茶葉微生物研究現(xiàn)狀與展望

黃友誼，方欣，隋夢圓，江廣賢，肖婧儀，王文鳳，寧瑤瑤

華中農(nóng)業(yè)大學(xué)園藝林學(xué)學(xué)院，武漢430070

茶是世界上最受歡迎和消費(fèi)最廣泛的飲料之一，而微生物與茶聯(lián)系緊密，最為典型的有微生物發(fā)酵的黑茶［1］、紅茶菌［2］等。隨現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)的發(fā)展，微生物在茶領(lǐng)域的研究與應(yīng)用逐漸拓寬且深入，涉及茶樹種植、茶葉加工和茶葉貯存等環(huán)節(jié)，呈現(xiàn)多元化發(fā)展趨勢，并在推動(dòng)茶產(chǎn)業(yè)發(fā)展中發(fā)揮了明顯的作用［3］。為更好地將微生物應(yīng)用于茶領(lǐng)域，本文介紹了茶園微生物中茶樹根際微生物、茶樹病原微生物、茶樹內(nèi)生菌、茶樹益肥微生物和茶園抗逆微生物的研究現(xiàn)狀，總結(jié)了以黑茶為主的茶葉加工微生物以及茶葉衛(wèi)生相關(guān)微生物的研究情況，以期促進(jìn)茶葉微生物學(xué)科的形成與發(fā)展。

1 茶園微生物

1.1 茶樹根際微生物

微生物生態(tài)是表征土壤質(zhì)量的重要指標(biāo)之一［4］。研究表明植物樹齡、季節(jié)、土壤特性、間作等因素均會(huì)對根際微生物的種類和數(shù)量產(chǎn)生影響［5-8］。茶樹根際土壤微生物群落中，以細(xì)菌含量最多，其次為真菌；由于茶樹根際土壤pH 值較小，不利于放線菌的生長繁殖，因此放線菌豐度較低；細(xì)菌主要優(yōu)勢菌屬包括假單胞菌屬（Pseudomonas）、微球菌屬（Micrococcus）和芽孢桿菌屬（Bacillus）等，真菌優(yōu)勢菌屬包括木霉屬（Trichoderma）、青霉屬（Penicillium）和曲霉屬（Aspergillus）等［9］。茶園中有益微生物常見的功能包括固氮、耐酸鋁、病原菌拮抗以及促進(jìn)多種營養(yǎng)元素（氮、磷、鉀、鐵等）的活化和吸收等功能［10-11］。除此之外，部分微生物還可以通過合成吲哚-3-乙酸、脫落酸、乙烯抑制劑等生長調(diào)節(jié)劑，直接影響植物生長情況［12］。在根際和葉際之間發(fā)生的植物病害較為常見，而根際、葉際等部位的微生物可以與植物共同抑制病害的發(fā)生或降低傷害，微生物可以作為植物病害防治的新途徑和資源，以此達(dá)到控制病害的目的［13-14］。

1.2 茶樹病原微生物與生防菌

因環(huán)境條件變化和病菌的抗藥性等問題，茶樹病害對茶葉生產(chǎn)的影響日益突出。根據(jù)病害對茶樹危害部位的不同，將病害分為葉病、莖病、根病等，其中葉病是茶樹中主要的病害類型。較常見的病害中，危害葉片的有茶餅病、茶炭疽病、茶輪斑病、茶云紋葉枯病、茶白星病等［15］；危害枝梢的病害有茶枝黑點(diǎn)病、茶紅銹藻病、茶胴枯病、茶褐斑病、茶苗莖枯病等；危害根部的病害有茶紫紋羽病、茶白絹病、茶根朽病等［16-17］。也有根據(jù)茶樹病原物的分類地位來劃分茶樹病害種類，病原物主要有真菌、細(xì)菌、病毒、線蟲等［16-17］；其中真菌引起的病害被確認(rèn)為是最常見的茶樹病害類型，如由擔(dān)子菌引起的茶餅病、茶網(wǎng)餅病、茶炭疽病以及茶云紋葉枯病等。與此同時(shí)，利用生防菌防治病蟲害是生物防治的重要手段，各種類型的微生物（病毒、細(xì)菌、真菌、線蟲和微孢子等）殺蟲劑被廣泛地應(yīng)用于農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中。其中在茶樹方面應(yīng)用比較廣泛的是蘇云金桿菌（Bacillus thuringiensis），其主要被用于防御和治療茶梢蛾、茶小卷葉蛾、茶尺蠖和茶細(xì)蛾等的危害。除此之外，用于防治茶尺蠖的有茶尺蠖病毒水劑，是由茶尺蠖核型多角體病毒制成。胡淑霞［18］在茶園中分離到能有效抑制茶赤葉斑病、茶白星病、茶煤病、茶輪斑病和茶褐色葉斑病的病原微生物——茶孢桿菌，為微生物防治茶園病害提供了有效途徑。

