血清LDH、CD4+/CD8+比值及腦脊液WBC在病毒性腦炎患兒病情判斷及預(yù)后評估中的臨床意義

韓玉娟，鄧 劼

1.青海省婦女兒童醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科，青海西寧 810000；2.北京兒童醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科，北京 100045

病毒性腦炎(VE)是常見的中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染性疾病，在兒童中發(fā)病率較高。大部分VE患兒經(jīng)對癥治療后預(yù)后良好，但某些重癥患兒治療干預(yù)效果不佳，遺留后遺癥甚至死亡的風險極高[1]。目前，對于VE患兒病情嚴重程度的判斷主要以其臨床癥狀及腦電圖檢查為主，缺乏可量化的指標[2]。VE發(fā)病機制尚不清楚，但有研究表明，VE患兒心肌酶譜水平紊亂，其乳酸脫氫酶(LDH)水平異常上升[3]。VE還是一種與機體免疫力密切相關(guān)的疾病，CD4+/CD8+比值是重要的免疫功能狀態(tài)指標[4]。此外，白細胞參與人體機體防御以及腦血管病變等多種生理反應(yīng)，VE引起的腦水腫將降低白細胞變形能力，而白細胞計數(shù)(WBC)升高又進一步促進氧自由基及血管活性因子的釋放，加重腦損傷[5]?；诖耍狙芯刻接懷錖DH、CD4+/CD8+比值以及腦脊液WBC在VE患兒病情嚴重程度及預(yù)后中的價值，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 將青海省婦女兒童醫(yī)院2018年1月至2021年1月收治的79例VE患兒納為VE組。另選擇同期疑似中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病，但經(jīng)腦脊液、腦電圖、影像學(xué)及體征檢查排除VE的60例住院患兒作為對照組。VE診斷參照《諸福棠實用兒科學(xué)》[6]中相關(guān)診斷標準：(1)急性期有發(fā)熱、畏光、眩暈等臨床表現(xiàn)；(2)噴射性嘔吐、驚厥等腦實質(zhì)受損體征；(3)腦脊液WBC增高，但<500×106/L；(4)腦電圖檢查有彌漫性異常慢波背景活動。重癥VE診斷標準：(1)有持續(xù)驚厥狀態(tài)；(2)合并意識障礙；(3)持續(xù)高熱；(4)有偏癱、單肢偏癱、精神行為異常等大腦皮質(zhì)受損表現(xiàn)。根據(jù)入院時臨床表現(xiàn)，將VE患兒分為輕癥組(44例)與重癥組(35例)。本研究經(jīng)青海省婦女兒童醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會批準實施，患兒家長均簽署知情同意書參與本研究。

1.2納入、排除標準 納入標準：(1)VE組患兒滿足上述診斷標準，年齡4～12歲，臨床資料完整；(2)對照組患兒年齡及性別比例與VE組相匹配。排除標準：細菌性腦膜炎、急性傳播性腦脊髓炎等其他腦病綜合征及發(fā)熱相關(guān)性疾病者；住院時間<3 d者；隨訪資料不全者。

1.3方法

1.3.1血清LDH水平、CD4+/CD8+比值及腦脊液WBC檢測 分別于VE組治療前后及對照組入組時采集患兒外周空腹靜脈血2管。一管3 mL，不抗凝，靜置20 min后以3 000 r/min離心5 min，取上層血清，采用日本Olympus AU-1000全自動生化分析儀進行檢測血清LDH。另一管1.8 mL，置于EDTA-K2抗凝管內(nèi)，使用相應(yīng)的熒光標記單克隆抗體染色，避光孵育20 min，F(xiàn)ACSLysing solution溶血處理，流式細胞儀檢測CD4+、CD8+T細胞水平，計算CD4+/CD8+比值。分別于VE組治療前后及對照組入組時抽取腦脊液2 mL，以離心半徑3 cm、3 000 r/min離心15 min，使用日本Sysmex UF-100全自動尿沉渣分析儀檢測腦脊液WBC。

