色譜及質(zhì)譜檢測(cè)技術(shù)在糧食質(zhì)量安全監(jiān)測(cè)中的應(yīng)用研究

董 娜，羅蓰超，楊忠寶

（吉林省糧油衛(wèi)生檢驗(yàn)監(jiān)測(cè)站，長(zhǎng)春 130033）

“民以食為天，食以安為先”，加強(qiáng)糧食質(zhì)量安全監(jiān)測(cè)是確保國(guó)家糧食質(zhì)量安全的基石。糧食質(zhì)量安全監(jiān)測(cè)的檢測(cè)項(xiàng)目主要包括真菌毒素、農(nóng)藥殘留和重金屬等。

色譜儀是一種很好的分離用儀器，但其檢測(cè)能力差；質(zhì)譜儀是一種很好的檢測(cè)儀器，其定性定量能力突出，但對(duì)混合物的分離無(wú)能為力。色譜與質(zhì)譜聯(lián)用可以相互取長(zhǎng)補(bǔ)短，成為集分離、定性、定量于一體的分析技術(shù)。色譜與質(zhì)譜聯(lián)用后，首先樣品被色譜分離，然后進(jìn)入質(zhì)譜被進(jìn)一步離子化，離子碎片經(jīng)質(zhì)譜的質(zhì)量分析器后,按荷質(zhì)比分開，經(jīng)檢測(cè)器得到質(zhì)譜圖，通過(guò)與數(shù)據(jù)庫(kù)對(duì)比可以得到所分析物質(zhì)的名稱以及含量。在糧食質(zhì)量安全監(jiān)測(cè)中，色譜及質(zhì)譜檢測(cè)技術(shù)在檢測(cè)真菌毒素和農(nóng)藥殘留時(shí)應(yīng)用最多。

1 真菌毒素的檢測(cè)

1.1 真菌毒素的種類和危害

真菌毒素是某些真菌在糧食中生長(zhǎng)繁殖所產(chǎn)生的次級(jí)代謝產(chǎn)物，在糧食收獲前后可大范圍地污染糧食。據(jù)聯(lián)合國(guó)糧食與農(nóng)業(yè)組織(FAO)統(tǒng)計(jì)，世界糧食超過(guò)25%被真菌毒素所，每年僅美國(guó)糧食產(chǎn)業(yè)因真菌毒素污染產(chǎn)生的損失就高達(dá)9.23億美元。目前已被確認(rèn)化學(xué)結(jié)構(gòu)的真菌毒素達(dá)400多種，在糧食中存在較多且影響較大的真菌毒素主要有：黃曲霉毒素、赭曲霉毒素、伏馬毒素、單端孢霉烯族化合物以及玉米赤霉烯酮等。

黃曲霉毒素主要是由黃曲霉和寄生曲霉產(chǎn)生的一類真菌毒素，主要有B1、B2、G1、G2等羥基化代謝產(chǎn)物，其中黃曲霉毒素B1的毒性和致癌性最強(qiáng)，易誘發(fā)肝癌，且在糧食中污染最廣泛，因此，在糧食質(zhì)量安全監(jiān)測(cè)中，主要以黃曲霉毒素B1為檢測(cè)指標(biāo)；赭曲霉毒素由赭曲霉、鮮綠青霉等代謝產(chǎn)生，包括A、B、C、D等多種結(jié)構(gòu)類似的化合物，其中赭曲霉毒素A毒性最強(qiáng)，易誘發(fā)腎病、腸炎，嚴(yán)重可導(dǎo)致腎臟癌變；伏馬毒素是一類主要由層出鐮刀菌和串珠鐮刀菌等霉菌代謝產(chǎn)生的真菌毒素，由于其化學(xué)結(jié)構(gòu)的不同，可分為A、B、C和P四類，其中B類毒性最強(qiáng)，伏馬毒素被認(rèn)為是誘發(fā)人體食道癌的病因，對(duì)各種動(dòng)物的影響不一，研究發(fā)現(xiàn)低劑量的伏馬毒素就能引起馬匹的腦白質(zhì)軟化癥，在豬體內(nèi)會(huì)攻擊心肺系統(tǒng)；單端孢霉烯族化合物是由鐮孢菌、頭孢菌和木霉菌等代謝產(chǎn)生的一組具有相似生物活性和化學(xué)結(jié)構(gòu)的有毒代謝產(chǎn)物，按照功能團(tuán)將其分為A、B、C、D四個(gè)類型，其中A和B最為常見(jiàn)，A型常見(jiàn)的有T-2毒素、HT-2毒素等，B型有脫氧雪腐鐮刀菌烯醇、3-乙酰脫氧雪腐鐮刀菌烯醇、15-乙酰脫氧雪腐鐮刀菌烯醇和雪腐鐮刀菌烯醇等，單端孢霉烯族化合物的毒性作用主要有細(xì)胞毒性、免疫抑制和致畸致癌作用，而A型毒性又比B型大；玉米赤霉烯酮是由禾谷鐮孢等鐮刀菌屬的菌種代謝所產(chǎn)生的次級(jí)產(chǎn)物，并無(wú)劇毒，但會(huì)對(duì)哺乳動(dòng)物的生殖系統(tǒng)產(chǎn)生傷害。常見(jiàn)的真菌毒素如表1所示。

