硫唑嘌呤在乙醇溶液中的溶解度

蔣茜

（昭通市疾病預(yù)防控制中心，云南昭通 657000）

硫唑嘌呤是6-硫基嘌呤的咪唑衍生物，化學(xué)名為6-(1-甲基-4-硝基咪唑-5-硫基)嘌呤，又叫依米蘭或依木蘭，為淡黃色粉末或結(jié)晶性粉末，味微苦。硫唑嘌呤在乙醇溶液中微溶[1]，在水中幾乎不溶，在稀氨溶液中易溶。

硫唑嘌呤可作為免疫抑制藥[2]、抗腫瘤藥，在體內(nèi)分解為藥效成分巰嘌呤，主要用于抑制同種異體移植的免疫排斥反應(yīng)。硫唑嘌呤可導(dǎo)致骨髓抑制、肝功能損傷，大劑量用藥后可能會導(dǎo)致粒細(xì)胞減少，造成再生障礙性貧血。燃燒后產(chǎn)生有毒氣體，應(yīng)放置于通風(fēng)、低溫、干燥處。

硫唑嘌呤具有很高的醫(yī)用價值，通過對硫唑嘌呤在乙醇溶液中的溶解度研究，可指導(dǎo)相關(guān)藥物臨床使用；另外，在生產(chǎn)硫唑嘌呤藥品時，利用其在乙醇溶液中的溶解度規(guī)律，可找到更適合硫唑嘌呤分離提純的生產(chǎn)條件。

1 材料與方法

1.1 實驗原理

硫唑嘌呤在不同溫度和不同配比的乙醇溶液中溶解度不同，根據(jù)高效液相色譜儀測出的溶解度值，確定硫唑嘌呤在乙醇溶液中溶解度的變化規(guī)律。

1.2 試劑與儀器

無水乙醇，分析純，重慶川東化工（集團）有限公司；甲醇，光譜純，Merck；硫唑嘌呤標(biāo)準(zhǔn)品，100197，中國食品藥品檢定研究院。

Waters 2998高效液相色譜儀，配備PDA檢測器，美國Waters公司；SK5200H型臺式超聲波清洗器，上?？茖?dǎo)超聲儀器有限公司；AS-01型真空泵，北京優(yōu)晟聯(lián)合科技有限公司；CPA2245型電子天平（Max 220 g，d=0.1 mg），德國Sartorius公司；THD-2020型低溫恒溫槽，上海滬粵明科學(xué)儀器有限公司；800B型離心機，上海安亭科學(xué)儀器廠。

1.3 色譜條件

色譜柱：Sun Fire? C8（4.6 mm×250 mm，5 μm）；流動相：甲醇-水溶液（體積比為35∶65）；檢測波長：300 nm[3]；流速：1.0 mL/min；檢測溫度：室溫。在上述色譜條件下，硫唑嘌呤的保留時間為5.68 min。

1.4 標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制

準(zhǔn)確稱取硫唑嘌呤0.010 0 g，用無水乙醇配成濃度為0.100 0 g/L的100 mL標(biāo)準(zhǔn)溶液待用。用帶過濾頭的注射器取1 mL標(biāo)準(zhǔn)溶液至進樣瓶中，進行HPLC測定，進樣體積依次為 0.1 μL、0.2 μL、0.3 μL、0.5 μL、1.0 μL、5.0 μL、10.0 μL、20.0 μL 和30.0 μL。橫坐標(biāo)為樣品含量（μg），縱坐標(biāo)為峰面積，回歸方程為Y=929X-547 0，R2=0.999 4。

1.5 樣品前處理

用精確度為0.1 mL的移液管配制二元混合溶劑，該溶劑中乙醇的摩爾分?jǐn)?shù)分別為0.0～1.0（梯度0.1）。將配好的溶劑裝入15 cm3的帶蓋離心管中，分別加入適量硫唑嘌呤粉末，200 W超聲20 min使其充分溶解，且離心管中有剩余粉末；再用離心機3 000 r/min離心2 min，將離心后的溶液放置在溫度精度為±0.05 ℃的恒溫水浴中，溫度為283.15～323.15 K（梯度10.0 K），恒溫24 h，確保固液平衡[4]。在相應(yīng)溫度下預(yù)熱一次性注射器，從上層清液中取出0.1～0.5 mL的樣品，并用硅膠將注射器針頭封住，用差減法稱重，將液體快速放入10 mL容量瓶中，用無水乙醇定容，搖勻，得到樣品溶液。進樣量10 μL，按照1.3項下條件進行檢測，按照1.4項下標(biāo)準(zhǔn)曲線計算硫唑嘌呤含量。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同溫度和溶劑濃度下硫唑嘌呤溶解度

實驗測得硫唑嘌呤在不同溫度、不同濃度乙醇溶液中的溶解度見表1。硫唑嘌呤的溶解度呈現(xiàn)一定規(guī)律：同一溫度條件下，隨著乙醇濃度升高，溶解度不斷升高，當(dāng)乙醇溶液的摩爾分?jǐn)?shù)為0.4～0.6時，溶解度達到最大值，濃度繼續(xù)升高，溶解度下降；當(dāng)乙醇濃度保持不變，在實驗范圍內(nèi)隨溫度升高，溶解度逐漸增大。

表1 硫唑嘌呤在不同溫度、不同濃度乙醇中的溶解度

2.2 經(jīng)驗方程

根據(jù)溫度的多項式經(jīng)驗方程[5]，溶解度計算公式如（1）所示：

式中，X1為溶解度，mg/100 g；T為絕對溫度，K；a、b、c為參數(shù)。通過（1）式對硫唑嘌呤在一定溫度范圍內(nèi)所對應(yīng)的體系中的溶解度數(shù)據(jù)進行擬合，數(shù)據(jù)列于表2（表2所得經(jīng)驗方程的X1應(yīng)×10-5）。均方根（RMSD）數(shù)值極小，說明方程擬合效果良好。

表2 實驗數(shù)據(jù)關(guān)聯(lián)得到的經(jīng)驗方程參數(shù)

3 結(jié)論

通過本實驗，可以發(fā)現(xiàn)硫唑嘌呤在不同溫度下不同摩爾分?jǐn)?shù)的乙醇溶液中的溶解度呈現(xiàn)一定的規(guī)律性。在一定濃度的乙醇溶液中，當(dāng)溫度從283.15 K升至323.15 K，硫唑嘌呤的溶解度隨之升高；在一定的溫度條件下，當(dāng)乙醇溶液摩爾分?jǐn)?shù)逐漸升高時，溶解度隨之升高，摩爾分?jǐn)?shù)在0.4～0.6時溶解度最大，摩爾分?jǐn)?shù)繼續(xù)升高，溶解度反而下降；根據(jù)測定數(shù)據(jù)進行了方程擬合，擬合度良好，可用于計算一定溫度下硫唑嘌呤在不同濃度乙醇溶液中的溶解度。