慢性蕁麻疹患者血清IL-31/33的水平變化及其意義

章含奇，徐 遠，劉 騰，曹文娟

（池州市人民醫(yī)院皮膚科，池州 247000）

慢性蕁麻疹（chronic urticaria，CU）是各種原因引起的以皮膚瘙癢、風(fēng)團和（或）血管性水腫為主要臨床表現(xiàn)的皮膚黏膜血管變態(tài)反應(yīng)性疾病，奇癢難忍，反復(fù)發(fā)作，嚴(yán)重影響患者的生活和工作[1]。CU發(fā)病機制尚不十分明確，近年來研究發(fā)現(xiàn)其與免疫、炎性反應(yīng)有關(guān)，輔助性T細(xì)胞2分泌炎性細(xì)胞因子促進肥大細(xì)胞增殖分化，釋放組胺，引發(fā)風(fēng)團，炎性因子大量釋放可誘導(dǎo)炎性級聯(lián)瀑布反應(yīng)，加重CU發(fā)生與發(fā)展。白細(xì)胞介素（interleukin，IL）-31、IL-33是新發(fā)現(xiàn)的具有多種生物學(xué)功能的過敏性和免疫性疾病生物學(xué)標(biāo)記物和治療靶點[2-3]，IL-31是T細(xì)胞衍生的促炎因子，參與細(xì)胞增殖和組織重塑，與特應(yīng)性皮炎、大皰性類天皰瘡、濕疹等瘙癢性皮膚疾病有關(guān)[4]。IL-33是IL-1家族成員，通過與其受體ST2L結(jié)合發(fā)揮作用，可調(diào)節(jié)特異性和先天性免疫細(xì)胞功能，主要誘導(dǎo)Th2型細(xì)胞免疫[5]。IL-31、IL-33在CU的發(fā)病機制尚未完全闡明，本研究分別檢測CU患者血清IL-31、IL-33水平變化，分析其與CU臨床參數(shù)的關(guān)系以及在CU的發(fā)病機制。

1 資料與方法

1.1 臨床資料

選擇2017年1月至2020年12月于池州市人民醫(yī)院就診的93例CU患者為觀察組，其中男性49例，女性44例，年齡19～46歲，平均年齡（35.12±4.26）歲，病程9 d至12年，平均病程（6.35±3.21）年；特異性免疫球蛋白E（sIgE）：陽性48例，陰性45例；過敏源（酶免疫分析法檢測）：蟑螂和螨蟲42例，螃蟹、魚和大豆51例。納入標(biāo)準(zhǔn)：1）典型CU臨床癥狀（皮膚不定時風(fēng)團，伴或不伴紅斑，瘙癢），病程≥6周，每周發(fā)作次數(shù)≥2次，符合《中國蕁麻疹診療指南（2018版）》中診斷標(biāo)準(zhǔn)[6]；2）均行血清IL-31、IL-33檢測。排除標(biāo)準(zhǔn)：1）哮喘、過敏性鼻炎、特應(yīng)性皮炎等其他過敏性疾病，自身免疫疾病，惡性腫瘤，嚴(yán)重心、肺、肝、腎等系統(tǒng)性疾?。?）近1個月未服用抗組胺、糖皮質(zhì)激素藥物；3）近期罹患急慢性感染性疾病。另選擇60例同期參加健康體檢者為對照組，排除系統(tǒng)性疾病、免疫性疾病、感染性疾病和皮膚病。男性32例，女性28例，年齡21～52歲，平均年齡（35.95±4.61）歲，兩組受試者性別、年齡比較差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P均＞0.05）。

1.2 診斷方法

1.2.1 CU病情評估 根據(jù)瘙癢程度評分[7]對患者進行分組，輕度瘙癢組（瘙癢評分1分）13例，中度瘙癢組（瘙癢評分2分）45例，重度瘙癢組（瘙癢評分3分）35例。風(fēng)團大小：風(fēng)團直徑＜5 mm的31例，風(fēng)團直徑5～15 mm的36例，風(fēng)團直徑＞15 mm的26例；風(fēng)團數(shù)量：1～6個的24例，7～12個的49例，＞12個的20例[8]。