表1 常見(jiàn)真菌毒素名稱及英文簡(jiǎn)寫

1.2 真菌毒素的儀器分析方法

真菌毒素的儀器分析方法除了色譜與質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)外，還有熒光光度法和毛細(xì)管電泳法等，但色譜與質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)以集分離、定性、定量于一體，高選擇性、靈敏高效等優(yōu)點(diǎn)，成為近年來(lái)檢測(cè)糧食中真菌毒素的常用手段。色譜與質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)又包括氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)（GC-MS）和液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)（LC-MS），由于大多數(shù)真菌毒素遇熱不穩(wěn)定，而GC及GC-MS又僅用于分析易揮發(fā)、熱穩(wěn)定性好的化合物，因此，采用GC-MS分析的真菌毒素種類有限，多為單端孢霉烯族化合物，但是，由于該化合物不易揮發(fā)，因此樣品凈化后需進(jìn)行衍生化處理，使操作更加繁瑣。林纓等[1]采用固相萃取-氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法檢測(cè)糧食作物中的T-2毒素和HT-2毒素，研究結(jié)果表明，兩種毒素最低檢出限均在0.05～0.5 μg/kg，回收率均在47.2%～110.8%。焦玉英[2]用氣相色譜和質(zhì)譜聯(lián)用檢測(cè)糧食中的鐮刀菌毒素，DON和NIV的檢出限為1 μg/kg。LC和LC-MS是真菌毒素檢測(cè)最常用的分析儀器之一，尤其LC-MS聯(lián)用技術(shù)，可同時(shí)提供目標(biāo)化合物的保留時(shí)間和分子結(jié)構(gòu)信息，靈敏度高，既適用于多組分檢測(cè)，又降低了前處理的凈化要求。

1.3 真菌毒素的前處理方法

雖然LC-MS聯(lián)用技術(shù)能降低前處理的凈化要求，但糧食種類繁多、基質(zhì)復(fù)雜，且糧食中真菌毒素含量低（一般為μg/kg級(jí)），采用哪種前處理方法，既能去除雜質(zhì)，達(dá)到降低干擾的目的，又能最大限度保留待測(cè)組分，直接關(guān)系到檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性，因此，采用正確有效的前處理方法能使糧食中真菌毒素的檢測(cè)事半功倍。常用的前處理方法主要有液液萃?。↙LE）和固相萃?。⊿PE）等。

液液萃?。↙LE）是利用待測(cè)組分在兩種互不相溶（或微溶）的溶劑中溶解度或分配系數(shù)的不同，使待測(cè)組分從一種溶劑轉(zhuǎn)移到另一種溶劑，經(jīng)過(guò)多次反復(fù)萃取，從而達(dá)到提取待測(cè)組分的目的，乙腈/水體系是LLE應(yīng)用最多的提取溶劑。液液萃取（LLE）作為最常規(guī)的提取方法，應(yīng)用雖廣，但其凈化能力有限，為了達(dá)到更好的凈化效果，常與其他凈化技術(shù)相結(jié)合應(yīng)用。隨著質(zhì)譜技術(shù)的快速發(fā)展，經(jīng)過(guò)LLE提取稀釋后直接測(cè)定的研究也越來(lái)越常見(jiàn)。葉金等[3]采用乙腈-水-乙酸（70∶29∶1，V∶V∶V）溶液直接提取后，結(jié)合穩(wěn)定同位素稀釋技術(shù)，利用超高效液相色譜-四極桿/靜電場(chǎng)軌道阱高分辨質(zhì)譜進(jìn)行檢測(cè)，建立了糧食中NIV、DON等16種真菌毒素的快速測(cè)定方法，結(jié)果表明，16種真菌毒素在一定濃度范圍內(nèi)均具有良好線性關(guān)系，在大米、小麥、玉米、大麥4種糧食中的加標(biāo)回收率為75.3%～123.5%。

