白及與其4種常見混偽品的理化比較鑒別

殷根深 廖瑩瑩 蘇 源 殷左句

1.昆明學(xué)院農(nóng)學(xué)與生命科學(xué)學(xué)院，云南 昆明 650214；2.湘潭市第六人民醫(yī)院門急診部，湖南 湘潭 411102

2020版《中國(guó)藥典》記載，中藥白及為蘭科白及屬植物白及Bletillastriata(Thunb.)Reichb. f.的干燥塊莖，其性味苦、甘、澀、微寒，歸肺、肝、胃經(jīng)，具有收斂止血、消腫生肌的功效，主要用于咯血、吐血、外傷出血、瘡瘍腫毒、皮膚皸裂等[1]，其主要藥效成分含有白及膠及白及多糖[2]。近年來(lái)，白及在醫(yī)藥、保健、美容等領(lǐng)域得到廣泛應(yīng)用，價(jià)格一度居高不下，導(dǎo)致其資源短缺，混偽品大量進(jìn)入市場(chǎng)[3]。據(jù)彭翠仙和向建英的調(diào)查，僅云南一省就發(fā)現(xiàn)有小白及[B.formosana(Hayata) Schltr.]、黃花白及(B.ochraceaSchltr.)、苞舌蘭(SpathoglottispubescensLindl.)、筒瓣蘭(AnthogoniumgracileLindl.)、獨(dú)蒜蘭[Pleionebulbocodioides(Franch.) Rolfe]、云南獨(dú)蒜蘭[P.yunnanensis(Rolfe) Rolfe，獨(dú)蒜蘭和云南獨(dú)蒜蘭在云南習(xí)稱“冰球子”]、紫花美冠蘭[Eulophiaspectabilis(Dennst.) Suresh]、毛梗蘭[Eriodesbarbata(Lindl.) Rolfe](紫花美冠蘭和毛梗蘭又稱“水白及”)、杜鵑蘭[Cremastraappendiculata(D.Don) Makino，云南習(xí)稱“山慈菇”]、滇黃精(PolygonatumkingianumColl.et Hemsl.)等10種混偽品。鞠康等人的調(diào)查結(jié)果表明，安徽的白及混偽品也有10種，除和云南市場(chǎng)上共有的幾種之外，華白及[B.sinensis(Rolf) Schltr.]、天麻(GastrodiaelataBl.)、二葉舌唇蘭(PlatantherachloranthaCust.ex Rchb.)也被當(dāng)成白及使用[4]。此外，地寶蘭[Geodorumdensiflorum(Lam.) Schltr.]在廣西[5]、知母(Anemarrhenaasphodeloides Bunge)在貴州[6]、玉竹[Polygonatumodoratum(Mill.) Druce]在四川等地[7]也被當(dāng)成白及而大量使用。這些混偽品在藥性、藥效上與白及存在較大差異。因小白及、滇黃精、山慈菇、玉竹在外觀性狀上與白及相似，容易混淆，在市場(chǎng)上冒充白及被大量使用[8]。其中小白及來(lái)源于白及同屬植物的干燥塊莖，在云南、甘肅、四川等地為地方習(xí)用品[8]；山慈菇為蘭科杜鵑蘭屬杜鵑蘭的干燥假鱗莖，具有清熱解毒、化痰散結(jié)的功效[1]；玉竹是百合科黃精屬玉竹的干燥塊莖，有養(yǎng)陰潤(rùn)燥、生津止渴的功效[1]；滇黃精為百合科黃精屬的干燥塊莖，有補(bǔ)氣養(yǎng)陰、健脾、潤(rùn)肺、益腎的功效[1]。當(dāng)前，對(duì)中藥混偽品的鑒別主要有性狀鑒別、理化鑒別、顯微鑒別等，其中基于各種中藥處理方式(如：粉末、水浸液、乙醇提取液)的理化鑒別(如：堿性酒石酸銅反應(yīng)、茚三酮反應(yīng))可以通過(guò)化學(xué)試劑作用于中藥成分而較為直接和準(zhǔn)確，并成熟的運(yùn)用于各種中藥與其混偽品的鑒別上(如：柴胡[9]、大黃[10]等)，但是還暫不清楚白及與其混偽品的鑒別效果如何。為保證白及用藥的準(zhǔn)確性和有效性，本研究將白及與其4種常見混偽品在理化試驗(yàn)上進(jìn)行了鑒定研究。

