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      基于網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)研究血府逐瘀湯治療糖尿病腎病的作用機(jī)制

      2022-09-09 06:56:34李桂女李和教
      關(guān)鍵詞:血府逐瘀湯靶點(diǎn)關(guān)鍵

      李桂女,李和教,黃 易,余 彬

      (1.海南醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院,海口 570102;2.成都市第一人民醫(yī)院,成都 610041;3.綿陽(yáng)市中心醫(yī)院,綿陽(yáng) 621000)

      糖尿病腎病(diabetic nephropathy,DN)是糖尿病常見(jiàn)并發(fā)癥之一,屬于微血管并發(fā)癥,是由于長(zhǎng)期高血糖導(dǎo)致代謝及其他功能紊亂而引起的腎小球硬化癥[1],臨床表現(xiàn)主要為蛋白尿、水腫、高血壓、腎小球?yàn)V過(guò)率降低,甚至進(jìn)展為腎功能不全、尿毒癥;DN是糖尿病主要的死亡原因之一,亦是增大糖尿病死亡風(fēng)險(xiǎn)的主要原因[2];相對(duì)于單純的糖尿病患者,DN患者的死亡風(fēng)險(xiǎn)是其12倍,不僅給患者的健康及心理帶來(lái)嚴(yán)重的影響,還給社會(huì)及其家庭帶來(lái)嚴(yán)峻的考驗(yàn)[3-4]。目前,西醫(yī)在治療DN上只能延緩疾病進(jìn)一步發(fā)展,但并未治愈疾病本身,并且治療過(guò)程中長(zhǎng)期服用藥物會(huì)導(dǎo)致藥物依賴性、泌尿道及生殖系統(tǒng)出現(xiàn)感染等不良反應(yīng),治療效果及患者死亡下降率尚未滿意。因此,尋找治療DN的新方法尤為迫切。

      中藥在治療疾病的作用中體現(xiàn)多成分、多靶點(diǎn)及多通路等特點(diǎn)。研究[5]表明,中醫(yī)中藥在臨床上治療DN的效果顯著,尤其在DN前期的治療效果尤佳。中醫(yī)認(rèn)為DN發(fā)生發(fā)展的整個(gè)過(guò)程中會(huì)產(chǎn)生氣陰兩虛及血瘀,因此,治療也應(yīng)以益氣養(yǎng)陰、活血化瘀為主[6]。血府逐瘀湯(口服液、膠囊)是治療“胸中血府淤血”的常用理血藥方之一,具有活血化瘀、行氣通絡(luò)之效,在臨床上治療DN具有較好的療效,可過(guò)調(diào)節(jié)機(jī)體代謝、改善腎微循環(huán)、改善血流動(dòng)力學(xué)紊亂與高凝狀態(tài)及減少致病性細(xì)胞因子等改善DN患者臨床癥狀[7-8]。但基礎(chǔ)研究較少,血府逐瘀湯治療DN的關(guān)鍵靶點(diǎn)及機(jī)制尚不明確。本研究運(yùn)用網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)方法,篩選血府逐瘀湯的活性成分靶點(diǎn),構(gòu)建“活性成分-潛在靶點(diǎn)”和“成分-潛在靶點(diǎn)-通路”網(wǎng)絡(luò),尋找潛在通路,從整體上對(duì)中藥物質(zhì)基礎(chǔ)和藥理作用進(jìn)行系統(tǒng)和多層次的解析[9],為更深入研究血府逐瘀湯治療DN的潛在作用機(jī)制提供理論基礎(chǔ)。

      1 材料與方法

      1.1 血府逐瘀湯活性成分的篩選

      以“桃仁、紅花、當(dāng)歸、川芎、赤芍、牛膝、柴胡、桔梗、甘草、枳殼、地黃”為關(guān)鍵字,通過(guò)檢索TCMSP數(shù)據(jù)庫(kù)以及查詢相關(guān)文獻(xiàn),收集符合口服生物利用度(oral bioavailability,OB)≥30%和類藥性(drug-likeness,DL)≥0.18條件[10]的活性成分,篩選血府逐瘀湯的活性成分,并且通過(guò)Pub-Chem數(shù)據(jù)查詢活性成分對(duì)應(yīng)的結(jié)構(gòu)式(SMILES)。