固相萃?。⊿PE）是利用固體吸附劑（固相）吸附樣品中的待測(cè)化合物，將其與基體和干擾化合物分離，然后用適當(dāng)?shù)娜軇┫疵摚瑥亩_(dá)到分離和富集的目的。固相萃取柱種類繁多，常見(jiàn)的有氨基固相萃取柱、C18固相萃取柱、石墨化炭黑固相萃取柱、陰離子交換樹脂固相萃取柱、HLB固相萃取柱以及多功能凈化柱（MFC）、免疫親和柱等。孫月等[4]建立了采用乙腈-水（80∶20，V∶V）提取，氨基固相萃取柱凈化，LC-MS/MS檢測(cè)糧食中OTA的方法。孟娟等[5]建立了采用乙腈-水（84∶16，V∶V）提取，石墨化炭黑固相萃取柱凈化，LC-MS/MS檢測(cè)糧食及其制品中6種玉米赤霉烯酮類物質(zhì)的方法。鐘世歡等[6]建立了將樣品經(jīng)乙腈-水（80∶20，V∶V）超聲提取，HLB固相萃取柱凈化，經(jīng)LC-MS/MS同時(shí)檢測(cè)糧食中AFT、FB、DON等多種真菌毒素的分析方法。

多功能凈化柱（MFC）為一種特殊的SPE柱，以極性、非極性及離子交換等基團(tuán)組成填充劑，可選擇性吸附樣液中的脂類、蛋白質(zhì)類、色素類等雜質(zhì)，而真菌毒素不被吸附可直接通過(guò)，不需要進(jìn)行活化、淋洗和洗脫操作，直接上樣即可，操作更加簡(jiǎn)便快捷，而且可同時(shí)凈化多種毒素，回收率高，而且多功能凈化柱穩(wěn)定性較高，降低了檢測(cè)成本，提高了檢測(cè)效率，廣泛應(yīng)用于糧食中真菌毒素檢測(cè)當(dāng)中。劉紅河等[7]建立了采用乙腈-水（84∶16，V∶V）超聲提取，MFC凈化，LC-MS/MS檢測(cè)糧食中DON、ZEN等12種真菌毒素的方法。高蓓等[8]建立了采用乙腈-水（84∶16，V∶V）提取，MFC凈化，同位素內(nèi)標(biāo)法定量，LC-MS/MS檢測(cè)糧食中DON、NIV等5種真菌毒素的方法。鄭翠梅等[9]建立了乙腈-水-乙酸（84∶15∶1，V∶V∶V）提取,多功能凈化柱和強(qiáng)陰離子交換柱凈化，LC-TOF MS同時(shí)檢測(cè)糧食中13種真菌毒素的方法。

免疫親和柱（IAC）是利用免疫親和層析原理，利用生物大分子具有對(duì)某一類生物大分子特異識(shí)別和可逆結(jié)合的特性而制成，用以分析檢測(cè)抗體和抗原的親和層析柱。其極強(qiáng)的特異識(shí)別能力，使其能與待測(cè)真菌毒素產(chǎn)生較強(qiáng)作用，抗干擾能力強(qiáng)，尤其適合糧食中低濃度真菌毒素的檢測(cè)，檢出限低。多功能凈化柱（MFC）和免疫親和柱（IAC）都已被商品化，但I(xiàn)AC的種類比MFC少得多，原因是真菌毒素的相對(duì)分子質(zhì)量較?。ɑ拘∮? 000），大部分真菌毒素都屬于弱免疫物質(zhì)。常見(jiàn)的商品化IAC主要有AF、ZEN、DON、OTA、FB、T-2、HT-2、CTN等 種 類。徐飛等[10]建立了經(jīng)乙腈-水（20∶80，V∶V）提取，IAC凈化，LC-MS/MS檢測(cè)糧食中黃曲霉毒素的快速分析方法。曾羲等[11]建立了采用乙腈-水（84∶16，V∶V）提取，IAC凈化，同位素內(nèi)標(biāo)法定量，LC-MS/MS檢測(cè)糧食中赭曲霉毒素A、B、C的方法。