1.2.2 血清IL-31、IL-33水平檢測CU患者就診48 h內(nèi)未治療前（對照組不限時間），于清晨采集空腹靜脈血2～5 mL，置于L535R低速臺式冷凍離心機（湖南湘儀實驗室儀器開發(fā)有限公司）4℃、3 000 r·min-1離心15 min（離心半徑10 cm），取血漿保存于-80℃超低溫冰箱（青島海爾特種電器有限公司）。采用酶聯(lián)免疫吸附實驗測定血清IL-31、IL-33水平，試劑盒購自美國Epitope Diagnostics公司，操作流程嚴(yán)格按照儀器說明書的實驗步驟進行。

1.3 觀察指標(biāo)

比較觀察組與對照組血清IL-31、IL-33水平，分析患者血清IL-31、IL-33水平與CU臨床參數(shù)的關(guān)系以及血清IL-31水平與IL-33水平的相關(guān)性。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法

采用SPSS 25.0統(tǒng)計學(xué)軟件進行數(shù)據(jù)分析，血清IL-31、IL-33水平等計量資料經(jīng)Kolmogorov-Smirnov、Levene檢驗符合正態(tài)分布、方差齊性，以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，兩組間比較采用獨立樣本t檢驗，多組間比較采用單因素方差分析，組間兩兩比較采用LSD-t檢驗。性別以率（%）表示，組間比較采用χ2檢驗。Spearman秩相關(guān)系數(shù)描述IL-31、IL-33與瘙癢程度、風(fēng)團數(shù)量、風(fēng)團直徑之間相關(guān)性，Pearson相關(guān)系數(shù)描述IL-31和IL-33之間相關(guān)性。所有統(tǒng)計均采用雙側(cè)檢驗，檢驗水準(zhǔn)α=0.05。

2 結(jié)果

2.1 兩組血清IL-31、IL-33水平比較

觀察組血清IL-31、IL-33水平均高于對照組（P均＜0.05），見表1。

表1兩組血清IL-31、IL-33水平比較（±s，ng·L-1）

表1兩組血清IL-31、IL-33水平比較（±s，ng·L-1）

組別 n IL-31 IL-33對照組 觀察組 60 17.95±3.35 30.09±2.69 93 28.75±5.12 45.53±4.32 t值 14.456 24.746 P值 ＜0.001 ＜0.001

2.2 不同臨床參數(shù)間CU患者血清IL-31、IL-33水平比較

CU患者血清IL-31水平在不同瘙癢程度、過敏源、有無血管性水腫方面差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P均＜0.05）。血清IL-33水平在不同風(fēng)團直徑、風(fēng)團數(shù)量、sIgE、有無血管性水腫方面差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P均＜0.05），見表2。

表2不同臨床參數(shù)間CU患者血清IL-31、IL-33水平比較（±s，ng·L-1）

表2不同臨床參數(shù)間CU患者血清IL-31、IL-33水平比較（±s，ng·L-1）

與風(fēng)團直徑＜5 mm比較aP＜0.05；與風(fēng)團直徑5～15 mm比較bP＜0.05；與瘙癢輕度組比較cP＜0.05，與瘙癢中度組比較dP＜0.05；與風(fēng)團數(shù)量1～6個比較eP＜0.05；與風(fēng)團數(shù)量7～12個比較fP＜0.05。

組別 n IL-31 t/F值 P值 IL-33 t/F值 P值年齡 ≥35歲 39 28.62±5.39 0.187 0.852 45.13±4.69 0.687 0.494＜35歲 54 28.84±5.75 45.81±4.73性別 男性 49 28.46±5.36 0.534 0.595 45.30±4.79 0.473 0.637女性 44 29.07±5.49 45.79±5.02病程 ≥5年 53 28.43±5.46 0.623 0.535 45.36±4.52 0.407 0.685＜年 40 29.17±5.79 45.76±4.91 sIgE + 48 28.61±5.23 0.255 0.800 48.25±6.35 5.030 ＜0.001-45 28.90±5.75 42.63±4.11過敏源 螨蟲、蟑螂 42 32.14±6.42 5.666 ＜0.001 45.33±4.72 0.358 0.721螃蟹、魚、大豆 51 25.95±4.03 45.69±4.92瘙癢程度 輕度組 13 24.15±3.26 10.933＜0.001 45.21±4.73 0.257 0.774中度組 45 27.45±4.05c 45.29±4.35重度組 35 32.13±8.12cd 45.96±4.59風(fēng)團直徑 ＜5 mm 31 28.36±5.59 0.727 0.486 40.12±3.01 80.324 ＜0.001 5～15 mm 36 28.27±5.63 45.26±3.52a＞15 mm 26 29.88±5.71 52.35±4.39ab風(fēng)團數(shù)量 1～6個 24 28.43±5.01 0.154 0.858 41.25±3.72 43.147 ＜0.001 7～12個 49 28.69±5.26 45.16±3.46e＞12個 20 29.28±5.19 51.57±4.19ef血管性水腫 有 37 31.07±4.34 4.642 ＜0.001 47.05±5.19 2.875 0.005無56 27.22±3.61 44.53±3.27