1.3 茶樹內(nèi)生菌

植物內(nèi)生菌（endophytes）包括內(nèi)生真菌、內(nèi)生細(xì)菌和內(nèi)生放線菌，許多學(xué)者對茶樹內(nèi)生菌的分離方法［19-21］、分布規(guī)律［22］、優(yōu)勢菌種鑒定［23］和生物學(xué)作用［24-25］等方面進(jìn)行了研究和探討。茶樹內(nèi)生細(xì)菌主要包括變形菌門（Proteobacteria）、厚壁菌門（Firmicutes）和擬桿菌門（Bacteroidetes），內(nèi)生真菌主要包括子囊菌門、擔(dān)子菌門和毛霉門微生物。茶樹內(nèi)生真菌和細(xì)菌的數(shù)量和種類隨地理環(huán)境、季節(jié)、茶樹品種、組織類型、葉齡的變化而變化。近幾年人們對茶樹內(nèi)生菌的功能研究較多，按內(nèi)生菌對植物的作用效果可分為有益、有害和中性三類；其中有益菌可以分泌一些促生物質(zhì)如吲哚乙酸等促進(jìn)植物生長，產(chǎn)生生物活性物質(zhì)，形成茶葉風(fēng)味，提高茶樹抗逆能力，防治植物病害等；有害菌能夠引起植物病害，抑制植物生長等。

1.4 茶樹益肥微生物

近年來，隨著綠色、生態(tài)、安全的理念逐步成為發(fā)展主流，綠色有機(jī)茶園不斷建立，多種適宜綠色有機(jī)茶園應(yīng)用的微生物肥料也相繼出現(xiàn)。根瘤菌、固氮菌、解磷菌、解鉀菌以及各種功能性的有益微生物作為生物肥料施用于綠色有機(jī)茶園，在保證茶園綠色生態(tài)的基礎(chǔ)上達(dá)到提升品質(zhì)和增加產(chǎn)量的效果［26］。如張漢鵠等［27］將從茶樹上分離的1 株芽孢桿菌制成微生物制劑，能夠促進(jìn)茶樹生長發(fā)育，提高茶葉產(chǎn)量。此外，一種以光合細(xì)菌、乳酸菌、酵母菌、放線菌為主的EM 有機(jī)肥，是由80 余種微生物復(fù)合培養(yǎng)而成的一類特殊的微生物制劑［28］，具有解磷、解鉀、固氮等提高土壤肥力的作用。

1.5 茶園抗逆微生物

在茶園抗逆微生物的研究中，章順成等［29］從茶樹根系分離鑒定出1株耐Al3+菌株，該菌株在一定范圍內(nèi)對Al3+具有吸附作用；同時(shí)該菌株能反射性地主動(dòng)攝入更多的水，形成較大物理靜水壓，以對抗由于Al3+升高而產(chǎn)生的高化學(xué)滲透壓，從而規(guī)避鋁毒害。趙?？。?0］從茶樹中分離得到53 株具備耐鋁功能的內(nèi)生細(xì)菌，從中鑒定出Enterobacter sacchari、洋蔥伯克霍爾德菌（Burkholderia cepacia）和Burkholderia seminalia的鋁耐受性顯著高于其他菌株；其中洋蔥伯克霍爾德菌能夠明顯降低茶園土壤中Al3+的含量，增強(qiáng)了茶樹的鋁耐受性，還具備固氮、解磷等功能，對植物生長具有一定的促進(jìn)作用。