除了上述前處理方法，一些新型的前處理技術(shù)也層出不窮，例如大孔樹脂吸附、凝膠滲透色譜、快速簡(jiǎn)便高效安全萃?。≦uEChERS）等[12]，蘇碧玲等[13]建立了采用乙腈-水（84∶16，V∶V）超聲提取，QuECh-ERS凈化，LC-MS/MS檢測(cè)糧食制品中DON等4種真菌毒素的方法。我國(guó)現(xiàn)行有效的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)，將液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法納入真菌毒素的測(cè)定方法，表2列出了國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測(cè)定糧食中幾種常見(jiàn)真菌毒素的前處理方法。

2 農(nóng)藥殘留的檢測(cè)

2.1 農(nóng)藥殘留的種類和危害

糧食中農(nóng)藥殘留的產(chǎn)生，除了農(nóng)藥通過(guò)農(nóng)作物吸收而污染糧食外，另一途徑是貯藏期間直接施用于糧食的各種殺蟲劑、抑菌劑和殺鼠劑等化學(xué)藥劑。按照功能的不同，可分為殺蟲劑（殺蟲脒、敵百蟲等）、殺菌劑（多菌靈、稻瘟凈等）、殺螨劑（三氯殺螨醇、溴螨酯等）、除草劑（甲草胺、除草醚等）等；按照其分子結(jié)構(gòu)的不同，可分為有機(jī)氯農(nóng)藥、有機(jī)磷農(nóng)藥、氨基甲酸酯類農(nóng)藥、擬除蟲菊酯類農(nóng)藥等。

有機(jī)氯農(nóng)藥是分子結(jié)構(gòu)中含有氯的有機(jī)殺蟲劑、殺菌劑的總稱。常見(jiàn)的有滴滴涕、六六六、狄氏劑、艾氏劑、氯丹、六氯苯、毒殺芬等，由于滴滴涕和六六六具有廣譜、高效、價(jià)廉、中等毒性等優(yōu)點(diǎn)，兩者一度成為我國(guó)使用最多的農(nóng)藥，占到農(nóng)藥總量的60%～70%，但其化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定，在自然界中難以被分解，日積月累，使得土壤、農(nóng)產(chǎn)品均受該農(nóng)藥污染。2000年12月，全球會(huì)議將滴滴涕等多種有機(jī)氯農(nóng)藥列為有必要禁止生產(chǎn)和使用的12種持久性污染物。有機(jī)氯農(nóng)藥具有較強(qiáng)的蓄積性，長(zhǎng)期食用含有有機(jī)氯農(nóng)藥殘留的糧食，會(huì)引起慢性中毒，據(jù)報(bào)道，滴滴涕、六六六等有機(jī)氯農(nóng)藥具有致癌性。

有機(jī)磷農(nóng)藥是分子結(jié)構(gòu)中含有磷的有機(jī)殺蟲劑、殺菌劑的總稱，是目前使用最廣泛的農(nóng)藥。常見(jiàn)的有敵敵畏、敵百蟲、馬拉硫磷、甲拌磷、二嗪磷、乙嘧硫磷、巴胺磷、甲基嘧啶硫磷、稻瘟凈、樂(lè)果、喹硫磷、甲基對(duì)硫磷、殺螟硫磷、對(duì)硫磷、磷銨、內(nèi)吸磷等。有機(jī)磷農(nóng)藥不僅種類繁多，其毒性差異也較大，可分為劇毒、中等毒性、低毒三類，常見(jiàn)的劇毒有機(jī)磷農(nóng)藥有對(duì)硫磷、甲拌磷、磷銨、內(nèi)吸磷等，中等毒性的有敵敵畏、甲基對(duì)硫磷、甲基內(nèi)吸磷等，低毒的有敵百蟲、樂(lè)果、馬拉硫磷、殺螟硫磷等。有機(jī)磷農(nóng)藥經(jīng)皮膚、呼吸道和腸胃等途徑進(jìn)入人體，主要表現(xiàn)為抑制膽堿酯酶的活力，使其喪失分解乙酰膽堿的能力，從而引起一系列的中毒反應(yīng)，如頭暈惡心、多汗乏力、瞳孔縮小、腹瀉腹痛、支氣管分泌物增多等，嚴(yán)重的可導(dǎo)致中樞神經(jīng)系統(tǒng)功能失常，長(zhǎng)期攝入會(huì)出現(xiàn)肝功能下降、血糖升高、免疫力下降等一系列病變，甚至?xí)禄?、致癌、致突變?/p>