1.3.2VE治療方法 VE患兒進行抗病毒及對癥支持治療，同時聯(lián)合物理降溫、鎮(zhèn)靜、脫水降顱壓、改善腦代謝等治療，適當應(yīng)用糖皮質(zhì)激素。重癥組患兒視情況給予丙種球蛋白治療。

1.3.3治療效果觀察 治療2周后，評估VE患兒治療效果：(1)顯效，指治療1周內(nèi)患兒退熱，意識清醒無頭痛或驚厥，神經(jīng)系統(tǒng)損傷開始恢復(fù)；(2)有效，指治療1～2周后，患兒退熱，意識清醒無頭痛或驚厥，神經(jīng)系統(tǒng)損傷開始恢復(fù)；(3)無效，指治療2周內(nèi)，發(fā)熱及神經(jīng)損傷癥狀依舊無改善。將顯效及有效患兒納為預(yù)后良好組(70例)，治療無效患兒納為預(yù)后不良組(9例)。

1.3.4觀察指標 (1)比較VE組與對照組，VE組治療前后，輕癥組及重癥組，以及不同預(yù)后VE患兒血清LDH水平、CD4+/CD8+比值及腦脊液WBC。(2)繪制受試者工作特征(ROC)曲線，計算曲線下面積(AUC)，評估血清LDH、CD4+/CD8+比值、腦脊液WBC在VE患兒預(yù)后中的預(yù)測效能。

2 結(jié) 果

2.1VE組與對照組治療前血清LDH水平、CD4+/CD8+比值及腦脊液WBC比較 VE組治療前血清LDH水平、腦脊液WBC高于對照組，CD4+/CD8+比值低于對照組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見表1。

表1 VE組與對照組治療前血清LDH水平、CD4+/CD8+比值及腦脊液WBC比較

2.2VE組治療前后血清LDH水平、CD4+/CD8+比值及腦脊液WBC比較 治療后，VE組血清LDH水平、腦脊液WBC較治療前下降，CD4+/CD8+比值較治療前升高，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見表2。

表2 VE組治療前后血清LDH水平、CD4+/CD8+比值以及腦脊液WBC比較

2.3輕癥組及重癥組治療前血清LDH水平、CD4+/CD8+比值及腦脊液WBC比較 輕癥組治療前血清LDH水平、腦脊液WBC低于重癥組，CD4+/CD8+比值高于重癥組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見表3。

表3 輕癥組及重癥組治療前血清LDH水平、CD4+/CD8+比值及腦脊液WBC比較

2.4不同預(yù)后VE患兒治療前血清LDH水平、CD4+/CD8+比值及腦脊液WBC比較 預(yù)后良好組治療前血清LDH水平、腦脊液WBC低于預(yù)后不良組，CD4+/CD8+比值高于預(yù)后不良組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見表4。

表4 不同預(yù)后VE患兒治療前血清LDH水平、CD4+/CD8+比值及腦脊液WBC比較

2.5血清LDH、CD4+/CD8+比值及腦脊液WBC單獨和聯(lián)合檢測對VE患兒預(yù)后的預(yù)測效能 血清LDH、CD4+/CD8+比值及腦脊液WBC單獨和聯(lián)合檢測對VE患兒預(yù)后均有一定的預(yù)測效能，3項指標聯(lián)合檢測的AUC為0.849，高于3項指標單獨檢測的0.752、0.761、0.733(Z=2.172、2.963、2.394，P<0.05)，而3項指標單獨檢測的AUC差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。見圖1、表5。

圖1 血清LDH、CD4+/CD8+比值及腦脊液WBC單獨和聯(lián)合檢測預(yù)測VE患兒預(yù)后的ROC曲線

表5 血清LDH、CD4+/CD8+比值及腦脊液WBC單獨和聯(lián)合檢測對VE患兒預(yù)后的預(yù)測效能

3 討 論

VE由病毒入侵大腦引起，是小兒常見的中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染性疾病。免疫功能障礙與VE發(fā)病機制密切相關(guān)。尋找對VE患兒病程及預(yù)后有提示作用的有效指標，在臨床中具有重要的意義。