2 茶葉加工微生物

2.1 黑茶微生物

黑茶因多種健康功效而越來越受到關(guān)注［31-32］，微生物發(fā)酵被認(rèn)為是黑茶感官品質(zhì)和健康功效形成的關(guān)鍵因素，有多種與黑茶質(zhì)量相關(guān)的化學(xué)成分在多種功能核心微生物作用下發(fā)生降解、氧化、縮合、結(jié)構(gòu)修飾、甲基化和糖苷化等一系列反應(yīng)［1］。為了揭示黑茶中化學(xué)成分的微生物生物轉(zhuǎn)化，學(xué)者們對發(fā)酵過程中微生物的群落結(jié)構(gòu)和動(dòng)態(tài)變化進(jìn)行了大量的研究。早期對黑茶中微生物群落的研究主要依靠傳統(tǒng)的平板分離、純化等可培養(yǎng)的方法，但傳統(tǒng)方法不能全面揭示發(fā)酵過程中微生物的群落組成。隨著分子生物學(xué)的發(fā)展，聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)-變性梯度凝膠電泳（PCR-DGGE）［33-34］、高通量測序［35-37］等免培養(yǎng)技術(shù)開始被廣泛應(yīng)用于黑茶微生物研究。

1）普洱茶（熟茶）。普洱茶（熟茶）是黑茶中微生物群落結(jié)構(gòu)和動(dòng)態(tài)變化方面研究最多的。研究者通過PCR-DGGE［33-34］、454 pyrosequencing 高通量測序［38］、鳥槍法宏基因組學(xué)（shotgun metagenomics）［39］、Illumina MiSeq 高通量測序［35-37］、Illumina MiSeq 高通量測序結(jié)合qPCR（quantitative PCR）技術(shù)［40］分析普洱茶微生物的群落結(jié)構(gòu)和動(dòng)態(tài)變化。已確定發(fā)酵過程中的主要菌屬如表1所示。