氨基甲酸酯類農(nóng)藥是一種氨基甲酸的N-甲基取代酯類的合成農(nóng)藥。具有廣譜、高效、選擇性強(qiáng)、殘留期短等特點(diǎn)，常見(jiàn)的有速滅威、西維因、涕滅威、克百威、葉蟬散、抗蚜威等，氨基甲酸酯類農(nóng)藥雖不是劇毒化合物，但具有致癌性。

擬除蟲菊酯類農(nóng)藥是一類具有高效、廣譜、低毒和能生物降解等特性的合成殺蟲劑，其殺蟲能力比有機(jī)氯、有機(jī)磷、氨基甲酸酯類農(nóng)藥高10～100倍。常見(jiàn)的有溴氰菊酯、氯氰菊酯等。擬除蟲菊酯類農(nóng)藥對(duì)人體低毒，其危害主要為通過(guò)影響神經(jīng)軸突的傳導(dǎo)而導(dǎo)致肌肉痙攣等。

2.2 農(nóng)藥殘留的儀器分析方法

色譜法是最常見(jiàn)的農(nóng)藥殘留檢測(cè)的儀器分析方法之一，主要有薄層色譜法、氣相色譜法和高效液相色譜法，其中氣相色譜法在檢測(cè)糧食中農(nóng)藥殘留時(shí)應(yīng)用最為廣泛，大多數(shù)農(nóng)藥的分子量小于400，且其沸點(diǎn)在氣相色譜工作溫度范圍內(nèi)，所以大多數(shù)農(nóng)藥殘留可用氣相色譜測(cè)定，為使檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確度和精密度更高，不同種類的農(nóng)藥選擇不同類型的檢測(cè)器，例如檢測(cè)有機(jī)磷農(nóng)藥可選用火焰光度檢測(cè)器（FPD），檢測(cè)有機(jī)氯和擬除蟲菊酯農(nóng)藥可選用電子捕獲檢測(cè)器（ECD），檢測(cè)氨基甲酸酯類農(nóng)藥可選用火焰熱離子檢測(cè)器（FTD）。選用質(zhì)譜儀作為檢測(cè)器時(shí)，即成為氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀，兩者聯(lián)用屬于強(qiáng)強(qiáng)聯(lián)合，MS在定性分析上有絕對(duì)優(yōu)勢(shì)，而且在痕量定量和GC分不開（保留時(shí)間相同）的情況下定量也有優(yōu)勢(shì)。

GC-MS和HPLC-MS聯(lián)用技術(shù)已被廣泛應(yīng)用于糧食中農(nóng)藥殘留檢測(cè)中。例如GB/T 5009.219—2008[19]、GB/T 5009.220—2008[20]、GB/T 5009.221—2008[21]分別規(guī)定了GC-MS聯(lián)用法測(cè)定糧谷中矮壯素、敵菌靈、敵草快的殘留量；SN/T 3768—2014[22]規(guī)定了GC-MS法測(cè)定出口糧谷中多種有機(jī)磷農(nóng)藥殘留量；SN/T 2085—2008[23]規(guī)定了HPLC-MS/MS法測(cè)定進(jìn)出口糧谷中多種氨基酸甲酯類農(nóng)藥殘留量。

2.3 農(nóng)藥殘留的前處理方法

在用色譜法檢測(cè)農(nóng)藥殘留之前，樣品要經(jīng)過(guò)提取、凈化，提取和凈化屬于前處理部分。樣品前處理不僅要盡可能提取其中的待測(cè)組分，還要盡可能除去與待測(cè)組分同時(shí)存在的雜質(zhì)，避免造成色譜柱和檢測(cè)器等的污染，降低對(duì)檢測(cè)結(jié)果的干擾，提高檢測(cè)的靈敏度和準(zhǔn)確性，因此，樣品前處理的好壞直接影響農(nóng)藥殘留測(cè)定結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。

