多粘菌素外排轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白的研究進(jìn)展

俄文慧，王文龍*，周春燕，杜秉海，劉凱，汪城墻

(1.山東農(nóng)業(yè)大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院/山東省鹽堿地植物-微生物聯(lián)合修復(fù)工程技術(shù)研究中心/山東省農(nóng)業(yè)微生物重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，山東 泰安 271018；2.山東農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院(動(dòng)物醫(yī)學(xué)院)，山東 泰安 271018)

隨著生活環(huán)境的復(fù)雜化，人類傳染性細(xì)菌和真菌疾病種類逐漸增多，一般的抗生素已滿足不了需求，多粘菌素被認(rèn)為是治療耐多藥革蘭氏陰性細(xì)菌感染的最后一道防線[1]，其對(duì)幾乎所有致病性革蘭氏陰性菌具有治療作用。1947年，在多粘類芽孢桿菌(Paenibacillus polymyxa)[2]中首次發(fā)現(xiàn)了多粘菌素，其是一類環(huán)狀脂肽類抗生素，對(duì)細(xì)菌細(xì)胞膜極具破壞力，具有優(yōu)良的殺菌活性。

多粘菌素的產(chǎn)生菌多粘類芽孢桿菌是植物根際促生菌(plant growth-promoting rhizobacteria，PGPR)[3]中的重要成員，廣泛存在于土壤生境和植物根部，可通過(guò)產(chǎn)生多粘菌素對(duì)植物的細(xì)菌病原菌起到拮抗作用[4]。多粘菌素被多粘類芽孢桿菌合成后，需要借助于外排轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白轉(zhuǎn)運(yùn)到胞外發(fā)揮拮抗功能。多粘菌素外排轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白在一些多重耐藥細(xì)菌(MDR)中也廣泛存在。隨著臨床中抗生素的大量使用，一些病原菌也逐漸對(duì)多粘菌素等抗生素產(chǎn)生耐藥性，如銅綠假單胞菌[5]、鮑曼不動(dòng)桿菌[6]、肺炎鏈球菌等，其中的耐藥機(jī)制之一就是多粘菌素外排轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白的存在[7]。本文對(duì)目前鑒定的多粘菌素外排轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白的類型、結(jié)構(gòu)和轉(zhuǎn)運(yùn)特征等進(jìn)行介紹。

1 多粘菌素的結(jié)構(gòu)與合成過(guò)程

多粘菌素的結(jié)構(gòu)特征與其跨膜分泌緊密相聯(lián)。多粘菌素的基本結(jié)構(gòu)是一個(gè)十肽序列，包括一個(gè)七肽環(huán)、一個(gè)三肽側(cè)鏈和脂肪酸鏈(圖1)，第10位的氨基酸L-Thr和第4位的2，4-二氨基丁酸(L-Dab)環(huán)化形成一個(gè)七肽環(huán)，不同的氨基酸殘基形成不同的多粘菌素類型[8]。多粘菌素B和多粘菌素E由于毒性小，抗菌活力強(qiáng)，已被應(yīng)用于臨床[9]。多粘菌素由非核糖體肽合成酶(nonribosomal peptide synthetase，NRPS)合成[10]，NRPS是具有模塊化結(jié)構(gòu)的多酶復(fù)合物，直接將一種或多種特定氨基酸合成最終產(chǎn)物[11]。多粘菌素合成基因簇由5個(gè)開放閱讀框組成:pmxA、pmxB、pmxC、pmxD和pmxE，其中，pmxA、pmxB和pmxE編碼多粘菌素的NRPS，而pmxC和pmxD編碼多粘菌素外排轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白[12]。

圖1 多粘菌素B和E的化學(xué)結(jié)構(gòu)[7]

2 多粘菌素外排轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白類型、結(jié)構(gòu)特征及其研究進(jìn)展

