡日本鵪鶉生產(chǎn)性能的影響

生產(chǎn)性能是決定經(jīng)濟效益的重要指標(biāo)，如何在不影響正常生長的條件下，提高產(chǎn)蛋率和降低料蛋比是禽類生產(chǎn)中急需攻克的難題[14]。目前，關(guān)于BA在鵪鶉生產(chǎn)上的研究鮮見報道。有研究表明，飼糧添加BA對海蘭褐蛋雞產(chǎn)蛋高峰期的產(chǎn)蛋率有提升效果，且顯著改善蛋品質(zhì)[12]。本試驗結(jié)果表明，飼糧添加80 mg/kg BA有提升鵪鶉產(chǎn)蛋率的趨勢，與上述結(jié)果相似。脂肪肝出血綜合征(fatty liver hemorrhagic syndrome,FLHS)是一種營養(yǎng)代謝疾病，在蛋禽產(chǎn)蛋高峰期較為常見，在全球各地有不同程度的發(fā)病，對鵪鶉肝臟造成嚴重損傷的同時,會導(dǎo)致產(chǎn)蛋率大幅下降[15]。鵪鶉產(chǎn)蛋率受自由基含量、卵泡生成激素、黃體生成激素、雌激素和卵巢芳香化酶活性等因素的影響[16]。有研究發(fā)現(xiàn)，鵝去氧膽酸(雞膽汁主要成分)干預(yù)能夠提高FLHS蛋雞肝臟抗氧化能力[17]，從而使肝臟、垂體、卵巢和輸卵管等高產(chǎn)自由基器官免受攻擊[16]，進而影響生殖激素及自由基的水平，這可能也是80 mg/kg BA添加組產(chǎn)蛋率升高的原因。

表3 飼糧添加BA對日本鵪鶉鈣、磷和粗脂肪表觀代謝率的影響

表4 飼糧添加BA對23周齡日本鵪鶉蛋殼品質(zhì)的影響

有研究表明，飼糧添加80、400和600 mg/kg BA可降低肉雞料重比和平均日采食量，顯著提升其生長性能[18-19]。曾佳佳等[20]在蛋雞飼糧中添加中草藥-益生菌-BA復(fù)合制劑也得出了相似的研究結(jié)果。Piekarski等[21]也報道，0.1%和0.5%的鵝去氧膽酸可降低肉雞平均日采食量。本試驗結(jié)果表明，飼糧添加80 mg/kg BA可顯著降低蛋鵪鶉料蛋比。這與上述等人研究結(jié)果相似，這可能與BA參與調(diào)節(jié)膽固醇平衡[22]、促進脂質(zhì)消化吸收有關(guān)。

3.2 飼糧添加BA對日本鵪鶉鈣、磷和粗脂肪表觀代謝率的影響

蛋殼主要由碳酸鈣組成，蛋禽鈣代謝水平直接影響蛋殼品質(zhì)。機體缺鈣、缺磷均會抑制動物采食，導(dǎo)致增重減慢、飼料利用率下降，直接導(dǎo)致料蛋/重比顯著升高；導(dǎo)致產(chǎn)蛋期禽類產(chǎn)蛋受阻，使殼鈣沉積減少、蛋殼軟化，提升壞蛋率，嚴重影響產(chǎn)蛋性能；還易導(dǎo)致骨質(zhì)疏松，影響成年禽類受精卵發(fā)育。由于磷酸鈣鹽的形成，機體不會出現(xiàn)磷過多的情況，但在實際生產(chǎn)中，會導(dǎo)致機體鈣不足、引起骨重吸收而導(dǎo)致骨折，同時還會因消化不良而引起禽類腹瀉。

目前，關(guān)于BA影響蛋鵪鶉腸道對鈣、磷吸收能力的相關(guān)研究未見報道。有研究發(fā)現(xiàn)，在肉雜雞飼糧中添加200、400和600 mg/kg BA，鈣表觀利用率顯著提高[23]。本試驗結(jié)果表明，飼糧添加40、80和120 mg/kg BA均可顯著提升日本鵪鶉對鈣的表觀代謝率，與其結(jié)果相似。維生素D作為脂溶性維生素，可促進腸道上皮細胞頂端鈣離子滲透及胞內(nèi)胞質(zhì)的轉(zhuǎn)運與排出，從而調(diào)控鈣離子在腸道上皮細胞的吸收[24]。在飼糧中添加不同形式維生素D可提高蛋雞對鈣、磷的利用率[25]。有研究表明，維生素D3可調(diào)控鈣磷吸收，改善骨強度[26-27]，并提高蛋雞產(chǎn)蛋后期蛋殼品質(zhì)及脛骨強度[28]。本研究結(jié)果表明，飼糧添加不同水平BA均提升了粗脂肪代謝率，其中40和120 mg/kg BA添加組差異極顯著。這提示，BA可能通過提高脂肪吸收利用，促進脂溶性維生素的吸收[29]，從而提高腸道鈣的吸收代謝能力。十二指腸對鈣的吸收率達90%，是腸道吸收鈣離子的主要場所[30]。有研究表明，BA可提高肉雞腸道絨毛高度，降低隱窩深度，增加小腸表面積，并可提高小鼠回腸閉鎖小帶蛋白-1(ZO-1)、閉合蛋白(occludin)、封閉蛋白-4(claudin-4)基因的表達量，改善腸道屏障功能[31]。因此，BA還可能通過影響腸道形態(tài)，直接提高鵪鶉腸道對鈣和粗脂肪的消化吸收來調(diào)節(jié)鈣的代謝。