常見(jiàn)的農(nóng)藥殘留分析步驟通常為：水溶性溶劑提取→非水溶性溶劑再分配→固相吸附柱凈化→氣相或液相色譜檢測(cè)。隨著檢測(cè)技術(shù)的發(fā)展，GC-MS和HPLC-MS聯(lián)用技術(shù)已被廣泛應(yīng)用于糧食中農(nóng)藥殘留的檢測(cè)當(dāng)中。液液萃取法（LLE）和固相萃取法（SPE）是農(nóng)藥殘留分析中常用的前處理方法，為了取得更好的前處理效果，LLE和SPE通常共同配合使用，但為了簡(jiǎn)化操作、提高回收率，有研究者采用LLE后直接進(jìn)樣分析，高玲等[24]采用液-液萃取技術(shù)對(duì)大米中36種有機(jī)磷類農(nóng)藥進(jìn)行提取，無(wú)需凈化，直接進(jìn)樣分析，結(jié)果表明，不同農(nóng)藥的檢出限在0.001～3.5 μg/kg之間，方法定量下限在0.004～10μg/kg之間，精密度RSD＜15%（樂(lè)果除外），回收率在88.3%～108.3%之間，該法簡(jiǎn)便、快速、靈敏、可靠。

農(nóng)藥殘留常用的提取溶劑為乙腈、丙酮等。固相吸附柱的種類繁多，根據(jù)吸附柱與目標(biāo)物作用力的不同，可分為正向SPE小柱（如Florisil柱）、反向SPE小柱（如C18柱）、離子交換SPE小柱（如NH2柱）、混合型SPE小柱（如Carb-NH2柱）。王貴雙等[25]以石油醚為提取劑，經(jīng)Florisil固相萃取柱凈化，GC-MS檢測(cè)糧谷中17種有機(jī)氯和擬除蟲菊酯農(nóng)藥殘留，17種農(nóng)殘回收率為70.9%～110.3%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為2.5%～10.3%，檢出限為1.8～16.8 μg/kg；張帆等[26]建立了乙腈提取、C18固相萃取柱凈化、HPLCMS/MS測(cè)定大米中20種氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留的方法；張丹[27]用乙腈（加入無(wú)水硫酸鈉、氯化鈉）超聲提取樣品、經(jīng)Carb/NH2和Florisil固相萃取柱凈化、再經(jīng)GC-MS測(cè)定2種鼠藥和5種農(nóng)藥殘留，結(jié)果表明該法快速、靈敏、準(zhǔn)確，可用于實(shí)際檢測(cè)分析；聶留俊等[28]建立了乙腈超聲提取、固相萃取柱凈化、HPLC-MS測(cè)定大米中5種有機(jī)磷農(nóng)藥殘留的方法，結(jié)果表明：不論采用NH2柱還是采用Carb/NH2固相萃取柱凈化對(duì)分析結(jié)果影響不大，但Carb/NH2固相萃取柱具有去除色素等干擾物、保護(hù)色譜柱的優(yōu)勢(shì)。

此外，常用的前處理技術(shù)還有凝膠滲透色譜、基質(zhì)固相分散萃取、QuEChERS技術(shù)、加速溶劑萃取等。凝膠滲透色譜（GPC）又稱體積排除色譜或尺寸排除色譜，其核心部件是在一根不銹鋼空心細(xì)管中加入孔徑不同的微粒作為填料的色譜柱，由于待測(cè)樣品中各組分分子量不同，在分離柱上按分子流體力學(xué)體積大小被分離開。每根色譜柱都有一定的相對(duì)分子質(zhì)量分離范圍和滲透極限。該方法具有應(yīng)用范圍廣、凈化快速高效等優(yōu)點(diǎn)。李愛(ài)軍等[29]采用乙酸乙酯提取、凝膠色譜和固相萃取柱（ENVI-Carb柱和Florisil柱）凈化、GC-MS/MS測(cè)定糧谷中16種有機(jī)磷農(nóng)藥殘留量，結(jié)果表明，添加水平在0.002～0.50 mg/kg時(shí)，回收率范圍為78.4%～97.8%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為9.7%～18.9%，測(cè)定低限為0.002 mg/kg。