表1 黑茶加工過程中的主要優(yōu)勢菌屬Table 1 Dominant microorganisms in black tea processing

在普洱茶（熟茶）渥堆發(fā)酵過程中，細(xì)菌和真菌協(xié)同作用形成普洱茶（熟茶）獨(dú)特的品質(zhì)特征及健康功效，但研究者對發(fā)酵過程中的微生物結(jié)構(gòu)或起主導(dǎo)作用的微生物群體尚未達(dá)成共識(shí)。Zhao等［38］研究表明普洱茶（熟茶）發(fā)酵過程中曲霉屬是唯一的優(yōu)勢真菌，占全部測定序列的94.98%；最優(yōu)勢的細(xì)菌門為變形菌門（48.42%），主要包括假單胞菌屬（17.82%）、unclassified_Enterobacteriaceae（7.69%）、無色桿菌屬（4.74%）等；其次為厚壁菌門（19.91%）、放線菌門（Actinobacteria，16.91%）、藍(lán)菌門（Cyanobacteria，9.95%）和擬桿菌門（3.79%）。也有研究表明在普洱茶（熟茶）發(fā)酵前期雖然以曲霉屬占據(jù)絕對優(yōu)勢，但隨著發(fā)酵進(jìn)行，曲霉屬相對豐度顯著下降，后期逐漸演替為芽生葡萄孢酵母屬占據(jù)優(yōu)勢地位［35］；發(fā)酵前期以歐文氏菌屬、泛菌屬和假單胞菌屬為主，而發(fā)酵中、后期芽胞桿菌屬、葡萄球菌屬、短桿菌屬、考克氏菌屬及短狀桿菌屬為優(yōu)勢菌群［36］。?i等［40］研究表明普洱茶（熟茶）發(fā)酵過程中，盡管枝孢霉屬（Cladosporium）和附球菌屬（Epicoccum）在原料中超過所有測定序列的80%，但隨著發(fā)酵進(jìn)行，曲霉屬很快成為優(yōu)勢菌屬，主導(dǎo)著整個(gè)發(fā)酵過程；發(fā)酵后期黑曲霉（Aspergillus niger）的豐度顯著下降，食腺嘌呤芽生葡萄孢酵母（Blastobotrys adeninivorans）、埃默森藍(lán)狀菌（Rasamsonia emersonii）和疏綿狀嗜熱絲孢菌（Thermomyces lanuginosus）相對豐度增加，食腺嘌呤芽生葡萄孢酵母成為發(fā)酵中的優(yōu)勢菌種，其次為埃默森藍(lán)狀菌、疏綿狀嗜熱絲孢菌和帚狀曲霉（Aspergillus penicillioides）；在屬水平上，norank_o_Chloroplast是原料中的絕對優(yōu)勢細(xì)菌，加工過程中norank_o_Chloroplast急劇下降，泛菌屬在發(fā)酵中期的豐度增加到56.68%，芽孢桿菌屬在發(fā)酵后期顯著增加至82.97%，成為絕對優(yōu)勢細(xì)菌。?i等［39］同樣發(fā)現(xiàn)在普洱茶發(fā)酵前期，屬水平上優(yōu)勢微生物是曲霉屬（42.10%），其次為假單胞菌屬（19.40%）和德巴利酵母屬（4.78%），且黑曲霉為優(yōu)勢菌種，相對豐度為12.88%；在發(fā)酵后期，曲霉屬相對豐度大幅度下降至6.51%，其他菌屬包括無色桿菌屬（8.39%）、Sugiyamaella（6.55%）、Rasamsonia（6.43%）、德巴利酵母屬（6.24%）和橫梗霉屬（5.91%）成為優(yōu)勢菌屬，同時(shí)Sugiyamaella lignohabitans（6.55%）和埃默森藍(lán)狀菌（6.43%）成為后期的優(yōu)勢菌種。

已有的研究表明普洱茶（熟茶）發(fā)酵過程中微生物組成、結(jié)構(gòu)和多樣性的變化顯著，不同研究中報(bào)道的微生物群落結(jié)構(gòu)及變化的不同可能與原料來源、生產(chǎn)環(huán)境和發(fā)酵工藝等因素相關(guān)。但現(xiàn)有研究中曲霉屬均被認(rèn)為是普洱茶（熟茶）中重要的優(yōu)勢真菌，此外，真菌均在發(fā)酵中集中呈現(xiàn)，多樣性在原料中最高，發(fā)酵過程中多樣性明顯降低；相對于真菌，細(xì)菌的多樣性較高，發(fā)酵前后細(xì)菌的多樣性和豐富度均顯著增加。

2）茯磚茶。茯磚茶微生物發(fā)酵可以劃分為用于生產(chǎn)黑毛茶的堆垛發(fā)酵和“發(fā)花”工序2 個(gè)階段。通過PCR-DGGE［41］和Illumina MiSeq高通量測序［41-46］等免培養(yǎng)技術(shù)研究茯磚茶群落結(jié)構(gòu)及動(dòng)態(tài)變化，確定在整個(gè)發(fā)酵過程中主要菌屬如表1所示。