LDH是胞漿酶，在腦組織內(nèi)含量豐富，當腦組織受損時，LDH透過腦屏障，被大量釋放至外周血循環(huán)系統(tǒng)，使其血液活性大幅度升高[7-8]。有研究報道LDH水平變化可作為腦損傷及病情恢復(fù)程度判斷的有效指標[9]。CD4+、CD8+T細胞分別是輔助性及抑制性細胞亞群，CD4+可輔助T、B淋巴細胞產(chǎn)生免疫應(yīng)答，清除病毒，并能阻止病毒所引起的B細胞增殖，增強免疫反應(yīng)，維持機體正常免疫平衡[10-11]。而CD8+T細胞可抑制B淋巴細胞分化及抗體合成等作用，當病程發(fā)展到一定程度后，B細胞可與CD8+T細胞相互結(jié)合而凋亡，迫使淋巴細胞增殖呈自限性變化[12]。CD4+/CD8+比值下降提示患兒機體免疫功能下降。炎癥反應(yīng)的特征表現(xiàn)之一是白細胞滲出，而腦脊液WBC是反應(yīng)感染性疾病的敏感指標之一[13-14]。一方面，VE引起的腦水腫將降低白細胞變形能力，增加其黏附性，加重腦部微循環(huán)障礙。另一方面，黏附于血管內(nèi)皮表面的白細胞還能與浸潤于腦組織內(nèi)的白細胞相互激活，釋放大量氧自由基與血管活性物質(zhì)，加重腦損傷[15]。

本研究發(fā)現(xiàn)，VE組治療前血清LDH水平、CD4+/CD8+比值及腦脊液WBC均異常，具體表現(xiàn)為VE組治療前血清LDH水平、腦脊液WBC升高，CD4+/CD8+比值降低，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，提示VE患兒存在腦組織損傷及炎癥反應(yīng)；此外，與治療前比較，治療后VE組血清LDH水平、腦脊液WBC明顯下降，CD4+/CD8+比值明顯上升，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，提示血清LDH水平、CD4+/CD8+比值及腦脊液WBC在反映VE患兒病情變化方面有一定價值。

此外，本研究還發(fā)現(xiàn)，在不同病情嚴重程度的VE患兒中，重癥組治療前血清LDH水平、腦脊液WBC均高于輕度組，CD4+/CD8+比值低于輕度組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，說明血清LDH水平、CD4+/CD8+比值及腦脊液WBC在評估VE患兒病情嚴重程度中也具有一定的價值。

治療2周后對VE患兒治療效果進行統(tǒng)計，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，預(yù)后良好組治療前血清LDH水平、腦脊液WBC明顯低于預(yù)后不良組，CD4+/CD8+比值高于預(yù)后良好組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，提示血清LDH水平、CD4+/CD8+比值及腦脊液WBC對VE患兒的預(yù)后也有一定的預(yù)測價值。進一步繪制ROC曲線，計算AUC，分析入院時血清LDH、CD4+/CD8+比值及腦脊液WBC對VE患兒預(yù)后的預(yù)測效能，結(jié)果顯示，血清LDH、CD4+/CD8+比值及腦脊液WBC單獨和聯(lián)合檢測預(yù)測VE患兒預(yù)后的AUC分別為0.752、0.761、0.733、0.849，提示3項指標在判斷VE患兒預(yù)后中均有一定的預(yù)測效能，但3項指標聯(lián)合檢測可有效提高預(yù)測效能。

綜上所述，在VE患兒中，血清LDH水平、腦脊液WBC升高，CD4+/CD8+比值降低，三者在反映VE患兒病情嚴重程度及預(yù)后中均有一定的價值，可作為評估VE患兒病情嚴重程度及預(yù)測預(yù)后的量化指標。