基質(zhì)固相分散萃?。∕SPD）是將待測(cè)樣品與涂有C18等多種聚合物的擔(dān)體固相萃取材料一起研磨，得到半干狀態(tài)的混合物并將其作為填料裝柱，然后用不同的溶劑淋洗柱子，將各種待測(cè)物洗脫下來(lái)。其優(yōu)點(diǎn)是集提取、凈化于一體，省去樣品轉(zhuǎn)移等操作，避免了樣品損失，適于自動(dòng)化分析。吳麗華等[30]研究了C18基質(zhì)固相分散萃?。∕SPD），HPLC-柱后衍生-熒光檢測(cè)器測(cè)定小麥中6種氨基甲酸酯農(nóng)藥的方法，結(jié)果表明，6種農(nóng)藥的回收率為82.1%～94.0%，變異系數(shù)≤3.54%，方法的最低檢出限為0.0092～0.038 mg/kg。

QuEChERS方法的操作步驟大致為：樣品粉碎→單一溶劑乙腈提取分離→加入MgSO4等鹽類除水→加入乙二胺-N-丙基硅烷(PSA)等吸附劑除雜→上清液進(jìn)行GC-MS、LC-MS檢測(cè)。該方法具有快速（quick）、簡(jiǎn)單（easy）、廉價(jià)（cheap）、高效（effective）、可靠（rugged）、安全（safe）等特點(diǎn)，利用此技術(shù)檢測(cè)農(nóng)殘時(shí)能得到較高回收率。曾敏等[31]運(yùn)用改良QuEChERS技術(shù)、GC-MS/MS測(cè)定糧谷中20種有機(jī)磷農(nóng)藥，結(jié)果表明，平均回收率在70.5%～105.2%之間，此方法的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差RSD值為2.4%～15.9%。

加速溶劑萃?。ˋSE）是在提高的溫度（50～200℃）和壓力（10.3～20.6 MPa）下用溶劑萃取固體或半固體樣品的自動(dòng)化方法。該方法具有快速、溶劑用量少、回收率高和重現(xiàn)性好等優(yōu)點(diǎn)。閔光等[32]采用加速溶劑萃取、活性炭固相萃取柱凈化、GC-MS檢測(cè)谷物中農(nóng)藥殘留，結(jié)果表明，大米中農(nóng)藥回收率為78.9%～105.3%，RSD≤12.8%，檢出限(LOD)為0.3～3.6 μg/kg；玉米中農(nóng)藥回收率為80.9%～106.2%，RSD≤13.6%，檢出限(LOD)為0.3～4.0 μg/kg。

3 結(jié)語(yǔ)

色譜及質(zhì)譜檢測(cè)技術(shù)在糧食質(zhì)量安全監(jiān)測(cè)中應(yīng)用越來(lái)越廣泛，尤其是在真菌毒素和農(nóng)藥殘留的檢測(cè)中。糧食中真菌毒素和農(nóng)藥殘留種類繁多且對(duì)人體產(chǎn)生不同程度傷害，因此，準(zhǔn)確、快速地檢測(cè)出其含量十分必要。色譜及質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)可以集分離、定性、定量于一體，具有高選擇性、靈敏、高效等優(yōu)點(diǎn)，在運(yùn)用該技術(shù)檢測(cè)糧食中真菌毒素和農(nóng)藥殘留時(shí)，選擇恰當(dāng)?shù)那疤幚硎侄?，可取得事半功倍的效果?/p>

重金屬（鉛、汞、砷、鎘）也是糧食質(zhì)量安全監(jiān)測(cè)的檢驗(yàn)項(xiàng)目之一。色譜及質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)也應(yīng)用在重金屬的檢測(cè)中，例如GB 5009.11—2014[33]中規(guī)定液相色譜-電感耦合等離子質(zhì)譜法（LC-ICP/MS）測(cè)定食品中無(wú)機(jī)砷含量，但色譜及質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)在真菌毒素和農(nóng)藥殘留的檢測(cè)中應(yīng)用更為廣泛。隨著電子技術(shù)和計(jì)算機(jī)技術(shù)的快速發(fā)展，色譜和質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)也日臻完善，硬件性能大幅提高，向多功能、高通量、高靈敏度、小型化方向發(fā)展；強(qiáng)大的數(shù)據(jù)分析軟件功能也大大增強(qiáng)了儀器的自動(dòng)化水平以及操作的靈活性。