茯磚茶中的黑毛茶堆垛發(fā)酵過程中，優(yōu)勢真菌包括塞伯林德納氏酵母屬、Uwebraunia、曲霉屬和unclassifiedPleosporales。在這些優(yōu)勢真菌中，塞伯林德納氏酵母屬最為豐富，它的相對豐度從最初的32.63%顯著增長至發(fā)酵后期的95.52%。而Uwe-braunia真菌屬從最初的16.37%顯著降低至發(fā)酵后期的1.64%。曲霉屬和unclassified_Pleosporales在發(fā)酵前期顯著降低，分別從11.57%降低至0.33%和從29.35%降低至5.18%；且之后保持相對穩(wěn)定至發(fā)酵結(jié)束。克雷伯氏菌屬是發(fā)酵過程中唯一的優(yōu)勢細(xì)菌，其相對豐度從最初的81.99%逐漸上升至發(fā)酵后期的99.06%。乳桿菌屬是次優(yōu)勢細(xì)菌，其相對豐度從最初的6.88%顯著降低至后期的0.41%［46］。與其他類型的黑茶相比，茯磚茶在堆垛發(fā)酵之后需要經(jīng)歷1 個(gè)獨(dú)特的微生物發(fā)酵工序，稱之為“發(fā)花”。在“發(fā)花”工序中，“金花”會(huì)在茯磚茶內(nèi)部大量繁殖；基于形態(tài)學(xué)、DNA 序列和多基因序列的系統(tǒng)發(fā)育學(xué)鑒定，“金花”實(shí)際上是冠突散囊菌（Eurotium cristatum）的金色閉囊殼；在新的分類中冠突散囊菌已被更名為冠突曲霉（Aspergillus cristatum）［50］?！鞍l(fā)花”被認(rèn)為是一種特別的發(fā)酵過程，在特殊處理下冠突曲霉成為茯磚茶中唯一的優(yōu)勢真菌［50-52］，可以分泌α-淀粉酶、多酚氧化酶、纖維素酶、果膠酶、木聚糖酶、蛋白酶和其他半纖維素酶等多種酶，這些酶可以通過促進(jìn)特定生物活性化合物的形成來提高茯磚茶的品質(zhì)［41］。此外，“金花”和冠突曲霉也在其他類型的黑茶如普洱茶、黑磚茶、千兩茶和六堡茶中被檢測到［49，53］，不過含量很低，不是優(yōu)勢菌。

3）其他類黑茶。與普洱茶（熟茶）和茯磚茶相比，關(guān)于其他類黑茶如六堡茶、青磚茶等的發(fā)酵微生物群落組成和動(dòng)態(tài)變化方面的研究較少。Wang等［47］通過Illumina miseq 高通量測序技術(shù)研究六堡茶發(fā)酵過程中微生物群落結(jié)構(gòu)及動(dòng)態(tài)變化，共鑒定到真菌581 屬和細(xì)菌341 屬，其中主要優(yōu)勢菌屬包括真菌的曲霉屬、芽生葡萄孢酵母屬和Rasamsonia等，以及細(xì)菌的葡萄球菌屬、unclassified_Enterobacteriaceae、短狀桿菌屬、短桿菌屬、Pluralibacter、Carnimonas、乳桿菌屬和考克氏菌屬等。發(fā)酵過程中優(yōu)勢菌落演替，早期以鞘氨醇單胞菌屬（Sphingomonas，23.68%）、甲基桿菌屬（17.67%）、金黃桿菌屬（Chryseobacterium，12.55%）、曲霉屬（16.70%）、枝孢屬（Cladosporium，8.36%）、青霉屬（6.07%）和芽生葡萄孢酵母屬（1.54%）為主，后期階段演替為葡萄球菌屬（59.05%）、短狀桿菌屬（9.66%）、考克氏菌屬（9.81%）、芽生葡萄孢酵母屬（65.07%）、曲霉屬（21.10%）和Rasamsonia（11.06%）［47］。張丹丹等［54］通過可培養(yǎng)方法研究青磚茶發(fā)酵過程中微生物的種類與變化，結(jié)果顯示在青磚茶渥堆發(fā)酵過程中以細(xì)菌數(shù)量最多，放線菌、霉菌其次，酵母菌最少；研究結(jié)果還表明發(fā)酵過程中不同堆層間微生物數(shù)量差異大，霉菌、酵母菌的數(shù)量在渥堆發(fā)酵前期的上層樣中最多，細(xì)菌、放線菌數(shù)量在渥堆發(fā)酵后期的上層樣中最多。Hu 等［48］通過Miseq Illumina 高通量測序技術(shù)分析青磚茶發(fā)酵過程中微生物群落結(jié)構(gòu)及動(dòng)態(tài)變化，發(fā)現(xiàn)真菌37屬，其中曲霉屬是青磚茶渥堆過程的絕對優(yōu)勢菌，相對豐度在38.1%～75.1%，青霉屬、塞伯林德納氏酵母屬、德巴利酵母屬、假絲酵母屬（Candida）、嗜熱絲孢菌屬、Rasamsonia、嗜熱子囊菌屬（Thermoascus）和絲衣霉屬（Byssochlamys）分別在不同時(shí)期出現(xiàn)，中后期優(yōu)勢菌屬為絲衣霉屬。