1 儀器與材料

1.1 儀器 AL204電子天平(梅特勒-托利多儀器有限公司)，HHS216電熱恒溫水浴鍋(江蘇常熟醫(yī)療器械廠)，AF-04A中藥粉碎機(jī)(奧力中藥機(jī)械有限公司)，Mixer 4K渦旋混合器(生工生物工程股份有限公司)。

1.2 材料 試劑有堿性酒石酸銅試劑、2%茚三酮試劑、95%乙醇溶液，均由分析純?cè)噭?生工生物工程股份有限公司)配制而成。

1.3 試藥 白及、小白及、山慈菇、玉竹、黃精均購(gòu)自于昆明螺螄灣中藥材市場(chǎng)，經(jīng)湘潭市第六人民醫(yī)院門急診部主治醫(yī)生殷左句鑒定為白及[Bletillastriata(Thunb.) Reichb.f.]、小白及[B.formosana(Hayata) Schltr.]、山慈菇[Cremastraappendiculata(D.Don) Makino]、玉竹[Polygonatumodoratum(Mill.) Druce]、黃精(PolygonatumkingianumColl.et Hemsl.)。

2 方法與結(jié)果

2.1 基于藥品粗粉的理化鑒別 將干燥的5種藥品用中藥粉碎機(jī)打碎成粉，粗粉備用，分別進(jìn)行泡沫試驗(yàn)和堿性酒石酸銅反應(yīng)。

2.1.1 泡沫試驗(yàn) 各取藥品粗粉1 g，加到15 mm×180 mm的試管中，再加入5 mL蒸餾水，塞上試管塞，在渦旋混合器上震蕩2 min，觀察泡沫產(chǎn)生的情況。由表1可以看出，在泡沫試驗(yàn)中，除了山慈菇的溶液為黃色之外，其余4種并不能進(jìn)行有效的區(qū)分，因此泡沫試驗(yàn)不能對(duì)白及與其4種混偽品進(jìn)行理化鑒別。

2.1.2 藥品粗粉的堿性酒石酸銅反應(yīng) 各取藥品粗粉1 g，加到15 mm×180 mm的試管中，加入1 mL蒸餾水，再滴加5～6滴堿性酒石酸銅試劑，在渦旋混合器上震蕩10 s，沸水浴中加熱5 min后取出，觀察反應(yīng)現(xiàn)象。由表1可以看出，在藥品粗粉的堿性酒石酸銅反應(yīng)中，白及反應(yīng)后的溶液為藍(lán)黃色，而小白及、山慈菇、玉竹以及黃精4種分別為橙紅色、磚紅色、黃色、黃色，因此可以根據(jù)反應(yīng)后不同溶液顏色不同這一特點(diǎn)將白及與其余4種區(qū)分開。反應(yīng)后的沉淀除小白及為橙紅色、山慈菇為磚紅色外，包括白及在內(nèi)的3種藥材的沉淀均為黃色，因此不能根據(jù)沉淀區(qū)分白及與其混偽品。

表1 基于藥品粗粉的白及與其4種混偽品的理化鑒別對(duì)比

2.2 基于藥材水浸液的理化鑒別 各取藥品粗粉1 g，加到15 mm×180 mm的試管中，再加入10 mL蒸餾水，塞上試管塞，在渦旋混合器上震蕩2 min，靜置30 min后過(guò)濾，濾液備用，分別進(jìn)行茚三酮反應(yīng)和堿性酒石酸銅反應(yīng)。

2.2.1 藥材水浸液的茚三酮反應(yīng) 取1 mL濾液，加到15 mm×180 mm的試管中，再加入5～6滴2%茚三酮試劑，搖勻，放入沸水浴中加熱5 min后取出，觀察反應(yīng)現(xiàn)象。由表2可以看出，除小白及反應(yīng)后的溶液為無(wú)色透明外，其余4種藥材反應(yīng)后的溶液顏色均為深淺不一的藍(lán)紫色。因此除了能迅速區(qū)分白及和小白及以外，并不能很好地將白及與其余3種藥材區(qū)分開來(lái)。