      1.2 血府逐瘀湯活性成分靶點(diǎn)反向預(yù)測(cè)

      通過(guò)將SMILES依次輸入Swiss數(shù)據(jù)庫(kù)(http://www.swisstargetprediction.ch/)[11]中的Swiss,以“人類”為研究物種預(yù)測(cè)活性成分的靶點(diǎn),整合去重得到血府逐瘀湯的作用靶點(diǎn)。

      1.3 DN的靶點(diǎn)獲取

      利用“diabetic nephropathy”為關(guān)鍵詞,對(duì)Gene Card數(shù)據(jù)庫(kù)[12]進(jìn)行疾病靶點(diǎn)的檢索及篩選。整合去除重復(fù)靶點(diǎn),即可獲得DN的相關(guān)靶點(diǎn)。

      1.4 構(gòu)建活性成分-潛在靶點(diǎn)網(wǎng)絡(luò)圖

      利用韋恩圖(Venn diagram)得到成分靶點(diǎn)與疾病靶點(diǎn)的交集,即潛在靶點(diǎn),使用Cytoscape 3.6.1軟件構(gòu)建活性成分-潛在靶點(diǎn)網(wǎng)絡(luò)。網(wǎng)絡(luò)圖中的節(jié)點(diǎn)(node)分別為活性成分和潛在靶點(diǎn);邊(edge)表示三者的相互關(guān)系。使用Cytoscape中Network Analysis插件對(duì)相應(yīng)網(wǎng)絡(luò)進(jìn)行拓?fù)湫再|(zhì)分析,根據(jù)節(jié)點(diǎn)連接度(degree)和介數(shù)中心性(betweenness centrality)設(shè)置網(wǎng)絡(luò)樣式,節(jié)點(diǎn)大小反映degree大小,邊的粗細(xì)反映betweenness centrality大小。

      1.5 蛋白質(zhì)相互關(guān)系網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建和關(guān)鍵靶點(diǎn)篩選

      將血府逐瘀湯治療DN的潛在靶點(diǎn)導(dǎo)入String數(shù)據(jù)庫(kù),得到潛在作用靶點(diǎn)的PPI網(wǎng)絡(luò),結(jié)果以TSV格式導(dǎo)出,將結(jié)果中的node1、node2、combined score信息以TXT格式導(dǎo)入Cytoscape軟件中進(jìn)行可視化和Network Analyzer分析,以節(jié)點(diǎn)度值(degree)和介數(shù)中心度(betweenness centrality)大于等于所有點(diǎn)中位數(shù)值2倍的靶點(diǎn),并滿足接近中心度(closeness centrality)大于所有點(diǎn)中位數(shù)值條件篩選關(guān)鍵靶點(diǎn)作為血府逐瘀湯治療DN的“關(guān)鍵靶點(diǎn)”,研究關(guān)鍵靶標(biāo)可能存在的藥理作用。

      1.6 GO富集分析與KEGG通路分析

      通過(guò)DAVID數(shù)據(jù)庫(kù)對(duì)血府逐瘀湯治療DN的關(guān)鍵靶點(diǎn)進(jìn)行Gene Ontology分析(生物過(guò)程、分子功能和細(xì)胞成分3個(gè)層面)和Pathways分析,保存并整理結(jié)果,篩選排名靠前的生物過(guò)程或信號(hào)通路,通過(guò)Omicshare進(jìn)行可視化分析。

      1.7 構(gòu)建活性成分-潛在靶點(diǎn)-通路網(wǎng)絡(luò)圖

      根據(jù)KEGG分析結(jié)果篩選出關(guān)鍵基因富集基因數(shù)相對(duì)較大的通路,通過(guò)Cytoscape軟件構(gòu)建活性成分-潛在靶點(diǎn)-通路網(wǎng)絡(luò)圖。

      2 結(jié)果

      2.1 血府逐瘀湯的活性成分篩選結(jié)果

      通過(guò)TCMSP數(shù)據(jù)庫(kù)以及文獻(xiàn)分別檢索血府逐瘀湯的活性成分及相應(yīng)靶點(diǎn)等信息,滿足OB≥30%和DL≥0.18條件的成分作為主要活性成分,共得到活性成分212個(gè),其中桃仁23個(gè)、紅花22個(gè)、當(dāng)歸2個(gè)、川芎7個(gè)、赤芍29個(gè)、牛膝20個(gè)、柴胡17個(gè)、桔梗7個(gè)、甘草23個(gè)、枳殼5個(gè)、地黃57個(gè),去重及去除無(wú)結(jié)構(gòu)式的活性成分后有105個(gè)活性成分,部分主要活性成分見(jiàn)表1。