2.3 CU患者血清IL-31、IL-33水平與瘙癢程度、風(fēng)團數(shù)量、風(fēng)團直徑相關(guān)性分析

Spearman秩相關(guān)分析顯示，CU患者IL-31水平與瘙癢程度呈正相關(guān)（rs=0.467，P＜0.05），IL-33水平與風(fēng)團數(shù)量、風(fēng)團直徑呈正相關(guān)（rs=0.569、0.513，P均＜0.05），見圖1。

圖1 CU患者血清IL-31、IL-33水平與瘙癢程度、風(fēng)團數(shù)量、風(fēng)團直徑相關(guān)性散點圖

2.4 CU患者血清IL-31與IL-33水平相關(guān)性分析

Pearson相關(guān)分析顯示，血清IL-31與IL-33水平呈正相關(guān)（rs=0.361，P＜0.05），見圖2。

圖2 CU患者血清IL-31與IL-33水平相關(guān)性散點圖

3 討論

CU是由多種原因引起的皮膚變態(tài)性反應(yīng)，可刺激皮膚肥大細(xì)胞脫顆粒釋放組胺和其他血管活性介質(zhì)，引起皮膚瘙癢或血管性水腫。自身抗體、循環(huán)介質(zhì)、細(xì)胞因子均參與了CU發(fā)病機制。免疫功能異常是CU的主要發(fā)病機制之一，且以Th2細(xì)胞反應(yīng)為主，Th2細(xì)胞可分泌多種細(xì)胞因子，這些細(xì)胞因子直接或間接參與變態(tài)反應(yīng)，因此細(xì)胞因子和T淋巴細(xì)胞亞群間失衡與CU發(fā)病有關(guān)，其中白細(xì)胞介素被證實參與了CU的病理生理過程[9-10]。

IL-31是IL-6家族成員，主要由活化的Th2細(xì)胞、肥大細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、樹突狀細(xì)胞和嗜酸性粒細(xì)胞產(chǎn)生，通過與受體結(jié)合傳導(dǎo)信號，并廣泛作用于免疫和非免疫細(xì)胞，參與免疫調(diào)節(jié)、炎性反應(yīng)、過敏反應(yīng)、神經(jīng)元生長等多種病理生理過程[11-12]。IL-31在瘙癢性皮膚病患者中表達明顯升高，被認(rèn)為是瘙癢反應(yīng)的主要驅(qū)動因素[4]。本研究CU患者血清IL-31水平高于對照組，且在不同瘙癢程度亞組之間差異有統(tǒng)計學(xué)意義，尤其是重度瘙癢患者血清IL-31水平最高，與相關(guān)報道[5，8]結(jié)果一致，且IL-31水平與瘙癢程度呈正相關(guān)，提示IL-31可反映CU患者瘙癢癥狀輕重。IL-31參與CU瘙癢癥狀的機制尚不十分清楚，有報道[10]指出，IL-31是T細(xì)胞活化和引起皮膚瘙癢癥狀的細(xì)胞因子，IL-31調(diào)節(jié)皮膚角質(zhì)細(xì)胞形成分化以及聚角蛋白微絲表達，同時角質(zhì)細(xì)胞中IL-31受體活化導(dǎo)致細(xì)胞鈣離子內(nèi)流，以及β-內(nèi)啡肽的產(chǎn)生，進而導(dǎo)致皮膚瘙癢的發(fā)生[13]。也有報道[4]指出，CU患者嗜酸性和嗜堿性粒細(xì)胞計數(shù)升高，直接刺激IL-33釋放并導(dǎo)致瘙癢癥狀和瘙癢程度加重。Siiskonen[14]認(rèn)為肥大細(xì)胞和CU瘙癢癥狀有關(guān)，感覺神經(jīng)釋放神經(jīng)肽，激活肥大細(xì)胞，釋放組胺、胰蛋白酶、細(xì)胞因子和生長因子等介質(zhì)，刺激瘙癢相關(guān)的感覺神經(jīng)相應(yīng)受體釋放，其中包括IL-31受體。本研究發(fā)現(xiàn)IL-31水平與CU過敏源有關(guān)，尤其是螨蟲、蟑螂導(dǎo)致的CU患者中IL-31水平高于食物過敏CU患者，提示螨蟲、蟑螂過敏源可能通過激活I(lǐng)L-31參與CU的發(fā)病，食物過敏源可能通過IL-31以外途徑。本研究尚未發(fā)現(xiàn)IL-31水平與CU患者風(fēng)團數(shù)量、直徑的關(guān)系，Lin等[5]也認(rèn)為，血清IL-31水平在不同CU病情嚴(yán)重程度組差異無統(tǒng)計學(xué)意義，說明IL-31與CU皮疹輕重程度似乎關(guān)系不甚明顯。