多粘菌素由多粘類芽孢桿菌合成和分泌，但目前對(duì)其跨膜分泌機(jī)制尚不明確，只鑒定出了兩個(gè)多粘菌素高活性外排相關(guān)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白PmxC和PmxD[13]。本課題組前期研究顯示[14]，在多粘類芽孢桿菌中有多種膜蛋白和多粘菌素的分泌有相關(guān)性，需要進(jìn)一步挖掘和鑒定其多粘菌素外排譜。

MDR的耐藥機(jī)制集中在改變或減少脂多糖的凈負(fù)電荷[15]，減少孔蛋白途徑，形成囊泡和過(guò)度囊泡，以及增加多粘菌素等藥物外排[1]。多粘菌素雖然是治療多重耐藥菌的最后一道防線，但一些MDR也會(huì)出現(xiàn)對(duì)多粘菌素的耐藥性。多粘菌素外排過(guò)程主要由膜外排轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白起作用。目前，在一些MDR中鑒定出了不同類型的多粘菌素外排轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白，主要涉及5種類型:耐藥結(jié)節(jié)細(xì)胞分裂家族(RND)、ATP結(jié)合盒家族(ABC)、主要促進(jìn)因子家族(MFS)、多藥和有毒化合物輸出家族(MATE)及小多藥耐藥家族(SMR)[16]。

2.1 多粘菌素RND外排系統(tǒng)

2.1.1 RND型外排系統(tǒng)結(jié)構(gòu) RND外排系統(tǒng)一般存在于革蘭氏陰性MDR，由內(nèi)膜轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白、膜融合蛋白和外膜蛋白組成三聯(lián)復(fù)合體，底物通過(guò)雙層細(xì)胞膜直接排出。RND型家族外排轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白由12個(gè)跨膜螺旋結(jié)構(gòu)域(TMs)組成，在TM1和TM2以及TM7和TM8之間有兩個(gè)大的胞外環(huán)，跨膜區(qū)的4個(gè)高度保守的帶正電荷氨基酸殘基是參與底物結(jié)合與轉(zhuǎn)運(yùn)的重要位點(diǎn)[17]。一些RND外排泵前后還存在阻遏蛋白，如smeR、cmeR等可控制外排轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白的表達(dá)量。

2.1.2 多粘菌素RND家族外排系統(tǒng)的研究 目前已鑒定的與多粘菌素外排相關(guān)的RND外排系統(tǒng)見表1。

表1 多粘菌素RND家族外排系統(tǒng)

在大腸桿菌和肺炎克雷伯菌都普遍存在的AcrAB-TolC是RND外排泵的典型代表(圖2)。AcrAB-TolC由膜融合蛋白AcrA、外排轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白AcrB和外膜通道蛋白TolC組成。在肺炎克雷伯菌中敲除acrB基因，菌株對(duì)多粘菌素的敏感性增強(qiáng)，抗菌肽減少[18，19]。AcrB橫跨內(nèi)膜，TolC橫跨外膜，AcrA包圍纏繞AcrB與TolC的外周胞質(zhì)部分。多粘菌素等藥物一般是從AcrAB-TolC中央孔道直接排出[20]。AcrA的N端脂質(zhì)部分錨定在內(nèi)膜上[21]。AcrA有一個(gè)原核脂蛋白信號(hào)肽，在其成熟序列的N端和C端各有1個(gè)疏水區(qū)，脂質(zhì)化的N端鑲嵌在內(nèi)膜上，C端伸展到周質(zhì)。膜融合中，AcrA起著連接作用，AcrA的C端與AcrB相互關(guān)聯(lián)，而AcrA的N端在C端的協(xié)助下與TolC相互作用，AcrA能把AcrB和TolC聯(lián)系起來(lái)[20]。AcrB主要作用是攝取和轉(zhuǎn)運(yùn)多粘菌素等底物，三個(gè)AcrB形成同型三聚體，橫跨細(xì)胞內(nèi)膜，由外周胞質(zhì)部分和跨膜部分組成。AcrB帶有12個(gè)TMs，在每個(gè)跨膜結(jié)構(gòu)域中存在偽雙重對(duì)稱軸，即六個(gè)N末端螺旋與六個(gè)C末端螺旋對(duì)稱排列?？缒^(qū)域包含三個(gè)功能上必需的帶電殘基:Asp407、Asp480和Lys940。AcrB帶有2個(gè)大的外周胞質(zhì)發(fā)夾環(huán)，是其底物特異性的主要決定因子[22]。RND家族中的許多外排轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白都與TolC類型蛋白相連。TolC位于外排泵AcrABTolC的最外側(cè)，由跨膜部分和外周胞質(zhì)部分組成?？缒げ糠趾?2個(gè)β折疊，穿越外膜，向胞外開放，內(nèi)徑為底物排出提供寬闊通道；外周胞質(zhì)部分通過(guò)α螺旋卷曲可以開啟、關(guān)閉外膜通道入口[23]。