2.2 其他茶類微生物

除黑茶加工外，還發(fā)現(xiàn)微生物對紅茶、白茶等茶類的品質(zhì)形成具有一定的影響。在紅茶加工過程中，霉菌、酵母菌等具有生成α-淀粉酶、纖維素酶等酶類、促進(jìn)氨基酸轉(zhuǎn)化、提高可溶性糖含量以及促進(jìn)花香甜味的形成等作用，能夠增進(jìn)茶湯香氣和滋味。紅茶加工中部分纖維素降解菌能夠?qū)⒀咳~中的纖維素降解為纖維二糖，再進(jìn)一步轉(zhuǎn)化為葡萄糖，最終減輕茶葉的粗老味而增加甜醇鮮爽味［55］。白茶加工過程中，接種冠突曲霉菌可明顯降低白茶苦澀味（酯型兒茶素總量降低），同時(shí)“發(fā)花”賦予白茶陳醇滋味［56］。

2.3 茶飲料微生物

微生物發(fā)酵茶飲料是以茶葉為底物、通過微生物的生理代謝作用能夠形成特定風(fēng)味與品質(zhì)的一類茶飲料［57］；這不僅能夠解決中低檔茶葉的滯銷問題，又可以滿足人們對健康功能型飲料的需求。用于茶飲料發(fā)酵的微生物主要有細(xì)菌、酵母菌、霉菌和食用真菌等，目前微生物茶飲料通常用細(xì)菌和真菌進(jìn)行混菌發(fā)酵制作而成。最具代表性的微生物發(fā)酵茶飲料是紅茶菌，其大多以紅茶為發(fā)酵原料，少數(shù)使用綠茶和普洱茶，參與發(fā)酵的微生物主要是酵母、醋酸菌和少量乳酸菌［58-59］。此外，還有微生物發(fā)酵的茶醋飲料、茶酒飲料等。

3 茶葉衛(wèi)生微生物

在鮮葉采摘、加工、包裝和貯運(yùn)全過程中，微生物都有可能對茶葉造成污染，甚至可能在適宜環(huán)境條件下生長并產(chǎn)生毒素，危害人類健康［39］。近年來的研究發(fā)現(xiàn)，紅茶、綠茶和黑茶等類成品茶葉中都存在產(chǎn)毒真菌污染的情況。紅茶成品中檢測到的污染真菌以曲霉屬為主［60-64］，此外還檢測到青霉屬、根霉屬（Rhizopus）、枝孢霉屬、橫梗霉屬和鐮刀菌屬等［60，63-64］。黑茶成品中檢測到的污染真菌以雜色曲霉（Aspergillus versicolor）、聚多曲霉（Aspergillus sydowii）、帚狀曲霉（Aspergillus penicillioides）、煙曲霉（Aspergillus fumigatus）、炭黑曲霉（Aspergillus carbonarius）、構(gòu)巢曲霉（Aspergillus nidulans）、棕曲霉等曲霉屬真菌［65-68］，以及青霉屬的桔青霉（Penicillium citrinum）、鮮綠青霉（Penicillium viridicatum）等真菌為主［65，67-68］。有關(guān)綠茶、白茶和烏龍茶等茶類中真菌毒素的研究較少，但也同樣存在曲霉屬和青霉屬優(yōu)勢菌群［60，69-70］。

此外，有研究表明茶葉中的微生物對農(nóng)藥殘留有一定的降解作用。洪永聰?shù)龋?1］從茶樹中分離得到1 株對茶輪斑病有抑制作用的枯草芽孢桿菌，具有很強(qiáng)的降解氯氰菊酯的能力。王兆守等［72］定向篩選得到1 株假單胞菌c1f6，具有很強(qiáng)的降解擬除蟲菊酯類農(nóng)藥的功能，對有機(jī)磷類農(nóng)藥同樣具備降解能力。