      表1血府逐瘀湯主要活性成分信息

      2.2 構(gòu)建血府逐瘀湯活性成分-血府逐瘀湯治療DN的潛在靶點(diǎn)藥理網(wǎng)絡(luò)

      活性成分-潛在靶點(diǎn)藥理網(wǎng)絡(luò)共包括202個(gè)節(jié)點(diǎn)和1 249個(gè)邊,該網(wǎng)絡(luò)包含了98個(gè)化合物節(jié)點(diǎn)和104個(gè)潛在靶點(diǎn)節(jié)點(diǎn),見(jiàn)圖1。潛在的活性成分與靶點(diǎn)產(chǎn)生1 436個(gè)相互作用關(guān)系。通過(guò)Network Analyzer對(duì)網(wǎng)絡(luò)圖進(jìn)行分析,結(jié)果顯示,與潛在靶點(diǎn)相互作用的活性成分中,橙皮素(Degree28)、木脂素(Degree27)、刺槐黃素(Degree27)、刺甘草查爾酮(Degree27)、漢黃芩素(Degree26)等與其他靶點(diǎn)連接度大于活性成分的中位數(shù)度值,即與6個(gè)以上靶點(diǎn)連接,是血府逐瘀湯治療DN的主要成分;在這個(gè)網(wǎng)絡(luò)中,藥物活性成分可作用于相同的靶點(diǎn),也可作用于不同的靶點(diǎn),一種成分對(duì)應(yīng)多個(gè)靶點(diǎn),一個(gè)靶點(diǎn)也對(duì)應(yīng)多種成分,這體現(xiàn)了其多成分、多靶點(diǎn)的作用特點(diǎn)。

      圖1 血府逐瘀湯的“活性成分-靶點(diǎn)”網(wǎng)絡(luò)圖

      2.3 蛋白相互作用網(wǎng)絡(luò)的構(gòu)建和分析

      使用STRING網(wǎng)站對(duì)得到的血府逐瘀湯治療DN的潛在靶點(diǎn)進(jìn)行分析,為獲得更加簡(jiǎn)潔的PPI網(wǎng)絡(luò),首先刪除自相作用關(guān)系的蛋白邊,然后刪除沒(méi)有相互作用蛋白的節(jié)點(diǎn),再使用Cytoscape軟件構(gòu)建潛在蛋白質(zhì)-潛在蛋白質(zhì)相互作用(PPI)網(wǎng)絡(luò),見(jiàn)圖2。PPI網(wǎng)絡(luò)中有104個(gè)節(jié)點(diǎn)和1 316個(gè)邊緣。PPI網(wǎng)絡(luò)圖中節(jié)點(diǎn)的大小與其在網(wǎng)絡(luò)中的度值呈正相關(guān)。節(jié)點(diǎn)的度值越大,其在網(wǎng)絡(luò)中作用越重要,相應(yīng)的蛋白質(zhì)靶點(diǎn)在疾病過(guò)程中有著更重要的作用。而在PPI圖中,用紅色代表度值較大的關(guān)鍵蛋白,在PPI網(wǎng)絡(luò)中白細(xì)胞介素(interleukin,IL)-6(Degree74)、TNF(Degree73)、GAPDH(Degree73)、AKT1(Degree70)、VEGFA(Degree62)、IL-1B(Degree62)、IL-2(Degree38)、MMP9(Degree50)、MMP2(Degree39)、STAT1(Degree36)蛋白質(zhì)節(jié)點(diǎn)的程度較高,大于節(jié)點(diǎn)中位數(shù)對(duì)應(yīng)的度的2倍以上,這些靶點(diǎn)蛋白可能在DN的發(fā)展中起關(guān)鍵作用,見(jiàn)表2。

