噬菌體治療在水產(chǎn)養(yǎng)殖動物細(xì)菌性疾病中的研究現(xiàn)狀

○劉海榮

（鄄城縣水產(chǎn)服務(wù)中心 山東鄄城 274600）

據(jù)實(shí)證資料分析可得，噬菌體在食源性病原微生物的應(yīng)用效果顯著。在水產(chǎn)養(yǎng)殖領(lǐng)域的多種菌群等引起的細(xì)菌性疾病中，以噬菌體為主要介質(zhì)的治療成效明顯，也充分彰顯了噬菌體在水產(chǎn)養(yǎng)殖的廣闊前景。

一、防控水產(chǎn)養(yǎng)殖動物細(xì)菌性病害的優(yōu)勢

第一，針對性強(qiáng)。在以往運(yùn)用抗生素治療疾病時，也會殺死水產(chǎn)動物的消化系統(tǒng)中正常細(xì)菌和有益菌，進(jìn)而影響自身機(jī)能的微生態(tài)平衡，從而引起其他有益的耐受菌群的生長，由此造成腹瀉、胃腸道感染等癥狀，并會導(dǎo)致因機(jī)體抵抗力降低引起疾病感染。噬菌體因其自身的繁殖特性與作用效益，能夠針對特定的菌株進(jìn)行毀滅處理，再利用時又不至于給其中的其他有益菌種群造成定性損害，最大化保障其中微生態(tài)的穩(wěn)定運(yùn)行。

第二，應(yīng)用基數(shù)少。噬菌體繁殖能力較強(qiáng)，具備指數(shù)式增殖的能力，僅需極小量就可以殺死一定的病原菌，起到了防止或減少細(xì)菌性感染的效果。

第三，篩選分離快，在應(yīng)用治療中的保存我物質(zhì)消耗低。其物種豐度較大，在生物界中具有指定細(xì)菌相對應(yīng)的噬菌體，較易分離，并可在常溫下儲存，方便于運(yùn)用流通和使用。

第四，給藥的方法多樣，且效果持久。噬病毒體的給藥途徑有很多種，包括皮下注射、口服、外用以及身體外用藥物等。在預(yù)防細(xì)菌性疾病過程中，噬病毒體既可以單一使用，也可以與成群基數(shù)以上的噬病毒體共同使用，也可以與抗菌素共同使用以增強(qiáng)防治效果，而且還因?yàn)槭刹◇w的自身繁殖作用，也可以繁殖和傳播，并通過對生物體的自身加以治愈而效果持久。

第五，無藥品的殘留。大量應(yīng)用抗菌素容易導(dǎo)致藥品在飼養(yǎng)動物身上的殘留，而噬病毒體環(huán)境高度依賴于相應(yīng)的微生物，會因?yàn)槲⑸锼拗鞯南Ф廊ィ由贇埩糁辽矬w內(nèi)。如表1為部分應(yīng)用試驗(yàn)結(jié)果。

表1 水產(chǎn)養(yǎng)殖動物噬菌體治療應(yīng)用試驗(yàn)

二、噬菌體治療在水產(chǎn)養(yǎng)殖動物中的應(yīng)用研究

1.節(jié)肢動物養(yǎng)殖中的噬菌體治療

現(xiàn)階段，由于諸多養(yǎng)殖過程中節(jié)肢動物的差異化的疾病頻頻出現(xiàn)，則會導(dǎo)致水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)出現(xiàn)巨大的經(jīng)濟(jì)損失。以弧菌病為代表的細(xì)菌性疾病是近年來引起蝦養(yǎng)殖業(yè)損失最為慘重的主要致病菌，其染病致死概率為百分之百。由副溶血性弧菌引起細(xì)菌性疾病也是東南亞區(qū)域中最為盛行且導(dǎo)致?lián)p失慘重的病癥之一。

Jun等人研究噬菌體對治療急性肝胰壞死病的效果，基于實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，以噬病毒體pVp-1為主要的治療介質(zhì)對患有染副溶血性弧菌引起病變的南美白對蝦其治療效益顯著，并且能極大程度保護(hù)其存活。以喂養(yǎng)為治療實(shí)行手段的實(shí)驗(yàn)組其死亡率高達(dá)百分之五十，而且采用浸浴法的實(shí)驗(yàn)組其累積死亡率約為1/4和1/2，由此可得，pVp-1在病菌預(yù)防方面比治療方面的效果更為顯著。

Vinod等也基于試行用噬菌體治療在蝦群體上產(chǎn)生的發(fā)光病。據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，在十七天的試驗(yàn)時間內(nèi)，對照組中的斑節(jié)對蝦僅有17%的蝦群存活，噬菌體介入治療的存活率可高達(dá)86%，與應(yīng)用抗生素進(jìn)行治療的觀察組的存活率相比有顯著的差異，其治療效果顯著，并且伴隨著濃度的提升，其存活率也成正向表現(xiàn)。