圖2 RND型外排系統(tǒng)AcrAB-TolC的模式圖[22]

除了多粘菌素外排泵AcrAB-TolC外，在其他細(xì)菌中也發(fā)現(xiàn)了不同的RND家族多粘菌素外排轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白。來(lái)自脆弱擬桿菌的外排泵BmeABC也與多粘菌素外排有關(guān)[24]。其中，BmeB是具有16個(gè)TMs的外排轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白，BmeB也具有類似AcrB的三級(jí)結(jié)構(gòu)[25]，BmeABC外排泵在殘基1 500和2 140之間還具有一段特殊的保守氨基酸序列。

在空腸彎曲桿菌中的CmeABC和CmeDEF外排系統(tǒng)可介導(dǎo)抗生素耐藥和維持細(xì)胞活力。CmeDEF外排泵在空腸彎曲桿菌中主要輔助CmeABC的外排。這兩個(gè)外排泵參與了空腸彎曲桿菌細(xì)胞活力的維持。CmeABC與其他革蘭氏陰性細(xì)菌中已知的多藥外排泵具有結(jié)構(gòu)同源性，其由周質(zhì)融合蛋白CmeA、內(nèi)膜轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白CmeB以及外膜蛋白CmeC組成[26]。CmeB有12個(gè)TMs，在TM1和TM2、TM7和TM8之間有兩個(gè)大環(huán)結(jié)構(gòu)[27]。對(duì)兩種空腸彎曲桿菌NCTC 11168和81-176進(jìn)行試驗(yàn)結(jié)果顯示，菌株11168 CmeF突變后相比野生菌株對(duì)多粘菌素的抗性降低了2倍，菌株81-176進(jìn)行CmeE、CmeF雙突變和CmeE單突變后相比野生菌株對(duì)多粘菌素敏感性增加了2倍[28]。在CmeABC上游有一個(gè)開放閱讀框(ORF)，被命名為CmeR，其可以調(diào)控CmeABC的外排[29]，而CmeDEF不受CmeR的調(diào)控。

鮑曼不動(dòng)桿菌的兩個(gè)外排泵AdeABC和AdeFGH與多粘菌素外排緊密相關(guān)。Verma等[30]研究顯示，外排泵AdeABC與多粘菌素的結(jié)合親和力最強(qiáng)。Sato等[31]證明，在多粘菌素B存在下，編碼外排轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白的adeB基因轉(zhuǎn)錄水平與外膜蛋白A(ompA)以及生物膜相關(guān)蛋白(bap)的mRNA表達(dá)水平正相關(guān)。AdeR和AdeS共同響應(yīng)刺激從而調(diào)節(jié)AdeABC的表達(dá)[32]。Sato等[31]也證明，adeG的表達(dá)水平與多粘菌素的存在與否呈正相關(guān)；adeFGH基因的表達(dá)受LysR型轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子(LTTR)的調(diào)控[33]。