      圖2 血府逐瘀湯治療DN潛在靶點(diǎn)相互作用網(wǎng)絡(luò)圖

      2.4 生物通路富集分析

      使用DAVID網(wǎng)站對(duì)血府逐瘀湯治療DN的關(guān)鍵靶點(diǎn)進(jìn)行GO富集分析,得到P<0.05的富集GO條目共計(jì)109個(gè),其中包含生物過(guò)程條目共74個(gè),最顯著的為ERK1和ERK2級(jí)聯(lián)正調(diào)控、蛋白磷酸化、MAP激酶活性的正調(diào)節(jié)、GTP酶活性的正調(diào)控等;細(xì)胞組成分析結(jié)果共有13條,最顯著的為核質(zhì)、細(xì)胞外間隙、胞外區(qū)、細(xì)胞質(zhì)核周區(qū)等;分子功能分析結(jié)果共有22條,最顯著的為酶活性、ATP結(jié)合、細(xì)胞因子活性、轉(zhuǎn)錄因子活性、DNA結(jié)合等,各類分別取前20條。通過(guò)對(duì)血府逐瘀湯治療DN的關(guān)鍵靶點(diǎn)進(jìn)行KEGG通路分析得到P<0.05的通路共76條,包括JAK-STAT信號(hào)通路、缺氧誘導(dǎo)因子1(HIF-1)信號(hào)通路、Toll樣受體信號(hào)通路、腫瘤壞死因子(TNF)信號(hào)通路、FoxO信號(hào)通路、雌激素信號(hào)通路等,見(jiàn)圖3。此20條作用通路均與血府逐瘀湯治療DN相關(guān)的8個(gè)以上靶基因富集重疊,揭示血府逐瘀湯的有效成分可能通過(guò)作用于以上多條信號(hào)通路來(lái)治療DN。相關(guān)通路信息及富集基因,見(jiàn)表3。

      圖3 GO富集分析和KEGG富集分析氣泡圖

      表2血府逐瘀湯治療DN的關(guān)鍵靶點(diǎn)

      2.5 構(gòu)建血府逐瘀湯活性成分-潛在靶點(diǎn)-通路網(wǎng)絡(luò)

      為研究血府逐瘀湯治療DN的主要作用通路,本研究將血府逐瘀湯治療DN作用的35個(gè)關(guān)鍵靶點(diǎn)蛋白置入DAVID數(shù)據(jù)庫(kù)中進(jìn)行通路富集分析,刪除結(jié)果中含有特殊疾病信號(hào)通路,并將結(jié)果在Cytoscape軟件中構(gòu)建血府逐瘀湯活性化合物-疾病靶點(diǎn)-通路網(wǎng)絡(luò),見(jiàn)圖4。該網(wǎng)絡(luò)共有127個(gè)節(jié)點(diǎn)和289個(gè)邊,該網(wǎng)絡(luò)有77個(gè)血府逐瘀湯中的化合物,27個(gè)主要的DN潛在靶點(diǎn)和13個(gè)通路。其中TNF信號(hào)通路有8個(gè)關(guān)鍵靶點(diǎn)富集、JAK-STAT信號(hào)通路有4個(gè)靶點(diǎn)富集、HIF-1信號(hào)通路有8個(gè)蛋白富集、Toll樣受體信號(hào)通路有10個(gè)蛋白富集、胰島素抵抗和FoxO信號(hào)通路有9個(gè)蛋白富集,其余通路富集蛋白數(shù)量見(jiàn)表3。

      圖4 血府逐瘀湯治療DN的“活性成分-靶點(diǎn)-通路”網(wǎng)絡(luò)圖

      表3 KEGG富集通路條目信息

      3 討論

      中醫(yī)認(rèn)為,DN屬于“消渴證”“尿濁證”范疇,屬于“水腫”和“消渴”類型,腎是主要病位,主要累及脈絡(luò)、脾和肝。血府逐瘀湯中的成分有甘草、生地黃、牛膝、桔梗、枳殼、柴胡、紅花、赤芍、桃仁、川芎和當(dāng)歸。赤芍、川芎和當(dāng)歸不僅可以起到養(yǎng)血療效,還可以活血化瘀;赤芍、枳殼和柴胡主要療效為疏肝理氣;川芎、當(dāng)歸、紅花、生地黃和桃仁不僅可以養(yǎng)陰潤(rùn)燥,還能活血化瘀。一般可以通過(guò)調(diào)節(jié)機(jī)體代謝和改善微循環(huán)來(lái)發(fā)揮活血化瘀對(duì)于DN的防治作用。各種藥物一起使用,則可以有效通暢氣血、疏通血脈,起到消腫的療效。DN的生理病理機(jī)制十分復(fù)雜,越來(lái)越多的現(xiàn)代藥理學(xué)研究顯示其可能跟炎性因子、糖脂代謝紊亂、血流動(dòng)力學(xué)改變、氧化應(yīng)激及遺傳因素等多方面[13-14]有關(guān),共同參與了DN的發(fā)生與發(fā)展過(guò)程。