2.軟體動物養(yǎng)殖中的噬菌體治療

基于近年來的水產(chǎn)養(yǎng)殖情況而言，弧菌致病菌給予養(yǎng)殖業(yè)帶來不可逆性的影響，同時也造成不同程度的損壞，制約水產(chǎn)規(guī)?；B(yǎng)殖的多元化發(fā)展。

胡蝶等以質(zhì)量分?jǐn)?shù)1g/kg噬菌體添加到飼料中投喂方斑東風(fēng)螺，基于試驗(yàn)的結(jié)果表明，從對照組的數(shù)據(jù)顯示，其中宿主細(xì)菌數(shù)量有效降低96%，水體中宿主菌有效減少至72%。由此表明微膠囊的應(yīng)用最大化控制宿主弧菌的平均基數(shù)，從而降低了水產(chǎn)養(yǎng)殖動物弧菌病的暴發(fā)。而柏仕杰等人認(rèn)為當(dāng)土壤和水域中都存在著相當(dāng)含量的噬病毒體時，可將其平均基數(shù)不斷減少至相對較低濃度，且能長時間內(nèi)達(dá)到持續(xù)抑制的治療效果，并有效減少其弧菌病的暴發(fā)。

李太武等人應(yīng)用噬病毒體，對河流弧菌II型引起的皺紋盤鮑膿皰病開展了應(yīng)用調(diào)查研究。結(jié)果顯示，應(yīng)用了相應(yīng)含量的噬病體能夠有效地防止或推遲由膿皰病造成的盤鮑凋亡過程，并使盤鮑的成活率提升50%以上。

3.棘皮動物養(yǎng)殖中的噬菌體治

療腐皮綜合癥已是水產(chǎn)養(yǎng)殖中普遍常見的疾病，其中以刺參為疾病高發(fā)生物集群，并且其中造成的經(jīng)濟(jì)損失極高，在一定程度上制約該行業(yè)的優(yōu)化發(fā)展。

Zhang等從某市場的排水管中噬菌體PVA1和PVA2，并制備成噬菌體雞尾酒，溶液濃度分別為105、106、107PFU/mL。試驗(yàn)對象刺參基于浸泡處理，并由數(shù)據(jù)對比得出，空白對照組僅有3%的存活率，且其中三種濃度的存活率分別為47%、50%、73%。與卡那霉素組相比，其試驗(yàn)結(jié)果并無明顯差距。

Li等在刺參養(yǎng)殖池水中篩選出對嗜環(huán)弧菌的噬菌體Vc1，并通過口服和靜脈注射的差異化給藥方法對其抑疫效應(yīng)進(jìn)行細(xì)致化探討。試驗(yàn)結(jié)果顯示，以60天為周期進(jìn)行飼料投喂后，刺參生存概率為81%，同對照組比增長63%；但在進(jìn)行注射給藥處理后，刺參的存活率卻只有58%。數(shù)據(jù)表明，基于刺參的治療而言，口服能直觀地彰顯其治療效益。

4.脊索動物養(yǎng)殖中的噬菌體治療

Verner-Jeffreys等將噬菌體O，R和B制備成混合制劑，對大西洋鮭魚進(jìn)行腹腔注射，從數(shù)據(jù)表明可以有效緩解細(xì)菌對其的死亡侵害。攻毒后及時注射混合制劑的魚群其死亡速率明顯慢與對照組，但最終的死亡結(jié)果并無顯著差異。

Silva等篩選出殺鮭氣單胞菌的噬菌體AS-A。在實(shí)際試驗(yàn)中，采用浸浴的方法給藥，在3天內(nèi)對照組累積死亡率為36%，而對照組的累積死亡為零。據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果表示，在進(jìn)行浸浴法給藥后，其對病原菌的抵抗力明顯提高。并也從發(fā)現(xiàn)，在宿主微生物存活的前提下添加噬病毒體，影響效果趨向平緩。所以，噬菌體在娃娃魚繁殖環(huán)境中，能有效而安全地防治癤瘡病。

綜上所述，噬菌體治療在水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)中也初顯成效，但由于現(xiàn)階段對大規(guī)模用于細(xì)菌病毒感染的有效防治方法尚不完善，因此關(guān)于噬病體的各種研究也持續(xù)進(jìn)行。而作為抗菌藥，由于噬病體具備的多重特性，使之可以作為抗生素的有力替代品，而所有可作為有效治療的噬病體都應(yīng)該具備有效配方，以及更多的臨床實(shí)驗(yàn)結(jié)果及其詳細(xì)的噬病體制劑使用方式。和早期的噬病體療法比較，現(xiàn)階段對噬病體有了更廣泛的認(rèn)識，也為其多元化的療法提供新的發(fā)展機(jī)遇。