銅綠假單胞菌可通過(guò)外排泵MexAB-OprM和MexXY-OprM外排多粘菌素[34]。外排泵Mex-AB-OprM中的MexB是外膜轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白，形成不對(duì)稱同源三聚體，其中每個(gè)單體均表現(xiàn)出由12個(gè)TM(TM1～TM12)組成的復(fù)雜拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)，以及由TM1和TM2之間以及TM7和TM8之間的兩個(gè)長(zhǎng)環(huán)形成的寬周質(zhì)結(jié)構(gòu)域，這些周質(zhì)結(jié)構(gòu)域折疊成六個(gè)亞結(jié)構(gòu)域，存在保守帶電殘基Asp407、Asp408和Lys939[34]。外排泵MexXY-OprM中的MexY作為轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白，底物特異性幾乎完全由其周質(zhì)結(jié)構(gòu)域決定。MexB和MexY轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白利用質(zhì)子動(dòng)力將多粘菌素等藥物輸出到外部介質(zhì)[35]。Morita等[36]在研究外排泵MexXY-OprM時(shí)，發(fā)現(xiàn)在其上游的一個(gè)調(diào)控基因ParRS會(huì)影響MexXY外排泵基因的表達(dá)，并賦予對(duì)多粘菌素的抗性。

VexAB-TolC外排泵可外排多粘菌素等抗生素并賦予霍亂弧菌抗藥性。Bina等[37]在霍亂弧菌中突變VexAB，結(jié)果表明突變菌株對(duì)多粘菌素B的最低抑菌濃度(MIC)降低，外排泵VexAB將多粘菌素B作為底物。TetR家族轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子VexR位于編碼膜融合蛋白VexA上游，起調(diào)控VexAB的作用[38]。

Eda等[39]在苜蓿根瘤菌中發(fā)現(xiàn)，外排泵Sme-AB-TolC中的TolC基因突變后，相較于野生菌株，突變株對(duì)多粘菌素B敏感性增強(qiáng)，并且推測(cè)基因smeAB的表達(dá)由SmeR與SmeAB中反向序列的結(jié)合所介導(dǎo)。

對(duì)嗜麥芽窄食單胞菌外排泵SmeYZ的研究發(fā)現(xiàn)，PhoP可調(diào)節(jié)SmeZ的表達(dá)，敲除PhoP的菌株與野生菌株相比，SmeZ表達(dá)量顯著降低，且對(duì)多粘菌素B的MIC降低，回補(bǔ)PhoP后，SmeZ表達(dá)量恢復(fù)到野生型水平，且對(duì)多粘菌素B的MIC恢復(fù)到野生型水平[40]。

腦膜炎雙球菌可以抵抗陽(yáng)離子抗菌多肽，外排泵MtrCDE對(duì)多粘菌素B存在特有的抗性[24]。MtrD外排轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白嵌入內(nèi)膜，并將藥物從周質(zhì)和內(nèi)膜輸出到MtrE外膜通道。MtrD包含底物結(jié)合位點(diǎn)，并通過(guò)H+反向轉(zhuǎn)運(yùn)機(jī)制傳導(dǎo)藥物輸出所需的電化學(xué)能[41]。2014年，Bolla等[42]解析MtrD多藥外排泵的晶體結(jié)構(gòu)，每個(gè)MtrD的N端(TM1～TM6)和C端(TM7～TM12)存在偽對(duì)稱關(guān)系。

伯克霍爾德氏菌的外排泵AmrAB-OprA和BpeAB-OprB參與多粘菌素的外排，AmrAB-OprA的amrB基因或BpeAB-OprB的bpeB基因突變會(huì)減少菌株對(duì)多粘菌素的外排，而超表達(dá)兩個(gè)基因則能增強(qiáng)菌株對(duì)多粘菌素等抗生素的抗菌活性[43]。

2.2 多粘菌素ABC家族外排轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白

2.2.1 ABC型外排轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白的結(jié)構(gòu)基礎(chǔ) ABC型外排轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白的基本結(jié)構(gòu)由兩個(gè)跨膜結(jié)構(gòu)域(TMDs)和兩個(gè)核苷酸結(jié)合結(jié)構(gòu)域(NBDs)組成，TMD提供底物轉(zhuǎn)運(yùn)通道，NBD水解ATP提供能量[44]。在細(xì)菌中，ABC型外排轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白的單個(gè)TMD一般擁有6個(gè)跨膜螺旋(TM)，通常以同型或異型二聚體形式存在[45]。

