高效液相色譜法在農產品質量安全檢測中的應用

張學嘉，趙娟，李勇，何龍源，速俊華

（1.云南省德宏傣族景頗族自治州土壤肥料工作站，云南 德宏 678400；2.云南省梁河縣農產品質量安全監(jiān)督檢測中心，云南 梁河 679200）

一、高效液相色譜法的應用優(yōu)勢

高效液相色譜法（HPLC）以液體作流動相，利用不同化合物分子在色譜柱的保留能力不同，從而實現(xiàn)對多種化合物進行分離測定的色譜法，是農產品質量安全檢測中的重要方法。

與氣相色譜法（GC）相比，液相色譜法適合分離測定不易氣化、受熱易分解、分子量大或強極性的化合物。HPLC 可以與柱前提取純化系統(tǒng)、柱后熒光衍生化反應裝置以及質譜檢測器等聯(lián)用，易實現(xiàn)分析過程的自動化。采用目前流行的超高效液相系統(tǒng)能夠大大提高分析檢測的靈敏度，縮短上機檢測時間，提高了檢測效率。

檢測器是液相色譜儀的“眼睛”。目前，紫外吸收檢測器（UV）是農產品質量安全檢測中化學殘留測定時應用較廣泛的檢測器，靈敏度高，受流量和溫度變化影響較小，是進行化合物梯度淋洗分離測定中較理想的檢測器，但其只能檢測對紫外光有吸收性能的化合物分子。

熒光檢測器也是液相色譜法中的常見檢測器，一般與柱后衍生反應裝置聯(lián)用。由于大多數(shù)化合物分子本身不發(fā)射熒光，衍生化反應較麻煩，增加了檢測時間，限制了其在農產品質量安全檢測領域的應用，一般可作為紫外檢測器的補充。

二、農產品質量安全檢測的重要性

德宏州是云南省農業(yè)大州，所產農產品有馬鈴薯、鮮食玉米、辣椒、西瓜、香蕉等，種類繁多，數(shù)量巨大，遠銷省內外，對農產品的質量安全也較高要求，加強農產品質量安全檢測意義重大。

三、高效液相色譜法在農產品質量安全檢測中的應用

1、農藥殘留檢測

農藥殘留是農產品中殘留的微量農藥原體、有毒物質的總稱，由于濫用農藥、頻繁使用農藥造成，或使用了國家限用的農藥，如有機磷農藥，嚴重威脅人們健康，甚至可能導致發(fā)生各種疾病乃至中毒。

農藥殘留檢測是農產品進入市場前的重要環(huán)節(jié)，HPLC 具有較高的靈敏度，能夠同時檢測多種農藥并對其進行定性定量分析，檢測結果精準度較高，是農產品農藥殘留檢測的關鍵技術[1]。使用該方法對莓茶中多菌靈、甲霜靈、路蟲苯甲酰胺等幾種農藥殘留量進行測定，莓茶為0.1 mg/kg 時，農藥殘的平均回收率為89%～95%，農藥殘留量的定量限為0.1～0.5 mg/kg。

2、獸藥殘留檢測

獸藥殘留主要指用藥后蓄積或存留于畜禽機體或產品（如雞蛋、奶品、肉品等）中的原藥物或其代謝產物，包括與獸藥有關的雜質殘留。動物養(yǎng)殖中，投喂獸藥能夠保證動物健康成長，如抗菌類、抗生素類等。違規(guī)用藥時，部分藥物會分解或排出體外，但還有部分藥物依然存留在動物體內，當人們食用肉制品時，殘留獸藥會進入人體，嚴重影響身體健康。常用獸藥有四環(huán)素、青霉素等，進入人們后會出現(xiàn)過敏反應或產生耐藥性。因此，需在保證正確用藥的基礎上，加強畜禽產品質量安全檢測。

HPLC 獸藥殘留檢測準確度較高，并且應用較為普遍，能夠準確檢測出獸藥含量。如，使用HPLC 測定小檗堿品種，只需要3 min 便能完成測定，且進樣量只有0.5μg，所獲得的峰形比較完整，具有較高分辨率，縮減了檢測時間。檢測丹參片化合物中的皂苷，只需要12 min 就可以分離4 種活性成分。用ACQUITY UPLC BEH C18 柱完成洗脫，利用質譜檢測器能夠快速檢測鰻魚中的殘留獸藥，如磺胺類藥物[2]。

3、激素殘留檢測

天然性激素具有一定積極作用，但過量使用會嚴重影響農產品質量安全。比較常用的激素有類固醇、氨基酸等，在禽畜養(yǎng)殖、瓜果蔬菜種植中較常應用，與其他添加物相比更易殘留在農產品中，食用后會擾亂人體正常代謝，導致人體內分泌失調。目前出臺多項政策，禁止農產品生產中添加激素，同時需加強激素殘留檢測以確保其質量安全。

HPLC 在農產品激素殘留檢測中的應用效果較好，能夠對奶粉、肉類中的甾體激素殘留量進行精準檢測，使用有機溶劑提取樣品中的甾體激素，并通過分解過濾進行分析。有機溶劑常使用甲醇，提取后的游離甾體激素中添加適量中性鹽，并使用乙醇進行提取，不僅提取效率較高，還不會受過高雜質影響。使用UPLC-MS/MS 方法檢測雞肉中的激素藥物，乙烯檢測限度達9.5 g/kg，丙烯檢測限度達8.4 g/kg[3]。

4、三聚氰胺檢測

三聚氰胺是一種有機化合物，能夠用于制作餐具、塑料等有機化學品，但攝入會影響身體健康。在乳制品生產中，部分企業(yè)添加三聚氰胺以提升蛋白質含量，如三鹿奶粉事件，對嬰幼兒造成了嚴重且不可逆的傷害。

HPLC 在乳制品三聚氰胺檢測中較常用，能夠精準、快速檢測三聚氰胺含量，檢測誤差小，精度可提升至0.005 mg/mL，并將偏差控制在4%之內，有效保障乳制品質量安全。

5、有毒物質檢測

部分農產品加工、儲存中可能發(fā)生化學變化，產生對人體有害的物質，應加強農產品有毒物質檢測，確保其質量安全。谷物類產品在高溫加工后會產生有毒物質，如丙烯酰胺，該物質毒性較強，嚴重時可能致癌。

通過HPLC 的上機測定，可以分析谷物中是否產生有毒有害物質。同時，在小麥、玉米等農作物生長中極易感染單端孢霉烯族真菌，利用HPLC 也能有效檢測出其中的有毒成分。

四、結語

農產品質量安全檢測是加強農產品質量監(jiān)管、推動農業(yè)發(fā)展的重要基礎，高效液相色譜法在國內農產品質量安全檢測中發(fā)揮著重要作用，檢測農藥殘留、獸藥殘留、激素殘留、三聚氰胺、有毒物質時，檢測效率高、操作便捷，同時檢測效果較好，滿足了農產品質量安全檢測需求。