4 展 望

4.1 梳理茶葉微生物體系，建立茶葉微生物方向

當(dāng)前很多傳統(tǒng)學(xué)科在與其他學(xué)科相互交叉融合的過程中，得到了快速發(fā)展與提升。在茶學(xué)學(xué)科中，也不斷有新技術(shù)如光電技術(shù)、計(jì)算機(jī)技術(shù)等的融合應(yīng)用，同樣明顯促進(jìn)了茶學(xué)學(xué)科的發(fā)展。盡管微生物早已深嵌入茶樹種植管理、茶葉加工、茶葉衛(wèi)生質(zhì)量、茶產(chǎn)品開發(fā)等方面，但一直發(fā)展不足，導(dǎo)致推動(dòng)茶學(xué)學(xué)科發(fā)展的作用不明顯，其原因在于未能提升到一個(gè)學(xué)科層面來發(fā)展。華中農(nóng)業(yè)大學(xué)園藝林學(xué)學(xué)院茶學(xué)系率先在茶學(xué)本科專業(yè)開設(shè)了《茶葉微生物產(chǎn)品學(xué)》專業(yè)選修課程，面向茶學(xué)碩士研究生開設(shè)了《茶葉微生物專題》專業(yè)選修課程（也有其他高校開設(shè)有類似課程）；還主編出版了“十三五”規(guī)劃教材《茶葉微生物產(chǎn)品學(xué)》，正在編寫農(nóng)業(yè)農(nóng)村部“十三五”規(guī)劃教材《茶葉微生物學(xué)》，努力將茶葉微生物作為一門學(xué)科來建設(shè)發(fā)展。盡管如此，還需要國內(nèi)同仁共同對茶葉微生物的學(xué)科體系進(jìn)行梳理，逐步建立茶葉微生物方向，并面向茶學(xué)本科生和研究生開設(shè)相關(guān)課程，積極培養(yǎng)具備茶葉微生物知識(shí)的綜合性茶學(xué)專業(yè)人才，促使微生物推動(dòng)茶學(xué)學(xué)科更快更好地發(fā)展。

4.2 加大茶葉微生物的基礎(chǔ)研究

當(dāng)前對茶葉微生物的基礎(chǔ)研究明顯不足，導(dǎo)致茶葉微生物相關(guān)理論基礎(chǔ)不完備，應(yīng)從以下幾個(gè)方面加強(qiáng)研究：一是加強(qiáng)茶葉微生物區(qū)系研究。對茶園微生物、茶葉加工微生物、茶葉產(chǎn)品質(zhì)量微生物等方面的微生物區(qū)系進(jìn)行全面研究分析，利用宏基因組學(xué)等手段了解不同微生物種群的種類與數(shù)量，確定微生物的動(dòng)態(tài)變化規(guī)律，明確優(yōu)勢菌的種類與互作關(guān)系，確定微生物生長變化與茶樹生長、茶產(chǎn)品品質(zhì)形成、茶葉質(zhì)量等方面的關(guān)系［34，73-77］。二是加強(qiáng)茶葉微生物資源的收集與保藏。需加強(qiáng)對茶葉微生物資源的調(diào)查，及時(shí)收集保存茶源微生物菌種資源，建立茶葉微生物資源庫；同時(shí)加強(qiáng)對各種優(yōu)勢菌、特色功能菌的篩選與鑒定，針對利用目標(biāo)建立茶葉微生物資源亞庫［78-79］。三是加強(qiáng)茶葉微生物生物學(xué)特性研究。對分離篩選的茶源優(yōu)勢菌或功能菌的培養(yǎng)條件、生長特性、酶學(xué)特性、代謝特性等進(jìn)行全面研究，為更好地利用這些菌株提供基礎(chǔ)。四是加強(qiáng)茶葉微生物作用機(jī)制研究。利用多組學(xué)技術(shù)剖析微生物對茶樹生長或茶葉加工的代謝組學(xué)特征，建立微生物與茶相互作用的代謝圖譜，特別是茶樹病原菌致病機(jī)制、茶樹內(nèi)生菌促進(jìn)茶樹生長的機(jī)制、微生物發(fā)酵轉(zhuǎn)化形成黑茶品質(zhì)與功能的機(jī)制等方面。同時(shí)利用多學(xué)科理論相融合，研究黑茶固態(tài)發(fā)酵理論與動(dòng)力學(xué)，建立黑茶發(fā)酵模型，以實(shí)現(xiàn)精準(zhǔn)定向調(diào)控黑茶發(fā)酵品質(zhì)。