2.2.2 多粘菌素ABC型外排轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白的研究目前，在革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌中鑒定出兩個(gè)多粘菌素ABC型外排轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(AbcAB和PmxCD)。AbcA和AbcB為異型二聚體ABC型多藥轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白，Margolles等[46]通過(guò)將短雙歧桿菌AbcAB異源表達(dá)到乳酸乳球菌中，經(jīng)過(guò)微生物藥物敏感性測(cè)試，發(fā)現(xiàn)AbcAB提高了乳酸乳球菌對(duì)多粘菌素B的抗性。在對(duì)多粘類芽孢桿菌外排多粘菌素轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白的研究中，Choi等[13]推測(cè)PmxC和PmxD可外排多粘菌素，Shaheen等[12]進(jìn)一步通過(guò)單獨(dú)敲除PmxC或PmxD，和共同敲除PmxC和PmxD，在單突變體以及雙突變體中都觀察到多粘菌素產(chǎn)量顯著減少。本課題組在多粘類芽孢桿菌SC2-M1中敲除PmxC和PmxD也得到了與Shaheen等[12]相似的結(jié)果，進(jìn)一步證明了PmxC和PmxD外排多粘菌素的功能。

在革蘭氏陰性菌中也解析出了多粘菌素ABC外排轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白。其中，MacABCsm外排轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白由MacAsm、MacBsm和MacCsm形成三元操縱子，可外排多粘菌素，并有助于菌株的氧化和包膜應(yīng)力耐受性以及生物膜形成。Lin等[47]在嗜麥芽窄食單胞菌中構(gòu)建MacABsm突變體ΔMacAB，與野生型菌株相比，突變菌株顯著降低了對(duì)多粘菌素B和多粘菌素E的MIC。Crow等[48]研究表明MacAB-TolC的表達(dá)增加了大腸桿菌對(duì)多粘菌素和桿菌肽的抵抗力，MacB蛋白通過(guò)協(xié)調(diào)其NBD的可逆二聚化與周質(zhì)構(gòu)象變化來(lái)轉(zhuǎn)運(yùn)底物(圖3)。在大腸桿菌中MacB為二聚體，每個(gè)MacB單體均包含一個(gè)N端NBD、四個(gè)跨膜α-螺旋(TMH)、以及TMH1和TMH2之間的周質(zhì)結(jié)構(gòu)域。TMH3和TMH4堆積在螺旋束的外部，由一個(gè)短的胞質(zhì)外環(huán)連接[45]，這是ABC型轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白的典型結(jié)構(gòu)[49]。

圖3 ABC型外排轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白MacAB-TolC的模式圖[45]

2.3 多粘菌素MFS家族外排轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白及其研究

MFS家族的外排轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白通常含有12～14個(gè)TMs，通過(guò)膜融合蛋白與外膜蛋白組成三聯(lián)復(fù)合體，將有毒化合物排出[50]。在肺炎克雷伯菌中敲除KpnGH基因及回補(bǔ)，證實(shí)KpnGH影響肺炎克雷伯菌的生長(zhǎng)和生物膜形成能力，藥敏試驗(yàn)結(jié)果表明，KpnGH基因敲除菌株比野生菌株對(duì)多粘菌素敏感性降低。KpnG有兩個(gè)疏水跨膜區(qū)，跨越氨基酸23～45和55～77；KpnF有13個(gè)跨膜區(qū)，跨越氨基酸16～38、52～73、76～98、106～128、138～160等[51]。