      3.1 血府逐瘀口服液的中藥化學(xué)成分靶標(biāo)分析

      在血府逐瘀湯治療DN的成分靶點(diǎn)網(wǎng)絡(luò)中,包括103個(gè)活性成分和104個(gè)潛在主要靶點(diǎn),其中有28個(gè)化合物能與20個(gè)及以上靶點(diǎn)發(fā)生相互作用,包括山柰酚(kaempferol)、黃芩黃素(baicalein)、刺甘草查爾酮(glypallichalcone)、刺槐黃素(acacetin)、木犀草素(luteolin)、漢黃芩素(wogonin)、表小檗堿(epiberberine)。槲皮素具有抗炎、抗氧化等作用,對(duì)糖尿病并發(fā)癥如DN、視網(wǎng)膜病變等具有較好的療效[15],還可通過(guò)抑制糖尿病腎臟的氧化和糖化來(lái)控制糖尿病并發(fā)癥[16]。與槲皮素化學(xué)結(jié)構(gòu)類似的山柰酚具有降空腹血糖、改善胰島素抵抗、調(diào)節(jié)糖脂代謝紊亂、抗氧化應(yīng)激和炎性反應(yīng)等作用[17-18]。查爾酮類可通過(guò)抑制相關(guān)蛋白及基因的表達(dá)(p22phox、p47phox mRNA)、轉(zhuǎn)錄及翻譯,降低還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶的活性,減輕腎臟氧化應(yīng)激程度。在臨床治療中,中藥與西藥相比,其治療疾病的作用機(jī)制更為復(fù)雜,但毒性較小,DN發(fā)病機(jī)制主要是高血糖所引起的腎臟血流動(dòng)力學(xué)變化、氧化應(yīng)激、腎組織炎性反應(yīng)增加等。血府逐瘀口服液作用原理主要是通過(guò)調(diào)節(jié)機(jī)體代謝、改善腎微循環(huán)、改善血流動(dòng)力學(xué)紊亂與高凝狀態(tài)及減少致病性細(xì)胞因子等治療DN。

      3.2 血府逐瘀湯治療DN的核心靶標(biāo)分析及關(guān)鍵通路分析

      本研究通過(guò)構(gòu)建“活性成分-靶點(diǎn)”網(wǎng)絡(luò)及對(duì)相關(guān)的通路進(jìn)行分析,探討血府逐瘀湯治療DN的關(guān)鍵靶點(diǎn)及其作用機(jī)制。對(duì)“成分-靶點(diǎn)”網(wǎng)絡(luò)圖進(jìn)行拓?fù)浞治鰸撛诎悬c(diǎn),推測(cè)血府逐瘀湯的活性成分主要通過(guò)作用于MAPK8、STAT1、IL-2、MMP2、MTOR、SIRT1、ESR1、MMP9、STAT3、IL-1B、VEGFA、AKT1、TNF、IL-6等關(guān)鍵基因上發(fā)揮調(diào)控DN的發(fā)生發(fā)展過(guò)程。