2.2.2 藥材水浸液的堿性酒石酸銅反應(yīng) 取1 mL濾液，加到15 mm×180 mm的試管中，再加入5～6滴堿性酒石酸銅試劑，搖勻，放入沸水浴中加熱5 min后取出，觀察反應(yīng)現(xiàn)象。由表2可以看出，除白及反應(yīng)后的溶液為淡藍(lán)色外，其余其余4種藥材反應(yīng)后的溶液顏色為磚紅色至黃色不等。因此依靠藥品水浸液的堿性酒石酸銅反應(yīng)能夠迅速區(qū)分白及與其4種混偽品。

2.3 基于藥材乙醇提取液的的堿性酒石酸銅反應(yīng) 各取藥品粗粉1 g，加到15 mm×180 mm的試管中，再加入10 mL的無(wú)水乙醇，塞上試管塞，在渦旋混合器上震蕩2 min，靜置30 min后過(guò)濾，濾液備用。取液1 mL濾液，滴加5～6滴堿性酒石酸銅試劑，搖勻，放入沸水浴中加熱5 min后取出，觀察反應(yīng)現(xiàn)象。由表3可以看出，除白及反應(yīng)后的溶液為墨綠色外，其余其余4種藥材反應(yīng)后的溶液顏色為黃色、磚紅色至褐色不等。因此依靠藥品乙醇提取液的堿性酒石酸銅反應(yīng)能夠迅速區(qū)分白及與其4種混偽品。

表2 基于藥品水浸液的白及與其4種混偽品的理化鑒別對(duì)比

表3 基于藥品乙醇提取液的白及與其4種混偽品的理化鑒別對(duì)比

3 討論

小白及、山慈菇、玉竹、黃精等在云南常被當(dāng)成白及使用。從科屬分類上來(lái)說(shuō)，小白及與山慈菇均為蘭科植物，其中小白及與白及為同屬植物，僅在花部大小、唇瓣中裂片形狀以及假鱗莖大小上有所區(qū)別；山慈菇與白及都屬于紅門蘭亞科(SubFam.Orchidoideae)樹蘭族(Trib.Epidendreae)，具有相似的假鱗莖[11]，因此三者在外形上具有較大相似性。百合科黃精屬的玉竹和滇黃精，切片后外形和口感都和白及較相似[7]，因此這白及與這四者的切片極易造成混淆，但在成分、性味與歸經(jīng)、功能與主治方面有差異，故不能與白及混用。

白及與其混偽品鑒定研究(見翟萌的綜述)[7]多以顯微特征、薄層色譜、紫外分光、高效液相色譜或分子條形碼方式[12]進(jìn)行，這些方法雖然十分精準(zhǔn)，但是存在諸如需要豐富的經(jīng)驗(yàn)(如顯微特征法)或者需要較為高昂的經(jīng)濟(jì)成本和較多的時(shí)間(如薄層色譜等)的要求。本研究理化試驗(yàn)結(jié)果表明小白及、山慈菇、玉竹、黃精與白及在理化特征上存在明顯差異，且本研究具有快速、直觀和方法易于復(fù)制的優(yōu)點(diǎn)。在基于藥材粗粉的理化鑒定中，泡沫試驗(yàn)只能將山慈菇和白及區(qū)分開來(lái)，但無(wú)法明顯區(qū)分白及與其它3種混偽品，而堿性酒石酸銅反應(yīng)可以很好地鑒別白及與其4種混偽品；在基于藥材水浸液的理化鑒定中，由于茚三酮反應(yīng)白及呈藍(lán)色，小白及為白色，有明顯差別，可快速鑒別白及和小白及，而堿性酒石酸銅反應(yīng)中，白及與其余4種混偽品有較明顯差異，是較好的理化鑒別方法；在藥材乙醇提取液中，堿性酒石酸銅反應(yīng)可以迅速地將白及與其4種混偽品者進(jìn)行區(qū)分開來(lái)。因此，在白及藥材使用過(guò)程中，無(wú)論是基于粉末、水浸液還是乙醇提取液，堿性酒石酸銅反應(yīng)是最好的將白及與其混偽品進(jìn)行快速理化鑒別的方法，可以為保障其用藥安全性和有效性提供依據(jù)。