鮑曼不動(dòng)桿菌中的外排泵EmrAB-TolC對(duì)多粘菌素E具有耐藥性。在Lin等[52]的試驗(yàn)中，將A1S_1772和A1S_1773作為EmrAB系統(tǒng)的代表，分別命名為EmrB和EmrA，敲除鮑曼不動(dòng)桿菌中EmrB基因，相較于野生菌株，敲除菌株對(duì)多粘菌素敏感性增加，并且通過(guò)熒光定量PCR試驗(yàn)證明經(jīng)過(guò)多粘菌素E處理的菌株和野生菌株相比，A1S_1772和A1S_1773上調(diào)1.3～1.6倍，EmrAB泵系統(tǒng)與鮑曼不動(dòng)桿菌中的多粘菌素E外排相關(guān)。鮑曼不動(dòng)桿菌的EmrB是編碼490個(gè)氨基酸的外膜轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白，EmrA具有較大的可溶性C末端結(jié)構(gòu)域(圖4)。EmrAB復(fù)合物的電子顯微鏡單顆粒分析顯示，存在約240×140?的粒子結(jié)構(gòu)，對(duì)應(yīng)于兩個(gè)背對(duì)背排列的EmrAB二聚體[53]。

圖4 MFS家族外排轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白EmrAB-TolC的模式圖[45]

2.4 多粘菌素MATE家族外排轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白及其研究

來(lái)自于越南伯克霍爾德菌的NorM蛋白(圖5)是MATE家族的典型代表，NorM轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白有12個(gè)TMs。由TM1～TM6和TM7～TM12構(gòu)成的兩束6跨膜螺旋形成一個(gè)空腔。胞質(zhì)環(huán)將兩個(gè)部分相連[54]。越南伯克霍爾德菌野生菌對(duì)多粘菌素不敏感，通過(guò)對(duì)NorM蛋白編碼基因的敲除和回補(bǔ)試驗(yàn)，證實(shí)NorM蛋白與伯克霍爾德菌對(duì)多粘菌素B的敏感性正相關(guān)[55]。

圖5 MATE家族外排轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白NorM的模式圖[56]

2.5 多粘菌素SMR家族外排轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白及其研究

SMR家族外排轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白單體一般含有4個(gè)跨膜α-螺旋結(jié)構(gòu)，以二聚體形式通過(guò)構(gòu)象變化泵出多粘菌素等藥物[56]。Srinivasan等[57]在肺炎克雷伯菌NTUH-K2044中突變SMR家族外排泵KpnEF的基因，突變菌株相比野生菌株對(duì)多粘菌素E敏感性增加，證明外排泵KpnEF與肺炎克雷伯菌對(duì)多粘菌素的外排功能有關(guān)。EbrAB為KpnEF的同源蛋白，圖6為EbrAB模式圖，可推知KpnEF的結(jié)構(gòu)。

圖6 SMR家族外排轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白EbrAB的模式圖[58]

3 總結(jié)與展望

多粘菌素相關(guān)外排轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白目前主要來(lái)源于產(chǎn)多粘菌素的多粘類芽孢桿菌以及MDR，如鮑曼不動(dòng)桿菌、肺炎克雷伯菌、銅綠假單胞菌等。目前MDR的多粘菌素耐藥機(jī)制是研究熱點(diǎn)，其中，多粘菌素外排蛋白起到重要作用。部分多粘菌素外排轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白的晶體結(jié)構(gòu)已經(jīng)被解析，可深入探究其外排機(jī)制。而對(duì)于產(chǎn)多粘菌素的多粘類芽孢桿菌中的多粘菌素外排轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白的研究不充分，目前僅通過(guò)間接試驗(yàn)證實(shí)PmxC和PmxD與多粘菌素的外排過(guò)程相關(guān)，因此對(duì)于多粘類芽孢桿菌中其他潛在的多粘菌素外排轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白的發(fā)掘以及轉(zhuǎn)運(yùn)機(jī)制的解析是十分必要的。

根據(jù)序列相似性，多粘菌素外排轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白可分為5種類型，其中RND家族中與多粘菌素外排相關(guān)的轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白較多，主要存在于MDR中。揭示MDR菌株中的多粘菌素外排轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白有助于研究和解決病原菌耐藥性難題?？偨Y(jié)多粘菌素相關(guān)外排轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白及其特性，可為深入研究外排轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白介導(dǎo)的細(xì)菌多重耐藥性提供參考，也為進(jìn)一步提高多粘類芽孢桿菌的多粘菌素產(chǎn)量提供理論依據(jù)。