IL-33是重要的炎性細(xì)胞因子，在Th2細(xì)胞、肥大細(xì)胞、嗜堿性和嗜酸性細(xì)胞上均有表達，在細(xì)胞外釋放誘導(dǎo)Th2細(xì)胞釋放IL-5和IL-13等細(xì)胞因子，促使sIgE和嗜酸性粒細(xì)胞水平升高，引起肥大細(xì)胞活化、成熟，參與哮喘、寄生蟲感染和特應(yīng)性皮炎等多種由Th2介導(dǎo)的免疫反應(yīng)[15-16]。本研究觀察組血清IL-33水平高于對照組，提示IL-33參與CU的發(fā)病機制。IL-33是先天的免疫應(yīng)答“放大器”[17]。有研究[18]顯示，過敏源、組織損傷、病原菌通過免疫機制識別IL-33激活皮膚或黏膜表面Th2介導(dǎo)的免疫應(yīng)答，提示IL-33可能通過天然免疫、Th2細(xì)胞因子在CU發(fā)病機制中發(fā)揮關(guān)鍵作用。本研究發(fā)現(xiàn)CU患者血清IL-33水平與風(fēng)團數(shù)量和直徑有關(guān)，Lin等[5]觀察到，CU病情重度患者IL-33水平高于輕度組。相關(guān)性分析發(fā)現(xiàn)IL-33與風(fēng)團數(shù)量、風(fēng)團直徑均呈正相關(guān)，提示IL-33參與CU皮膚炎性反應(yīng)進程，可反映CU病情嚴(yán)重程度。本研究同樣發(fā)現(xiàn)觀察組sIgE陽性患者IL-33水平高于陰性組，可能因為肥大細(xì)胞經(jīng)sIgE激活后產(chǎn)生IL-33，進而激活I(lǐng)L-33/ST2通路，產(chǎn)生IgE依賴性炎性反應(yīng)，IL-33同時能促進嗜堿性粒細(xì)胞脫顆粒和遷移以及細(xì)胞因子、趨化因子的產(chǎn)生[19]。上述結(jié)果提示，IL-33可能通過促使肥大細(xì)胞、嗜堿性粒細(xì)胞增加Th2細(xì)胞免疫反應(yīng)參與CU炎性反應(yīng)進程。本研究相關(guān)性分析顯示，CU患者血清IL-31和IL-33水平呈正相關(guān)，說明IL-31和IL-33在CU發(fā)病機制中可能存在協(xié)同作用機制和功能聯(lián)系，相關(guān)報道指出IL-33及受體ST2可調(diào)控Th2免疫應(yīng)答[20]，Vocca等[21]指出IL-33/ST2可表達于Th2細(xì)胞調(diào)控IL-31等細(xì)胞因子的產(chǎn)生。

綜上所述，CU患者血清IL-31、IL-33水平升高，IL-31、IL-33可能參與了CU發(fā)病機制，IL-31水平與CU瘙癢程度有關(guān)，通過抑制IL-31表達可減輕患者瘙癢癥狀，IL-33與CU病情嚴(yán)重程度有關(guān)，IL-33抑制劑有助于抑制病情進展。本研究創(chuàng)新之處在于闡述IL-31、IL-33與CU發(fā)病、病情程度關(guān)系，為臨床治療提供了新的思路和理論依據(jù)。局限之處在于未設(shè)置如過敏性皮炎作為陽性對照組，CU與其他皮膚病患者的血清IL-31和IL-33水平是否有差異尚未探知，另外，CU患者血清和皮膚組織中IL-31、IL-33水平差異尚需納入更多樣本加以探討。