      通過(guò)DAVID數(shù)據(jù)庫(kù)對(duì)關(guān)鍵靶點(diǎn)進(jìn)行GO和KEGG富集分析,GO富集和KEGG通路富集結(jié)果顯示,關(guān)鍵靶點(diǎn)主要富集于TNF信號(hào)通路、JKA-STAT信號(hào)通路、雌激素信號(hào)通路、HIF-1信號(hào)通路等,涉及ERK1和ERK2級(jí)聯(lián)正調(diào)控、蛋白磷酸化、MAP激酶活性的正調(diào)節(jié)等生物過(guò)程。炎性因子介導(dǎo)的微炎環(huán)境與DN的發(fā)生發(fā)展存在緊密關(guān)系[19],產(chǎn)生了極大影響。研究發(fā)現(xiàn),IL-1B、IL-6及TNF等炎性因子參與DN病情發(fā)生及進(jìn)展并直接與患者的蛋白尿程度相關(guān)[15],通過(guò)引起腎小球基底膜厚度增加而加速了2型糖尿病患者終末期腎病的病情進(jìn)展[16-17]。這說(shuō)明改善或抑制DN患者機(jī)體微炎環(huán)境(抑制炎癥因子的分泌等)可影響及優(yōu)化DN患者的預(yù)后和治療效果。絲裂原活化蛋白激酶,即MAP酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)參與調(diào)控細(xì)胞代謝凋亡及基因表達(dá)等效應(yīng),活化后的p38MAPK可通過(guò)多種途徑參與細(xì)胞應(yīng)激、炎性反應(yīng)和凋亡,進(jìn)一步促進(jìn)DN的發(fā)生、發(fā)展[18,20];抑制p38MAPK表達(dá)水平可以明顯減少DN的蛋白尿,減輕巨噬細(xì)胞、T細(xì)胞的浸潤(rùn)和炎性介質(zhì)的釋放,最終延緩DN的進(jìn)展、降低氧化應(yīng)激損傷、抑制腎臟組織細(xì)胞凋亡、降低炎性介質(zhì)水平,對(duì)2型糖尿病大鼠腎臟組織起保護(hù)作用。而細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶1/2(extracellular regulated protein kinase 1/2,ERK1/2)是MAPK家族最主要成員,主要參與細(xì)胞的生長(zhǎng)、發(fā)育、分裂、凋亡等多種生理反應(yīng)的過(guò)程,是胞內(nèi)介導(dǎo)胞外刺激的重要信號(hào)系統(tǒng)之一[21]。激活ERK1/2信號(hào)通路可誘導(dǎo)足細(xì)胞損傷、腎間質(zhì)炎癥及纖維化等,參與DN的發(fā)生發(fā)展[22]。也證實(shí)ERK1/2信號(hào)通路激活可促進(jìn)腎臟系膜細(xì)胞增殖,進(jìn)而導(dǎo)致腎小球的硬化。

      JAK2/STAT3信號(hào)途徑參與了多種重要致炎/抗炎細(xì)胞因子包括腫瘤壞死因子(TNF)、IL-1等的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)及基因調(diào)控過(guò)程[23],可誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,引起腎組織的免疫炎癥性反應(yīng),通過(guò)氧化應(yīng)激與糖脂代謝交叉調(diào)控進(jìn)而引起糖代謝紊亂[24];有實(shí)驗(yàn)證明[25-26],糖尿病大鼠腎小球及系膜細(xì)胞中JAK/STAT途徑活性明顯增強(qiáng),相關(guān)蛋白表達(dá)水平升高,而活化的JAK2/STAT3信號(hào)通路可進(jìn)一步刺激細(xì)胞外基質(zhì)合成及腎小球系膜細(xì)胞增殖,最終導(dǎo)致腎損傷;抑制JAK/STAT信號(hào)通路及其調(diào)控的炎癥因子及纖維化相關(guān)蛋白的活化與表達(dá),從而對(duì)DN的進(jìn)展起到延緩作用[27]。由此可見(jiàn),血府逐瘀湯有效活性成分可能通過(guò)參與調(diào)控血漿黏稠程度、血清總膽固醇等血液流變學(xué)保護(hù)腎臟,通過(guò)細(xì)胞凋亡有效清除大量的增生細(xì)胞,進(jìn)而對(duì)腎臟功能給予有效保護(hù)。

      本研究通過(guò)網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)方法初步探討了血府逐瘀湯的化學(xué)成分,治療DN的關(guān)鍵靶點(diǎn)、關(guān)鍵通路,并進(jìn)行了預(yù)測(cè)分析,為后期研究其治療DN的機(jī)制提供參考,為其臨床治療DN提供理論依據(jù),但其具體的機(jī)制還需通過(guò)體內(nèi)和體外實(shí)驗(yàn)來(lái)進(jìn)一步確證。

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