4.3 加強(qiáng)茶葉微生物的應(yīng)用研究

發(fā)展茶葉微生物除了加強(qiáng)基礎(chǔ)研究，必須加強(qiáng)茶葉微生物的應(yīng)用研究。一是加強(qiáng)助推傳統(tǒng)微生物茶產(chǎn)品生產(chǎn)技術(shù)水平提升的應(yīng)用研究。通過篩選優(yōu)良菌株、制作菌劑等方式，標(biāo)準(zhǔn)化開發(fā)茶樹生防菌劑、茶樹益生菌劑、黑茶發(fā)酵菌劑、茶園含菌有機(jī)肥等產(chǎn)品，使傳統(tǒng)微生物茶產(chǎn)品的生產(chǎn)逐步實(shí)現(xiàn)標(biāo)準(zhǔn)化與現(xiàn)代化，尤其是促使黑茶加工實(shí)現(xiàn)全程清潔化、可控、安全、發(fā)酵生產(chǎn)［55］。二是加大開發(fā)可食微生物茶產(chǎn)品的研究力度。依據(jù)色、香、味、功能四大食品特性來進(jìn)行，利用產(chǎn)香微生物研發(fā)不同香型茶產(chǎn)品；利用產(chǎn)糖微生物研發(fā)滋味回甘強(qiáng)的發(fā)酵茶產(chǎn)品；利用特定微生物研發(fā)富含沒食子酸、茶氨酸等功能活性成分的茶產(chǎn)品［55，80］。三是加強(qiáng)開發(fā)特色非可食微生物茶產(chǎn)品的研究?？砷_發(fā)促進(jìn)茶樹優(yōu)質(zhì)高產(chǎn)的茶樹生防產(chǎn)品、茶樹益肥、茶樹促生長劑、茶樹抗逆劑等制劑，可研發(fā)生產(chǎn)應(yīng)用于降解農(nóng)殘、縮短發(fā)酵時(shí)間、形成特色品質(zhì)等的微生物菌劑等［55］。

4.4 以微生物手段綜合開發(fā)利用茶資源

當(dāng)前我國茶資源呈現(xiàn)快速增長的趨勢，每年有大量茶資源未及時(shí)采摘利用，還有大量的茶產(chǎn)品加工副產(chǎn)物未得到有效利用。傳統(tǒng)開發(fā)方法對進(jìn)一步促進(jìn)大規(guī)模開發(fā)利用茶資源的作用有限，而微生物技術(shù)卻可彌補(bǔ)當(dāng)前新技術(shù)手段的不足。微生物的種類豐富，可以產(chǎn)酶、產(chǎn)香，還可以分泌各種活性成分?？梢岳梦⑸锇l(fā)酵茶渣、修剪廢棄物、茶果、茶花等制作飼料、生物肥等；可以利用微生物發(fā)酵制備表面活性劑、殺蟲劑、填充劑等；還可以利用微生物發(fā)酵茶資源生產(chǎn)酶制劑、蛋白質(zhì)、生物材料等［55］。借助微生物可以提升茶資源的利用率，提高茶園綜合效益，促進(jìn)茶產(chǎn)業(yè)提檔升級。

總之，茶葉微生物發(fā)展空間巨大，未來必定會(huì)有力促進(jìn)茶學(xué)學(xué)科快速發(fā)展。