本試驗結(jié)果表明，飼糧添加80 mg/kg BA雖顯著降低了鵪鶉對磷的表觀代謝率，但其對平均日采食量的下降效果不顯著，且其料蛋比仍顯著降低，這與上述機體缺磷癥狀不符。有研究表明，鈣過量會加重腸道負擔(dān)，抑制微量元素如鋅[32]和有機磷的吸收與利用[33]。因此，BA可能是提高了腸道對鈣的吸收利用，加重了腸道負擔(dān)從而降低了磷的表觀代謝率，具體原因有待進一步驗證。

3.3 飼糧添加BA對23周齡日本鵪鶉蛋殼品質(zhì)的影響

蛋殼可保護其內(nèi)容物，還可提供種蛋孵化所需鈣源。蛋殼的鈣化分為鈣化起始、線性沉積和鈣化末期，均在在子宮內(nèi)進行，接著逐漸形成蛋殼乳突層、柵欄層、垂直晶體層和膠護膜[34]。蛋殼形成的動態(tài)過程中，血液中鈣離子不斷被子宮上皮細胞攝入，然后分泌到子宮腔中與碳酸氫根離子形成碳酸鈣(占蛋殼組分的96%以上[35])。血液中鈣離子主要來源于腸道吸收和髓質(zhì)骨動員，因此，鈣代謝直接影響蛋殼形成過程和蛋殼品質(zhì)[36]。

蛋殼品質(zhì)可由蛋殼強度和厚度等相關(guān)指標(biāo)評價，主要受蛋禽品種、日齡和飼養(yǎng)管理及蛋的儲存條件等因素的影響[4]。隨著蛋禽產(chǎn)業(yè)的規(guī)模化、機械化，蛋禽因老齡化引起的子宮部衰老和鈣代謝的改變，是導(dǎo)致產(chǎn)蛋率和蛋殼品質(zhì)下降的主要原因[37]。鈣在蛋雞腸道中的吸收主要受飼糧鈣水平[38]和蛋雞日齡[39]等因素的影響。然而蛋禽對鈣的吸收能力有限，高鈣飼糧不僅不能改善蛋殼質(zhì)量[40]，同時也抑制采食和減緩生長。有研究表明，飼糧鈣水平低于2.5%時才與蛋殼質(zhì)量存在線性關(guān)系[41]。因此，從提高機體鈣代謝的角度出發(fā)，通過營養(yǎng)調(diào)控強化鈣的吸收利用和緩解殼鈣沉積異常，才能解決隨日齡增加導(dǎo)致的蛋殼質(zhì)量下降的問題。

目前，關(guān)于BA對鵪鶉蛋殼品質(zhì)的相關(guān)研究鮮見報道。有研究表明，飼糧添加0.2%中草藥-益生菌-BA復(fù)合制劑對海蘭褐蛋雞蛋殼厚度無顯著影響[20]，這與本試驗結(jié)果一致。本試驗結(jié)果還表明，飼糧添加40、80和120 mg/kg BA對鵪鶉蛋的蛋殼強度和蛋殼鈣含量均有提升效果，其中40和80 mg/kg BA添加組蛋殼強度差異顯著，40和120 mg/kg BA添加組蛋殼鈣含量差異顯著。這說明飼糧添加適宜水平BA可促進鈣的代謝，增加鵪鶉蛋殼內(nèi)鈣的沉積，從而增強蛋殼強度，改善鵪鶉蛋殼品質(zhì)。

4 結(jié) 論

① 飼糧添加80 mg/kg BA有提高日本鵪鶉產(chǎn)蛋率的趨勢，能夠顯著降低料蛋比，從而改善生產(chǎn)性能。

② 飼糧添加40～120 mg/kg BA均可顯著提高日本鵪鶉鈣表觀代謝率。

③ 飼糧添加40～120 mg/kg BA可增加鵪鶉蛋的殼鈣沉積，提高蛋殼強度，改善鵪鶉蛋殼品質(zhì)。

④ 建議日本鵪鶉(16～23周齡)飼糧BA適宜添加水平為80 mg/kg。