腸道病毒在反復(fù)呼吸道感染住院患兒中的分子流行病學(xué)意義

王 欣，李 寧

(開(kāi)封市兒童醫(yī)院，河南 開(kāi)封 475000)

呼吸道感染是兒童常見(jiàn)病癥，也是導(dǎo)致5歲以下嬰幼兒死亡的重要原因[1]。其中反復(fù)呼吸道感染(Recurrent respiratory tract infections, RRTI)是兒科常見(jiàn)的呼吸道感染[1]。反復(fù)呼吸道感染定義是指一年內(nèi)上呼吸道感染超過(guò)一定次數(shù)。呼吸道常見(jiàn)感染病原種類(lèi)多樣，由副流感嗜血桿菌等社區(qū)獲得性肺炎感染，由銅綠假單胞菌和肺炎克雷伯菌等醫(yī)源獲得性肺炎感染，白色念珠菌和曲霉菌所致真菌感染。兒童的呼吸道感染病原與成人的呼吸道感染病原存在明顯差異，病毒感染是兒童呼吸道感染常見(jiàn)的病原，其中人腸道病毒HEV是導(dǎo)致兒童呼吸道感染的主要致病病毒，根據(jù)遺傳物質(zhì)常見(jiàn)致病腸道病毒HEV屬于RNA類(lèi)病毒[1，2]。本研究以反復(fù)呼吸道感染的患兒為對(duì)象，通過(guò)進(jìn)行腸道病毒感染流行病學(xué)研究，為兒科相關(guān)疾病的預(yù)防和治療提供參考依據(jù)。

1 資料和方法

1.1 一般資料

選擇2018年12月～2020年10月在開(kāi)封市兒童醫(yī)院治療的反復(fù)呼吸道感染的兒童406例?；純壕现腥A醫(yī)學(xué)會(huì)兒科學(xué)分會(huì)呼吸學(xué)組聯(lián)合《中華兒科雜志》編輯委員會(huì)在2007年修訂的《反復(fù)呼吸道感染診斷參考標(biāo)準(zhǔn)》：反復(fù)上呼吸道感染：0～2歲每年上呼吸道感染次數(shù)大于7次，3～5歲大于6次，6～14歲大于5次；反復(fù)下呼吸道感染：0～2歲每年反復(fù)氣管支氣炎大于3次或反復(fù)肺炎大于2次，3～14歲反復(fù)氣管支氣管炎大于2次或反復(fù)肺炎大于2次。家屬已簽知情同意書(shū)。

患兒一般資料收集包括一年內(nèi)呼吸道感染次數(shù)，癥狀，實(shí)驗(yàn)室檢查結(jié)果，影像學(xué)檢測(cè)結(jié)果等。采集患兒入院當(dāng)天鼻咽分泌物，放置存在RNA保護(hù)液的離心管中，置于4℃保存。

1.2 方法

1.2.1 病毒RNA提取 使用QIAGEN的QIAamp Viral RNA Kit試劑盒提取樣品中的病毒RNA，操作嚴(yán)格按說(shuō)明書(shū)進(jìn)行，去除人rRNA，提取病毒總RNA后，使用Qbuit進(jìn)行提取。

1.2.2 RT-PCR檢測(cè)病毒 使用TaKaRa的RT-PCR試劑盒進(jìn)行檢測(cè)，操作嚴(yán)格按說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

2 結(jié)果

2.1 患兒一般資料

入組患兒一般資料如下：男：女為1.1∶1，年齡分布：1～2歲126例(31.0%)，3～5歲235例(57.9%)，6～14歲45例(11.1%)。反復(fù)呼吸道感染易感因素：營(yíng)養(yǎng)素缺乏203例(50.0%)，被動(dòng)吸煙264例(65.0%)，藥物使用不當(dāng)340例(83.7%)，集體生活347例(85.5%)，早產(chǎn)174例(42.9%)。

2.2 腸道病毒檢測(cè)結(jié)果

406例中單一病毒檢出陽(yáng)性的268例(66.0%)，兩種及兩種以上病毒檢出陽(yáng)性的96例(23.6%)。腸道病毒HEV檢出21例(5.2%)，其中腸道病毒HEV-D68 15例(71.4%)，丙型肝炎病毒CV-B1 1例(4.8%)0，丙型肝炎病毒CV-B4 1例(4.8%)，腸道病毒HEV-C117 1例(4.8%)，腸道病毒HEV-A71 1例(4.8%)，ECV 2例(9.6%)。

2.3 腸道病毒的臨床特點(diǎn)

21例腸道病毒感染的患兒中，男：女為1.1∶1，年齡中位數(shù)2歲1月，易感因素：營(yíng)養(yǎng)素缺乏12例(57.1%)，被動(dòng)吸煙9例(42.9%)，藥物使用不當(dāng)4例(19.0%)，集體生活5例(23.8%)，早產(chǎn)9例(42.9%)。

3 討論

反復(fù)呼吸道感染是兒科常見(jiàn)疾病，給患兒及患兒家庭帶來(lái)心理和經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)。反復(fù)呼吸道感染的主要發(fā)病機(jī)制之一是呼吸道免疫屏障破壞，病毒感染與調(diào)節(jié)性T細(xì)胞存在聯(lián)系。腸道病毒感染后診斷主要依賴(lài)于熒光PCR，不同于細(xì)菌感染，病毒感染后進(jìn)入到人體細(xì)胞導(dǎo)致無(wú)法進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)，只能依托于病毒核酸片段進(jìn)行PCR或二代高通量測(cè)序等方式[3，4]。

本研究對(duì)腸道病毒HEV在反復(fù)呼吸道感染中的發(fā)生及特點(diǎn)進(jìn)行研究，結(jié)果顯示反復(fù)呼吸道感染中腸道病毒HEV感染率為5.2%，主要以腸道病毒HEV-D68為主，占71.4%，其他CV-B1，丙型肝炎病毒CV-B4，腸道病毒HEV-C117，腸道病毒HEV-A71，ECV2均有感染，所占比例較少。腸道病毒HEV感染的反復(fù)呼吸道感染主要診斷為肺炎，毛細(xì)支氣管炎和哮喘，這可能是因?yàn)橹饕悄c道病毒HEV-D68感染。腸道病毒71型(EV-A71)感染與多種疾病的嚴(yán)重程度有關(guān)，突變體VP1-280T和VP2-139T之間產(chǎn)生的氫鍵有助于加強(qiáng)VP1-VP2復(fù)合物的網(wǎng)狀相互作用結(jié)構(gòu)[1，3]。不同分子分型病毒感染后，疾病感染嚴(yán)重程度和預(yù)后存在差異，因此，探究不同分子分型病毒在我國(guó)兒童發(fā)病情況，對(duì)于精準(zhǔn)診治和判斷預(yù)后都有重要意義。

本研究認(rèn)為腸道病毒HEV感染是引起反復(fù)呼吸道感染的原因之一，其中主要以腸道病毒HEV-D68感染為主，下呼吸道感染和哮喘的腸道病毒HEV感染率較高，營(yíng)養(yǎng)素缺乏，被動(dòng)吸煙和早產(chǎn)是腸道病毒HEV感染的易感因素。